Phân Lập Chất Từ Cao Cloroform Của Cây Rau Má Lá Sen Hydrocotyle Bonariensis, Họ Ngò

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA CÔNG NGHỆ  LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO CLOROFORM CỦA CÂY RAU MÁ LÁ SEN HYDROCOTYLE BONARIENSIS, HỌ NGÒ CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN Ths Tơn Nữ Liên Hương Khưu Hồng Yến MSSV: 2064047 Ngành: Cơng Nghệ Hóa Học-Khóa 32 Tháng 11/2010 Trường Đại học Cần Thơ Khoa Công Nghệ Bộ môn Công nghệ hóa học Cộng hịa xã hội chủ nghĩa Việt Nam Độc lập – Tự – Hạnh phúc -Cần Thơ, ngày 11 tháng 11 năm 2010 PHIẾU ĐỀ NGHỊ ĐỀ TÀI TỐT NGHIỆP CHO SINH VIÊN NĂM HỌC: 2010 – 2011 Họ tên cán hướng dẫn Ths Tôn Nữ Liên Hương MCB: 1410 Tên đề tài: Phân lập chất từ cao chloroform rau má sen Hyrocotyle bonariensis, họ ngị Địa điểm thực hiện: Phịng thí nghiệm hóa hữu Bộ Mơn Hóa học – Khoa Khoa Học– Trường Đại Học Cần Thơ Số lượng sinh viên thực hiện: 01 sinh viên Họ tên sinh viên: Khưu Hồng Yến MSSV: 2064047 Lớp: Cơng Nghệ Hóa Học Khóa: 32 Mục đích đề tài − Sử dụng kỹ thuật chiết rắn-lỏng để điều chế cao có độ phân cực tăng dần − Phân lập chất từ cao chloroform ráu má sen Hydrocotyle bonariensis xác định cấu trúc chúng Các nội dung giới hạn đề tài  Điều chế cao acol tổng phương pháp ngâm dầm Sử dụng kỹ thuật chiết rắn-lỏng để điều chế cao có tính phân cực tăng dần  Sắc ký cột cao chloroform nhằm phân lập để tinh chế chất  Ghi phổ NMR chiều để xác định cấu trúc chất cô lập Các yêu cầu hỗ trợ cho việc thực đề tài Các hóa chất để thực Kinh phí dự trù cho việc thực đề tài: 250.000 đồng DUYỆT CỦA CB TẠI CƠ SỞ DUYỆT CỦA CBHD Th.S Tôn Nữ Liên Hương DUYỆT CỦA BỘ MÔN DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG THI & XÉT TỐT NGHIỆP NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN   NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN  LỜI CẢM ƠN  Để có thành hơm em xin chân thành cám ơn tất quý thầy cô khoa Công nghệ khoa Khoa học tự nhiên truyền đạt cho em kiến thức quý báu suốt năm rưỡi học tập trường Những kiến thức giúp em vững bước đường tới Đặc biệt, em xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Tơn Nữ Liên Hương tận tình hướng dẫn, bảo giảng giải cho em kiến thức em chưa biết, điều em chưa hiểu Cô động viên tạo điều kiện tốt để em hồn thành đề tài Cơ truyền đạt cho em hiểu biết thêm lĩnh vực hợp chất thiên nhiên, giúp em yêu thích lĩnh vực Em xin ghi ơn cố vấn học tập thầy Nguyễn Minh Trí tận tình gíup đỡ quan tâm đến lớp em Em xin cám ơn thầy trưởng mơn cơng nghệ hóa học, thầy Trương Chí Thành, nhiệt tình giúp đỡ suốt thời gian em thực đề tài Em xin cảm ơn chị Lê Thu Trang tạo điều kiện dụng cụ máy móc Em xin chân thành cám ơn anh chị học viên cao học tận tình hướng dẫn em kỹ thuật thực nghiệm Cảm ơn người bạn sẻ chia đồng hành chặn đường học tập gian nan vừa qua Con xin gởi lời cảm ơn tới gia đình nơi ln chỗ dựa tinh thần vững Xin chân thành cám ơn!!! Khưu Hồng Yến LỜI NĨI ĐẦU  Cuộc sống người ngày tiến bộ, sức khỏe lại vấn đề người quan tâm hàng đầu Để chữa bệnh người dùng loại thuốc tạo từ trình tổng hợp Về sau phát tác dụng phụ thuốc tổng hợp có hại nên người chuyển sang dùng loại thảo dược có nguồn gốc từ thiên nhiên để chữa bệnh Tuy nhiên, thảo dược có nhiều hợp chất có hàm lượng thấp nên việc điều trị bệnh kéo dài Do đó, nhà khoa học nghĩ đến việc lập, trích ly hợp chất thiên nhiên có cỏ động vật Điều giúp ta xác định thành phần hóa học có để đưa hướng ứng dụng hợp lý việc điều trị bệnh bảo vệ sức