Nghiên cứu hóa học và hoạt tính sinh học hai loài sao biển anthenea sibogae và anthenea aspera của việt nam tt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGUYỄN ANH HƢNG NGHIÊN CỨU HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC HAI LOÀI SAO BIỂN ANTHENEA SIBOGAE VÀ ANTHENEA ASPERA CỦA VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa học hợp chất thiên nhiên Mã số: 44 01 17 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC HÀ NỘI - 2020 Cơng trình đƣợc hồn thành tại: Học viện Khoa học Công nghệ Viện Hàn lâm Khoa học Công Nghệ Việt Nam Ngƣời hƣớng dẫn khoa học 1: PGS.TS.Trần Thị Thu Thủy Ngƣời hƣớng dẫn khoa học 2: TSKH Alla Anatolievna Kicha Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Học viện, họp Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Vào hồi ngày tháng năm Có thể tìm hiểu Luận án tại: - Thư viện Học viện Khoa học Công nghệ - Thư viện Quốc gia Việt Nam MỞ ĐẦU Tính cấp thiết luận án Việt Nam thiên nhiên ưu đãi với triệu km2 vùng biển, có khí hậu nhiệt đới gió mùa, mật độ cửa sơng dày đặc điều kiện lý tưởng cho hệ sinh vật biển đa dạng chủng loại giàu trữ lượng Ngay từ năm 1970 có vài cơng trình nghiên cứu hợp chất thiên nhiên từ sinh vật biển Tuy nhiên, so với nguồn tiềm sinh vật biển nước ta đến cơng trình nghiên cứu nước q tản mát, đặc biệt nghiên cứu động vật Da gai Sao biển loài động vật không xương sống, thuộc ngành Da gai, từ lâu biết đến loại thực phẩm bổ dưỡng Theo thống kê, nay, giới có khoảng 1800 loài biển khác Tuy nhiên, có khoảng 80 lồi nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Trong họ Oreasteridae gồm có 20 chi : Acheronaster, Anthaster, Anthenea, Astrosarkus, Bothriaster, Choriaster, Culcita, Goniodiscaster… Hiện giới có lồi thuộc họ Oreasterdae nghiên cứu có lồi nghiên cứu Việt Nam Anthenea chinensis Culcita novaeguineae Kết nghiên cứu cho thấy rằng, chất phân lập từ biển họ Oreasteridae có khả kháng viêm, giảm đau, giảm huyết áp, gây độc tế bào, kháng khuẩn, kháng nấm kháng số dịng tế bào ung thư Nhằm mục đích tìm hoạt chất sử dụng y dược từ thuốc dân gian Việt Nam, lựa chọn loài biển thuộc chi Anthenea Xuất phát từ điểm đó, đề tài “Nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học hai lồi biển Anthenea sibogae Anthenea aspera Việt Nam” Mục tiêu nghiên cứu luận án - Khảo sát thành phần hóa học hai lồi biển Anthenea sibogae Anthenea aspera - Đánh giá hoạt tính sinh học hợp chất phân lập từ loài biển Anthenea sibogae Anthenea aspera Các nội dung nghiên cứu luận án Để đạt mục tiêu luận án thực nội dung sau:  Phân lập hợp chất từ hai loài biển Anthenea aspera Anthenea sibogae thu thập từ vùng biển Việt Nam  Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập  Thử nghiệm số hoạt tính sinh học số chất phân lập CHƢƠNG TỔNG QUAN Phần tập hợp nghiên cứu nước quốc tế vấn đề: 1 Giới thiệu biển 1.2 Thành phần hóa học họ biển Oreasteridae 1.3 Hoạt tính sinh học biển CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu Mẫu biển thu thập đảo Vạn Bội, tỉnh Quảng Ninh vào tháng 6/2012 tháng 7/2015, PGS Đỗ Công Thung, Viện Tài nguyên Môi trường biển, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Mẫu tiêu Anthenea sibogae: DG02-BTL, Anthenea aspera: SBĐ 12 lưu Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu hóa học sinh học 2.2.1 Phương pháp phân lập chất Các phương pháp sắc ký sử dụng để phân lập hợp chất bao gồm: sắc ký mỏng (TLC), sắc ký cột silica gel (CC) pha thường pha đảo, sắc ký cột Polychrome 1, sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc Các phương pháp sử dụng để xác định cấu trúc hóa học hợp chất bao gồm: phổ khối ion hóa phun mù điện tử (ESI-MS), phổ khối phân giải cao (HR ESI-MS), độ quay cực ([α]D), phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều (1H, 13C, DEPT, 1D-TOCSY) hai chiều (HSQC, HMBC, COSY, ROESY) ghi máy Bruker Avance 500 MHz Bruker Avance III 700 MHz, sử dụng TMS chất chuẩn