Xử lý bả thải của ngành công nghiệp sản xuất bia thành môi trường nuôi cấy vi khuẩn Bacillus thuringencis var. kurstaky MSS8-4 sinh tố diệt ruồi nhà

Sử dụng tác nhân axit và kiềm để thủy phân bã thải sản xuất bia thành môi trường nuôi cấy vi khuẩn Bacillus thuringiensis var. kurstaki MSS8.4 ở điều kiện nhiệt độ 1210C, thời gian 30 phút. Vi khuẩn sinh trưởng tốt trên môi trường được làm từ dịch thủy phân bằng phương pháp axit. Mật độ tế bào, bào tử lần lượt đạt 4,9x108CFU/ml và 4,6x108CFU/ml sau 48 giờ lên men. Kết quả kiểm tra hoạt tính sinh học trên ấu trùng ruồi nhà Musca domestica ở độ tuổi 2 cho thấy: hoạt tính sinh học của MSS8-4 khi lên men trên môi trường bã thải bia thủy phân và môi trường tổng hợp nước thịt pepton (Meat peptone broth – MPB) là tương đương nhau. Ở nồng độ bào tử 105CFU/g sau 96 giờ 100% ấu trùng ruồi bị tiêu diệt.

Kết nghiên cứu KHCN Xử lý bã thải ngành công nghiệp sản xuất bia thành môi trường nuôi cấy vi khuẩn Bacillus thuringencis var kurstaky MSS8-4 sinh độc tố diệt ruồi nhà Phạm Thùy Dương1, Ngơ Đình Bính2, Nguyễn Thị Hòa3, Lê Đức Khánh4 Trường Đại học Phương Đông Viện Công nghệ sinh học- Viện Hàn Lâm KH&CN Việt Nam Trung Tâm KHCN&MT – Liên Minh HTX Việt Nam Viện Bảo vệ thực vật Tóm tắt Sử dụng tác nhân axit kiềm để thủy phân bã thải sản xuất bia thành môi trường nuôi cấy vi khuẩn Bacillus thuringiensis var kurstaki MSS8.4 điều kiện nhiệt độ 1210C, thời gian 30 phút Vi khuẩn sinh trưởng tốt môi trường làm từ dịch thủy phân phương pháp axit Mật độ tế bào, bào tử đạt 4,9x108CFU/ml 4,6x108CFU/ml sau 48 lên men Kết kiểm tra hoạt tính sinh học ấu trùng ruồi nhà Musca domestica độ tuổi cho thấy: hoạt tính sinh học MSS8-4 lên men môi trường bã thải bia thủy phân môi trường tổng hợp nước thịt pepton (Meat peptone broth – MPB) tương đương Ở nồng độ bào tử 105CFU/g sau 96 100% ấu trùng ruồi bị tiêu diệt R ĐẶT VẤN ĐỀ uồi nhà (Musca domestica) sống gần gũi với người toàn giới, chúng thường xuất khu dân cư, khu vực sản xuất, chăn nuôi, nơi có nhiều thực phẩm chất thải Sự có mặt chúng dấu hiệu điều kiện vệ sinh chúng mang theo nhiều chất bẩn mầm bệnh Ruồi khơng gây khó chịu cho người hoạt động sản xuất, nghỉ ngơi mà vật trung gian lây truyền nhiều loại dịch bệnh cho người, động vật nuôi 34 trồng như: virut, vi khuẩn, trứng giun sán từ người bệnh sang người lành; từ môi trường vào thực phẩm thể người; từ vùng có dịch sang vùng khơng có dịch Ruồi truyền khoảng 100 bệnh chủ yếu bệnh nguy hiểm như: bại liệt, bệnh đau mắt hột, viêm gan (A, E), sốt hồi quy Rickettsiae, lỵ, tả, thương hàn nhiều loại vi khuẩn Streptococci Staphyloccoci Do đặc tính ruồi thường xuất khu vực sinh sống người, động vật nơi sản xuất thực phẩm, vậy, sử dụng biện pháp hóa học khơng gây nhiễm mơi trường mà cịn tiềm ẩn nguy nhiễm độc thực phẩm, gây hại trực tiếp cho người động vật hít phải Để khắc phục tồn thuốc diệt ruồi hóa học phương pháp diệt ruồi truyền thống, cần tạo chế phẩm sinh học vừa có tác dụng tiêu diệt hiệu mầm