Nghiên cứu hiệu quả hai phương pháp đông phôi chậm và đông phôi thủy tinh hóa tt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI PHAN THỊ THANH LAN nghiªn cứu hiệu hai phơng pháp Đông phôi chậm ®«ng ph«i thđy tinh hãa Chun ngành : Sản phụ khoa Mã số : 62720131 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2020 Cơng trình hoàn thành tại: TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Viết Tiến Phản biện 1: PGS.TS Nguyễn Xuân Hợi Phản biện 2: PGS.TS Nguyễn Khang Sơn Phản biện 3: PGS.TS Nguyễn Duy Ánh Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp trường họp Trường Đại học Y Hà Nội Vào hồi … giờ…….ngày…… tháng…… năm 2020 Có thể tìm hiểu luận án thư viện:  Thư viện Quốc Gia  Thư viện Trường Đại học Y Hà Nội  Thư viện Bệnh viện Phụ sản Trung Ương CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU ĐÃ ĐƯỢC CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN NỘI DUNG LUẬN ÁN Phan Thị Thanh Lan (2015), “Ðánh giá chất lượng phôi sau rã đơng tỷ lệ có thai sau chuyển phơi ngày - ngày đông lạnh theo phương pháp thủy tinh hóa”, Tạp chí Nghiên cứu Y học, Số 95 (3), tr 15-23 Phan Thị Thanh Lan (2015), “Ðánh giá chất lượng phôi sau rã đông tỷ lệ có thai sau chuyển phơi ngày - ngày đơng lạnh theo phương pháp đơng lạnh chậm”, Tạp chí Y học thực hành, Số 979 (10), tr 2-6 ĐẶT VẤN ĐỀ Trữ lạnh kỹ thuật thiếu hỡ trợ sinh sản Đã có phương pháp trữ lạnh áp dụng là: Hạ nhiệt độ chậm thủy tinh hóa Sự khác biệt phương pháp tốc độ hạ nhiệt nồng độ chất bảo quản (CPA) Trong thời gian dài, dù có những hạn chế mặt hiệu hạ nhiệt độ chậm xem phương pháp trữ lạnh chuẩn mực ngành công nghiệp chăn nuôi IVF người.Trái lại, khoảng thời gian dài sau giới thiệu, thủy tinh hóa xem kỹ thuật mang tính thử nghiệm nhiều lý do.Trong đó, lo ngại độc tính có việc sử dụng chất bảo quản nồng độ cao phơi khó khăn việc thiết lập hệ thống làm lạnh với tốc độ cao những trở ngại Vì vậy, đánh giá hiệu quy trình trữ lạnh thơng qua tiêu chí:tỷ lệ phơi sống, tỷ lệ có thai, tỉ lệ sinh sống, yếu tố liên quan , tiên lượng kết có thai, theo dõi hình thành phát triển chiều cao, cân nặng, thể chất, trí tuệ, tâm vận động, bệnh tật từ sinh cho đến tuổi để đưa tiên lượng cho phát triển tiếp theo cho những tre sinh từ phương pháp cần thiết Do chúng tơi thực đề tài: “Nghiên cứu hiệu quả hai phương pháp đông phôi chậm và đông phôi thủy tinh hóa" với mục tiêu: Đánh giá đặc điểm phôi sau rã đông hai phương pháp đông phôi chậm đơng phơi thủy tinh hóa Đánh giá mợt số yếu tố liên quan tiên lượng hai phương pháp đông phôi chậm đông phôi thủy tinh hóa NHỮNG ĐĨNG GĨP MỚI CỦA LUẬN ÁN 1- Khẳng định hình thái phơi tốt có tương quan chặt số lượng sau mỗi bước kỹ thuật làm tăng khả có thai, có ý nghĩa thống kê 2- Tìm gía trị cụ thể để tiên lượng kết có thai số lượng chất lượng phôi trước đông, sau rã, trước chuyển 3- Theo dõi lâu dài sau tre đời cho phương pháp trữ lạnh: đơng chậm thủy tinh hóa CẤU TRÚC CỦA LUẬN ÁN Luận án bao gồm 148 trang, chương, 55 bảng, 16 biểu đồ, 13 hình, 145 tài liệu tham khảo với 12 tài liệu tiếng Việt 133 tài liệu tiếng nước Phần đặt vấn đề: 02 trang; chương 1: tổng quan tài liệu 41 trang; chương 2: đối tượng phương pháp nghiên cứu 13 trang; chương kết nghiên cứu 49 trang; chương bàn luận 39 trang; kết luận trang; khuyến nghị 01 trang; những đóng góp luận án; danh mục báo liên quan; phụ lục Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Những thay đởi bên tế bào q trình trữ lạnh Từ 15ºC đến -5ºC: hạt lipid, màng giàu lipid sợi vi ống bên tế bào bị tởn thương Enzym giảm tốc độ hoạt động Bọt khí mơi trường ni cấy chèn ép làm tởn thương đến cấu trúc tế bào.Hình thành tinh thể đá từ phân tử nước môi trường ngoại bào môi trường nội bào gây tổn thương học lên màng tế bào bào quan bên trong.Đây giai đoạn gây tổn thương lớn quan trọng Nhiệt độ giảm: số lượng phân tử nước chuyển thành tinh thể đá tăng, lượng nước thể lỏng giảm dần Hậu quả: nồng độ chất tan môi trường ngoại bào tăng, gây cân áp lực thẩm thấu giữa tế bào với môi trường.Nước từ bên tế bào chất bị rút ngồi kích thước tế bào trở nên co nhỏ Nếu tế bào bị co nhỏ mức, tổn thương màng lipoprotein tế bào xảy phục hồi Tăng nhiệt độ tiềm tàng hậu hình thành tinh thể đá Sự thay đổi nhiệt độ đột ngột làm ảnh hưởng đến cấu trúc chức tế bào sau rã đơng hay chí làm tế bào chết trình làm lạnh Từ -50ºC đến -150ºC, màng suốt bị đứt gãy Ở nhiệt độ lưu trữ mẫu -196ºC, tế bào bị ảnh hưởng bất lợi tồn quy trình trữ lạnh 1.2 Các biện pháp hạn chế tổn thương tế bào trữ lạnh 1.2.1 Sử dụng chất bảo quản lạnh (CPA) CPA khử nước bên tế bào, giúp hạn chế tạo thành tinh thể đá nội bào CPA hạn chế gia tăng nồng độ chất hoà tan CPA gắn lên màng bào tương để bảo vệ tế bào phân tử nước ngoại bào bắt đầu chuyễn sang dạng tinh thể Hai dạng CPA thường sử dụng đơng lạnh CPA có khả thẩm thấu CPA khơng có khả thẩm thấu qua màng tế bào Hầu hết CPA có khả gây độc tính Độc tính CPA tỉ lệ thuận với nồng độ thời gian tiếp xúc, nhiệt độ sinh lý 1.2.2 Kiểm sốt tốc độ làm lạnh rã đơng 1.2.3 Trang thiết bị dụng cụ 1.3 Các phương pháp trữ lạnh 1.3.1 Hạ nhiệt độ chậm (Slow - freezing) 1.3.1.2 Ưu nhược điểm hạ nhiệt độ chậm: - Ưu điểm:Tính an tồn cao thiết lập dựa cân tốc độ làm lạnh nồng độ CPA Nồng độ CPA sử dụng thấp (1-1,5mol/l) chỉ kết hợp chất có khả chất khơng có khả thấm qua màng tế bào nên tính độc tế bào thấp - Nhược điểm:Do nồng độ CPA sử dụng khơng cao, nên tinh thể đá nội bào tạo trình hạ nhiệt độ Đây nguyên nhân làm cho tỉ lệ sống giao tử phôi sau đông chậm không cao.Chi phí để trang bị hệ thống áy hạ nhiệt cao.Thời gian thực cho lần đơng lạnh nỗn phơi thực tế dài (trung bình 1,5 -2 giờ) 1.3.2 Thủy tinh hóa (vitrification) - Ưu điểm:Khơng hình thành tinh thể đá nội, ngoại bào Rút ngắn thời gian cho chu trình đơng lạnh - rã đơng.Tiết kiệm chi phí đầu tư ban đầu - Nhược điểm:Lo ngại độc tính có việc sử dụng CPA nồng độ cao phơi Khó khăn việc thiết lập hệ thống làm lạnh với tốc độ cao những trở ngại Việc lây nhiễm chéo giữa mẫu trình lưu trữ ghi nhận 1.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến kết chuyển phôi trữ lạnh 1.4.1 Các tác nhân ảnh hưởng đến hiệu quy trình trữ lạnh 1.4.2.Tuổi người vợ 1.4.3 Nguyên nhân vô sinh 1.4.4 Kỹ thuật hỗ trợ 1.4.5 Thời gian bảo quản phôi 1.4.6 Tuổi phôi trước đông 1.4.7 Số phôi chuyển vào buồng tử cung 1.4.8 Chất lượng phôi chuyển vào buồng tử cung 1.4.9 Ảnh hưởng kỹ thuật chuyển phôi 1.4.10 Ảnh hưởng nội mạc tử cung (NMTC) tới kết chuyển phôi đông lạnh (FET) 1.4.11 Ảnh hưởng kỹ thuật hỗ trợ phơi màng Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu: - Đối tượng 1: bệnh nhân rã đông phôi ngày 2, ngày trữ theo phương pháp đông lạnh chậm - Đối tượng 2: bệnh nhân rã đông phôi ngày 2, ngày trữ theo phương pháp thủy tinh hóa 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn: Đối tượng 1: BN còn dư phôi đông chậm (không hạn chế tuổi chuyển phôi, không hạn chế số lần IVF, không hạn chế nguyên nhân vô sinh, bao gồm xin phôi, xin trứng), rã đông chuyển phôi - