Chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng cơ Duchenne

Xuất hiện với tần suất 1/3500 trẻ trai, loạn dưỡng cơ Duchenne (DMD) là bệnh lý di truyền thần kinh cơ hay gặp nhất trong nhóm bệnh lý loạn dưỡng cơ. Đây là bệnh lý di truyền liên kết nhiễm sắc thể giới tính X, do đột biến gen dystrophin. Bài viết trình bày mô tả kết quả chẩn đoán trước sinh bệnh DMD bằng các kỹ thuật di truyền phân tử.

TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 16(01), 14(01), 31 XX-XX, - 36,2016 2018 CHẨN ĐOÁN TRƯỚC SINH BỆNH LOẠN DƯỠNG CƠ DUCHENNE Đinh Thuý Linh(1), Trần Vân Khánh(1), Trần Huy Thịnh(2), Nguyễn Đức Hinh(2) (1) Đại học Y Hà Nội, (2) Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội Từ khóa: loạn dưỡng Duchenne, chẩn đoán trước sinh, Microsatellite DNA Keywords: Duchenne muscular dystrophy, prenatal diagnosis, Microsatellite DNA Tóm tắt Xuất với tần suất 1/3500 trẻ trai, loạn dưỡng Duchenne (DMD) bệnh lý di truyền thần kinh hay gặp nhóm bệnh lý loạn dưỡng Đây bệnh lý di truyền liên kết nhiễm sắc thể giới tính X, đột biến gen dystrophin.Hiện bệnh DMD chưa có phương pháp điều trị đặc hiệu, chẩn đoán trước sinh trường hợp thai phụ người mang gen bệnh giúp phát trường hợp thai mắc DMD, giảm tỷ lệ mắc bệnh cộng đồng Mục tiêu: Mơ tả kết chẩn đốn trước sinh bệnh DMD kỹ thuật di truyền phân tử Đối tượng nghiên cứu: 10thai phụ mang thai từ 17 –22 tuần có nguy cao sinh mắc DMD Phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả loạt bệnh Sử dụng kỹ thuật MLPA, PCR, giải trình tự gen Microsatellite-DNA chẩn đốn trước sinh bệnh DMD Kết quả: 1/10 thai nhi chẩn đoán thai nhi bệnh lý, thai phụ tư vấn định đình thai nghén 9/10 thai nhi chẩn đốn bình thường, tiếp tục theo dõi thai kỳ Kết luận: Ứng dụng thành công kỹ thuật di truyền phân tử trongchẩn đoán trước sinh bệnh DMD Từ khoá: loạn dưỡng Duchenne, chẩn đoán trước sinh, Microsatellite DNA Abstract Tập 14, số 04 Tháng 05-2016 With the rate of 1/3500, Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is the most common genetical neuromuscular dissease among muscular dystrophy diseases male children DMD is resulted from the mutation of dystrophin gene on X chromosome Prenatal diagnosis on pregnant women carrying the gene will provide the chance to diagnose DMD case among fetus Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 Tác giả liên hệ (Corresponding author): Đinh Thuý Linh, email: DrDinhLinhobgyn@gmail.com Ngày nhận (received): 02/04/2018 Ngày phản biện đánh giá báo (revised): 02/04/2018 Ngày báo chấp nhận đăng (accepted): 27/04/2018 PRENATAL DIAGNOSIS OF DUCHENNE MUSCULAR DYSTROPHY 31 SẢN KHOA – SƠ SINH ĐINH THUÝ LINH, TRẦN VÂN KHÁNH, TRẦN HUY THỊNH, NGUYỄN ĐỨC HINH Objective: Describe results of DMD prenatal diagnosis by using molecular biology techniques Subject: 10pregnant women during 17 – 22 weeks of gestation, whom fetus is high risk of DMD Method: Serial cases report Implementing sequencing, MLPA, Microsatellite-DNA technique in DMD prenatal diagnosis Result:1/10fetus was diagnosed with the disease, the mother decided to