Các XNCĐ bệnh dị ứng tự miễn huong ngo

Giảng viên: Ngô Thị Hương Bộ môn: Dị ứng – Miễn dịch lâm sàng Đại học Y Hà Nội  Hiểu nguyên lý xét nghiệm dị ứng miễn dịch  Nêu định, chống định xét nghiệm  Biết cách thực số xét nghiệm  Tổng quan bệnh dị ứng  Các xét nghiệm chẩn đoán bệnh dị ứng  Tổng quan bệnh tự miễn  Xét nghiệm phát tự kháng thể bệnh tự miễn    Dị ứng phản ứng mẫn gây hệ thống miễn dịch Dị ứng quy định kháng thể thông qua chế tế bào Dị ứng biểu nhiều tình trạng khác như: mày đay, phù mạch, viêm mũi dị ứng, hen phế quản, bệnh huyết thanh, viêm mạch dị ứng, viêm da atopy, viêm da tiếp xúc… Với nguyên nhân liên quan đến thuốc, thức ăn Phản ứng dị ứng xảy tất quan thường gặp da màng nhầy chúng hàng rào ngăn cách quan bên thể với môi trường bên Theo phân loại Gell Coombs dị ứng chia làm typ       Type I: kháng thể kết hợp với kháng nguyên để giải phóng chất hoạt hóa sinh lý Type II: kháng thể tự kết hợp với kháng nguyên bề mặt tế bào Type III: kháng thể kết hợp với kháng nguyên hòa tan để tạo thành phức hợp lắng đọng mô Type IV: mẫn tế bào T chịu trách nhiệm cho việc biểu triệu chứng dị ứng Typ I,II III quy định kháng thể, chúng gọi dị ứng nhanh Typ IV quy định tế bào, gọi dị ứng muộn Trung gian miễn dịch Liên quan bổ thể Cơ chế miễn dịch Ví dụ Typ I IgE Typ II IgG IgM Typ III IgG IgM Typ IV T cell Khơng Có Có Khơng Giải phóng chất trung gian từ tế bào Mast bạch cầu Kháng thể bổ thể gây ly giải tế bào Lắng đọng phức hợp kháng nguyên - kháng thể Giải phóng cytokines Sốc phản vệ, dị ứng thức ăn, hen… Tai biến truyền Bệnh huyết Viêm da tiếp xúc, máu, thiếu máu thanh, Lupus ban test lao tan máu tự đỏ hệ thống miễn Tế bào Mast - Cư trú hầu hết mô, thường gần với biểu mô bề mặt (da, hệ thống hô hấp đường tiêu hóa) - Tiền thân tạo tủy xương, lưu hành máu sau thâm nhập vào mơ nơi chúng trưởng thành hồn tồn - Vai trò việc tăng chống lại nọc độc động vật giúp thể vật chủ chống lại số ký sinh trùng định - Vai trò bệnh lý: + Là nơi tập trung chủ yếu Histamine chất trung gian (mediator) tham gia vào phản ứng dị ứng sốc phản vệ + Được hoạt hóa nhanh chóng (trong vòng vài phút) để giải phóng histamine hóa chất trung gian kháng nguyên nhận biết kháng thể IgE gắn bề mặt tế bào thông qua IgE receptor (FcεRI)  Mediator Ảnh hưởng sinh học Histamine - Tăng tính thấm thành mạch gây giãn mạch Gây co trơn đường thở Gây đau ngứa Ảnh hưởng đáp ứng miễn dịch chức số tế bào thần kinh Proteases (Tryptase, chymase, carboxypeptidase…) - Phân hủy số protein peptides, bao gồm chất có nọc độc động vật Quy định q trình tái tạo mơ Lipid mediators ( Leukotrienes, prosta glandins) - - Cytokines, chemokines, Peptide growth factor - Quy định trình di chuyển chức bạch cầu Tăng tính thấm thành mạch Tác động đến co thắt giãn nở mạch máu ( phụ thuộc vào loại chất trung gian) Co giãn trơn ( đường thở, dày ruột) Tăng tiết chất nhầy Có nhiều ảnh hưởng lên bạch cầu tế bào cấu tạo mô dẫn đến tăng cường ức chế trình viêm tái tạo mô  Test lẩy da (Skin prick test)  Test nội bì (Intradermal test)  Định lượng IgE đặc hiệu (Specific IgE quantification)  Định lượng Tryptase (Tryptase quantification)  