bệnh, lại vừa thân thiện với người môi trường Từ đầu kỷ 20 nhà khoa học tìm chứng minh vi khuẩn Bacillus thuringencis(Bt) có khả sản sinh protien độc có khả diệt chọn lọc loại Tạp chí Hoạt động KHCN An toàn - Sức khỏe & Môi trường lao động, Số 1,2&3-2017 Kết nghiên cứu KHCN trùng thuộc khác mà không gây hại đến sức khỏe người loại vật nuôi Chính vậy, Bt thương mại hóa dạng thuốc trừ sâu sinh học, sản xuất sử dụng rộng rãi Việt Nam từ năm 70 kỷ 20 Hiện nay, Bt đến dạng thuốc trừ sâu sinh học mà cịn chứng minh có khả diệt loại côn trùng thuộc cánh cứng, cánh vảy, hai cánh Các chế phẩm thương mại Bt sản xuất với quy mô khác nhiều nơi giới Tuy nhiên, hoạt tính khơng mạnh hoạt chất hóa học đồng thời giá thành lại cao nên sản phẩm chưa tìm chỗ đứng thị trường, vậy, việc tìm nguồn nguyên liệu rẻ tiền thay hóa chất tổng hợp cần thiết để giảm giá thành sản phẩm Hiện nay, giới đối mặt với tình trạng suy kiệt nguồn tài nguyên thiên nhiên, vậy, xu sản xuất tương lai quay vòng, tái sử dụng tất nguồn nguyên liệu sẵn có, chất thải q trình sản xuất trở thành nguyên liệu đầu vào cho trình khác Việt Nam đánh giá đất nước có mức tiêu thụ bia bình qn đầu người đứng đầu giới, vậy, lượng bã thải q trình sản xuất vơ lớn Chất thải sản xuất bia bao gồm bã malt, xác nấm men, vậy, có hàm lượng dinh dưỡng cao tận dụng làm nguồn nguyên liệu để sản xuất môi trường lên men cho vi sinh vật VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu - Bã thải sản xuất bia nhà máy bia Sài Gịn - Hà Nợi tḥc Cơng ty cổ phần bia Sài Gịn – Hà Nội, Khu cơng nghiệp vừa nhỏ Từ Liêm – Hà Nội Vi khuẩn thuringiensis var MSS8-4 Bacillus kurstaki - Ấu trùng ruồi nhà Muscadomestica tuổi 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp xác định mật độ tế bào bào tử - Xác định số lượng tế bào: mẫu pha loãng muối sinh lý (0,85% w/v) khử trùng Mẫu pha loãng (0,1ml) cấy đĩa thạch chứa môi trường MPA (Meat Peptone Agar - MPA) ủ 300C 24 Đếm số lượng khuẩn lạc hình thành mơi trường - Xác định số lượng bào tử: mẫu pha loãng làm nóng bể dầu 800C 10 phút sau để lạnh nước đá phút Mẫu cấy môi trường MPA ủ 300C 24 Đếm số lượng khuẩn lạc hình thành môi trường Số lượng tế bào bào tử xác định thông qua đếm khuẩn lạc phát triển môi trường thạch MPA Số khuẩn lạc đĩa thạch dao động 30 – 300 khuẩn lạc Công thức xác định số lượng tế bào bào tử: X = a × b × 10 (CFU/ml) Ảnh minh họa, Nguồn Internet Trong đó: a: số lượng khuẩn lạc xuất đĩa petri; b: nghịch đảo nồng độ pha lỗng Tạp chí Hoạt động KHCN An toàn - Sức khỏe & Môi trường lao động, Số 1,2&3-2017 35 Kết nghiên cứu KHCN trùng bổ sung 2%v/v dịch giống Lên men máy lắc ổn nhiệt 30 ± 10C, tốc độ lắc 200 vịng/phút, thời gian ni 48 2.2.5 Phương pháp phân tích 2.2.2 Phương pháp xử lý bã thải bia làm môi trường nuôi cấy vi sinh vật Bã thải bia xử lý làm nguyên liệu nuôi cấy vi sinh vật phương pháp thủy phân kết hợp thay đổi pH môi trường [5], [7] Nguyên tắc chung Sử dụng nhiệt kết hợp với tác nhân kiềm mạnh axit mạnh để phân hủy hợp