determine pregnancy 9/10 fetus were diagnosed to be normal and continued with Conclusion: Successful in using molecular biology techniques in DMD prenatal diagnosis Keywords: Duchenne muscular dystrophy, prenatal diagnosis, Microsatellite DNA Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 Đặt vấn đề 32 Trong bệnh lý di truyền thần kinh nay, loạn dưỡng Duchenne (DMD) bệnh lý hay gặp với tần suất 1/3500 trẻ trai [1] Bệnh mô tả lần vào kỷ XIX đến cuối kỷ XX, nguyên nhân bệnh xác định đột biến gen dystrophin nhiễm sắc thể giới tính X Đây bệnh lý di truyền gen lặn, kiên kết với NST giới tính X nhiên có 30% trường hợp đột biến phát sinh [1],[2] Trong trường hợp người mẹ mang gen bệnh, khơng có biểu lâm sàng lại có khả truyền gen bệnh cho gây biểu bệnh trai với tỉ lệ 50% [2],[3] Đột biến gen dystrophin gây thiếu hụt tổng hợp protein tương ứng, dẫn đến biểu lâm sàng người bệnh: yếu tiến triển từ gần đến xa, phì đại bắp chân, tăng sinh tổ chức chậm phát triển trí tuệ Triệu chứng yếu bắt đầu biểu trẻ tuổi tập Bệnh nhân khả lại phụ thuộc xe lăn lứa tuổi 11-12 thường tử vong lứa tuổi 20 suy hô hấp biến chứng tim mạch [1],[3] Hiện chưa có phương pháp điều trị đặc hiệu bệnh loạn dưỡng Duchenne, sàng lọc người mang gen bệnh chẩn đoán trước sinh đóng vai trị quan trọng giúp giảm tỷ lệ mắc bệnh Có nhiều kỹ thuật sinh học phân tử áp dụng để phát đột biến gen dystrophin với ưu, nhược điểm riêng phù hợp với đặc điểm đột biến bệnh nhân Kỹ thuật MLPA với khả khảo sát toàn 79 exon gen dystrophin phát đột biến xóa đoạn lặp đoạn, chiếm khoảng 60-65% đột biến [4],[5] 35-40% trường hợp đột biến điểm cần phải sử dụng kỹ thuật giải trình tự gen để xác định, kỹ thuật thường cần nhiều thời gian với giá thành cao [6],[7] Trong chẩn đoán trước sinh thường thực kỹ thuật phát đột biến trực tiếp gen dystrophin dựa vào đột biến điểm bệnh nhân giải trình tự gen, MLPA, PCR [6],[8] Tuy nhiên số trường hợp không xác định đột biến gen dystrophin bệnh nhân thai phụ người mang gen cấu trúc gen lớn kỹ thuật phân tích gián tiếp Microsatellite DNA xác định allele đột biến mà khơng cần có đột biến điểm Hơn nữa, kỹ thuật Microsatellite DNA đáp ứng yêu cầu chẩn đoán trước sinh với thời gian trả lời kết nhanh sau 48 – 72h giá thành xét nghiệm thấp kỹ thuật khác, giảm gánh nặng kinh tế cho bệnh nhân [6],[9],[10] Mục tiêu nghiên cứu: Mô tả kết chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne kỹ thuật di truyền phân tử Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng nghiên cứu 10 thai phụ mang thai từ 17 tuần – 22 tuần trung hai vùng “hot spot” hay xảy đột biến Các exon bị đoạn thể vắng mặt band tương ứng gel agarose 2.2.2.4 Kỹ thuật giải trình tự gen Máy giải trình tự gen tự động sử dụng màu huỳnh quang khác để đánh dấu loại ddNTP, sử dụng hệ thống điện di mao quản Mỗi có vạch điện di qua, phân tử ddNTP cuối đầu 3’ đoạn DNA phát màu huỳnh quang tương ứng, máy ghi nhận màu sắc chuyển máy tính phân tích Dựa vào màu huỳnh quang, máy nhận diện nucleotid, từ biết trình tự DNA đích, xác định xác đột biến gen 2.2.3 Kỹ thuật nuôi cấy tế bào ối xác định nhiễm sắc thể đồ thai nhi Nuôi cấy theo phương pháp hở tủ ấm 37°C với 5% CO2 95% không khí nguồn ẩm Thời gian trung bình ni cấy từ 7-15 ngày Các tế bào ối thai nhi thu với số lượng tương đối sau nuôi cấy tách DNA theo phương pháp phenol-chloroform phân tích gen Tế bào ối sử dụng để nhuộm băng G phân tích karyotype thai 2.3 Đạo đức nghiên cứu Gia đình bệnh nhân hoàn toàn tự nguyện tham gia nghiên cứu, tư vấn giải thích cụ thể mục đích, qui trình nghiên cứu, quyền tự rút khỏi nghiên cứu, đảm bảo bí mật cá nhân kết nghiên cứu Các thông tin bệnh nhân, người nhà bệnh nhân kết chẩn đốn hồn tồn giữ bí mật, đặc biệt thơng tin giới tính thai nhi TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 16(01), 31 - 36, 2018 Kết nghiên cứu 3.1 Kết chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne cho thai nhi Bảng Các dạng đột biến gen dystrophin gây bệnh loạn dưỡng Duchenne 10 thai phụ Dạng đột biến Số lượng Tỷ lệ % Xoá đoạn 60 Lặp đoạn 10 Đột biến điểm 20 Không xác định đột biến 10 Tổng 10 100 Trong 10 thai phụ chẩn đốn trước sinh, có thai phụ xác định có mang gen Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 xác định người mang gen bệnh loạn dưỡng Duchenne có tiền sử sinh mắc bệnh loạn dưỡng Duchenne 2.2 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu mô tả loạt ca bệnh 2.2.1 Chọc hút nước ối Kỹ thuật chọc hút nước ối thực tuổi thai 17-22 tuần hướng dẫn siêu âm, Bệnh viện Phụ Sản Trung ương Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội Lượng dịch ối lấy thai phụ 15ml: 05 ml sử dụng để thực chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne, 10 ml sử dụng để xét nghiệm nhiễm sắc thể đồ thai nhi 2.2.2 Kỹ thuật di truyền phân tử chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne từ dịch ối 2.2.2.1 Kỹ thuật Microsatellite DNA Kỹ thuật microsatellite DNA sử dụng cặp mồi có gắn huỳnh quang để khuếch đại STR phân tích kích thước chúng thông qua điện di mao quản máy máy giải trình tự gen Đối với gia đình loạn dưỡng Duchenne cần khuếch đại 20 vùng STR đặc hiệu để xác định 2-3 marker dị hợp tử mẫu mẹ Sử dụng cặp mồi xác định marker dị hợp tử từ xác định kiểu gen kiểu hình thai nhi Sản phẩm khuếch đại PCR điện di hệ thống sequencing - Beckman coulter Kết phân tích phần mềm GeneMapper v3.2 software 2.2.2.2 Kỹ thuật MLPA Kỹ thuật MLPA sử dụng 79 đoạn dò gen dystrophin Mỗi DNA lai (probe) gồm hai chuỗi oligonucleotid lai đặc hiệu với 79 exon Kết điện di cho 79 đỉnh có kích thước tương ứng 79 probe đặc hiệu với 79 exon: - Với đột biến xoá đoạn, exon bị xoá đoạn đỉnh exon không phát - Với đột biến lặp đoạn, kết tính tốn dựa vào tỉ lệ RPA (Relative Peak Area) tương ứng với exon so với mẫu chứng người bình thường, exon lặp đoạn mà tỉ lệ RPA lớn 1,5 2.2.2.3 Kỹ thuật Multiplex PCR PCR cho phép tổng hợp số lượng lớn gen thời gian ngắn Phản ứng PCR bao gồm ba bước lặp lặp lại nhiều lần Kỹ thuật multiplex PCR sử dụng nhiều cặp mồi phát đột biến đoạn gen dystrophin 25 exon tập 33 SẢN KHOA – SƠ SINH ĐINH THUÝ LINH, TRẦN VÂN KHÁNH, TRẦN HUY THỊNH, NGUYỄN ĐỨC HINH đột biến gây bệnh loạn