Đây là công trình đầu tiên ở Việt Nam nghiên cứu về sinh học sinh sản cá khế vằn (Gnathanodon speciosus). Nghiên cứu tập trung vào đặc điểm tinh sào cá khế vằn đực. Đàn cá thí nghiệm có khối lượng và chiều dài lần lượt là 400-800 g và 30-44 cm. Đàn cá được nuôi trong lồng trên biển và cho ăn hàng ngày bằng cá tạp với khẩu phần 3-5% khối lượng thân. Cá đực được thu mẫu ngẫu nhiên để thu thập tinh sào. Kết quả nghiên cứu cho thấy hệ số thành thục (GSI) trung bình của cá khế vằn đực tăng cao từ tháng 6 và đạt giá trị cao nhất vào tháng 9 (3,3% ± 0,6%). Tỷ lệ thành thục sinh dục ở cá đực đạt tỷ lệ cao giai đoạn từ tháng 5 đến tháng 9. Đây là loài cá đẻ nhiều lần trong năm. Trong tinh sào thành thục có nhiều tinh bào ở các giai đoạn phát triển khác nhau. Thành phần sinh hóa của tinh sào thay đổi theo giai đoạn phát triển. Hàm lượng protein và lipid ở giai đoạn thành thục cao hơn so với giai đoạn chưa thành thục.
Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Số 2/2020 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC TINH SÀO CÁ KHẾ VẰN (Gnathanodon speciosus) STUDY ON THE TESTIS BIOLOGY OF GOLDEN TREVALLY (Gnathanodon speciosus) Hứa Thị Ngọc Dung1, Đào Thị Đoan Trang1, Phạm Quốc Hùng1 Trường Đại học Nha Trang Tác giả liên hệ: Phạm Quốc Hùng (Email: hungpq@ntu.edu.vn) Ngày nhận bài: 12/04/2020; Ngày phản biện thông qua: 13/05/2020; Ngày duyệt đăng: 12/06/2020 TĨM TẮT Đây cơng trình Việt Nam nghiên cứu sinh học sinh sản cá khế vằn (Gnathanodon speciosus) Nghiên cứu tập trung vào đặc điểm tinh sào cá khế vằn đực Đàn cá thí nghiệm có khối lượng chiều dài 400-800 g 30-44 cm Đàn cá nuôi lồng biển cho ăn hàng ngày cá tạp với phần 3-5% khối lượng thân Cá đực thu mẫu ngẫu nhiên để thu thập tinh sào Kết nghiên cứu cho thấy hệ số thành thục (GSI) trung bình cá khế vằn đực tăng cao từ tháng đạt giá trị cao vào tháng (3,3% ± 0,6%) Tỷ lệ thành thục sinh dục cá đực đạt tỷ lệ cao giai đoạn từ tháng đến tháng Đây loài cá đẻ nhiều lần năm Trong tinh sào thành thục có nhiều tinh bào giai đoạn phát triển khác Thành phần sinh hóa tinh sào thay đổi theo giai đoạn phát triển Hàm lượng protein lipid giai đoạn thành thục cao so với giai đoạn chưa thành thục Từ khóa: tinh sào, cá khế vằn, Gnathanodon speciosus, thành phần sinh hóa, hệ số thành thục ABSTRACT This is for the first time in Viet Nam, a study on reproductive biology of golden trevally (Gnathanodon speciosus) was conducted The present study was focused on testis biology of the fish The male broodstock with body weith and total length were 400-800 g and 30-44 cm, respectively Fish were kept in seacage and daily fed with trashfish at 3-5% body weight Testis were collected for biological parameters The results indicated that the GSI increased from June to September (3.3% ± 0.6%) Maturation of male fish increased from May to September Male golden trevally are multiple spawners There are different stages of germcell development in the testis at the same time The biochemical composition changed based on the stages of testis maturation Protein and lipid contents in mature testis were found higher than that in immature testis Keywords: Testis, golden trevally, Gnathanodon speciosus, GSI, biocehmical composition I ĐẶT VẤN ĐỀ Cá khế vằn, Gnathanodon speciosus, (tên địa phương gọi cá bè đưng, bè vàng, bè nghệ) lồi cá biển có giá trị kinh tế, sinh trưởng nhanh, dễ ni có tính ăn tạp, nguồn thức ăn dễ tìm ni thủy vực nước lợ [7; 12] Hiện lồi cá nhân giống thành cơng điều kiện nuôi nhốt nuôi thương phẩm số địa phương ven biển [7; 12] Điều tạo tiền đề lớn việc mở rộng quy mơ nghề ni, góp phần đa dạng hóa đối tượng nuôi cho ngành thủy sản Trên giới có số nghiên cứu lồi cá này, chủ yếu tập trung vào sản xuất giống [11; 12] Tuy nhiên, cá khế vằn chưa nghiên cứu đầy đủ, chưa có quy trình sản xuất giống hiệu sản xuất không ổn định, chất lượng giống chưa cao xảy dịch bệnh chưa có biện pháp quản lý điều trị Tại Việt Nam chưa có cơng trình nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản cá khế vằn Nhằm góp phần hồn thiện quy trình sản xuất giống nhân tạo, tiến