Ứng dụng kỹ thuật PCR đa mồi trong chẩn đoán các căn nguyên gây nhiễm trùng đường hô hấp ở trẻ em tại Bệnh viện Nhi Trung ương

Bài viết trình bày việc áp dụng phương pháp sinh học phân tử PCR đa mồi trong chẩn đoán các căn nguyên virus gây nhiễm trùng đường hô hấp tại Bệnh viện Nhi Trung ương.

tạp chí nhi khoa 2016, 9, ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR ĐA MỒI TRONG CHẨN ĐOÁN CÁC CĂN NGUYÊN GÂY NHIỄM TRÙNG ĐƯỜNG HÔ HẤP Ở TRẺ EM TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƯƠNG Phùng Thị Bích Thủy, Nguyễn Thanh Phúc, Trần Thị Sinh, Trần Thanh Tú Bệnh viện Nhi Trung ương TÓM TẮT Đặt vấn đề: Nhiễm khuẩn hơ hấp cấp tính bệnh phổ biến tồn giới với tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ tử vong đứng hàng đầu bệnh nhiễm khuẩn cấp trẻ em Căn nguyên gây nhiễm trùng đường hô hấp chủ yếu virus Tuy nhiên việc xác định nguyên gây bệnh phương pháp truyền thống nhiều hạn chế Mục tiêu: Áp dụng phương pháp sinh học phân tử PCR đa mồi chẩn đoán nguyên virus gây nhiễm trùng đường hô hấp Bệnh viện Nhi Trung ương Phương pháp: Nghiên cứu mơ tả tiến cứu 194 trẻ có độ tuổi từ tháng đến tuổi điều trị khoa Điều trị tự nguyện A, Bệnh viện Nhi Trung ương với chẩn đốn nhiễm trùng đường hơ hấp, xác định kỹ thuật PCR đa mồi từ tháng 7/2012 đến tháng 6/2013 Kết quả: Áp dụng kỹ thuật PCR đa mồi phát 143 bệnh nhân dương tính chiếm 73,7% Trong 67,8% trường hợp nhiễm loại virus 32,2% trường hợp nhiễm từ loại virus trở lên Lứa tuổi hay nhiễm virus đường hơ hấp nhóm trẻ từ đến tháng tuổi RSV thường gặp vào mùa thu (27/73 trường hợp) đạt đỉnh vào mùa đông (28/73 trường hợp) Rhinovirus đạt đỉnh vào mùa thu (22/63) lại giảm thấp mùa đơng (10/63) Ngồi Parainfluenza Adenovirus thường tăng cao vào mùa thu Kết luận: Áp dụng kỹ thuật PCR đa mồi 18 loại virus đường hô hấp cho thấy độ nhạy, độ đặc hiệu cao, đồng thời rút ngắn thời gian áp dụng xét nghiệm thường quy tại bệnh viện để tăng khả phát nguyên virus nhiễm trùng hô hấp trẻ em ĐẶT VẤN ĐỀ Nhiễm khuẩn hơ hấp cấp tính bệnh phổ biến toàn giới với tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ tử vong đứng hàng đầu bệnh nhiễm khuẩn cấp trẻ em [1,2] Tại Việt Nam, theo thống kê chương trình nhiễm khuẩn hơ hấp cấp tính (NKHHCT) trung bình năm trẻ mắc nhiễm khuẩn hơ hấp cấp từ 3-5 lần Theo báo cáo tình hình bệnh tật trẻ em Bệnh viện Nhi Trung ương (19952004), tỷ lệ Bệnh nhi NKHHCT chiếm 24 % tổng Theo số liệu Tổ chức Y tế giới (TCYTTG) số bệnh nhân nội trú Tỷ lệ tử vong viêm phế (2004), hàng năm tỷ lệ trẻ tử vong viêm phổi quản phổi đứng đầu bệnh hô hấp chiếm gần 1/5 số trẻ tử vong toàn giới (75%), chiếm 21% so với tổng số tử vong chung Ở châu Âu tỷ lệ viêm phổi chiếm từ 30 đến 40 trẻ em [1,3] trường hợp/1.000 trẻ/năm [3] 50 Căn nguyên gây viêm đường hô hấp trẻ em phần nghiên cứu đa dạng: virus, vi khuẩn, nấm, ký sinh trùng Nghiên cứu tiến hành từ tháng 7/2012 Các nghiên cứu (NC) gần cho thấy, nước đến tháng 6/2013 với bệnh phẩm dịch tỵ hầu phát triển nguyên gây bệnh VPQP chủ yếu 194 bệnh nhi có độ tuổi từ tháng đến virus (virus cúm, cúm, hợp bào hô hấp, tuổi chẩn đốn nhiễm trùng hơ hấp Rhinovirus, Enterovirus, Adenovirus.v.v.) chiếm cấp tính nhập viện điều trị khoa Tự nguyện A - 80-90% Ngược lại nước phát triển, Bệnh viện Nhi Trung ương vi khuẩn nguyên nhân quan trọng gây 2.2 Phương pháp nghiên cứu nhiễm khuẩn hơ hấp cấp tính trẻ em, chiếm Nghiên cứu mô tả tiến cứu 75% [4] Ứng dụng kỹ thuật PCR đa mồi 18 virus để xác Hiện có nhiều phương pháp xác định định nguyên gây NTHHCT khoa Nghiên nguyên virus gây bệnh viêm đường hô cứu Sinh học phân tử bệnh truyền nhiễm - hấp truyền thống nuôi cấy virus, test huyết Bệnh viện Nhi Trung ương: thanh, miễn dịch huỳnh quang gần kỹ - Tách chiết để thu nhận RNA/DNA thuật PCR áp dụng rộng rãi cho độ nhạy, độ nguyên người máy tách chiết tự động đặc hiệu rút ngắn thời gian chẩn đoán MagNA Pure 2.0 hãng Roche so với phương pháp khác nhiên - Thực kỹ thuật PCR đa mồi theo kit xTAG® phương pháp làm riêng lẻ cho loại Respiratory Viral Panel (RVP) FAST Abbott xác virus Việc chấn đoán sớm nguyên virut định nguyên làm hạn chế việc sử dụng kháng sinh không cần thiết cho bệnh nhân nâng cao hiệu điều trị giảm chi phí điều trị Kỹ thuật PCR đa mồi xTAG kỹ thuật mới, KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Tỷ lệ nhiễm virus nhóm trẻ NTHHCT từ tháng - tuổi đại phát lúc 18 Nghiên cứu tiến hành với 194 nguyên virus gây bệnh đường hô hấp Đây kỹ bệnh nhân nhiễm trùng hơ hấp cấp tính từ thuật chưa ứng dụng chẩn đoán bệnh viện tháng đến tuổi nhập viện điều trị với tuổi trung Việt Nam Chính chúng tơi tiến hành bình 9,2 ± 6,56 tháng, tỷ lệ nam/nữ 1,99/1 đề tài nghiên cứu “Ứng dụng kỹ thuật PCR đa Số bệnh nhân có kết xét nghiệm virus dương mồi chẩn đoán nguyên gây nhiễm tính kỹ thuật PCR đa mồi 143 bệnh nhân trùng đường hô hấp trẻ em Bệnh viện Nhi chiếm 73,7% Trong 67,8% trường hợp Trung ương”, với mục tiêu: đưa kỹ thuật nhiễm loại virus 32,2% trường hợp nhiễm từ vào ứng dụng xét nghiệm chẩn đoán thường loại virus trở lên Trên biểu đồ thấy, tỷ lệ loại virus phân lập từ đường hô hấp RSV thường gặp (36,5%), tiếp đến Rhinovirus (31,5%), Parainfluenza (14%) Adenovirus (7,5%) quy bệnh viện ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 51 tạp chí nhi khoa 2016, 9, Biểu đồ Tỷ lệ loại virus phân lập 3.2 Tỷ lệ nhiễm virus quần thể nghiên cứu giới tính nhóm tuổi 3.3 Đặc điểm nguyên virus nhiễm trùng đường hô hấp theo mùa Trong 194 mẫu bệnh phẩm xét nghiệm thấy tỷ lệ nhiễm virus RSV, Rhinovirus/Enterovirus, Parainfluenza, Adenovirus trẻ nam nhiều trẻ nữ ngoại trừ số virus chiếm tỷ lệ thấp Kết nghiên cứu cho thấy, Lứa tuổi hay nhiễm virus đường hô hấp cao nhóm trẻ từ đến tháng tuổi: 92/200 bệnh nhân (chiếm 46%) Tỷ lệ nhiễm virus giảm dần tuổi tăng dần thấp nhóm tuổi 12 – 24 tháng Trong nhóm Rhinovirus RSV thường gặp tỷ lệ RSV thường gặp vào mùa thu (27/73 trường hợp) đạt đỉnh vào mùa đông (28/73 trường hợp) Rhinovirus đạt đỉnh vào mùa thu (22/63) lại giảm thấp mùa đông (10/63) Ngoài Parainfluenza Adenovirus thường tăng cao vào mùa thu Các loại virus khác khác biệt mùa năm Kết mô tả biểu đồ RSV Rhinovirus/enterovirus Adenovirus Parainfluenza Cúm A Cúm B Corona virus Humanbocavirus Humanmetapneumonia Xuân 52 Hạ Thu Đông Biểu đồ Tỷ lệ nhiễm virus quần thể nghiên cứu giới tính phần nghiên cứu 3.4 Mối liên quan đồng nhiễm virus vi khuẩn Bảng Mối liên quan đồng nhiễm virus vi khuẩn Virus dương tính Virus âm tính Tổng Vi khuẩn (+) 23 (11,9%) (3,1%) 29 (15%) Vi khuẩn (-) 120 (61,9%) 45 (23,2%) 165 (85%) Tổng 143 (73.7%) 51 (26.3%) 194 (100%) Kết thể mối liên quan virus vi khuẩn thể bảng cho thấy, có 23/194 thời điểm chúng tơi lấy bệnh phẩm để phân lập virus sớm bệnh nhân (chiếm 11,9%) nhiễm đồng thời Kết biểu đồ cho thấy đa số virus vi khuẩn Tỷ lệ nhiễm virus đơn độc bệnh nhân (67,8%) nhiễm loại virus, lại 120/194 bệnh nhân chiếm 61,9% từ loại virus trở lên (32,2%) Tỷ lệ bệnh nhân nhiễm virus cao nhóm Theo kết nghiên cứu Gilles Guerrier chẩn đoán viêm tiểu phế quản 68/143 năm 2012 Campuchia cho thấy có 60/491 bệnh nhân (chiếm tỷ lệ 47,6%) nhóm (12,2%) bệnh nhân NTHHDCT nhiễm từ loại virus RSV chiếm tỷ lệ cao 45/68 bệnh nhân đường hô hấp trở lên [7] Chun JK năm 2009 (66,2%) Tỷ lệ virus phân lập dương tính thấp Hàn Quốc cho thấy tỷ lệ đồng nhiễm virus (từ nhóm viêm phế quản 22/143 bệnh nhân loại virus trở lên) 11,6% (17/147) [5] Preeti (16%) RSV virus phân lập dương tính Bharaj năm 2009 Delhi năm 2009 cho thấy có nhiều tổng số loại virus 73/143 20/106 bệnh nhân (chiếm 18,8%) đồng nhiễm bệnh nhân (51,4%) virus [6] Như tỷ lệ nhiễm loại virus chiếm BÀN LUẬN 4.1 Tỷ lệ nhiễm virus NTHHDCT đa số, đồng nhiễm virus chiếm tỷ lệ vừa phải Kết nghiên cứu chúng tơi hồn tồn tương đồng với tác giả nghiên cứu trước Trong nghiên cứu chúng tôi, kết Trong số loại virus phân lập từ đường biểu đồ cho thấy có 143/194 trẻ NTHHDCT từ hơ hấp, RSV thường gặp (36,5%), tiếp đến tháng- tuổi xác định nhiễm virus đường Rhinovirus (31,5%), Parainfluenza (14%) hô hấp, chiếm 73,7% So sánh với nghiên cứu Adenovirus (7,5%) Theo nghiên cứu Preeti tỷ lệ nhiễm virus dịch tỵ hầu trẻ Bharaj, Chun JK Gilles Guerrier cho thấy RSV tuổi tác giả khác như: Ou SY (2009) có tỷ lệ nhiễm cao Rhinovirus, 178/345 chiếm 51,6%, Preeti Bharaj (2009) Parainfluenza, Adenovirus, cúm A/B [5,6,7] 106/301 chiếm 35,2%, Chun JK 147/297 chiếm Kết nghiên cứu tương đối 49,5%, Gilles Guerrier (2012) 491/1006 chiếm phù hợp với kết nghiên cứu giới 48,8% [5,6,7,8] Tỷ lệ phát virus trong RSV thường chiếm tỷ lệ cao NTHHDCT cao so với bệnh nhân NTHHDCT Do bệnh nhân nghiên cứu khác giới đối tượng nhi vào viện nhiễm NTHHCT nên đặt RSV nghiên cứu lứa tuổi nhỏ nguyên vi sinh nguy hàng đầu 53 tạp chí nhi khoa 2016, 9, 4.2 Tỷ lệ nhiễm virus quần thể nghiên cứu giới tính nhóm tuổi 53,1% [10] Các nghiên cứu tác giả nước ngồi cho nhìn tương tự: nghiên Kết nghiên cứu cho thấy, cứu Hussey GD năm 2000, trẻ tháng tỷ lệ trẻ nam mắc NTHHDCT cao hẳn trẻ nữ đối tượng mắc NTHHDCT RSV cao [13] Trong số trẻ phân lập virus dương Nhìn chung, trẻ tuổi thường gặp tính tỷ lệ nam giới cao (66,4% và đặc biệt trẻ từ nhóm tuổi tháng đến 33,6%) Theo J.K Chun nghiên cứu Hàn Quốc tháng tuổi Có thể giải thích điều năm 2009 khơng có khác biệt giới tính lứa tuổi thân trẻ chưa có miễn dịch chủ trẻ mắc NTHHDCT [5] động, chủ yếu kháng thể từ mẹ truyền sang, Với RSV, virus thường gặp nghiên cứu lượng IgA dịch tiết bề mặt niêm mạc chúng tôi, tỷ lệ nam/nữ trẻ nhiễm RSV phế quản trẻ cịn chưa hồn chỉnh nên khả 1,81/1 Theo tác giả Đoàn Mai Thanh, năm 2006 chống lại bệnh nhiễm trùng nói chung khoa Hô Hấp Bệnh viện Nhi Trung ương, virus nói riêng cịn nhận thấy tỷ lệ nhiễm RSV trẻ trai cao gấp 2,52 4.3 Đặc điểm nguyên vi sinh theo mùa lần trẻ gái [10] Hồ Chí Thanh, năm 2002 Bênh Trong nghiên cứu chúng tôi, biểu đồ viện Nhi Đồng I, tỷ lệ 1,68/1 [11] Phạm RSV thường gặp vào mùa thu (27/73 Minh Hồng, năm 2004 Bệnh viện Nhi Đồng II trường hợp) đạt đỉnh vào mùa đông (28/73 tỷ lệ 1,88/1 [9] Rietveld E, năm 2005 trường hợp) Rhinovirus đạt đỉnh vào Netherlands tỷ lệ 1,45/1 [12] Như vậy, trẻ trai mùa thu (22/63) lại giảm thấp mùa bị mắc RSV cao hẳn trẻ gái Ngun nhân đơng (10/63) Ngồi Parainfluenza Adenovirus nam giới chiếm tỷ lệ cao nữ giới chúng tơi thường tăng cao vào mùa thu Ngồi loại chưa xác định xác, nhiên virus thường gặp trên, loại virus khác yếu tố cân giới tính xã hội Việt số lượng phân lập dương tính cịn nên chưa Nam với tỷ lệ nam giới ngày tăng thấy khác biệt tỷ lệ nhiễm mùa đặc tính biệt số 194 trẻ từ tháng đến năm tuổi nhập viện NTHHDCT tỷ lệ nam vượt trội hẳn so với nữ (1,99/1) Theo tác giả J.-K Chun năm 2009, RSV tìm thấy đỉnh điểm vào tháng 11 tháng 12 (mùa Trong kết chúng tôi, lứa tuổi hay nhiễm đông) [5] Preeti Bharaj năm 2009 tỷ lệ nhiễm virus đường hơ hấp nhóm trẻ từ đến RSV tăng cao vào cuối mùa thu đạt đỉnh vào mùa tháng tuổi Tỷ lệ nhiễm virus giảm dần tuổi tăng đông [6], tỷ lệ nhiễm Cúm A tăng vào tháng mùa dần thấp nhóm tuổi 12 – 24 tháng Trong đơng Humametapneumovirus tăng vào mùa nhóm Rhinovirus RSV thường gặp xuân Gilles Guerrier năm 2012 Campuchia Theo tác giả Hồ Chí Thanh, năm 2002, tỷ lệ phân bố chung virus đạt đỉnh vào mùa thu nhiễm RSV nhóm trẻ tháng cao từ tháng đến tháng 10 [7] Riêng RSV thường gặp chiếm 43% [11] Phạm Minh Hồng, năm 2004, tỷ hai mùa mùa khô mùa mưa, lệ nhiễm RSV cao trẻ tháng việc nhiễm Parainfluenza Rhinovirus khơng (86%) [9] Đồn Mai Thanh năm 2006, nhóm theo mùa Humanmetapneumovirus đạt đỉnh tuổi nhiễm RSV cao tháng tuổi mùa mưa Như kết tác giả khác 54 phần nghiên cứu giới tương tự kết nghiên cứu khuẩn, tương tự kết nghiên cứu chúng chúng tơi tơi Điều nói lên hầu hết trường hợp Theo nghiên cứu Hồ Chí Thanh, tỷ lệ nhiễm mắc NTHHDCT khơng có định sử dụng thuốc RSV cao từ tháng đến tháng 10, đặc biệt kháng sinh Do thực hành lâm sàng không tháng [11] Thời gian tương ứng với nên dùng kháng sinh cách hệ thống mà mùa mưa miền Nam Miền Bắc nói chung Hà Nội nói riêng thường gặp đợt dịch RSV muộn vào mùa đơng, mùa mưa thường khơng kéo dài vào mùa đơng nhiệt độ ngồi trời hạ thấp độ ẩm cao dẫn đến tăng nguy nhiễm lạnh mắc NTHHDCT Miền Nam khơng có đặc tính thời tiết Theo tác giả Đoàn Mai Thanh, số bệnh sử dụng kháng sinh có chứng nhiễm khuẩn thơng qua xét nghiệm bạch cầu, CRP, procalcitonin xét nghiệm cấy vi khuẩn dương tính để giảm nguy kháng thuốc nguy tăng chi phí điều trị cách không cần thiết KẾT LUẬN nhân nhập viện NTHHDCT, nhiễm RSV rải rác tất Qua nghiên cứu 194 bệnh nhân NTHHDCT từ tháng năm từ tháng đến tháng 10 tháng đến tuổi, xác định mắc nhiều đỉnh cao tháng [10] 143 bệnh nhân nhiễm virus kỹ thuật PCR Kết nghiên cứu phù hợp với kết nghiên cứu tác giả nước đặc biệt khu vực phía Bắc, có sai khác nhiên khơng đáng kể với tác giả phía Nam nước ngồi Ngun nhân cho nước khí đa mồi thu kết sau: - 73,7% bệnh nhân nhiễm trùng hơ hấp cấp tính từ tháng đến tuổi có kết phân lập virus dương tính Đa số bệnh nhân nhiễm hậu nhiệt đới, thời tiết chuyển mùa từ thu loại virus Lứa tuổi hay nhiễm virus đường hô hấp sang đơng mùa đơng ẩm thấp người ta thấy nhóm trẻ từ đến tháng tuổi tháng này, có song song - RSV thường gặp vào mùa thu (27/73 bệnh nhân bị NTHHDCT tăng cao, tỷ trường hợp) đạt đỉnh vào mùa đông (28/73 lệ xác định virus dương tính bệnh trường hợp) Rhinovirus đạt đỉnh vào mùa nhân NTHHDCT cao hẳn thu (22/63) lại giảm thấp mùa Đơng 4.4 Tính đồng nhiễm vi khuẩn nhóm nhiễm virus Kết bảng 1, cho thấy, số 143 bệnh nhân phân lập virus dương tính (73,7%), đa số bệnh nhân nhiễm virus đơn độc 120/194 bệnh nhân chiếm 61,9% Theo nghiên cứu Đoàn Mai Thanh khoa (10/63) Ngoài Parainfluenza Adenovirus thường tăng cao vào mùa thu Việc áp dụng kỹ thuật PCR đa mời chẩn đốn 18 loại ngun virus đường hơ hấp sử dụng thường quy tại bệnh viện để tăng khả phát nguyên NTHHCT Hô hấp bệnh viện Nhi trung ương năm 2006, tỷ lệ Đây kỹ thuật có độ nhạy, độ đặc hiệu cao, rút NTHHDCT RSV có bội nhiễm vi khuẩn 9,88% ngắn thời gian sàng lọc chẩn đoán [10], trung bình 10 trẻ mắc NTHHDCT nguyên virus gây nhiễm trùng đường hơ hấp, virus RSV có trẻ bội nhiễm thêm vi mang lại hiệu điều trị cho bệnh nhi 55 tạp chí nhi khoa 2016, 9, TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ môn Nhi (2000), “Nhiễm khuẩn hơ hấp cấp tính”, Bài giảng Nhi khoa, Trường Đại học Y Hà Nội, tr 321 - 324 WHO (1994), “The management of Acute Respiratory Infection in children”, Practical Guideline for outpatient care, Geneva WHO, pp 26 WHO (2004), “Who/Unicef joit statement: management of pneumonianin community senttings” WHO (2007), “Acute Respiratory Infection in children” Chun JK, Kim HS, Cheong HM, Kim KS, Kang hospitalized children from East Guangdong of China”, Article in Chinese Phạm Thị Minh Hồng (2004), “Vai trò virus hợp bào đường hô hấp viêm tiểu phế quản trẻ em yếu tố tiên lượng”, Luận án Tiến sĩ y học, Đại học Y Dược, TP Hồ Chí Minh 10 Đồn Mai Thanh (2005), “Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng nhiễm trùng đường hơ hấp cấp tính virus hợp bào đường hô hấp khoa Hô hấp Bệnh viện nhi Trung ương từ 1/2005 – 9/2005”, Luận văn thạc sĩ y khoa, Trường Đại học Y Hà Nội 11 Hồ Chí Thanh (2002), “Đặc điểm viêm tiểu C (2009), “Establishing a surveillance network for phế quản virus hợp bào đường hô hấp ở trẻ severe lower respiratory tract infections in Korean từ tháng tuổi đến tuổi tại khoa Hô hấp