chất cao phân tử, tế bào vi sinh vật nhằm giải phóng chất chất dinh dưỡng tế bào vi sinh vật pha lỏng làm nguồn cung cấp dinh dưỡng cho Bt phát triển Các bước thực Bước 1: Sử dụng NaOH 10M để điều chỉnh pH dịch bã thải pH10 (phương pháp kiềm nhiệt); Sử dụng H2SO4 5M để điểu chỉnh pH (phương pháp axit nhiệt) 36 Ảnh minh họa, Nguồn Internet Bước 2: Thủy phân môi trường 1210C, áp suất 1atm, thời gian 30 phút Bước 3: Làm nguội, điều chỉnh pH H2SO4 5M (NaOH 10M) vô trùng Bước 4: Bổ sung 2%v/v dịch giống vi sinh vật 2.2.3 Chuẩn bị dịch giống Một vòng que cấy vi khuẩn Btk từ ống giống đưa vào bình nón 500ml có chứa 100ml mơi trường sở (MTCS) vô trùng Nuôi lắc 300C, 200 vòng/phút, thời gian nhân giống - 10 Dịch nuôi cấy (chứa tế bào giai đoạn sinh trưởng) sử dụng để làm giống cho thí nghiệm [8] 2.2.4 Lên men Bacillus thuringiensis mơi trường dịch thể Sử dụng bình nón 500ml chứa 100ml môi trường vô Dịch thủy phân bã thải bia sau xử lý đưa phân tích thành phần hóa học theo phương pháp hành Trong đó, TOC xác định phương pháp SMEWW 5310B-2005; TN, TP xác định phương pháp EPA352.1 EPA-365.2, thành phần kim loại xác định theo phương pháp SMEWW 3125-2012 2.2.6 Thử hoạt tính ấu trùng ruồi nhà Để đánh giá khả tiêu diệt côn trùng hai cánh chủng MSS8.4 nuôi mơi trường bã thải, thí nghiệm thực ấu trùng ruồi nhà Muscadomestica độ tuổi theo phương pháp Thiery Frachon hai nồng độ 105 107 bào tử/ml Mỗi nồng độ thử nghiệm với cốc nhựa (lặp lại ba lần), cốc có 10 ấu trùng Chuẩn bị: Chủng MSS8.4 nuôi môi trường bã thải bia xử lý phương pháp axit nhiệt môi trường đối chứng MTCS; nuôi lắc 300C 72 Đánh giá mật độ tế bào, bào tử đạt được; tiến hành pha loãng đến mật độ 105 107 bào tử/ml để thử hoạt tính Cơ chất để thử hoạt tính bã bia vơ trùng làm Tạp chí Hoạt động KHCN An toàn - Sức khỏe & Môi trường lao động, Số 1,2&3-2017 Kết nghiên cứu KHCN nguội đến nhiệt độ phòng Các thử nghiệm thực nhiệt độ phòng, cốc nhựa có nắp đậy đục lỗ li ti để thơng khí, đặt nơi thống mát Theo dõi tỉ lệ ấu trùng chết từ - 120 Tỉ lệ ấu trùng chết tính theo cơng thức Abbott [1]: A=(C-T).100/C Trong đó: A: % ấu trùng ruồi nhà chết C: Số ấu trùng ruồi nhà sống mẫu đối chứng T: Số ấu trùng ruồi nhà sống mẫu thí nghiệm KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ảnh hưởng phương pháp xử lý bã thải bia đến sinh trưởng vi khuẩn MSS8-4 Bã thải bia lấy từ nhà máy bia Sài Gòn – Hà Nội bảo quản ngăn mát tủ lạnh 4-60C Khi sử dụng làm nguyên liệu lên men vi khuẩn MSS8-4, bã thải bia nghiền nhỏ đưa nồng độ chất rắn 2% Bã bia xử lý theo phương pháp kiềm nhiệt (pH10) axít nhiệt (pH2) trình bày mục 2.2, sau đó, dịch thủy phân bã bia sử dụng để lên men vi khuẩn MSS8-4 Thí nghiệm tiến hành song song với hai mẫu đối chứng môi trường làm từ dịch bã bia vô trùng mơi trường sở Thí nghiệm thực bình nón 500ml 300C, thời gian 48 giờ, tốc độ lắc 200 vịng/phút, kết phân tích trình bày Bảng Sử dụng bã bia xử lý phương pháp thủy phân mơi trường axít (TN1) môi trường kiềm (TN2) làm môi trường lên men, MSS8-4 sinh trưởng tốt Trong đó, TN1 sử dụng dịch thủy phân phương pháp Bảng 1.Ảnh hưởng phương pháp xử lý đến khả sinh trưởng MSS8-4 Mẫu Tổng tế bào (CFU/ml) Tổng bào tử (CFU/ml) Tỷ lệ chuyên hóa tế bào/bào tử TN1 4,9 x108 4,6 x108 91,8% TN2 1,8 x10 8 88,8% TN3 6,5 x107 5,7 x107 85,1% 8 92,5% ÑC 9,3 x10 1,6 x10 8,6 x10 Ghi chú: TN1: sử dụng dịch thủy phân bã bia xử lý phương pháp axít nhiệt TN2: sử dụng dịch thủy phân bã bia xử lý phương pháp kiềm nhiệt TN3: sử dụng dịch bã bia vô trùng ĐC: sử dụng môi trường sở (đối chứng) axit cho mật độ tổng tế bào bào tử cao đạt 4,9x10 8CFU/ml 4,6x108CFU/ml; đó, thí nghiệm sử dụng bã bia vô trùng (TN3), mật độ tế bào đạt 107CFU/ml (Bảng 1) Điều cho thấy: axit giúp phân hủy số chất hữu cao phân tử tạo thành chất dinh dưỡng cho vi sinh vật dễ hấp thụ Bên cạnh đó, bã bia có lượng lớn sinh khối nấm men, tác động axit áp suất cao, tế bào nấm men bị phân hủy nên giải phóng axit amin mơi trường Như vậy, tiền xử lý bã bia phương pháp axít nhiệt kiềm nhiệt làm tăng hàm lượng chất dinh dưỡng môi trường giúp vi khuẩn MSS8-4 sinh trưởng tốt Do đó, mật độ tế bào, bào tử vi khuẩn MSS8-4 môi trường bã bia thủy phân phương pháp axit nhiệt cao so với môi trường khác tương đương với mật độ tế bào đạt nuôi môi trường sở Đặc điểm sinh học quan trọng chủng vi khuẩn Bacillus thuringiensis sinh tổng hợp tinh thể độc đồng thời với trình hình thành bào tử, vậy, tỷ lệ chuyển hóa tế bào sang bào tử yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm lên men Các kết thí nghiệm cho thấy: tỷ lệ chuyển hóa tế bào/bào tử thí nghiệm Tạp chí Hoạt động KHCN An toàn - Sức khỏe & Môi trường lao động, Số 1,2&3-2017 37 Kết nghiên cứu KHCN Bảng Thành phần hóa học dịch thủy phân bã bia Kết STT Chỉ tiêu Đơn vị Phương pháp phân tích TN mg/l EPA-352.1 130,00 108,00 93,30 TP mg/l EPA-365.2 5,25 6,73 9,48 TOC mg/l SMEWW 5310B2005 520,00 360,00 370,00 Al 0,176 0,140 0,162 Ca 28,500 14,800 12,900 Cd 0,0003 0,0002 < 0,0002 Cr 0,046 0,025 0,020 Cu 0,037 0,016 0,023 Fe 1,210 1,470 1,220 10 K 4,090 3,270 3,230 11 Mg 12,000 8,410 6,870 12 Na 2,970 64,300 53,400 13 Ni 0,096 0,061 0,057 14 Pb 0,005 0,004 0,004 15 Zn 0,421 0,193 0,138 16 Mn 0,136 0,066 0,136 mg/l mẫu đối chứng tương đương Như vậy, phương pháp axit nhiệt giúp xử lý bã thải sản xuất bia làm môi trường dinh dưỡng phù hợp cho sinh trưởng chủng vi khuẩn MSS8-4 phát triển 3.2 Phân tích thành phần dịch thủy phân bã bia Để đánh giá hàm lượng chất có dịch thủy phân bã thải bia, dịch thủy phân bã thải bia phương pháp xử 38 SMEWW3125:20 12 Axit nhiệt Vô trùng Kiềm nhiệt lý khác gửi phân tích Phịng Phân tích chất lượng mơi trường - Viện Cơng nghệ mơi trường (Bảng 2) Kết phân tích dịch thủy phân bã bia phương pháp axit nhiệt hàm lượng C, N (hai nguồn chất quan trọng sinh trưởng vi khuẩn) cao hẳn so với dịch bã bia thủy phân phương pháp kiềm nhiệt vơ trùng Kết hồn tồn phù hợp với nhận định trên, cho tác nhân axit điều kiện nhiệt độ cao giúp tăng khả phân