Test áp (Patch test)  Chuyển dạng lympho bào (Lymphocyte transformation test) 10 Khái niệm: Thăm dò chức hơ hấp (spirometry) phương pháp thăm dò chức phổi cách đo thể tích khí lưu thơng mà bệnh nhân hít vào thở q trình đo thơng qua dụng cu đo Spirometer  43 Chỉ định:  Xác nhận rối loạn thơng khí: tắc nghẽn, hạn chế hỗn hợp  Đánh giá mức độ nghiêm trọng bệnh  Giúp phân biệt hen COPD  Phát hen, COPD đối tượng phơi nhiễm với yếu tố nguy (thuốc lá)  Cho phép thăm dò tiến triển bệnh  Giúp đánh giá hiệu điều trị Chống định:  Bệnh nhân có tình trạng bệnh tim mạch, nhồi máu tim ( vòng tháng), tắc mạch phổi  Xuất huyết CRNN  Tràn khí màng phổi  Bị chứng phình mạch bụng, ngực, não  Rối loạn cấp tính: buồn nơn nơn  Suy hơ hấp  Bệnh sa sút trí tuệ  Trẻ em tuổi 44 Viết tắt Tên Trị số VC Vital capacity (L): Dung tích sống > 80% FVC Forced vital capacity (L): Dung tích sống gắng sức > 80% FEV1 Forced Expiratory Volume during 1st second: Thể tích thở gắng sức giây đầu > 80% FEV1/VC Chỉ số Tiffeneau > 70% FEV1/FVC Chỉ số Gaensler > 70% FEF25-75 Forced expiratory flow during the middle half of FVC: lưu lượng thở khoảng dung tích sống gắng sức Peak expiratory flow: lưu lượng đỉnh Dung tích phổi tồn phần Thể tích khí cặn > 60% PEF TLC RV > 80% > 80% 45 46 Khái niệm:  Test phục hồi phế quản thăm dò sử dụng thuốc giãn phế quản dạng hít nhằm giúp đánh giá đáp ứng trơn đường thở bệnh nhân với thuốc giãn phế quản  Ở bệnh nhân có bệnh phổi tắc nghẽn mạn tính hen phế quản, đo chức hơ hấp phát có rối loạn thơng khí tắc nghẽn bệnh nhân yêu cầu làm test hồi phục phế quản Chỉ định  Đối với bệnh nhân sau đo chức hơ hấp có FEV1/FVC < 70% FEV1 giảm nghi ngờ rối loạn thơng khí tắc nghẽn khơng điển hình  Chẩn đốn xác định hen phế quản  Chẩn đoán phân biệt hen phế quản hay COPD 47 Các bước tiến hành:  Người bệnh yêu cầu hít 400mcg salbutamol (4 nhát xịt ventolin), sau ngồi chờ 15 phút  Để nâng cao hiệu thuốc hít, thường thuốc xịt vào buồng đệm người bệnh hít thuốc qua buồng đệm  Đo lại chức hô hấp sau 15 phút xịt thuốc giãn phế quản Đánh giá kết  Nếu FEV1 sau hít thuốc giãn phế quản 15 phút cải thiện 200ml 12%: người bệnh đánh giá có test hồi phục phế quản dương tính  có đáp ứng tốt với thuốc giãn phế quản  Trong trường hợp chức hơ hấp hồn tồn bình thường sau test hồi phục phế quản, người bệnh chẩn đoán hen phế quản 48  Bệnh tự miễn bệnh hệ miễn dịch bị sai sót q trình nhận biết mơ thể bình thường phá hủy chúng thể chúng chất ngoại lai cơng tác nhân bên ngồi  Ngun nhân bệnh tự miễn chưa giải thích rõ theo số nghiên cứu cho bệnh tự miễn khởi phát tiếp xúc với vi sinh vật yếu tố môi trường khác đặc biệt biến đổi gen  Bệnh tự miễn ảnh hưởng đến nhiều quan 57 Tự kháng thể Anti- DsDNA Anti –SSA/ Ro Kháng thể kháng nhân (ANA) Anti – SSB/La Anti – Centromere Anti – Jo1 Anti - RNP Anti - Smith (Sm) Anti – Scl 70 Anti - Histone Anti - CCP Bệnh thường gặp SLE SLE, Block tim bẩm sinh, Hội chứng Sjogren nguyên phát Hội chứng Sjogren nguyên phát Hội chứng CREST Viêm da Bệnh mô liên kết hỗn hợp SLE Xơ cứng bì SLE, lupus thuốc Viêm khớp dạng thấp Anti – neutrophil cytoplasmic antibody (ANCA) (Kháng thể kháng Viêm mạch hệ thống tương bào bạch cầu đa nhân trung tính) Anti-mitochondrial antibody (AMAM2) (kháng thể kháng ty lạp thể) Xơ gan mật nguyên phát Anti- Smooth muscle antibody (kháng thể kháng trơn) Anti-Liver Kidney Microsomal Antibodies (LKM) (Kháng thể kháng tiểu thể gan thận) Viêm gan tự miễn Anit – Liver Cytosol (LC) Kháng thể kháng tương bào gan Anti – Cardiolipin antibody Anti – β2 Glycoprotein antibody Hội chứng kháng Phospholipid  Hiện có số xét nghiệm phòng thí nghiệm để phát tự kháng thể ANA phương pháp miễn dịch huỳnh quang gián tiếp (IF) phương pháp miễn dịch gắn enzyme (ELISA) Trong IF xem tiêu chuẩn vàng để phát tự kháng thể ELISA lại sử dụng rổng rãi cách thực đơn giản thuận tiện thích hợp với việc thực thường quy  Một số phương pháp khác flowcytometry cơng nghệ nano giai đoạn thử nghiệm 59       Nguyên lý: Hỗn hợp kháng nguyên gắn vào đáy microwell Kháng thể có huyết bệnh nhân gắn vào kháng nguyên tương ứng Một enzyme (Horseradish peroxidase HRP) gắn với kháng thể kháng – kháng thể người tạo thành phức hợp Kháng nguyên – kháng thể - kháng kháng thể - enzyme Một chất thêm vào enzyme có mặt phức hợp thủy phân tạo thành chất có màu xanh da trời Một acid để dừng phản ứng thêm vào biến dung dịch màu thành màu vàng Mật độ quang học dung dịch màu vàng đo 450 nm Cường độ quang học màu trực tiếp nồng độ kháng thể có mặt huyết ban đầu 60 Cách thực hiện: 61  - - - Nguyên lý: Có phiến đồ phủ tế bào thẩm thấu cố định ( từ nhà sản xuất) sau huyết bệnh nhân thêm vào phiến đồ ủ thời gian rửa Nếu bệnh nhân có tự kháng thể, chúng gắn vào phiến đồ Sau đó, kháng thể thứ hai gắn huỳnh quang (từ nhà sản xuất) đượ thêm vào ủ rửa kháng thể không gắn Các tự kháng thể quan sát kính hiển vi huỳnh quang 62 ANA pattern Antigen Associated diseases Speckled ENA, RNP, Sm, SSA/Ro, SSB/La, Scl70, Jo-1, ribosomal-P SLE, Mixed CTD, SS, Primary Sjogren's syndrome, PM Homogenous dsDNA, Histones SLE, Drug induced SLE Peripheral (rim) RNP, Sm, SSA/Ro SLE, SS Nucleolar Anti-PM-Scl, antiRNA polymerase I-III, anti-U3-RNP, To RNP SS, PM Centromere CENP A-E Limited SS 63  Độ nhạy Độ đặc hiệu ELISA 90 – 97% 36 – 94% IF 80% 99% ELISA phát ANA có độ nhạy tốt độ đặc hiệu tốt, cho thấy ELISA thử nghiệm hiệu tiết kiệm chi phí thay IFA sàng lọc ban đầu ANA Copple SS, Sawitzke AD, Wilson AM, Tebo AE, Hill HR Enzyme-linked immunosorbent assay screening then indirect immunofluorescence confirmation of antinuclear antibodies: a statistical analysis Am J Clin Pathol 2011 May 64 65 ... nghiệm dị ứng miễn dịch  Nêu định, chống định xét nghiệm  Biết cách thực số xét nghiệm  Tổng quan bệnh dị ứng  Các xét nghiệm chẩn đoán bệnh dị ứng  Tổng quan bệnh tự miễn  Xét nghiệm phát tự. .. kháng thể bệnh tự miễn    Dị ứng phản ứng mẫn gây hệ thống miễn dịch Dị ứng quy định kháng thể thông qua chế tế bào Dị ứng biểu nhiều tình trạng khác như: mày đay, phù mạch, viêm mũi dị ứng, hen... định bệnh dị ứng quy định IgE bệnh nhân bị viêm kết mạc dị ứng, hen, mày đay, sốc phản vệ, dị ứng thuốc thứ ăn Nguyên lý:  11 Chỉ định:  Dựa vào bệnh sử triệu chứng lâm sàng nghi ngờ bệnh nhân