THU THẬP, LƯU GIỮ NGUỒN GEN VÀ ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ SINH HỌC TRONG BẢO TỒN VÀ PHÁT TRIỂN MỘT SỐ LOÀI LAN QUÝ Ở QUẢNG NINH

SỞ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT QUẢNG NINH TRUNG TÂM KHOA HỌC VÀ SẢN XUẤT LÂM NÔNG NGHIỆP BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI “THU THẬP, LƯU GIỮ NGUỒN GEN VÀ ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ SINH HỌC TRONG BẢO TỒN VÀ PHÁT TRIỂN MỘT SỐ LỒI LAN Q Ở QUẢNG NINH” SỞ NƠNG NGHIỆP VÀ PTNT QUẢNG NINH TRUNG TÂM KHOA HỌC VÀ SẢN XUẤT LÂM NÔNG NGHIỆP BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ ĐỀ TÀI “THU THẬP, LƯU GIỮ NGUỒN GEN VÀ ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ SINH HỌC TRONG BẢO TỒN VÀ PHÁT TRIỂN MỘT SỐ LOÀI LAN QUÝ Ở QUẢNG NINH” Đã chỉnh sửa theo ý kiến Hội đồng nghiệm thu cấp tỉnh ngày 14/12/2013 MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH SÁCH TÁC GIẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI iv BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI v PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.2.1 Mục tiêu chung 1.2.2 Mục tiêu cụ thể PHẦN 2: TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU 2.1 Khái niệm nuôi cấy mô 2.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào 2.3 Các nhân tố ảnh hưởng đến trình nuôi cấy mô 2.4 Các giai đoạn q trình ni cấy mơ 12 2.5 Giới thiệu chung 10 loài lan 14 2.6 Yêu cầu điều kiện ngoại cảnh 18 2.7 Đặc điểm thực vật học 20 2.8 Một số kết nghiên cứu hoa lan giới Việt Nam .24 PHẦN 3: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ 44 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .44 3.1 Đối tượng, vật liệu nghiên cứu 44 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu: 44 3.1.2 Vật liệu sử dụng 44 3.2 Nội dung, thời gian, địa điểm nghiên cứu 44 3.2.1 Nội dung1: Khảo sát, thu thập số loài lan rừng Quảng Ninh 44 3.2.2 Nội dung 2: Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật lưu giữ loài lan rừng 45 3.2.3 Nội dung 3: Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống 45 3.2.4 Nội dung 4: Xây dựng mơ hình ni trồng lan 46 3.3 Phương pháp nghiên cứu 46 3.3.1 Cách bố trí thí nghiệm 46 i 3.3.1.1 Xây dựng vườn bảo tồn, lưu giữ giống 46 3.3.1.2 Giai đoạn vào mẫu: 47 3.3.1.3 Giai đoạn nhân nhanh .50 3.3.1.4 Giai đoạn rễ: 52 3.3.1.5 Giai đoạn nuôi trồng: .53 3.3.2 Các tiêu theo dõi 54 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 56 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN .57 4.1 Khảo sát, thu thập số loài lan rừng Quảng Ninh 57 4.2 Xây dựng vườn lưu giữ 60 4.3 Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống 66 4.3.1 Giai đoạn nhân giống in vitro 66 4.3.1.1 Nhân giống in vitro từ chồi: .67 4.3.1.1.1 Giai đoạn vào mẫu 67 4.3.1.1.2 Giai đoạn nhân nhanh 70 4.3.1.1.3 Giai đoạn rễ .84 4.3.1.2 Nhân giống in vitro từ hạt 89 4.3.1.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng hoá chất, thời gian khử trùng đến tỷ lệ sống mẫu cấy 90 4.3.1.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy chất phụ gia hữu đến chất lượng 92 4.3.2 Giai đoạn nuôi trồng 98 4.4.Giai đoạn trồng mơ hình 108 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 114 5.1 Kết luận 114 Khảo sát, mua mẫu giống 114 Xây dựng vườn lưu giữ 114 Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống phương pháp ni cấy mơ cho lồi lan (Hồng vũ, Trần mộng, Phi điệp tím, Hài vệ nữ hoa vàng) 114 5.1.4 Xây dựng mơ hình ni trồng lan .115 5.2 Kiến nghị 116 TÀI LIỆU THAM KHẢO 117 ii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT BAP Cym CT CW CS Den ĐTST IAA IBA α-NAA 2,4-D HVN HV K Kinetin KHCN MS VW Pap P PĐT N XĐ XN X TNo TM THT Zeatin : 6- Benzyl Amino Purine : Cymbidium : Công thức : Nước dừa : Cộng : Dendrobium : Điều tiết sinh trưởng : Indol Acetic Acid : 3- Indol Butyric Acid : α-Naphyl acetic acid : 2,4-Dichlorophenoxy Acetic Acid : Hài vệ nữ : Hoàng vũ : Kali : 6- Furfuryl aminopurine - C10H9NO5 : Khoa học công nghệ : Muraskige & Skoog : Vacin and Went : Paphiopedilum : Phospho : Phi điệp tím : Nitrogen : Xanh đậm : Xanh nhạt : Xanh : Thí nghiệm : Trần mộng : Than hoạt tính : (E)-2-methyl-4-(7H-purin-6-ylamino)but-2-en-1-ol - C10H 13N50 iii SỞ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT QUẢNG NINH TRUNG TÂM KHOA HỌC VÀ SẢN XUẤT LÂM NƠNG NGHIỆP CỘNG HỒ Xà HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Quảng Yên, ngày 25 tháng 11 năm 2013 DANH SÁCH TÁC GIẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI Tên đề tài: Thu thập, lưu giữ nguồn gen ứng dụng công nghệ sinh học bảo tồn phát triển số loài lan quý Quảng Ninh - Thuộc: Chương trình Nghiên cứu Khoa học Phát triển Công nghệ hàng năm tỉnh Quảng Ninh Thời gian thực (Bắt đầu – Kết thúc): 05/2011 – 12/2013 Tổ chức chủ trì: Trung tâm KH SX lâm nơng nghiệp Quảng Ninh Cơ quan chủ quản: Sở Nông nghiệp PTNT tỉnh Quảng Ninh Cơ quan quản lý: Sở Khoa học Công nghệ Quảng Ninh Tác giả thực đề tài gồm người có tên danh sách Chức danh khoa học, học vị, họ tên ThS Ngô Thị Nguyệt Trung tâm KH&SX LNN Quảng Ninh KS Tô Phương Thảo Trung tâm KH&SX LNN Quảng Ninh KS Đặng Thị Chinh Trung tâm KH&SX LNN Quảng Ninh ThS Hoàng Thị Thế Trung tâm KH&SX LNN Quảng Ninh KS Đinh Thu Huế Trung tâm KH&SX LNN Quảng Ninh KS Nguyễn T Thu Trang Trung tâm KH&SX LNN Quảng Ninh KS Trần Thuỳ Dung Trung tâm KH&SX LNN Quảng Ninh KS.Trần Thị Hà Trung tâm KH&SX LNN Quảng Ninh TT Chủ nhiệm đề tài Tổ chức công tác Chữ ký Thủ trưởng tổ chức chủ trì đề tài Ngơ Thị Nguyệt iv SỞ NƠNG NGHIỆP VÀ PTNT QUẢNG NINH TRUNG TÂM KHOA HỌC VÀ SẢN XUẤT LÂM NƠNG NGHIỆP CỘNG HỒ Xà HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Quảng Yên, ngày 25 tháng 11 năm 2013 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN ĐỀ TÀI I THÔNG TIN CHUNG Tên đề tài: “Thu thập, lưu giữ nguồn gen ứng dụng công nghệ sinh học bảo tồn phát triển số loài lan quý Quảng Ninh” Thuộc: Chương trình Nghiên cứu Khoa học Phát triển Công nghệ tỉnh Quảng Ninh Chủ nhiệm đề tài: Họ tên: Ngô Thị Nguyệt Ngày, tháng, năm sinh: 01/02/1975 Nam/Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Thạc sỹ Chức danh khoa học: Cán nghiên cứu Chức vụ: Trưởng phòng Điện thoại quan: 0333 873 595 Mobile: 01228.389.565 Fax: 0333 873 693 E-mail: vannguyet99@yahoo.com.vn Tên tổ chức công tác: Trung tâm KH&SX Lâm Nông nghiệp Quảng Ninh Địa tổ chức: Km11 - P.Minh Thành - Thị xã Quảng Yên - Tỉnh Quảng Ninh Địa nhà riêng: Khu Lâm Sinh I - P.Minh Thành - Thị xã Quảng Yên Tỉnh Quảng Ninh Tổ chức chủ trì đề tài: Tên tổ chức chủ trì đề tài: Trung tâm KH&SX Lâm Nông nghiệp Quảng Ninh Điện thoại: 033.3873.002 Fax: 033.387693 E-mail: ttlnn@gmail.com Địa chỉ: Km11- P.Minh Thành - Thị xã Quảng Yên - Tỉnh Quảng Ninh Họ tên thủ trưởng tổ chức: Trần Thị Doanh v Số tài khoản: 800 221 101 0006 Mở ngân hàng Nông nghiệp PTNT TX Quảng Yên - Tỉnh Quảng Ninh Cơ quan chủ quản đề tài: Sở Khoa học Cơng nghệ Quảng Ninh II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực đề tài: - Theo Hợp đồng ký kết: từ tháng 05 năm 2011 đến tháng 12 năm 2013 - Thực tế thực hiện: từ tháng 05 năm 2011 đến tháng 12 năm 2013 - Được gia hạn: Khơng Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 2.206,840 triệu đồng, đó: +) Kính phí hỗ trợ từ SNKH: 1.566,820 tr.