nội 2.2.3 Các phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học 2.2.3.1 Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào Hoạt tính gây độc tế bào hợp chất đánh giá theo phương pháp MTS Viện Hóa sinh hữu Thái Bình Dương (PIBOC) - Viện Hàn lâm Khoa học liên bang Nga - Vladivostok (dòng tế bào T-47D) 2.2.3.2 Phương pháp đánh giá hoạt tính chống tăng sinh tế bào Các chất thử nghiệm thêm vào môi trường nuôi tế bào nồng độ nồng độ 50 μM sau ủ thêm 24, 48 72 37 0C tủ ấm CO2 5% Các khối u hình thành đo độ hấp thụ quang 490/630 nm máy µQuant microplate 2.2.3.3 Phương pháp khảo sát hình thành khối tế bào ung thư Các chất thử nghiệm thêm vào môi trường nuôi tế bào nồng độ nồng độ 50 μM Môi trường nuôi cấy giữ 37 0C tủ ấm chứa CO2 khoảng tuần khối tế bào ung thư thu đếm kính hiển vi sử dụng phần mềm máy tính ImageJ CHƢƠNG THỰC NGHIỆM 3.1 Chiết tách, phân lập hợp chất từ biển Anthenea sibogae Phần trình bày cách thức phân lập hợp chất từ mẫu biển A sibogae Việc phân tách hợp chất nêu tóm tắt sơ đồ hình 3.1 3.1.1 Xử lý mẫu biển A sibogae 3.1.2 Hằng số vật lý liệu phổ chất phân lập từ loài biển A sibogae Anthenea sibogae (2 Kg) H/E 40/1, 5/1 ASB1 (7 mg) Chiết lần MeOH (t = 45 C) 100 g cặn tổng ASB2 (5 mg) CH2Cl2 (3x500 ml) Cặn CH2Cl2 E/Me 30/1, 10/1 ASB3 (6 mg) 80 g chất không tan Nước cất (1L) ASB4 (7 mg) Rửa giải AgNO3 , EtOH 10,5 g cặn EtOH CH2Cl2/MeOH (9/11:5) F1… F8 MeOH/H2O (15/15:1) F6 F6.1, F6.2, F6.5 CHCl3/EtOH (3:1Ò2:1) F6.3 (87 mg) F6.4 (25 mg) EtOH/H2O 75%,; 25 ml/phút F6.3.2 (2,3 mg) MeOH/H2O 80%,; 0,5 ml/phút ASB7 (0,3 mg; tR = 31,7 phút ) F6.3.3 (3,2 mg), F6.3.4 (5,8 mg), F6.4.1 (13,5 mg), F6.3.1 (6,9 mg) MeOH/H2O 80%; 0,5 ml/phút MeOH/ H2O 85/15; 0,5 ml/phút ASB5 (2,4 mg; tR = 35 phút ) ASB8 (1,2mg; tR = 30,4 phút ) ASB6 (2,1 mg; tR = 39,8 phút ) ASB9 (0,6 mg; tR = 27,6 phút ) ASB10 (1,0 mg; tR = 27,5 phút ) ASB11 (1,9 mg; tR = 58,2 phút ) Hình 3.1 Sơ đồ chiết phân lập hợp chất từ mẫu biển A sibogae 3.2 Chiết tách, phân lập hợp chất từ biển A aspera Phần trình bày cách thức phân lập hợp chất từ mẫu biển A aspera Việc phân tách hợp chất nêu tóm tắt sơ đồ hình 3.2 3.2.1 Xử lý mẫu biển A aspera 3.2.2 Hằng số vật lý liệu phổ chất phân lập từ loài biển A aspera CHƢƠNG - KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Chương trình bày kết nghiên cứu phân lập làm sáng tỏ cấu trúc hợp chất phân lập từ loài biển A aspera A sibogae, hoạt tính gây độc tế bào, hoạt tính ức chế khối u thạch mềm hoạt tính chống tăng sinh số hợp chất phân lập 4.1 Xác định cấu trúc hợp chất từ loài biển Anthenea sibogae Từ loài biển Anthenea sibogae phân lập 11 hợp chất có chất steroid glycoside mới, chất lại lần phân lập từ chi Anthenea ASB2 Thymine ASB1 Cholesterol ASB3 L-tyrosine ASB4 Tryptophan ASB5 Anthenoside S1 (chất mới) ASB6 Anthenoside S2 (Chất mới) ASB7 Anthenoside S3 (chất mới) ASB9 Anthenoside S5 (chất mới) ASB8 Anthenoside S4 (chất mới) ASB10 Anthenoside S6 (chất mới) ASB11 Hỗn hợp Anthenoside J Anthenoside K 4.1.5 Hợp chất ASB5: (20R,22E)-7-O-(6-O-methyl--D-galactofuranosyl)-16-O-(3-O-methyl--Dglucopyranosyl)-24-nor-5-cholesta-8(14),22(23)-diene-3,6 , 7 ,16-tetraol (anthenoside S1, hợp chất mới) Công thức phân tử ASB5 xác định C40H66O14 từ kết phổ khối phân giải cao (+)-HRESI-MS với pic [M + Na]+ m/z 793,4346 Các liệu phổ 1H- 13C-NMR khung steroid ASB5 có tín hiệu hai nhóm Me góc H3-C(18) [δ(H) 0,91 (s), δ(C) 20,3] H3-C(19) [δ(H) 0,84 (s); δ(C) 15,5], liên kết đôi 8(14) (δ(C) 126,6; 147,6), hai nhóm HC-O, bao gồm H -C(3) [δ(H) 4,07 - 4,08 (m, W = 11,8); δ(C) 67,5] H-C(6) [δ(H) 3,64 (t, J = 2,8); δ(C) 75,2], hai nhóm HC-O mang gốc Omonosaccharide, bao gồm H-C(7) [δ(H) 4,23 (d, J = 2,8); δ(C) 78,5] H-C(16) [δ(H) 4,63 (td, J = 9,0; 5,0); δ(C) 79,2] Độ rộng tín hiệu multiple dự đoán H-3 vào khoảng 12 Hz tương ứng tốt với cấu hình 3α-OH Độ dịch chuyển hóa học proton carbon nhóm