dưỡng Duchenne đột biến xoá đoạn chiếm tỷ lệ cao với 6/10 thai phụ (chiếm 60%) Đột biến điểm phát thai phụ, thai phụ xác định mang đột biến lặp đoạn trường hợp thai phụ chưa tìm thấy đột biến, nhiên thai phụ sinh trai mắc bệnh loạn dưỡng Duchenne, đưa vào nghiên cứu Bảng Kết chẩn đoán trước sinh 10 thai phụ có nguy cao sinh mắc bệnh DMD Kết chẩn đoán trước sinh STT Mã số Dạng đột biến phát thai phụ bệnh loạn dưỡng Duchenne thai nhi DMD10 Xóa đoạn exon 46-50 Thai nhi khơng mắc bệnh DMD11 Xóa đoạn exon 49-50 Thai nhi không mắc bệnh DMD12 Xóa đoạn exon 51 Thai nhi khơng mắc bệnh Đột biến điểm: Thai nhi không mắc bệnh DMD13 c.3022A>T (p.Cys1008Stop) DMD15 Xóa đoạn exon 35-43 Thai nhi khơng mắc bệnh DMD 17 Xóa đoạn exon 19-47 Thai nhi không mắc bệnh Thai nhi mắc bệnh loạn dưỡng DMD 18 Lặp đoạn 19-43 Duchenne DMD20 Xóa đoạn exon 49-52 Thai nhi khơng mắc bệnh DMD 22 Không phát đột biến Thai nhi không mắc bệnh Đột biến điểm Thai nhi không mắc bệnh 10 DMD33 c.6640C>A (p.S2214X) Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 1/10 thai nhi được chẩn đoán thai nhi mắc bệnh loạn dưỡng Duchenne, 9/10 thai nhi chẩn đốn bình thường Trường hợp thai chẩn đoán mắc bệnh loạn dưỡng Duchenne, bệnh nhân gia đình định đình thai nghén trường hợp thai bình thường tư vấn giữ thai Kết chẩn đoán trước sinh thai phụ DMD 22 (ứng dụng kỹ thuật Microsatellite DNA): Phả hệ gia đình bệnh nhân mã số DMD22: thai phụ có trai bị bệnh loạn dưỡng Duchenne, cho thấy thai phụ người mang gen dị hợp tử bắt buộc Thai phụ trai xét nghiệm tìm đột biến gen dystrophin, nhiên chưa xác định đột biến 34 Hình Phả hệ gia đình thai phụ mã số DMD22 Hình Kỹ thuật Microsatellite chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne thai phụ DMD22 Kết chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne thai phụ DMD22 tìm thấy marker dị hợp tử DXS9907, DSTR 49 DSTR50 Với marker DSTR50, thai phụ xuất đỉnh có kích thước 241bp 246bp (hình A), tương ứng với alen nằm nhiễm sắc thể X (XBXb) Ở trai mắc loạn dưỡng Duchennechỉ xuất đỉnh kích thước 241bp tương ứng với alen nhiễm sắc thể X (XbY), trùng khớp với kích thước đỉnh mẫu thai phụ Từ kết trêncho thấy đỉnh kích thước 241bp đỉnh alen bệnh, đỉnh kích thước 246bp đỉnh alen bình thường nhi chẩn đốn trước sinh kỹ thuật PCR, xác đinh không mang đột biến xố đoạn giống mẹ (khơng mắc loạn dưỡng Duchenne) 3.2 Kết xét nghiệm nhiễm sắc thể đồ thai nhi Bảng Kết nhiễm sắc thể đồ từ dịch ối Bất thường NST Không bất thường NST Tổng Số lượng 10 10 Tỷ lệ % 100 100 TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 16(01), 31 - 36, 2018 Với marker DSTR49 (hình B), đỉnh mang kích thước 251bp đỉnh alen bệnh, đỉnh kích thước 236bp đỉnh alen bình thường Với marker D DXS9907 (hình C), đỉnh mang kích thước 211bp đỉnh alen bệnh, đỉnh kích thước 202bp đỉnh alen bình thường Phân tích kết mẫu ối thai nhi: marker DSTR50, DSTR 49 DXS9907 xuất đỉnh có kích thước tương ứng 202bp, 236bp, 246bp alen bình thường Kết khẳng định trường hợp thai nam không mắc bệnh loạn dưỡng Duchenne Kết chẩn đoán trước sinh thai phụ DMD33 (ứng dụng kỹ thuật giải trình tự gen): Trong 10 trường hợp thai nhi xét nghiệm nhiễm sắc thể đồ, không phát trường hợp có bất thường NST qua ni cấy tế bào ối Bàn luận Hình Kỹ thuật giải trình tự gen chẩn đốn trước sinh bệnh DMD thai phụ DMD33 Giải trình tự gen phát đột biến thay nucleotide C thành A vị trí c.6640 exon 46 gen dystrophin Đây dạng đột biến tạo mã kết thúc sớm (S2214X), từ tạo nên protein dystrophin khơng hồn chỉnh Mẹ bệnh nhân phát thấy đột biến trạng thái dị hợp tử Thai nhi không phát thấy đột biến, chẩn đốn khơng mắc bệnh loạn dưỡng Duchenne Kết chẩn đoán trước sinh thai phụ DMD12 (ứng dụng kỹ thuật PCR): Hình Kết chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne thai phụ DMD12 Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 Thai phụ xác định người mang gen đột biến xoá đoạn exon 51 gen dystrophin Thai Loạn dưỡng Duchennelà bệnh di truyền thần kinh hay gặp nhóm bệnh lý di truyền thần kinh với bệnh cảnh lâm sàng nặng nề chưa có phương pháp điều trị đặc hiệu Hiện có nhiều kỹ thuật sinh học phân tử áp dụng để xác định đột biến gen dystrophin Các kỹ thuật phát đột biến gen trực tiếp ứng dụng chấn đoán trước sinh với trường hợp có đột biến điểm thai phụ Kỹ thuật PCR có khả khảo sát 25 exon, phát đột biến xoá đoạn nằm vùng “hot spot”, kỹ thuật MLPA lại có khả khảo sát 79 exon, phát đột biến xoá đoạn lặp đoạn Tuy nhiên với đột biến điểm, việc xác định dựa vào kỹ thuật giải trình tự gen Với trường hợp phát đột biến kích thước gen q lớn hay bệnh nhân khơng đủ điều kiện kinh tế để thực xét nghiệm giải trình tự gen, kỹ thuật chẩn đốn gián tiếp Microsatellite DNA ứng dụng Khơng có khả phát trường hợp thai nhi mang đột biến từ mẹ mà kỹ thuật Microsatellite DNA đáp ứng yêu cầu chẩn đoán trước sinh với thời gian trả lời kết nhanh xác (chỉ sau 48 – 72h) so với kỹ thuật giải trình tự gen phải đến hàng tuần Đồng thời chi phí cho xét nghiệm thấp giúp giảm gánh nặng kinh tế cho bệnh nhân Mỗi bệnh nhân lựa chọn 2-3 marker dị hợp tử Tuỳ vào đặc điểm gia đình bệnh nhân loạn dưỡng Duchenne ứng dụng 35 SẢN KHOA – SƠ SINH ĐINH THUÝ LINH, TRẦN VÂN KHÁNH, TRẦN HUY THỊNH, NGUYỄN ĐỨC HINH kỹ thuật di truyền phân tử khác chẩn đoán trước sinh Việc lựa chọn kỹ thuật di truyền phân tử để chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne cần dựa vào loại đột biến điểm cụ thể phả hệ gia đình bệnh nhân Với trường hợp xác định đột biến người mẹ, sử dụng kỹ thuật xác định đột biến trực tiếp chẩn đoán trước sinh như: kỹ thuật PCR xác định đột biến xoá đoạn, kỹ thuật MLPA xác dịnh đột biến xố đoạn lặp đoạn, kỹ thuật giải trình tự gen xác định đột biến điểm Trong trường hợp không xác định đột biến người mẹ, chẩn đoán trước sinh cần áp dụng phương pháp phát đột biến gián tiếp Microsatellite DNA Việc xây dựng quy trình chẩn đốn trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne cần thiết để phát xác trường hợp thai nhi mắc bệnh thời gian ngắn Tài liệu tham khảo Tập 16, số 01 Tháng 05-2018 Bushby, K., et al Diagnosis and management of Duchenne muscular dystrophy, part 2: implementation of multidisciplinary care Lancet