đ +) Kinh phí từ nguồn khác: 640,020 tr.đ b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn NSSNKH: Theo kế hoạch TT Thực tế đạt Ghi Thời gian Kinh phí Thời gian Kinh phí (Số đề nghị (Tháng, năm) (Tr.đ) (Tháng, năm) (Tr.đ) toán) Năm 2011 638,720 31/12/2011 638,720 638,720 Năm 2012 375,910 31/12/2012 375,910 375,910 Năm 2013 552,190 31/12/2013 552,190 552,190 Tổng cộng 1.566,820 1.566,820 1.566,820 vi c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đơn vị tính: 1.000 đồng Nội Theo kế hoạch Thực tế đạt dung TT Nguồn Nguồn Tổng SNKH Tổng SNKH khoản khác khác chi Công lao động (khoa 808.913 694.844 114.068 807.230,4 693.247,1 114.068 học, phổ thông) Nguyên, vật liệu, 756.490 744.490 12.000 756.408 744.423 12.000 lượng Thiết bị, 222.070 14.100 207.970 222.080 14.110 207.970 máy móc Xây dựng, 359.983 54.000 305.983 359.983 54.000 305.983 sửa chữa nhỏ Chi khác 59.385 59.385 61.139,6 61.039,9 Tổng 2.206.840 1.566.820 640.020 2.206.841 1.566.820 640.020 cộng - Lý thay đổi: khơng vii Các văn hành q trình thực đề tài: Số, thời gian ban hành TT Tên văn văn Biên họp Hội đồng KHCN cấp sở Ngày 15 tháng năm 2011 thẩm định đề tài Sở Nông nghiệp PTNT Quảng Ninh Biên họp Hội đồng thẩm định thuyết minh nhiệm vụ NCKH – PTCN cấp tỉnh Ngày 26 tháng năm 2011 năm 2010, năm 2011 Sở Khoa học Công nghệ Quảng Ninh Ngày 11/5/2011 Quyết định việc giao tiêu kế hoạch Số 1617/QĐ-UBND, ngày nghiệp khoa học công nghệ đợt 25/5/2011 năm 2011, UBND tỉnh Quảng Ninh Quyết định việc phê duyệt giá mua Số 248/QĐ-SNN&PTNT, lan loại cho đề tài, Sở NN&PTNT ngày 27 tháng năm 2011 Quảng Ninh Hợp đồng nghiên cứu Khoa học PTCN Số 26/2011/HĐ-KHCN, Sở KH&CN Quảng Ninh với Trung ngày 03 tháng năm 2011 tâm KH&SXLNN Quảng Ninh 10 11 12 Số 76/QĐ-TT, ngày 8/6/2011 Số 78/QĐ-TT, ngày 9/6/2011 Số 04/QĐ –TT, ngày tháng năm 2012 Số 10/QĐ-TT, ngày 8/1/2012 Số 01/QĐ-TT, ngày 2/1/2013 Số 02/QĐ-TT, ngày 2/1/2013 Biên thẩm định dự tốn kinh phí nhiệm vụ NCKH & PTCN năm 2010, năm 2011 Quyết định việc giao việc cho cán thực đề tài năm 2011 Quyết định việc giao việc cho thư ký, kế toán đề tài năm 2011 Quyết định việc giao việc cho cán thực đề tài năm 2012 Quyết định việc giao việc cho thư ký, kế toán đề tài năm 2012 Quyết định việc giao việc cho cán thực đề tài năm 2013 Quyết định việc giao việc cho thư ký, kế toán đề tài năm 2013 viii Khi so sánh tỷ lệ phối trộn loại giá thể vỏ thông, xơ dừa, than củi kết tốt cơng thức giá thể có tỷ lệ phối trộn (5:2,5:2,5) cho tất tiêu tỷ lệ sống, số lá/cây, chiều dài lá, chiều rộng cao so với công thức lại Kết tương tự với kết tác giả Nguyễn Kim Lan, 2013 đưa 4.3.2.2 Tình hình sâu bệnh hại lan rừng Tình hình sâu bệnh hại vấn đề đáng quan tâm nhà vườn trồng lan Chúng tiến hành theo dõi số loại sâu bệnh hại đánh giá tình hình sâu bệnh theo biểu phân loại cấp sâu bệnh hại Sau 12 tháng theo dõi tình hình sâu bệnh hại ghi bảng sau: Bảng 4.14: Ảnh hưởng số loại sâu bệnh hại STT Sâu, bệnh hại Bệnh đốm (cấp) Bệnh thối (cấp) Bệnh thối rễ (cấp) Ruồi đục (cấp) Bọ trĩ (cấp) Rệp son (cấp) Trần mộng Tỷ lệ Cấp bị bệnh bệnh (%) Phi điệp tím Tỷ lệ Cấp bị bệnh bệnh (%) Hoàng vũ Tỷ lệ Cấp bị bệnh bệnh (%) Hài vệ nữ Tỷ lệ Cấp bị bệnh bệnh (%) 0,98 - - - 2,11 