Bệnh infants and young children”, European Journal of viện Nhi Đồng I”, Luận án thạc sĩ y khoa, Trường Clinical Microbiology & Infectious Diseases Đại học Y dược TP Hồ Chí Minh Preeti Bharaj, Wayne M Sullender (2009), “Respiratory viral infections detected by multiplex PCR among pediatric patients with lower respirstory tract infections seen at an urban hospital in Delhi from 2005- 2007”, Virology Journal Gilles Guerrier, MD (2012), “Acute viral lower respirsatory tract infections in Cambodian 12 Rietveld, Vergouwe Y, Stryerberg EW, el al (2006), “Hospitalization for Respiratory syncytial virus infection in young children: Development of a Clinical Prediction Rule”, Pediatr Infect Dis J, 25, pp.201-207 13 Hussey GD, Apolles P, et al (2000), children: Clinical and epidemiologic characteristics” “Respiratory syncytial virus pneumonia in the Ou SY, Lin GY (2009), “Viral pathogens hospital setting: leng of stay, charges and mortality”, of acute lower respiratory tract infection in 56 J Pediat Aug; 137(2), pp.227-32 phần nghiên cứu abstract Apply multiplex PCR to diagnosis of pathogen which caused respiratory infectious disease in children in National Hospital of Pediatrics Background: Respiratory infectious disease are common disease in the world with incidence and mortality forefront of infectious disease in children Pathogen of respiratory tract infections mainly viruses However, determining the cause of the illness by the traditional method is still limited Aims: Apply multiplex PCR to diagnosis pathogen which caused respiratory infectious disease in children in National Hospital of Pediatrics Method: Analysis 194 children who from months to years old admitted General Pediatrics A Department, National Hospital of Pediatrics Multiplex PCR were using during from July 2012 to June 2013 Result: Using multiplex PCR detected 73.7% positive patients, there are 67.8% infected with one of virus and 32.2% infected with more than viruses Age of children respiratory infected common from to months The most common RSV fall (27/73 cases ) and peaked in winter (28/73 cases) while Rhinovirus peaked in autumn ( 22/63 ), but lower in the winter (10/63) Parainfluenza and Adenovirus and generally higher in fall Conclusion: Apply multiplex PCR technique to diagnosis of pathogen which caused respiratory infectious disease in children have sensitive, specific and short time and can be apply in routine test in hospital 57 ... Số bệnh nhân có kết xét nghiệm virus dương mồi chẩn đoán nguyên gây nhi? ??m tính kỹ thuật PCR đa mồi 143 bệnh nhân trùng đường hô hấp trẻ em Bệnh viện Nhi chiếm 73,7% Trong 67,8% trường hợp Trung. .. Bệnh viện Nhi Trung ương vi khuẩn nguyên nhân quan trọng gây 2.2 Phương pháp nghiên cứu nhi? ??m khuẩn hô hấp cấp tính trẻ em, chiếm Nghiên cứu mơ tả tiến cứu 75% [4] Ứng dụng kỹ thuật PCR đa mồi. .. lệ nhi? ??m virus nhóm trẻ NTHHCT từ tháng - tuổi đại phát lúc 18 Nghiên cứu tiến hành với 194 nguyên virus gây bệnh đường hô hấp Đây kỹ bệnh nhân nhi? ??m trùng hô hấp cấp tính từ thuật chưa ứng dụng