hủy hợp chất cao phân tử, làm tăng hàm lượng hợp chất hữu dễ hấp thu dịch thủy phân Các nguyên tố khống nhân tố khơng thể thiếu q trình sinh trưởng, phát triển vi khuẩn nói chung chủng thuộc gen Bt nói riêng Trong đó, ion kim Tạp chí Hoạt động KHCN An toàn - Sức khỏe & Môi trường lao động, Số 1,2&3-2017 Kết nghiên cứu KHCN loại Mg, Mn, Fe, Zn, Ca, v.v có tác dụng điều tiết quan trọng đến sinh trưởng, hình thành bào tử sinh tổng hợp protein tinh thể diệt côn trùng Do vậy, môi trường tổng hợp lên men vi khuẩn thường bổ sung thêm số muối khoáng với nồng độ sau: 0,3% MgSO 4.7H 2O; 0,02‰ 0,02‰ MnSO 4.7H 2O; FeSO 4.7H 2O; 0,2‰ ZnSO4.7H2O 1,0‰ CaCO3 [2] Theo nghiên cứu Ozkan cộng (2003): nồng độ 10-6M, Mn yếu tố chủ chốt tác động đến sinh tổng hợp độc tính vi khuẩn Bt mà khơng ảnh hưởng tới trình khác tế bào Trong dịch thủy phân bã bia phương pháp axit nhiệt (Bảng 2), Mn có nồng độ 0,136mg/l (2,7x10 -6M/l) nồng độ nằm khoảng nồng độ phù hợp cho lên men vi khuẩn Bt thu độc tố delta endotoxxin [6] sinh tổng hợp protein tinh thể vi khuẩn Btk không phụ thuộc vào yếu tố dinh dưỡng cacbon, nito mà chịu tác động lớn từ nhân tố khoáng Cụ thể, bổ sung Mg nồng độ từ 8x10-5M đến 4x10-3M mật độ tế bào nồng độ protein tinh thể tăng mạnh [4] Theo kết phân tích Bảng nồng độ Mg dịch thủy phân bã bia phương pháp axit nhiệt 12mg/l (2,9x10-3M), nồng độ Mg nằm khoảng thích hợp cho phát triển sinh độc tố vi khuẩn Bt theo nghiên cứu ca Iỗgen bó bia), i chng dng (b sung mụi trường thủy phân bã bia) Tỷ lệ ấu trùng chết theo dõi đọc kết 24 giờ, 48 giờ, 72 96 Kết thử nghiệm trình bày Bảng Từ kết thử hoạt tính sinh hoạt ấu trùng ruồi nhà cho thấy: chủng MSS8-4 cho hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà tương đương nuôi môi trường sở môi trường làm từ bã thải bia Sau 48 lây nhiễm, tỷ lệ ấu trùng ruồi chết đạt gần 50% tất thí nghiệm Ở nồng độ bào tử 107CFU/g sau 72 lây nhiễm tỷ lệ ấu trùng bị chết 100% so với 90% nồng độ 105CFU/g Kết theo dõi đến 96 cho thấy ấu trùng tất thí nghiệm bị tiêu diệt Khi quan sát tỷ lệ ấu trùng ruồi chết mẫu đối chứng âm đối chứng dương cho thấy: tỷ lệ chết lớn 13,3% sau 96 Như vậy, thấy ấu trùng ruồi chết độc tố từ chủng vi khuẩn MSS8-4 tác nhân từ môi trường xung quanh 3.3 Thử nghiệm sinh học Dịch lên men thu lên men môi trường bã thải bia môi trường sở có nồng độ 108 bào tử/ml, pha lỗng với nước cất vô trùng bổ sung vào chất nuôi ấu trùng ruồi để đạt nồng độ 105, 107CFU/g Thử hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà mơ tả mục 2.6 Các thí nghiệm thực đồng thời với mẫu đối chứng âm (chỉ có c cht l Theo nghiờn cu ca Iỗgen v cỏc cộng (2002), sinh trưởng, hình thành bào tử Bảng Kết thử hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà Musca domestica Tỷ lệ ấu trùng chết (%) 24 Môi trường 48 96 72 107 105 107 105 107 105 107 10 MTCS 6,6 16,6 46,6 53,3 93,3 100 100 100 Baõ thaûi bia 6,6 13,3 46,6 56,6 90 100 100 100 Đối chứng (+) 0 3,3 3,3 6,6 10 Đối chứng (-) 0 0 6,6 10 13,3 Tạp chí Hoạt