0,87 2,46 2,37 0,84 1,02 1,12 2,12 - - - - 0 - - - - 0 - - - - 107 Kết bảng cho thấy: - Lan hài vệ nữ hoa vàng: Tỷ lệ bệnh hại thấp, có số nhiễm bệnh thối thối rễ bệnh thối rễ 2,12%, bệnh thối 2,37% trình chăm sóc tưới nước chưa - Phi điệp tím: Ở giai đoạn thích nghi dần với điều kiện mơi trường bên ngồi, sau 12 tháng bệnh thối thối rễ cấp tỷ lệ bị bệnh giảm xuống 0,87 – 1,02% Tỷ lệ bị nhiễm bệnh mức độ nhẹ hoàn tồn khơng bị sâu hại, có sức sinh trưởng tốt - Lan Hồng Vũ: khơng bị bệnh đốm lá, bệnh thối 2,46%, bệnh thối rễ 0,84% - Lan Trần mộng: Tỷ lệ bị bệnh đốm chiếm 0,98%, bệnh thối 2,11%, bệnh thối rễ 1,12% Mặc dù, loại lan bị số loại bệnh hại nhiên mức độ nhẹ, xử lý mang mầm bệnh phun phòng nên ngăn chặn kịp thời lây lan * Sản xuất cho mơ hình Sau nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống vơ tính hữu tính chúng tơi áp dụng sản xuất cho giai đoạn ni trồng mơ hình với tổng số 7.040 đạt tiêu chuẩn để vườn ươm, vượt 1.040 = 17,3% so với kế hoạch sản xuất 6.000 Trong hồng vũ 1.800 (700 hạt, 1100 chồi), trần mộng 1.835 (715 hạt, 1120 chồi), hài vệ nữ hoa vàng 1.700 (680 hạt, 1020 chồi), phi điệp tím 1.705 (695 hạt, 1010 chồi) 4.4 Xây dựng mơ hình ni trồng lan Tiếp sau việc xây dựng quy trình nhân giống ni cấy mô hướng dẫn kỹ thuật nuôi trồng lan sau in vitro, nội dung xây dựng mơ hình để đánh giá thực tế tình hình sinh trưởng phát triển khả thích nghi, chống chịu với ngoại cảnh điều kiện sinh thái Quảng Ninh 108 4.4.1 Giai đoạn Cây lan sau giai đoạn nuôi cấy mô, đưa nuôi trồng thương phẩm, phải có tháng nuôi trồng điều kiện nhà màng lớp điều khiển nhiệt độ, ánh sáng để thích nghi dần với điều kiện tự nhiên Kết giai đoạn thể qua bảng 4.15 Bảng 4.15 Tình hình sinh trưởng lồi lan giai đoạn vườn ươm Thời gian theo dõi Chỉ tiêu theo dõi Số (lá) Sau tháng 3,67 Sau tháng 5,1 Sau tháng 6,8 Trần Dài (cm) 6,86 7,48 8,4 mộng Rộng (cm) 0,27 0,44 0,67 Tỷ lệ sống (%) 98,6 97,4 96,2 Số (lá) 3,63 5,1 6,9 2,16 2,71 2,98 Rộng (cm) 0,56 0,82 0,95 Tỷ lệ sống (%) 98,6 97,1 96,1 Số 3,77 4,2 5,69 Dài (cm) 2,25 2,41 2,94 Rộng (cm) 0,55 0,6 0,82 Tỷ lệ sống (%) 98,4 96,8 95,8 Số (lá) 3,93 5,8 8,3 Dài (cm) 7,31 8,24 10,73 Rộng (cm) 0,5 0,65 0,88 Tỷ lệ sống (%) 98,9 97,5 96,4 Phi điệp Dài (cm) tím Hài vệ nữ Hồng vũ 109 Màu sắc Chất lượng Xanh Tốt Xanh Tốt Xanh Tốt Xanh Tốt Nhìn chung, lan đưa vườn ươm có tỷ lệ sống cao, tốc độ sinh trưởng qua tháng ổn định Sau tháng nuôi trồng, lan cứng cáp hơn, rễ phát triển mạnh, mọc nhanh xanh non Lúc này, có khả thích nghi cao với điều kiện sống, giai đoạn thích hợp để thay cốc đưa lan vào giá thể thích hợp cho lồi 4.4.2.Giai đoạn trồng mơ hình Tháng năm 2013 chúng tơi xây dựng xong 03 mơ hình ni trồng loài lan địa điểm: Việt Hưng - Hạ Long, Vàng Danh – ng Bí, Minh Thành - Quảng n Mỗi mơ hình ni trồng diện tích 300m với 2.000 lan 04 lồi/mơ hình (500 cây/lồi) Các tiêu sinh trưởng đưa vào trồng mơ hình thể bảng số liệu Bảng 4.16 Tình hình sinh trưởng 04 lồi lan mơ hình: Hạ Long, ng Bí, Trung tâm Chỉ tiêu theo dõi Thời gian theo dõi Tại ng Bí Sau tháng Sau tháng Sau tháng Sau 10 tháng Sau 11 tháng Số (lá) 8,00 8,13 8,23 8,67 9,43 Chiều dài (cm) 10,04 9,98 10,01 10,21 11,04 T Chiều rộng M (cm) Chất lượng Sâu bệnh Sinh Không trưởng 0,68 0,70 0,74 0,78 0,84 Tỷ lệ sống (%) 98,2 96,4 94,6 94,2 93,6 Số (lá) 6,53 7,00 7,13 7,15 7,67 5,49 5,37 5,48 5,57 5,71 Sinh 0,73 0,74 0,77 0,81 0,88 trưởng 98,8 97,6 96,2 96,0 95,8 P Dài (cm) Đ Rộng (cm) T Tỷ lệ sống (%) 110 tốt tốt