H3-C(18), H3-C(19), H-C(3), H-C(6), H-C(7) H-C(16) ASB5 có giá trị gần tương tự với liệu công bố nhóm tương ứng phân tử anthenoside R với cấu trúc aglycon Δ8(14)-3α,6β,7β,16α-tetrahydroxysteroid bị glycosyl hóa C(7) C (16) Phổ NMR mạch nhánh aglycon xuất tín hiệu ba nhóm Me thứ cấp H3-C(21) [δ(H) 1,10 (d, J = 7,0); δ(C) 23,8], H3-C (26) [δ(H) 0,98 (d, J = 6,7); δ(C) 23,2], H3-C(27) [δ(H) 0,97 (d, J = 6,7); δ(C) 23,1], H3-C(27) [δ(H) 0,97 (d, J = 6,7); δ(C) 23,1], liên kết đôi 22(23) [δ(H) 5,74 (ddd, J = 15,3; 8,8; 1,2), 5,30 (dd, J = 15,3; 6,8); δ(C) 133,9; 137,2] Dựa vào liệu xác định aglycon ASB5 (22E)-Δ22-24-nor-cholestan (Bảng 4.6 4.7, Hình 4.1.27) Các tương tác chìa khóa phổ COSY, HSQC phần aglycon cho phép xác định hệ spin proton: H-C(1)H-C(7), H-C(9)H-C(12) thông qua H-C(11), H-C(15)H-C(17), H-C(17)HC(20), H-C(20)H-C(22), H-C(23)H3-C(27) Cấu trúc khung steroid aglycon ASB5 dựa phổ HMBC xuất tương tác H-C(6)/C(8), C(10); H-C(15)/C(8), C(14), C(17); H3-C(18)/C(12), C(13), C(14), C(17); H3-C(19)/С(1), С(9), С(10); H3-C(21)/C(17), C(20), C(22); H-C(22)/C(25) H-C(23)/C(20), C(25), C(26), C(27) Phổ ROESY xuất tương tác C(19)/Hβ-C(2), Hβ-C(4), Hβ-C(11); H3-C(18)/Hβ-C(12), HβC(15), H-C(16); H-C(5)/Hα-C(1), Hα-C(9); Hα-C(4)/Hα-C(6); Hβ-C(4)/H-C(19) Hα-C(7)/Hα-C(15) với giá trị số tương tác H6, H-7 H-16, cho phép khẳng định cấu hình tương đối 3,6,7,16 nhóm OH cấu hình 5/9/10/13 nhân steroid Tổng hợp tất liệu phổ phân tích, xác định phần cấu trúc aglycon ASB5 (20R,22E)-24-nor-5-cholesta8(14),22(23)-diene-3,6,7,16-tetraol Các tín hiệu cộng hưởng proton anomer (δH 4,33 5,02) có tương tác phổ HSQC tương ứng với carbon δC 102,9 108,4 Phổ (+)-ESI-MS/MS pic ion [M+Na]+ m/z 793 cho mảnh pic ion m/z 599 ([(M+Na)-C7H14O6]+) 217 ([C7H14O6+Na]+) Phổ (-)-ESI-MS/MS pic ion [M-H]- m/z 769 cho mảnh pic ion 575 ([(M-H)-C7H14O6]- 193 ([C7H13O6]-) Các pic tương ứng với việc gốc O-methyl-hexose Độ dịch chuyển hóa học số tương tác H-1 đến H-6 đơn vị đường O-methyl-hexose xác định cách chiếu xạ proton anomer thí nghiệm TOCSY 1D Ngồi ra, tín hiệu proton cacbon đơn vị monosaccharide ASB5 xác định nhờ phổ NMR 2D COSY, HSQC HMBC (hình 4.1.27, bảng 4.6) Các giá trị độ dịch chuyển hóa học số tương tác hai đơn vị đường hoàn toàn trùng khớp với liệu cơng bố chất có hai gốc đường cuối mạch 3-O-methyl- -glucopyranosyl 6-O-methyl- -galactofuranosyl Phản ứng thủy phân ASB5 TFA 2M, sau cho phân tử đường tác dụng với (R)-(-)-2octanol sau acetyl hóa, phân tích GC so sánh với thời gian lưu với dẫn xuất acetyl (-)-2octyl glycoside monosaccharide chuẩn, cho phép xác định cấu hình D hai đơn vị đường 3-Omethyl- -glucopyranose 6-O-methyl- -galactofuranose phân tử ASB5 Vị trí gắn hai đơn vị đường nói với phần aglycon xác định nhờ phổ HMBC ROESY, từ tương tác H-1’ 3-OMe-Glcp C-16 H-16 phần aglycon, H-1” 6-OMe-Galf với C-7 H-7 phần aglycon quan sát phổ Dựa tất kiện trên, cấu trúc ASB5 xác định (20R,22E)-7-O-(6-O-methyl- -D-galactofuranosyl)-16-O-(3-O-methyl- -Dglycopyranosyl)-24-nor-5-cholesta-8(14),22(23)-diene-3,6,7,16-tetraol Intens x106 +MS, 2.4min #140 1+ 793.4346 1+ 301.1409 186.9952 226.9878 268.9983 1+ 385.2349 1+ 441.2974 617.3659 659.2872 100 200 300 400 500 600 700 800 m/z Hình 4.1.20 Phổ (+)HR-ESI-MS ASB5 Hình 4.1.21 Phổ 1H-NMR ASB5 Hình 4.1.22 Phổ 13C-NMR ASB5 Hình 4.1.25 Phổ HMBC ASB5 Hình 4.1.26 Phổ ROESY ASB5 Hình 4.1.27 Cấu trúc hóa học ASB5 Bảng 4.6 Số liệu phổ NMR hợp chất ASB5-ASB10 Vị trí ASB5 ASB6 ASB7 ASB8 ASB9 1,51-1,55 1,51-1,55 1,50-1,56 (m) 1,51-1,55 (m) 1,52-1,55 (m) (m) 1,28-1,31 (m) 1,28-1,34 (m) (m) 1,29-1,31 1,28-1,30 1,29-1,32 (m) (m) (m) 1,61-1,63 1,60-1,64 1,60-1,64 (m) 1,60-1,62 (m) 1,60-1,63 (m) (m) (m) 4,07-4,08 4,06-4,08 4,06-4,08 (m) 4,06-4,08 (m) 4,07-4,09 (m) (m) (m) 1,96 (td, J = 1,96 (td, J = 1,96 (td, J = 1,96 (td, J 1,98 (td, J = 14,0; 2,8) 14,0; 2,8) 14,0, 2,8) =14,0;2,8) 13,7, 2,8) 1,37 (br d, J 1,36 (td, 1,36 (br d, J = 1,36 (br d, J = 1,38 (br d, J = 14,0) J=14,0) 14,0) 14,0) = 13,7) 2,12 (dt, J = 2,12 (dt, J 2,12 (dt, J = 2,13 (dt, J 2,16 (td, J 14,0, 2,8) =14,0; 2,8) 14,0; 2,8) =14,0, 2,8) =13,7; 2,8) 3,64 (t, J = 3,63 (t, J = 3,64(t, J = 2,8) 3,64 (t, J = 2,8) 3,53 (t, J = 2,8) 2,8) 2,8) 4,23 (d, J = 4,22 (d, J = 4,26 (d, J = 2,8) 4,27 (d, J = 4,25 (d, J = ASB10 1,50-1,54 (m) 1,28-1,30 (m) 1,60-1,63 (m) 4,07-4,09 (m) 1,96 (td, J = 14,0; 2,8) 1,37 (brd, J = 14,0) 2,13 (dt, J = 14,0, 2,8) 3,61-3,63 (m) 4,23 (d, J = 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 2,8) 2,25-2,28 (m) 1,63-1,67 (m) 1,52-1,55 (m) 1,82 (dt, J = 12,5;3,3) 1,23-1,27 (m) 2,86 (ddd, J = 17,0; 9,0, 2,8) 2,64(ddd, J = 17,0; 5,0, 2,1) 4,63(td, J = 9,0; 5,0) 2,8) 2,25-2,28 (m) 1,63-1,66 (m) 1,51-1,55 (m) 1,81 (dt, J = 12,4; 3,4) 1,23-1,27 (m) 2,85 (ddd, J = 17,0; 9,0, 2,8) 2,64 (ddd, J = 17,0; 5,0, 2,1) 4,62 (td, J = 9,0; 5,0) 1,53 (dd, J = 9,0; 4,0) 0,91 (s) 0,84 (s) 2,38-2,42 (m) 1,10 (d, J = 7,0) 5,74 (ddd, J = 15,3; 8,8, 1,2) 5,30 (dd, J = 15,3, 6,8) - 1,54 (dd, J = 9,0; 4,0) 0,91 (s) 0,84 (s) 2,38-2,42 (m) 1,10 (d, J = 7,1) 5,76 (d, J = 15,3; 8,8, 1,2) 5,31(dd, J = 15,3; 6,8) - 2,22-2,30 (m) 0,98 (d, J = 6,7) 0,97 (d, J = 6,7) 2,26-2,29 (m) 0,98 (d, J = 6,6) 0,97 (d, J = 6,6) 2,26-2,28 (m) 2,8) 2,25-2,29 (m) 1,62-1,66 (m) 1,50-1,56 (m) 1,62-1,66 (m) 1,51-1,56 (m) 1,85 (dt, J = 12,0; 3,3) 1,28-1,32 (m) 1,87-1,89 (m) 1,30-1,34 (m) 2,84 (ddd, J = 17,0; 8,7; 3,0) 2,68 (ddd, J = 17,0; 4,1; 1,8) 2,85 (ddd, J = 17,0; 8,6; 2,9) 2,62-2,69 (m) 4,55 (td, J = 8,7; 4,1) 4,57 (td, J = 8,6, 4,2) 1,49-1,51 (m) 1,51 (dd, J = 8,6, 6,7) 0,95 (s) 0,85 (s) 1,69-1,75 (m) 0,94 (s) 0,85 (s) 1,67-1,74 (m) 1,03 (d, J = 6,8) 1,71-1,76 (m) 1,43-1,47 (m) 1,03 (d, J = 6,8) 1,85-1,89 (m) 1,52-1,56 (m) 2,07-2,12 (m) 1,88-1,93 (m) 5,14 (br t, J =7,5) - 2,19-2,23 (m) 1,87-1,91 (m) - 1,67 (s) 1,03 (d, J = 6,9) 1,03 (d, J = 6,9) 4,72 (d, J = 1,3) 2,24-2,31 (m) 1,60 (s) 28 2,8) 2,24-2,26 (m) 1,65-1,68 (m) 1,50-1,56 (m) 1,80 (dt, J = 12,0; 3,4) 1,19-1,22 (m) 2,93 (ddd, J = 16,8; 9,0; 3,0) 2,38-2,41 (m) 4,47 (ddd, J = 9,8, 9,0; 6,0) 1,46 (dd, J = 9,8; 2,7) 0,89 (s) 0,83 (s) 2,37-2,42 (m) 1,09 (d, J = 7,3) 5,65 (dd, J = 15,4, 7,3) 5,37 (dd, J = 15,4, 7,3) 1,92(br td, J =7,3, 3,3) 1,56-1,62 (m) 0,89 (d, J = 6,5) 0,89 (d, J = 6,5) 2,8) 2,25-2,28 (m) 1,63-1,67 (m) 1,51-1,57 (m) 1,82 (dt, J = 12,3; 3,5) 1,24 ‒ 1,28 (m) 2,87 (ddd, J = 17,0; 9,0, 3,1) 2,60 (ddd, J = 17,0; 5,2, 1,8) 4,46 (td, J = 9,0; 5,2) 1,48 (dd, J = 9,0; 4,6) 0,93 (s) 0,85 (s) 1,66-1,71 (m) 1,06 (d, J = 6,8) 1,79-1,86 (m) 1,43-1,47 (m) 2,21-2,24 (m) 1,92-1,97 (m) 2,24-2,30 (m) 1,04 (d, J = 6,9) 1,04 (d, J = 6,9) 4,75 (br s) 4,72 (br d, J 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 6’ OMe 1’’ 2’’ 3’’ 4’’ 5’’ 6’’ OMe C 4,70 (br s) 3-OMe-β-DGlcp 4,32 (d, J = 7,8) 3,22 (dd, J =9,1, 7,8) 3,08 (t, J = 9,1) 3,27-3,29 (m) 3-OMe-βD-Glcp 4,33 (d, J = 7,7) 3,23 (dd, J = 9,3; 7,7) 3,09 (t, J = 9,3) 3,36 (t, J = 9,3) 3,27 (ddd, J = 9,3;5,5, 2,5) 3,88(dd, J=11,6; 2,5) 3,70(dd, J=11,6; 5,5) 3,63 (s) 6-OMe-βD-Galf 5,02 (d, J = 2,0) 3,90 (dd, J = 3,7; 2,0) 3,94 (dd, J = 6,2; 3,7) 3,903,91(m) 3,82 (ddd, J = 7,0; 5.2; 3,4) 3,53 (dd, J = 10,3; 5,2) 3,52 (dd, J = 10,3;7,0) 3,38 (s) =1,3) β-D-Galf 4-OMe-β-D- 3-OMe-β-D3-OMe-β-DGlcp Glcp Galf 4,29 (d, J 4,32 (d, J = 7,7) 4,97 (br s) 4,95 (d, J = =7,8) 2,4) 3,17 (dd, J 3,21(dd, J = 9,1, 4,00 (dd, J = 3,96 (dd, J = =9,3; 7,8) 7,7) 2,5; 1,1) 4,8; 2,4) 3,46 (t, J = 3,08 (t, J = 9,1) 3,74 (dd, J = 4,04 (dd, J = 9,3) 5,6; 2,5) 7,2; 4,8) 3,10 (t, J = 3,32 (t, J = 9,1) 4.08 (dd, J = 3,88 (dd, J = 9,3) 5.6, 3.5) 7,2; 2,4) 3,26 (ddd, J 3,25 (ddd, J = 3,26 (m) 3.73-3.75 3,70-3,73 (m) = 9,3; 5,1, 9,1; 5,7; 2,5) (m) 2,2) 3,86(dd, 3,86(dd, J=11,6, 3,86(dd, 3,65(br d, 3,62 (dd, J = J=11,6; 2,2) 2,5) J=11,6, 2,5) J=6,1) 11,2; 7,2) 3,71(dd, 3,65(dd,J=11,6, 3,63(dd, 3,59 (dd, J = J=11,6; 5,1) 5,7) J=11,6, 5,6) 11,2, 4,5) 3,56 (s) 3,62 (s) 3,62 (s) 3,41 (s) 6-OMe-β-D- 6-OMe-β-D6-OMe-β-D6-OMe-β-DGalf Galf Galf Galf 5,01 (d, J = 5,05 (d, J = 2,0) 5.04 (d, J = 4.99 (d, J = 2,0) 2.0) 2.3) 3,89-3,91 3,90 (dd, J = 4,3, 3.90 (dd, J 3.91 (dd, J = (m) 2,0) =3.6, 2.0) 3.8, 2.3) 3,94 (dd, J = 3,90-3,96 (m) 3.93 (dd, J = 3.95 (dd, J = 6,1; 3,6) 6.8, 3.6) 6.2, 3.8) 3,89-3,91 3,91(dd, J = 5,8, 3.92 (dd, J = 3.88 (dd, J = (m) 3,4) 6.8, 3.5) 6.2, 3.9) 3,82 (ddd, J 3,82 (ddd, J = 3.82 (ddd, J = 3.82 ‒ 3.85 = 7,0; 5,2, 7.2, 4.8, 3.4) 7.1, 4.8, 3.5) (m) 3,3) 3,53 (dd, J = 3,53(dd, J = 3,54 (dd, J = 3,53 (d, J = 10,1; 5,2) 10,1, 4,8) 10.1, 4.8) 3,52 6,0) 3,52 (dd, J = 3,52 (dd, J = (dd, J = 10.1, 10,1; 7,0) 10,1; 7,2) 7,1) 3,38 (s) 3,38 (s) 3,38(s) 3,39(s) a b c # CD3OD, 176 MHz, 700 MHz, δC số liệu anthenoside R Bảng 4.7 Số liệu phổ 13C-NMR hợp chất chất ASB5-ASB10 ASB5 ASB6 ASB8 ASB9 ASB10 34,6 34,5 34,6 34,5 34,5 29,6 29,6 29,6 29,5 29,6 67,5 67,5 67,3 67,4 67,5 33,3 33,3 33,2 33,4 33,3 38,0 38,0 37,9 37,7 38,0 75,2 75,5 75,5 77,4 75,2 78,5 78,7 78,7 72,1 78,4 10 10 11 12 13 14 15 16 126,6 45,9 38,8 19,5 37,2 45,4 147,6 34,3 79,2 126,6 45,9 38,8 19,5 37,1 45,4 147,6 34,5 79,4 126,6 45,6 38,9 19,6 37,6 45,4 148,0 34,2 80,1 128,4 45,8 38,7 19,4 36,9 44,9 146,8 33,5 76,9 127,0 45,8 38,9 19,5 37,3 45,1 147,4 33,8 77,7 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 62,8 20,3 15,5 37,2 23,8 133,9 137,2 32,3 23,2 23,1 62,8 20,3 15,4 37,1 23,8 133,8 137,4 32,3 23,2 23,1 62,6 20,5 15,3 37,1 24,6 137,7 129,5 43,2 29,9 22,8 3-OMe-β-D-Glcp 4-OMe-β-D-Glcp 62,7 19,7 15,5 34,1 20,8 34,6 33,0 158,4 34,9 22,6 22,4 108,6 3-OMe-β-D-Glcp 62,7 20,1 15,4 32,9 21,4 33,8 33,3 157,7 34,9 22,5 22,3 107,2 β-D-Galf 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 6’ OMe 102,9 75,2 87,9 71,5 77,8 63,2 61,0 -OMe-β-DGalf 108,4 83,4 78,7 85,0 70,8 75,5 59,4 3-OMe-β-DGalf 108,2 80,9 88,9 84,3 73,2 65,1 58,1 103,0 102,6 107,6 75,2 75,1 83,7 78,2 87,8 78,3 81,2 71,7 84,4 77,2 77,9 72,4 62,7 63,4 65,4 60,8 61,0 -OMe - β-D6 -OMe - β- D6 -OMe -β-DGalf Galf Galf 1’’ 108,4 108,5 108,4 2’’ 83,4 83,4 83,5 3’’ 78,7 78,7 78,7 4’’ 85,0 85,0 85,0 5’’ 70,8 70,8 70,8 6’’ 75,5 75,5 75,5 OMe 59,4 59,4 59,4 Đo CD3OD, 176 MHz 4.2 Xác định cấu trúc hợp chất từ loài biển Anthenea aspera hợp chất sterol hợp chất chứa N lần phân lập từ cặn chiết hexane, ethyl acetat metanol loài biển Anthenea aspera thu thập vùng biển Đông Bắc Việt Nam 11 AA1 Cholesterol AA2 Lathosterol AA4.Cholestan-3β,5α,6β,15α,16β-26-hexol AA3 Cholest-4-ene-3β,6β-diol AA6 L-glycine-L-propyl AA5 Cyclo(L-glycine-L-proline) AA8 L-Phenylalanine AA7.Cyclo(L-alanine-4-hydroxyl-L-prolyl AA9 Tyramine AA10 Thymine AA11 Uracil 4.2.1 Hợp chất AA1: cholesterol Hợp chất AA1 có điểm nóng chảy, Rf phổ NMR trùng với hợp chất ASB1 nên xác định cholesterol 4.2.2 Hợp chất AA2: Lathosterol (Cholest-7,8-ene-3-ol) Vị trí Hình 4.2.8 Cấu trúc hóa học AA2 Bảng 4.14 Số liệu phổ NMR AA2 hợp chất tham khảo # Ha,b(mult., J, Hz) C Ca,c 37,1 37,1 1,82 m/ 1,07 m 31,3 31,4 1,80 m/ 1,61 m 70,7 71,1 3,60 m 37,8 38,0 1,27 m/ 1,72 m 40,2 40,3 1,40 m 29,6 29,7 1,76 m 117,2 117,4 5,15 m 139,3 139,6 49,4 49,5 1,61 m 12 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 34,1 34,2 21,5 21,6 1,57 m, 1,45 m 39,5 39,5 1,20; 2,02 m 43,2 43,4 54,9 55,0 1,80 overlap 22,9 23,0 1,40m; 1,52 m 27,9 27,9 1,88 m; 1,26 m 56,1 56,1 1,20 m 11,8 11,8 0,53 s 12,9 13,0 0,79 s 36,1 36,0 1,36 m 18,8 18,8 0,92 d (6,5) 36,1 36.2 0,99 m; 1;34 m 23,9 23,9 1,14 m, 1,34 m 39,4 39,6 1,13-1,10 m 27,9 28,0 1,52 m 22,5 22,6 0,86 d (7,0) 22,7 22,8 0,87 d (7,0) a b c # CD3OD, 500 MHz, 125 MHz, δC số liệu TLTK [58] 4.2.3 Hợp chất AA3: cholest-4-ene-3 ,6-diol C 10 11 12 13 14 Ca,c 37,4 29,6 69,2 121,4 149,5 68,6 43,7 35,8 55,9 38,9 22,1 41,1 43,2 57,4 Hình 4.2.13 Cấu trúc hóa học AA3 Bảng 4.15 Số liệu phổ NMR AA3 hợp chất tham khảo C δCa,c Ha,b(mult., J, Hz) Ha,b(mult., J, Hz) 