động KHCN An toàn - Sức khỏe & Môi trường lao động, Số 1,2&3-2017 39 Kết nghiên cứu KHCN bùn thải sinh học thành nguyên liệu tạo chế phẩm vi sinh vật hữu ích phục vụ cho nông lâm nghiệp Dự án nghị định thư 2010-2011, Viện Công nghệ môi trường [6] Ozkan, M., Dilek, F.B., Yetis, U., Ozcenzig, G (2003) Nutritional and cultural parameters in Xuencing antidipteran delta-endotoxin production Research in Microbiology 154, 49–53 Hình Ảnh thử hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà Musca domestica KẾT LUẬN Phương pháp axit nhiệt phù hợp để xử lý bã thải sản xuất bia làm môi trường dinh dưỡng cho sinh trưởng vi khuẩn MSS8-4 Mật độ tế bào, bào tử đạt 4,9x108CFU/ml 4,6x108CFU/ml Hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà Musca domesticacủa vi khuẩn MSS8-4 nuôi môi trường tổng hợp môi trường từ bã thải bia tương đương Ở mật độ bào tử 107CFU/g ấu trùng bị tiêu diệt 100% sau 72 giờ, mật độ bào tử 105CFU/g 100% ấu trùng bị tiêu diệt sau 96 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Abbott WS (1925) A method of computing the effectiveness of an insecticide.J Econ Entomol 18;265-676 40 [2] Ngơ Đình Bính, Nguyễn Đình Tuấn, Trịnh Thị Thu Hà (2009) Hiệu diệt ấu trùng muỗi chế phẩm Bacillus thuringensis subsp israelensis sản xuất Việt Nam Tạp chí Khoa học Công nghệ 47, 5, 45 – 53 [3] Bradford MM (1976) A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantitites of protein utilizing the principle of protein-dye binding Analytical Biochem, 72, pp 248-254 [4] Icgen, Y., Icgen, B., Ozcengiz (2002) Regulation of crystal protein biosynthesis byBacillus thuringiensis: I EVects of mineral elements and pH Research in Microbiology 153 (9), 599–604 [7] Valo A., H.Carrère, J.P.Delgenès (2004) Thermal, chemical and thermo-chemical pre-treatment of waste activated sludge for anaerobic digestion J Chem.Technol Biotechnol 79, pp.1197–1203 [8] Yezza A., R.D.Tyagi, J.R.Valero, R.Y.Surampalli (2005) Bioconversion of industrial wastewater and wastewater sludge in Bacillus thuringiensis based biopesticides in pilot fermentor Bioresource Technology 97, pp 1850-1857 [9] Yasuda and Yasuhiro Sewage sludge utilization technology in Tokyo, Water Science & Technology 23 (1991) 17431752 [5] Nguyễn Hồng Khánh (2012) Tiếp cận công nghệ nghiên cứu xử lý, tái chế Tạp chí Hoạt động KHCN An toàn - Sức khỏe & Môi trường lao động, Số 1,2&3-2017 ... 2.2.2 Phương pháp xử lý bã thải bia làm môi trường nuôi cấy vi sinh vật Bã thải bia xử lý làm nguyên liệu nuôi cấy vi sinh vật phương pháp thủy phân kết hợp thay đổi pH môi trường [5], [7] Nguyên... chất dinh dưỡng môi trường giúp vi khuẩn MSS8-4 sinh trưởng tốt Do đó, mật độ tế bào, bào tử vi khuẩn MSS8-4 môi trường bã bia thủy phân phương pháp axit nhiệt cao so với môi trường khác tương... Ảnh thử hoạt tính diệt ấu trùng ruồi nhà Musca domestica KẾT LUẬN Phương pháp axit nhiệt phù hợp để xử lý bã thải sản xuất bia làm môi trường dinh dưỡng cho sinh trưởng vi khuẩn MSS8-4 Mật độ tế