khỏe người Để lập, trích ly chất tinh khiết cỏ, động vật phải qua nhiều giai đoạn, nhiều thời gian công sức Tuy khó khăn ngày có nhiều nhà khoa học theo hướng nghiên cứu hợp chất thiên nhiên nhằm tìm nhiều hợp chất để phục vụ cho sức khỏe cộng đồng Ở Việt Nam có nhiều cỏ mọc hoang mà tưởng chừng vô ích, thật cỏ mọc hoang lại kho dược phẩm quý mà thiên nhiên ban tặng cho ta Rau má loài người biết đến từ lâu người ưa chuộng lợi ích mà đem lại Rau má không dùng để ăn sống, nấu canh hay xay làm nước uống mà cịn dùng loại thuốc chữa nhiều bệnh trị ho, trị mụn nhọt, cầm máu, trị phỏng,… Hiện nước ta, đặc biệt Đồng sơng Cửu Long, ngồi lồi rau má phổ biến cịn xuất vài lồi rau má khác có vị đắng, trịn sen có màu xanh đậm Người ta gọi loài rau má Thái, Nhật, hay gọi rau má sen Có hai lồi chủ yếu Hydrocotyle vulgaris Hydrocotyle bonariensis Trong Hydrocotyle bonariensis chưa có tài liệu cơng bố thành phần hóa dược tính Do đó, đề tài “PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO CLOROFORM CỦA CÂY RAU MÁ LÁ SEN HYDROCOTYLE BONARIENSIS, HỌ NGÒ.” em chọn để thực hiện, với mong muốn đóng góp phần vào cơng trình nghiên cứu lồi Hydrocotyle Bonariensis MỤC LỤC PHIẾU ĐĂNG KÝ ĐỀ TÀI NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN LỜI CẢM ƠN TÓM TẮT LỜI MỞ ĐẦU MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC BẢNG iv DANH MỤC CÁC HÌNH v DANH MỤC SƠ ĐỒ vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC .viii CHƯƠNG Tổng quan thực vật 1.1 Giới thiệu chung thuộc chi Hydrocotyle 1.2 Giới thiệu rau má sen Hydrocotyle bonariensis 1.2.1 Tên gọi phân loại 1.2.2 Mô tả đặc điểm, xuất xứ phân bố 1.2.3 Thành phần hóa học 1.2.4 Công dụng CHƯƠNG Sơ lược triterpenoid 2.1 Sơ lược terpenoid 2.2 Triterpenoid 10 2.2.1 Đại cương triterpen 10 2.2.2 Tìm hiểu hoạt tính sinh học lupeol 13 CHƯƠNG Sơ lươc phương pháp sắc ký cột sắc ký lớp mỏng 15 3.1 Sắc ký cột 15 3.1.1 Nguyên tắc 15 3.1.2 Kỹ thuật triển khai 17 3.1.2.1 Chuẩn bị cột 17 3.1.2.2 Đưa chất phân tích vào cột 18 3.1.3 Giải ly cột sắc ký pha thường 19 3.2 Sắc ký lớp mỏng 21 3.2.1 Nguyên tắc 21 3.2.2 Dung môi triển khai 22 3.2.3 Giải ly mỏng 23 3.2.4 Ứng dụng SKLM 24 CHƯƠNG Địa điểm, thời gian, phương tiện phương pháp nghiên cứu 25 4.1 Địa điểm 25 4.2 Thời gian 25 4.3 Phương tiện 25 4.3.1 Dụng cụ 25 4.3.2 Hóa chất 26 4.4 Phương pháp nghiên cứu 26 4.4.1 Phương pháp chiết tách 26 4.4.2 Phân lập hợp chất hữu 26 CHƯƠNG Thự nghiệm 28 5.1 Điều chế loại cao 28 5.1.1 Điều chế cao acol tổng 29 5.1.2 Điều chế cao có độ phân cực khác từ cao alcol tổng 29 5.1.2.1 Kỹ thuật chiết pha rắn 29 5.1.2.2 Điều chế cao ete dầu hỏa 30 5.1.2.3 Điều chế cao cloroform 31 ii 5.1.2.4 Điều chế cao etyl acetat 31 5.1.2.5 Điều chế cao Me cuối 31 5.2 Kết thảo luận 33 5.2.1 Khảo sát ban đầu cao C sắc ký cột 33 5.2.2 Khảo sát số phân đoạn thu từ cao C2 36 5.2.2.1 Khảo sát phân đoạn C2-2 36 5.2.2.2 Khảo sát phân đoạn C2-5 39 5.3 Khảo sát cấu trúc cô lập 41 5.3.1 Biện luận phổ HB-A1 41 5.3.2 Biện luận phổ HB-A3 45 CHƯƠNG Kết luận kiến nghị 46 6.1 Kết luận 46 6.2 Kiến nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iii SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 56 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 57 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 58 PHỤ LỤC PHỔ NMR CỦA HỢP CHẤT HB-A3 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 59 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 60 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 