1,76 (m); 1,32 (m) 15 25,2 1,64 (m); 1,40 (m) 1.91 (m); 1,49 (m) 16 29,2 1,88 ( m), 1,32 (m) 4,11-4,16 (trùng H-6) 17 57,6 1,14 (m) 5,67 (d, J 1,5 Hz) 18 12,4 0,75 (s) 19 19,2 1,08 (s) 4,11-4,16 (trùng H-3) 20 37,1 1,43 (m) 0,87 (m) 21 19,2 0,95 (d, J 6,5) 1,58 (m) 22 37,3 1,39 (m); 1,05 (m) 0,75 (m) 23 24,9 1,14-1,22 (m) 24 40,7 1,10-1,21 (m) 1,39; 1,53 (m) 25 29,1 1,55 (m) 2,04-2,06 (m) 26 23,2 0,89 (d, 6,5) 27 22,9 0,86 (d, 6,5) 1,07 (m) a CD3OD, b500 MHz, c125 MHz, #δC số liệu TLTK [77] 13 4.2.4 Hợp chất AA4: cholestane 3 ,5,6 ,15,16 ,26-hexol Hình 4.2.21 Cấu trúc hóa học AA4 Bảng 4.16 Số liệu phổ NMR AA4 hợp chất tham khảo C C Cac Hab, mult (J = Hz) 31,7 33,5 68,4 41,6 76,6 76,6 31,7 33,5 68,3 41,5 76,6 76,4 1,79 m; 1,51 m 1,62 m; 1,35 m 4,03 m (5,5) 2,08 dd (11,5; 13,0) 3,49 dd (2,5; 3,0) 35,4 35,2 1,89 m 10 11 12 13 14 15 16 17 18 32,2 46,7 39,5 22,0 42,1 44,9 61,2 85,0 83,2 60,1 15,2 31,1 46,6 39,3 21,9 42,0 44,7 60,9 85,1 83,0 59,9 15,1 2,01 m 1,41 m 1,38 m 1,98 m; 1,20 m 0,98 m 3,76 dd (2,5; 10,0) 3,99 dd (2,5; 7,5) 1,27 m 0,93 s 19 17,2 17,3 1,20 s 20 21 22 23 24 25 26 31,0 18,6 37,5 24,8 35,0 37,0 68,6 31,0 18,6 37,4 24,8 34,9 37,0 68,4 # HMBC (HC) C-5, C-19 C-10 C-3, C-5 C-4, C-5, C-8, C-10 C-6, C-8, C-9, C-14 C-7, C-9, C-14 H-4, H-7 C-13 C-9, C-14 C-13, C-16, C-18 C-8, C-14, C-16 C-13, C-15 C-13, C-18, C-20 C-12, C-13, C-14, C-17 C-1, C-5, C-9, C-10 C-17 C-17, C-20, C-22 C-21 C-24 C-27 1,89 m 0,98 d (5,5) 1,08 m 1,46 m; 1,23 m 1,43 m; 1,06 m 1,58 m 3,45 dd (6,0; 10,5); 3,34 C-24, C-25, C-27 overlapped 27 17,3 17,4 0,93 d (6,5) C-24, C-25, C-26 a b c # CD3OD, 500 MHz, 125 MHz, δC số liệu TLTK [78] 4.2.5 Hợp chất AA5: cyclo(L-glycine-L-proline) 14 NOESY H-18 H-17 Hình 4.2.27 Cấu trúc hóa học AA5 Bảng 4.17 Số liệu phổ NMR AA5 hợp chất tham khảo a ,c HMBC (H→C) δ H (mult, J, δaH,c (mult, J, Hz) (AA5) a ,b Hz) cyclo(LVị trí Gly-L-Pro) [79]  δC (AA5) L-Gly-LPro [80] (AA5) Gly NH Pro 1′ 2′ 3′ 4,10 3,87 (dd) 7,15 4,11 1,75-2,55 4′ 1,75-2,55 5′ 3,58 (m) 4,10* 3,90 (dd, 4,5; 16,5) 7,35 (br s) 163,6 4,10 2,38 (m)/2,06* (2,34-2,41) 1,92 (m)/2,06* (1,86-2,11) 3,64 (m)/3,56 (m) (3,58, m) 175,6 C-1, C-1′ 46,5 46,2 C-1, C-2′ 170,1 58,5 * δCd ,e 28,4 22,3 45,2 C-3’, C-4’ C-1′, C-2′, C-4′, C5′ C-2′, C-3′, C-5′ C-1, C-2′, C-3′, C4′ 169,3 59,6 29,2 23,6 43,0 Đo aCDCl3, , b125 MHz, c500 MHz, *Tín hiệu trùng, dD2O, eCD3OD 4.2.6 Hợp chất AA6: L-glycine-L-prolin Hình 4.2.31 Cấu trúc hóa học AA6 Bảng 4.18 Số liệu phổ NMR AA6 hợp chất tham khảo δC [80] L-Gly-L-Pro δaC,b (AA6) Gly 175,6 172,0 46,2 47,0 NH Pro 1′ 2′ 169,3 59,6 166,5 59,9 # Vị trí 15 δaH, c (mult, J.,Hz) (AA6) HMBC (H→C) (AA6) 4,12 (ddd, 17,0; 2,0; 1,0) 3,76 (d, 17,0) C-1, C-1’ 4,25 (m) C-3’ 3′ 29,2 29,3 4′ 23,6 23,3 5′ 46,3 46,3 b c MeOD–d4, D2O, 125 MHz, 500 MHz 4.2.7 Hợp chất AA7: cyclo(L-alanyl-4-hydroxyl-L-prolyl) a 2,35 (m) 1,99 (m) 2,04 (m) 1,96 (m) 3,52-3,60 (m) C-5’ C-4’ # Hình 4.2.37 Cấu trúc hóa học AA7 Bảng 4.19 Số liệu phổ NMR AA7 hợp chất tham khảo C Cac Hab, mult (J = Hz) 163,6 46,5 169,1 52,1 15,7 172,8 58,9 38,2 69,1 4,26 - # C 1’ 2’ 3’ 4’ 170,1 58,5 28,4 22,3 4,54 2,30 (dd, dd, 6,5; 13,5) 4,49 2,11 (ddd, 4,0 ; 11,0; 13,5) 5’ 45,2 55,2 3,69 (dd,4,5; 13,0) 3,45 (d,13,0) N-H 4,63 a CD3OD, b500 MHz, c125 MHz, #δC số liệu TLTK [81] 4.2.8 Hợp chất AA8: L-phenylalanine HMBC (HC) C-1 C-1 C-1’ C-1’ - C-1 - Hình 4.2.43 Cấu trúc hóa học AA8 Bảng 4.20 Số liệu phổ NMR AA8 hợp chất tham khảo C C Cac 135,3 128,7 129,7 130,7 129,7 128,7 37,8 137,3 130,0 130,4 128,4 130,4 130,0 38,3 # Hab, mult (J = Hz) 7,28-7,38 (m, 5H, H-Ar); 7,28-7,38 (m, 5H, H-Ar); 7,28-7,38 (m, 5H, H-Ar); 7,28-7,38 (m, 5H, H-Ar); 7,28-7,38 (m, 5H, H-Ar); 3,33 (dd, 1H, J = 4,5; 14,5 Hz, H-7), 3,02 (dd, 1H, J = 9,0; 14,5 Hz, H-7) 55,5 57,6 3,79 (dd, 1H, J = 4,5; 9,0 Hz, H-8); 174,2 173,8 a CD3OD, b500 MHz, c125 MHz, #δH liệu [82] đo CD3OD 16 HMBC (HC) C-8, C-2, C-6, C-1, C-9 