Neurol, 9(2); 2010 177-189 Kneppers, A L., Ginjaar, I B., and Bakker, E Duchenne and Becker muscular dystrophy Methods Mol Med, 92; 2004 311-41 Hallwirth Pillay K.D., Bill P.L., Madurai S., Mubaiwa L., Rapiti P Molecular deletion patterns in Duchenne and Becker muscular dystrophy patients from KwaZulu Natal J Neurol Sci 252(1); 2007 – Hwa H.L., Chang Y.Y., Chen C.H et al Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification identification of deletions and duplications of the Duchenne muscular dystrophy gene in Taiwanese subjects J Formos Med Assoc, 106; 2007 pp 339-46 Gatta V, Scarciolla O, Gaspari AR et al Identification of deletions and duplications of the DMD gene in affected males and carrier females by multiple 36 Hiện chương trình sàng lọc, chẩn đốn trước sinh tập trung vào phát rối loạn NST thường gặp như: hội chứng Down (3 nhiễm sắc thể 21), hội chứng Edwards (3 nhiễm sắc thể 18) hay hội chứng Patau (3 nhiễm sắc thể 13) Các hội chứng gây tình trạng đa dị tật hình thái khơng có biện pháp điều trị đặc hiệu Chính vậy, chọc hút nước ối, song song với lấy dịch ối để chẩn đoán thai nhi mắc loạn dưỡng Duchenne cần lấy nước ối để chẩn đoán bất thường nhiễm sắc thể thai nhi Kết luận Ứng dụng thành công kỹ thuật di truyền phân tử chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne: 1/10 thai nhi chẩn đoán thai nhi bệnh lý, thai phụ định đình thai nghén, 9/10 thai nhi chẩn đốn bình thường, tiếp tục theo dõi quản lý thai ligation probe amplification (MLPA) Hum Genet, 117; 2005 pp.92-8 Prior TW, Bridgeman SJ Experience and Strategy for the Molecular Testing of Duchenne Muscular Dystrophin JMD, 7(3); 2005 317-25 Ta MH, Tran TH, Do NH, Pham le AT, Bui TH, Ta VT, Tran VK Rapid method for targeted prenatal diagnosis of Duchenne muscular dystrophy in Vietnam.Taiwan J Obstet Gynecol, 52(4); 2013 534-539 Matsuo M Duchenne and Becker muscular dystrophy: from molecular diagnosis to gene therapy IUBMB Life, 53; 2002 pp 147-52 Hussey N.D., Donggui H., Froiland D.A., Hussey D.J., Haan E.A., Matthew C.D., Craig J.E Analysis of five Duchenne muscular dystrophy exons and gender determination using conventional duplex polymerase chain reaction on single cells Mol Hum Reprod, 5(11); 1999 pp 1089-94 10 Schouten JP, McElgunn CJ, Waaijer R, Zwijnenburg D, Diepvens F, Pals G Relative quantification of 40 nucleic acid sequences by multiplex ligationdependent probe amplification Nucleic Acids Res, 30(12); 2002 e57  ... phụ mã số DMD22 Hình Kỹ thuật Microsatellite chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne thai phụ DMD22 Kết chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne thai phụ DMD22 tìm thấy marker dị hợp... biến, nhiên thai phụ sinh trai mắc bệnh loạn dưỡng Duchenne, đưa vào nghiên cứu Bảng Kết chẩn đoán trước sinh 10 thai phụ có nguy cao sinh mắc bệnh DMD Kết chẩn đoán trước sinh STT Mã số Dạng... phân tử khác chẩn đoán trước sinh Việc lựa chọn kỹ thuật di truyền phân tử để chẩn đoán trước sinh bệnh loạn dưỡng Duchenne cần dựa vào loại đột biến điểm cụ thể phả hệ gia đình bệnh nhân Với