61 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 62 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 63 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 64 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 65 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 66 SVTH Khưu Hoàng Yến MSSV 2064047 67 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự Do - Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ BỘ MÔN: CÔNG NGHỆ HÓA HỌC Cần Thơ, ngày 10 tháng 08 năm 2010 ******** ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Năm học: 2010 - 2011 Tên đề tài thực hiện: : PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO CLOROFORM CỦA CÂY RAU MÁ LÁ SEN HYDROCOTYLE BONARIENSIS , HỌ NGÒ Họ tên sinh viên thực hiện:  Họ tên: Khưu Hoàng Yến  Mã số sinh viên: 2064047 Họ tên cán hướng dẫn:  Họ tên: Tôn Nữ Liên Hương  Học vị : Thạc Sĩ Đặt vần đề (giới thiệu chung): Ngày hướng nghiên cứu thảo dược loại có hoạt tính sinh học cao nhiều người quan tâm ngiên cứu Trong số đó, Rau Má đối tượng nhà khoa học ý đến Rau Má có tác dụng nhiệt, giải độc, nhuận gan, lợi tiểu, làm chậm lão hóa, chữa nhiều chứng bệnh da… Rau má sen loài rau má xuất nhiều Việt Nam Tuy nhiên nghiên cứu hóa học hợp chất loài rau má sen Hydrocotyle Bonraniensis thực Việt Nam Do đó, đề tài “PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO CLOROFORM CỦA CÂY RAU MÁ LÁ SEN HYDROCOTYLE BONARIENSIS , HỌ NGÒ.” em chọn để thực Với mong muốn đóng góp phần vào cơng trình nghiên cứu lồi Hydrocotyle Bonariensis Mục đích u cầu:  Cơ lập định danh chất có cao cloroform  Tìm hiểu hướng ứng dụng chúng Địa điểm, thời gian thực hiện:  Địa điểm: Phòng thí nghiệm hóa hữu khoa Khoa học  Thời gian thực hiện: 09/8/2010 – 10/11/2010 Giới thiệu thực trạng có liên quan tới vấn đề đề tài:  Vì lồi nên chưa có cơng trình nghiên cứu giới  Ở Việt Nam, tách flavol rau má sen Thạc sĩ Tôn Nữ Liên Hương thực Các nội dung giới hạn đề tài: Nội dung chính: Chương 1: Tổng quan 1.1 Mô tả thực vật 1.2 Phương pháp sắc ký cột hở 1.3 Phương pháp sắc ký lớp mỏng Chương 2: Thực nghiệm kết 2.1 Dụng cụ, hóa chất phương pháp nghiên cứu 2.1.1 Dụng cụ, hóa chất 2.1.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2 Thực nghiệm 2.2.1 Sắc ký mỏng cao cloroform 2.2.2 Sắc ký cột cao cloroform 2.2.3 Kết Chương 3: Kết luận kiến nghị 3.1 Kết luận 3.2 Kiến nghị Phương pháp thực đề tài:  Cô lập chất từ cao cloroform phương pháp sắc ký cột hở  Tinh chế chất  Xác định cấu trúc (chạy phổ) Kế hoạch thực (ghi rõ tiến độ thực hiện):  Từ ngày 09/08/2010 đến 17/10/2010 tiến hành sắc ký cột hở sắc ký lớp mỏng để phân lập tinh chế hợp chất Gửi Hà Nội đo phổ NMR chất tinh khiết thu  Từ ngày 18/10/2010 viết sửa để hoàn thành luận văn SINH VIÊN THỰC HIỆN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN Khưu Hồng Yến Tơn Nữ Liên Hương DUYỆT CỦA BỘ MÔN DUYỆT CỦA HĐ LV&TLTN ... ? ?Phân lập chất từ cao chloroform rau má sen Hydrocotyle bonariensis, họ hoa tán.” thực phịng thí nghiệm hóa hữu – Khoa khoa học tự nhiên trường Đại học Cần Thơ 4.2 Thời gian Thời gian thực từ. .. “PHÂN LẬP CHẤT TỪ CAO CLOROFORM CỦA CÂY RAU MÁ LÁ SEN HYDROCOTYLE BONARIENSIS, HỌ NGÒ.” em chọn để thực hiện, với mong muốn đóng góp phần vào cơng trình nghiên cứu lồi Hydrocotyle Bonariensis... NGHIỆP CHO SINH VIÊN NĂM HỌC: 2010 – 2011 Họ tên cán hướng dẫn Ths Tôn Nữ Liên Hương MCB: 1410 Tên đề tài: Phân lập chất từ cao chloroform rau má sen Hyrocotyle bonariensis, họ ngị Địa điểm thực