C-7, C-1, C-9 4.2.9 Hợp chất AA9: tyramine Hình 4.2.46 Cấu trúc hóa học AA9 17 Bảng 4.21 Số liệu phổ NMR hợp chất AA9 hợp chất tham khảo # C C Cac Hab, mult (J = Hz) 128,3 128,5 130,5 130,8 7,11 d (8,5) 116,2 116,7 6,79 d (8,5) 156,6 157,8 116,2 116,7 6,79 d (8,5) 130,5 130,8 7,11 d (8,5) 35,1 34,0 2,88 dd (8,0; 7,0) 42,3 42,3 3,13 dd (8,0; 7,0) C=O 177,0 CH3 10,5 a b c # CD3OD, 500 MHz, 125 MHz, δC liệu [83] đo CD3OD 4.2.10 Hợp chất AA10: thymine Phổ 1H-NMR Rf điểm nóng chảy AA10 hồn tồn đồng với liệu ASB2 4.2.11 Hợp chất AA11: uracil Hình 4.2.51 Cấu trúc hóa học AA11 Bảng 4.22 Số liệu phổ NMR AA11 hợp chất tham khảo C N-H C # Cac 167,5 110,4 139,2 150,3 12,1 Hab, mult (J = Hz) 164,3 100,2 5,44 ppm (J =7,5Hz, H-2) 142,1 7,38 ppm (J =7,5Hz, H-3) 151,5 11,8 11,0 a b c # CD3OD, 500 MHz, 125 MHz, δc số liệu TLTK [84,85] 4.3 Kết thử hoạt tính sinh học số chất phân lập từ biển A sibogae 4.3.1 Hoạt tính gây độc tế bào Các hợp chất ASB5, ASB6, ASB8-ASB11 thử nghiệm độ gây độc tế bào dòng tế bào ung thư vú người T-47D theo phương pháp MTS Chất đối chứng dương lựa chọn cisplatin Kết cho thấy hợp chất thử nghiệm cisplatin khơng gây độc tế bào dịng tế bào T47D nồng độ lên đến 150 μM 4.3.2 Hoạt tính chống tăng sinh tế bào Các hợp chất ASB5, ASB6và ASB8 khơng thể hoạt tính ức chế tăng sinh dòng tế bào T47D nồng độ 50 μM, hỗn hợp ASB11 ức chế tăng sinh tế bào T-47D sau 24 giờ, 48 72 nồng độ so với chất đối chứng cisplatin Sau 24 hỗn hợp ASB11 làm giảm tăng sinh tế bào T-47D 10% chất đối chứng cisplatin làm giảm tăng sinh tế bào T-47D 20% Sau 48 hỗn hợp ASB11 làm giảm tăng sinh tế bào T-47D khoảng 20% chất đối chứng cisplatin làm giảm tăng sinh tế bào T-47D khoảng 50% Hỗn hợp ASB11 (50 μM) làm giảm tăng sinh tế bào T-47D sau 72 47%, chất đối chứng cisplatin (15 μM) làm giảm tăng sinh tế bào T-47D sau 72 67% (Hình 4.3.1) 18 Hình 4.3.1 Hoạt tính ức chế tăng sinh tế bào T-47 theo thời gian hỗn hợp ASB11 cisplatin 4.3.3 Khảo sát hoạt tính ức chế hình thành khối tế bào ung thư thạch mềm Các tế bào T-47D (8 × 103) xử lý với hợp chất ASB5, ASB6, ASB8 hỗn hợp ASB11 nồng độ 50 μM với cisplatin (1 μM) (chứng dương) chất thạch mềm ủ 370C buồng ủ với 5% CO2 tuần Các khối tế bào (colony) đếm kính hiển vi với trợ giúp phần mềm ImageJ Hình 4.3.2 Hiệu ức chế phát triển tế bào ung thư vú T-47D chất ASB5, ASB6, ASB8 hỗn hợp ASB11 so sánh với mẫu chứng Kết cho thấy nồng độ 50 μM hợp chất ASB5, ASB6 ASB8 khơng ức chế số lượng kích thước khối tế bào ung thư vú T-47D so sánh với mẫu chứng Trong đó, hỗn hợp ASB11 không ức chế số lượng khối tế bào lại làm giảm nửa kích thước khối tế bào T-47D Cisplatin (1 μM) ức chế hình thành khối tế bào ung thư khoảng 48% (Hình 4.3.2.A) Các thí nghiệm sinh học trước hỗn hợp anthenoside J+K có hoạt tính gây độc tế bào chống tăng sinh tế bào ung thư mạnh anthenoside khác Do đó, cần tiếp tục nghiên cứu chế hoạt tính hỗn hợp này, mối quan hệ cấu trúc hoạt tính anthenoside phân lập từ chi Anthenea CHƢƠNG V - KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Nghiên cứu thành phần hóa học Bằng cách sử dụng kết hợp phương pháp sắc ký phương pháp phổ đại, phân lập xác định cấu trúc hóa học 22 hợp chất từ hai loài biển A aspera A sibogae, có hợp chất Từ biển Anthenea sibogae phân lập xác định cấu trúc hóa học 11 hợp chất (ASB1-ASB11) có hợp chất (ASB5-ASB10) đặt tên là: anthenoside S1, anthenoside S2, anthenoside S3, anthenoside S4, anthenoside S5, anthenoside S6 hợp chất biết cholesterol (ASB1), thymine (ASB2), L-tyrosine (ASB3), tryptophan (ASB4) hỗn hợp anthenoside J anthenoside K (ASB11) Từ biển Anthenea aspera phân lập xác định cấu trúc hóa học 11 hợp chất (AA1AA11) 11 hợp chất phân lập lần từ chi Anthenea : cholesterol (AA1), lathosterol (AA2), cholest-4-ene-3β,6β-diol (AA3), cholestane 3,5,6,15,16,26-hexol) (AA4), cyclo(L-glycine-Lproline) (AA5), L-glycine-L-prolin (AA6), cyclo(L-alanine-4-hydroxyl-L-proline) (AA7), L-phenylalanine (AA8), tyramine (AA9), thymine (AA10) uracil (AA11) 19 Nghiên cứu hoạt tính sinh học Lần đầu tiên, hợp chất glycoside steroid mới: anthenoside S1-S6 phân lập từ biển A sibogae nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào, hoạt động chống tăng sinh tế bào khả ức chế hình thành khuẩn lạc đĩa thạch mềm dòng tế bào ung thư vú T-47D Các hợp chất ASB5, ASB6 ASB8 không cho thấy hoạt động ức chế dòng tế bào T47D nồng độ 50 μM, hỗn hợp ASB11 ức chế tăng sinh tế bào T-47D sau 24 giờ, 48 72 nồng độ so với chất đối chứng cisplatin Hỗn hợp ASB11 (50 μM) làm giảm tăng sinh tế bào T-47D sau 72 47%, đối chứng cisplatin (15 μM) làm giảm tăng sinh tế bào sau 72 67% Ở nồng độ 50 μg / ml steroid glycoside ASB5, ASB6, ASB8, ASB11 ức chế kích thước khối tế bào ung thư vú T-47D 23%, 19%, 30%, 52% 5.2 Kiến nghị Đây nghiên cứu ban đầu hoạt tính sinh học số glycoside steroid phân lập từ loài biển A sibogae A aspera Những thí nghiệm sinh học dừng lại mức độ thăm dò cần nghiên cứu thêm chế hoạt động Cần thử hoạt tính chống ung thư hợp chất dòng tế bào ung thư khác người số hoạt tính sinh học khác hoạt tính kháng viêm, kháng khuẩn hoạt tính neuritogenic NHỮNG ĐĨNG GĨP MỚI CỦA LUẬN ÁN - Đây nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi biển Anthenea sibogae giới nghiên cứu Việt Nam thành phần hóa học loài biển Anthenea aspera - Từ loài biển Anthenea sibogae phân lập xác định cấu trúc hợp chất mới: anthenoside S1 – anthenoside S6 - Từ loài biển Anthenea aspera phân lập xác định cấu trúc 11 hợp chất, tất hợp chất lần phân lập từ chi Anthenea - Thử nghiệm invitro hoạt tính gây độc tế bào T-47D glycoside steroid phân lập 20 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ A A Kicha, D T Ha, N V Ivanchina, T V Malyarenko, A I Kalinovsky, P S Dmitrenok, S P Ermakova, O S Malyarenko, N A Hung, T TT Thuy, P Q Long, Six new polyhydroxysteroidal glycoside Anthenosides S1-S6, from the starfish Anthenea sibogae, Chemistry & Biodiversity, 2018, 15 (3), e1700553 DOI: 10.1002/cbdv.201700553 (SCIE) Nguyen Anh Hung, Dinh Thi Ha, Tran Thi Thu Thuy, Pham Quoc Long, Alla Anatolievna Kicha Steroidal diglycoside from the starfish Anthenea sibogae, Vietnam Journal of Sciences and Technology, 2018, 56 (4A), 121-126 DOI: 10.15625/2525-2518/56/4A/13137 (ACI) Nguyen Van Tuyen Anh, Doan Lan Phuong, Nguyen Anh Hung, Pham Minh Quan, Tran Thi Thu Thuy, Biochemical constituents of some Vietnames starfish, Vietnam Journal of Science and Technology, 2016, 54 (2B), 263-269 (ACI) Đoàn Lan Phương, Phạm Văn Công, Đinh Thị Hà, Nguyễn Anh Hƣng, Nguyễn Văn Tuyến Anh, Phạm Quốc Long, Trần Thị Thu Thủy, Một số hợp chất chứa nitơ phân lập từ loài biển Anthenea aspera Việt Nam, Tạp chí khoa học cơng nghệ, 2014, 52 (5A), 89-95 Phuong, D L., Thuy, T T T., Nguyet, N T., Huong, D T., Hung, N A., Bordoloi, M., & Long, P Q First study on chemical constituents of starfish Anthenea aspera from Vietnamese northeast sea Успехи наук о жизни, 2013, 7, 66-67 Nguyễn Anh Hưng, Nguyễn Thị Hải Yến, Đặng Thị Thúy Hồng, Trần Thị Thu Thủy, Phạm Quốc Long Phân lập hợp chất từ cặn dichloromethane lồi biển Anthenea sibogae, Tạp chí Khoa học trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2, 2020 (Giấy chấp nhận đăng) 21 ... Anthenea aspera Việt Nam? ?? Mục tiêu nghiên cứu luận án - Khảo sát thành phần hóa học hai lồi biển Anthenea sibogae Anthenea aspera - Đánh giá hoạt tính sinh học hợp chất phân lập từ loài biển Anthenea. .. số hoạt tính sinh học khác hoạt tính kháng viêm, kháng khuẩn hoạt tính neuritogenic NHỮNG ĐĨNG GĨP MỚI CỦA LUẬN ÁN - Đây nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học lồi biển Anthenea sibogae. .. tìm hoạt chất sử dụng y dược từ thuốc dân gian Việt Nam, lựa chọn loài biển thuộc chi Anthenea Xuất phát từ điểm đó, đề tài ? ?Nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học hai lồi biển Anthenea sibogae Anthenea