hành nghiên cứu số đặc điểm sinh học sinh sản, tập trung vào đặc điểm tinh sào cá đực chu kỳ sinh sản Nắm quy luật phát triển tinh sào thay đổi tổ chức học chu kỳ sinh sản thông tin cần thiết TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG • 19 Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản cho biết dự báo trạng thái thành thục cá đực, phục vụ cho công tác quản lý đàn cá bố mẹ [4; 13; 14] Nghiên cứu tập trung vào việc xác định đặc điểm phát triển tinh sào chu kỳ sinh sản cá khế vằn, đặc điểm hình thái ngồi, tiêu mơ học giai đoạn phát triển tinh sào, hệ số thành thục thành phần sinh hóa tinh sào chu kỳ sinh sản Kết nghiên cứu cung cấp thơng tin hữu ích đặc điểm sinh học sinh sản, đóng góp cho việc nghiên cứu hồn thiện quy trình sản xuất giống cá khế vằn mở nhiều tiềm hội phát triển nghề ni cá biển, góp phần phát triển ngành ni trồng thủy sản II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đàn cá thí nghiệm Đàn cá bố mẹ thuộc Công ty TNHH Phượng Hải Nha Trang nuôi lồng biển Đảo Trí Nguyên, Phường Vĩnh Nguyên, Nha Trang (12°4′23.01″N, 109°2′51.97″E) Mật độ ni bình qn kg/m3 với tỷ lệ đực 1:1; Nhiệt độ nước: 28 - 32oC; độ mặn: 29 - 34 ‰; pH: 7,8 - 8,6 oxy hòa tan: 4,5- 6,5 mg/l Cá bố mẹ cho ăn cá tạp hàng ngày với phần - 5% khối lượng thân Cá đực có khối lượng trung bình 400 - 800g, chiều dài trung bình từ 30 - 44cm bắt ngẫu nhiên để thu mẫu tinh sào đo kích thước Thời gian thu mẫu từ tháng 3/2018 đến tháng 4/2019 Phương pháp làm tiêu tổ chức học tinh sào Mẫu tinh sào đưa khỏi dung dịch cố định, rửa rút nước cách ngâm cồn tuyệt đối khoảng - giờ, tiếp theo, ngâm methyl salicylate 12 - 24 Sau cùng, mẫu thấm parafin nóng chảy 65o C thời gian Sử dụng máy đổ parafin nóng chảy vào khn chứa mẫu, để dàn lạnh khoảng 30 phút cho mẫu parafin đông cứng lại Dùng dao gọt khối parafin chứa mẫu thành hình thang hình chữ nhật để dễ cắt lớp Gắn khối parafin lên đế gỗ dán nhãn Gắn đế gỗ có mẫu vào máy microtom, cắt lát có độ dày - micron Đưa lát cắt vào nước ấm (40 - 45oC) khoảng - phút để lát cắt giãn Dùng lam 20 • TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG Số 2/2020 lấy lát cắt khỏi nước sấy máy sấy nhiệt độ 45 - 60oC - Sau sấy khô, tiếp theo, mẫu khử parafin cách ngâm dung dịch xilen làm trương nước cách nhúng dung dịch ethanol nồng độ khác khoảng - phút Cuối mẫu nhuộm dung dịch Hematoxylin - Mayer (4 - phút) Eosin (2 phút) để khô đậy lamen keo dán Ghi nhãn lên lamen khâu cuối quy trình Xác định GSI giai đoạn phát triển tinh sào Tiêu tổ chức học đọc kính hiển vi Zeiss Axioskop 2-Plus light (Zeiss Inc., Vienna, Austria) chụp hình máy Nikon Camera Head DS-5M Nikon Camera Control Unit DS-L1 Bậc thang phân biệt giai đoạn phát triển tinh sào nghiên cứu dựa theo tiêu chuẩn Nikolski (1963); Sakun (1954) Sakun & Butskaya (1968) [6; 8; 9] Hệ số thành thục (GSI - Gonado Somatic Index) tỷ lệ phần trăm khối lượng tuyến sinh dục khối lượng toàn thể Xác định thành phần sinh hóa tinh sào cá khế vằn Thành phần sinh hóa tinh sào (các tiêu ẩm, tro, protein lipid) giai đoạn phát triển khác phân tích phịng thí nghiệm Cơng nghệ cao, Trung tâm Thí nghiệm Thực hành - Trường Đại học Nha Trang - Xác định hàm lượng ẩm tro: Theo phương pháp sấy khô 105oC (độ ẩm) nung 550oC (tro) đến khối lượng không đổi - Xác định hàm lượng protein phương pháp Dumas (TCVN 11604: 2016) Phương pháp đốt cháy Dumas để xác định protein thơ Quy trình dùng thiết bị lị điện đun nóng mẫu phân tích lên đến 600oC lị phản ứng bịt kín với diện oxy Hàm lượng nitơ khí đốt sau đo cách dùng máy dò dẫn nhiệt - Xác định lipid thiết bị chiết Soxhlet: Dựa vào tính tan hồn tồn chất béo vào dung mơi hữu Dùng dung mơi hữu trích ly chất béo có tuyến sinh dục cá Sau làm bay hết dung mơi, cân chất béo cịn lại, tính hàm lượng chất béo có tuyến sinh dục cá Tạp chí Khoa học - Cơng nghệ Thủy sản Xử lý thống kê Số liệu trình bày dạng TB ± SD Sự khác đặc điểm sinh sản tháng hay giai đoạn phát triển tuyến sinh dục phân tích phương pháp phân tích phương sai nhân tố (One-way ANOVA) với kiểm định Duncan’s multiple range test phần mềm SPSS có ý nghĩa mức P