Không Số (lá) 3,73 3,73 3,43 4,03 4,13 4,48 4,54 4,52 4,57 4,69 Sinh 0,70 0,73 0,74 0,76 0,8 trưởng 98,0 95,2 92,4 91,2 90,6 Số (lá) 7,80 8,13 8,17 9,0 9,5 Dài (cm) H V Rộng (cm) 12,16 11,64 11,73 11,92 12,01 Sinh 0,74 0,78 0,79 0,84 0,89 trưởng 98,4 96,8 95,2 94,8 93,8 tốt Số (lá) 7,97 8,10 8,30 8,37 8,67 Dài (cm) T M Rộng (cm) 9,81 9,84 9,87 9,92 10,02 Sinh 0,68 0,71 0,73 0,75 0,79 trưởng Tỷ lệ sống (%) 98,8 97,2 95,6 95,2 95,0 Số (lá) 6,53 6,77 6,93 7,0 7,17 5,27 5,27 5,29 5,6 5,81 Sinh 0,74 0,74 0,76 0,76 0,81 trưởng 98,6 97,2 95,8 95,0 94,8 3,67 3,67 3,80 3,9 4,1 444 4,46 4,47 4,53 4,58 Sinh 0,70 0,71 0,73 0,77 0,84 trưởng 97,6 95,0 92,4 91,8 91,4 tốt Số (lá) 7,83 8,03 8,14 8,2 8,8 Dài (cm) H V Rộng (cm) 11,80 11,86 11,88 11,91 12,02 Sinh 0, 75 0,78 0,80 0,82 0,91 trưởng 99,2 98,2 97,2 97,0 96,8 7,93 8,03 8,17 8,6 8,93 H Dài (cm) V Rộng (cm) N Tỷ lệ sống (%) Tỷ lệ sống (%) Không tốt Không Hạ Long P Dài (cm) Đ Rộng (cm) T Tỷ lệ sống (%) Số (lá) H Dài (cm) V Rộng (cm) N Tỷ lệ sống (%) Tỷ lệ sống (%) Trung tâm T Số (lá) 111 Không tốt Không tốt tốt Không Không M Dài (cm) Sinh 9,91 9,83 9,92 10,02 10,12 Rộng (cm) 0,68 0,71 0,72 0,77 0,84 trưởng Tỷ lệ sống (%) 99,4 97,6 95,8 95,6 95,4 tốt Số (lá) 6,43 6,70 7,00 7,57 8,27 5,39 5,36 5,50 5,51 5,66 Sinh 0,72 0,75 0,76 0,8 0,86 trưởng 98,6 97,2 95,6 94,8 94,6 3,73 4,00 3,90 4,13 4,23 4,62 4,55 4,49 4,58 4,66 Sinh 0,71 0,71 0,74 0,78 0,85 trưởng 98,0 95,0 93,4 91,4 91,0 tốt Số (lá) 7,80 7,63 8,20 8,5 9,0 Dài (cm) H V Rộng (cm) 11,73 11,67 11,51 11,75 11,88 0,75 0,74 0,75 0,81 0,87 98,6 97,2 95,6 95,6 95,4 P Dài (cm) Đ Rộng (cm) T Tỷ lệ sống (%) Số (lá) H Dài (cm) V Rộng (cm) N Tỷ lệ sống (%) Tỷ lệ sống (%) Không Không tốt Sinh Không Không trưởng tốt Ghi chú: TM: Trần mộng; PĐT: Phi điệp tím; HVN: Hài vệ nữ; HV: Hồng vũ; Từ bảng số liệu trên, rút số nhận xét sau: - Các loài lan đề tài có đặc tính sinh học khác Do vậy, nuôi trồng mơ hình, tình hình sinh trưởng chúng khác Trong lồi lan, lồi có tỷ lệ bị chết nhiều nuôi trồng mô hình lan hài vệ nữ Tỷ lệ chết qua tháng loài gấp 3,6 – 5,2% lồi lại Điều chứng tỏ lồi mẫn cảm thay đổi môi trường sống 112 Cũng thời gian nuôi trồng tháng mơ hình, chưa phát bị bệnh Phần lớn bị chết khả thích ứng kém, yếu rễ, bị tổn thương nhiều trình chuyển giá thể - Ở mơ hình, sinh trưởng phát triển giống tương đương nhau, khơng có khác biệt lớn mơ hình ni trồng Một đặc điểm bật loài lan trồng mơ hình tính đồng cao tiêu sinh trưởng Đặc điểm có lan trồng mơ hình tạo kỹ thuật nuôi cấy mô, cho phép tạo hàng loạt thời điểm có độ đồng cao Khi cây, lan nhỏ, chiều cao 10 cm, số đạt từ – Tuy nhiên, ngồi vườn ươm chăm sóc quy trình, tốc độ sinh trưởng lan nhanh, tỷ lệ sống cao đạt từ 91 - 96,8% tùy lồi Chúng tơi tiếp tục theo dõi, sinh trưởng phát triển 04 loài lan 03 mơ hình 113 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Khảo sát, thu thập số loài lan rừng Quảng Ninh Đã khảo sát nhà vườn nuôi trồng lan Uông Bí, Hạ Long, Cẩm Phả - Quảng Ninh; Văn Lâm, Văn Giang – Hưng Yên; Thành phố Hải Phòng (Quận Lê Chân, Kiến Thuỵ, An Dương, Hải An) Đã thu thập đủ 780 mẫu giống cho 10 loài lan Xây dựng vườn lưu giữ Đã xây dựng vườn bảo tồn lưu giữ nguồn gen lan rừng Trung tâm, tổng diện tích 300 m2 Đã thu thập lưu giữ 10 loài lan vườn bảo tồn gồm: Phi điệp tím 150 mẫu; Hài vệ nữ vàng 150 mẫu; Trần mộng 150 mẫu; Hoàng vũ 150 mẫu; Quế lan hương 30 mẫu; Long tu 30 mẫu; Trầm tím 30 mẫu; Hài gấm 30 mẫu; Kim điệp 30 mẫu; Kiếm tứ thời 30 mẫu Các loài lan vườn lưu giữ sinh trưởng phát triển tốt Đã xây dựng hướng dẫn kỹ thuật nhân giống phương pháp ni cấy mơ, ni trồng, chăm sóc cho lồi lan (Hồng vũ, Trần mộng, Phi điệp tím, Hài vệ nữ hoa vàng)với tiêu: 3.1 Nhân giống in vitro từ chồi - Giai đoạn vào mẫu: Chế độ khử trùng mẫu tối ưu lan Hoàng Vũ Ca(OCl)2 5% thời gian 10 phút + HgCl2 0,1% thời gian phút Trần mộng, Phi điệp tím Ca(OCl)2 5% thời gian 15 phút + HgCl2 0,1% thời gian phút Hài vệ nữ hoa vàng Ca(OCl)2 5% thời gian 20 phút + HgCl2 0,1% thời gian phút - Giai đoạn nhân nhanh: Môi trường nhân nhanh tối ưu: Với lan Hồng vũ BAP 2,0 mg/lít + Kinetin 1,5 mg/lít Trần mộng BAP 2,0 mg/lít + 114 Kinetin 1,2 mg/lít Phi điệp tím BAP 1,5 mg/lít + Kinetin 0,9 mg/lít Hài vệ nữ hoa vàng BAP 0,5 mg/lít + Kinetin 1,2 mg/lít - Giai đoạn rễ: Mơi trường thích hợp nhất: Hồng vũ 1/2 MS + mg/l α – NAA Trần mộng Phi điệp tím 1/2 MS + 1,5 mg/l α – NAA Hài vệ nữ hoa vàng 1/2 MS + 1,5 mg/l IAA - Kết kiểm chứng giai đoạn nhân giống vơ tính: Đã tạo 5.184 (4 lồi) phục vụ giai đoạn nghiên cứu nuôi trồng 3.2 Nhân giống in vitro từ hạt - Giai đoạn vào mẫu: Kết tốt sau: Đối với lan Hoàng vũ, Trần mộng Ca(OCl)2 5% thời gian 10 phút Lan Hài vệ nữ hoa vàng Phi điệp tím Ca(OCl)2 5% thời gian 15 phút - Giai đoạn nhân nhanh tạo hồn chỉnh: Mơi trường thích hợp với lan Hồng vũ hài vệ nữ hoa vàng là: VW + 30g/l khoai tây + 30 g/l cà rốt Lan Trần mộng Hyponex + 30g/l khoai tây + 10% nước dừa + 30 g/l cà rốt Lan Phi điệp tím MS + 30g/l khoai tây + 30 g/l cà rốt - Sau nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống vơ tính chúng tơi áp dụng sản xuất cho mơ hình ni trồng với tổng số 7.040 đạt tiêu chuẩn để vườn ươm 3.3 Giai đoạn nuôi trồng - Giai đoạn 1(6 tháng đầu): Trên giá thể dớn biển Phân bón thích hợp lan Trần mộng Hài vệ nữ hoa vàng Yogen + NPK Lan Hồng Vũ Phi điệp tím Atonik + NPK - Giai đoạn 2(6 tháng sau): Giá thể thích hợp lan Trần mộng hỗn hợp vỏ thông, phân hữu cơ, xơ dừa tỷ lệ 1:1:1 Lan Hồng vũ giá thể hỗn hợp vỏ thơng, phân hữu cơ, đất phù sa với tỷ lệ 1:1:1 Lan Phi điệp tím giá thể gỗ nhãn Lan Hài vệ nữ hoa vàng hỗn hợp giá thể vỏ thông, xơ dừa, than củi (5:2,5:2,5) 115 - Tình hình sâu bệnh hại: Mặc dù, loại lan có bị số loại bệnh hại, nhiên mức độ nhẹ, xử lý mang mầm bệnh phun phòng nên ngăn chặn kịp thời lây lan Xây dựng mơ hình ni trồng lan Đã xây dựng 03 mơ hình ni trồng loài lan địa điểm: Việt Hưng - Hạ Long, Vàng Danh – ng Bí, Minh Thành - Quảng n Mỗi mơ hình có diện tích 300m2 với 2.000 (500 cây/lồi) - Ở mơ hình, sinh trưởng phát triển giống lan tương đương chất lượng tương đương sản phẩm nhập nội, khơng có khác biệt lớn tiêu theo dõi mô hình Đặc điểm có lan giống tạo kỹ thuật nuôi cấy mô, cho phép tạo hàng loạt thời điểm có độ đồng cao 5.2 Kiến nghị Tiếp tục nhân giống phát triển 04 loài lan Đề nghị tập trung phát triển 02 loài địa Trần mộng hoàng vũ sản xuất Kính đề nghị cấp có thẩm quyền xem xét, tạo điều kiện kinh phí cho Trung tâm tiếp tục trì chăm sóc, theo dõi vườn bảo tồn lưu giữ mơ hình CƠ QUAN CHỦ TRÌ ĐỀ TÀI CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI (Ký đóng dấu) (Ký ghi rõ họ tên) Ngô Thị Nguyệt 116 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Trần Văn Bảo (2001), ”Kỹ thuật nuôi trồng phong lan”, Nhà xuất Trẻ, TP Hồ Chí Minh Báo cáo tổng kết, kết thực đề tài (2009), “Thu thập đánh giá nguồn gen hoa lan Việt Nam lưu giữ chúng hai vùng Miền núi phía Bắc Đồng Bằng Bắc Bộ” Báo cáo khoa học, Viện nghiên cứu Rau Nguyễn Tiến Bân cs (1990),“Thực vật chí Việt Nam”, NXB Khoa học Nguyễn Tiến Bân (1997), ”Cẩm nang tra cứu nhận biết họ thực vật bậc kín Việt Nam”, NXB Nông nghiệp, Hà Nội Bộ Nông nghiệp PTNT (2001), Tuyển tập ”Tiêu chuẩn Nông nghiệp Việt Nam”, Tập II, 1, NXB Trung tâm Thông tin Nông nghiệp Phát triển Nông thôn, Hà Nội Việt Chương, Nguyễn Việt Thái (2002), ”Kỹ thuật trồng kinh doanh phong lan”, NXB TP HCM Dương Thị Thảo Chinh (2008), nghiên cứu đặc điểm sinh trưởng, phát triển số giống địa lan trồng chậu ảnh hưởng giá thể, phân bón qua đến hiệu sản xuất hoa địa lan Sapa – Lào Cai, Luận Văn Thạc sĩ Nông nghiệp Đặng Văn Đông, Trần Duy Quý, Chu Thị Ngọc Mỹ (2009) ”Điều tra phân bố hoa lan Việt Nam kết lưu giữ, đánh giá số giống lan quý Gia Lâm – Hà Nội”, Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam số 3(12)/2009, tr 96-101 Hoàng Thị Giang, Nguyễn Quang Thạch, Mạch Hồng Thắm (2010) ”Nghiên cứu nhân giống in vitro nuôi trồng giống lan hài quý (Hài Hằng) thu thập Việt Nam”, Tạp chí KH&PT 2010, tập 8, số tr 194-201 10 Võ Hà Giang, Ngơ Xn Bình (2010), ”Nghiên cứu nhân giống phong lan 117 Đuôi Chồn (Rhynchotylis retunsa [L] Blume) phương pháp nuôi cấy mô tế bào”, Tạp chí nơng nghiệp PTNT số 5/2010, tr 25-30 11 Phạm Hoàng Hộ (1993), Cây cỏ miền Nam Việt Nam, 3, Bộ Giáo dục, Hà Nội 12 Trần Hợp (1990), Phong lan Việt Nam”, tập 1,2 – NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 13 Huỳnh Thanh Hùng (2007) Nghiên cứu vật liệu làm giá thể trồng lan Dendrobium Thủ Đức –TP Hồ Chí Minh Tạp chí KHKT Nơng lâm Nghiệp, số 03/2007 14 Nguyễn Duy Hạng (2007) Sản xuất giá thể trồng hoa lan từ phụ phế phẩm nông nghiệp Lâm Đồng; www.lamdong.gov.vn 15 Phạm Thị Liên, Trần Thuý Oanh, Lê Thanh Nhuận (2009), ”Kết thu thập, đánh giá tuyển chọn số giống Phong lan Hoàng Thảo (Dendrobium) nhập nội miền Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam số 3(12)/2009, tr 15-20 16 Nguyễn Thị Kim Lý (2009), “Hoa cảnh”, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội 17 Vũ Ngọc Lan cs (2010) Ảnh hưởng giá thể trồng đến q trình sinh trưởng lan Hồng thảo Trúc Đen (Den hancockii), Tạp chí Khoa học PT 2010, tập 8, số tr 757-764 18 Nguyễn Kim Lan (2013) Cách trồng lan hài; www.trongraulamvuon.com 19 Nguyễn Thị Lương, Trung tâm nghiên cứu ứng dụng tiến KH&CN Lào Cai đưa mơi trường cho lồi địa lan; www.laocai.gov.vn 20 Chu Thị Ngọc Mỹ, Trịnh Khắc Quang (2010) ”Nghiên cứu đánh giá đặc điểm nông sinh học số mẫu giống lan rừng Việt Nam Gia Lâm – Hà Nội”, Tạp chí NN&PTNT số 13/2010 tr 13-19 21 Trần Mạnh (2009) Kỹ thuật trồng địa lan, nguồn Hương sắc Việt Nam số -2009 118 22 Đặng Xuyến Như (2006); Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống ni trồng lồi lan hài Việt Nam (hài hài hồng) 23 Dương Tấn Nhựt (2005) Một số kỹ thuật nhân giống vô tính lan hài Báo cáo KH Hội thảo ứng dụng kỹ thuật nhân giống nuôi trồng hoa lan TP Hồ chí Minh tr 13 24 Lê Minh Nguyệt, Trần Thị Ngân, Vũ Văn Liết, Trần Duy Quý (2009), ”Ảnh hưởng môi trường chất điều hoà sinh trưởng đến khả tái sinh nhân nhanh giống Hoàng lan thuộc chi lan Kiếm (Cymbidium)”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam số 3(12)/2009, tr 27-34 25 Nguyễn Công Nghiệp (2000), Trồng hoa lan, Nhà xuất Trẻ, TP Hồ Chí Minh 26 Trịnh Khắc Quang, Chu Thị Ngọc Mỹ (2010), “Nghiên cứu đánh giá đặc điểm nông sinh học số mẫu giống lan rừng Việt Nam Gia Lâm Hà Nội”, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn số 13/2010 tr 13 - 19 27 Trần Duy Quý cộng (2005), ”Sổ tay người Hà Nội chơi lan”, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội 28 Nguyễn Quang Thạch cs (2004); Ứng dụng phương pháp nuôi cấy lát mỏng tế bào nhân nhanh in vitro số giống địa lan có giá trị; Tạp chí KHKT Nơng nghiệp số 5/2004 29 Nguyễn Quang Thạch cộng (2008), ”Quy trình kỹ thuật nuôi trồng Địa lan (Cymbidium spp.) cấy mô”, Tạp chí nơng nghiệp PTNT số 8/2008, tr 18-22 30 Hoàng Ngọc Thuận (2003), “Kỹ thuật trồng hoa cảnh” Bài giảng cao học 31 Khuất Hữu Trung cộng (2007), ”Nghiên cứu đa dạng di truyền tập đoàn lan Kiếm (Cymbidium swartz ) Việt Nam kĩ thuật RAPD”, Tạp chí nơng nghiệp PTNT số 14/2007, tr 26- 30 119 32 Khuất Hữu Trung (2009), ”Nghiên cứu đa dạng di truyền loài lan Hài Đốm (Paphiopedilum cônclor Pfitzer) địa Việt Nam”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam số 3(12)/2009, tr 70-77 TÀI LIỆU NƯỚC NGOÀI 33 Laws, N., 1995, “Cut orchids in the world market, Flora Culture International (12): 12-15 34 Leonid V Averyanov & Anna L Averyanova, 2003, Updated checklits of the orchids of Viet Nam, Viet Nam Nationnal University Publising House, Ha Noi 35 He S, Lu S C (1994) [J] Chinese Bulletin of Botany, 1l(4): 58- 59 36 Li F, Chen K S, Chen H T, et al (1998) Aseptic seeding of in terspecific hybridization seed from C.floribundum var pumilum and C.faberi [J] Journal of Zhejiang Agricultural University, 24(1):69- 73 37 Pan-Chi Liou (2006), Marching towward the Market – the Business Potential for Agricultural Biotechnology in Taiwan, horticultural Division Agricultural Research Institute Executive Yuan Taichung Hsien 42301, Taiwan ROC TÀI LIỆU TỪ INTERNET 38 “Việt Nam trở thành nước xuất Phong lan lớn, tin hoạt động ngành ngày 14/02/2007, http://www.agroviet.gov.vn/portal/page?_pageid=35,280791&_dad=porta l&_schema=PORTAL&pers_id=280681&item_id=488285&p_details=1 39 Bùi Xuân Đáng (2005), “Tìm hiểu hoa lan”, http://www.hoalanvietnam.org/article-print.asp?url=/Article.asp&ID=1 40 Trung Quốc phác hoạ khung đồ gen hoa lan, 17/11/2009, http://www.khoahoc.com.vn/khampha/sinh-vat-hoc/thucvat/25956_Trung-Quoc-phac-hoa-khung-ban-do-gen-hoa-lan.aspx 41 Orchid Research Program, 120 10/2/2010, http://www.hrt.msu.edu/faculty/Runkle/Orchid/Orchid_Research.htm 42 Phát huy ti m n ng xu t kh u phong lan Vi t Nam, 04/07/2009, http://lantaynguyen.wordpress.com/2009/07/04/phat-huy-ti%E1%BB%81 m-nang-xu%E1%BA%A5t-kh%E1%BA%A9u-phong-lan-c%E1%BB%A 7a-vi%E1%BB%87t-nam/ 43 Hoa lan Vi t nam, 18/12/2006, http://www.rauhoaquavietnam.vn/ 44 Tháng 09/08, kim ng ch xu t kh u phong lan t ng m nh, 07/11/2008, http://rauhoaquavietnam.vn/default.aspx?tabID=5&ID=11&LangID=1&N ewsID=4504 45 http:www.phununet.com 46 Ajchara – Boonrote (1987), Effect of glucose, hydroquinoline sulfate, silve nitrat, silve thiosuffate on vase life of Dendrobium Padeewan cut flowers in Thai Land, Bangkok 121 ... - Đảm bảo tính khoa học thực thực đề tài Đảm bảo tính khoa học tiễn, Hội đồng thực tiễn nghiệm thu cấp thông qua c) Sản phẩm Dạng III: TT Tên sản phẩm Bài báo khoa học Yêu cầu khoa học cần đạt... thuật lưu giữ hoa lan rừng Bản hướng dẫn kỹ thuật nhân giống hoa lan rừng phương pháp in vitro Bản hướng dẫn kỹ thuật nhân giống hữu tính lan Hồng vũ phương 3.1 pháp in vitro Yêu cầu khoa học cần... KH&SXLNN QN Hội đồng Khoa học Sở NN&PTNT Quảng Ninh, nhóm Nghiệm thu đề tài cấp tỉnh Tháng 12/2013 Tháng 12/2013 thực đề tài Trung tâm KH&SXLNN QN Hội đồng Khoa học Sở Khoa học Cơng nghệ Quảng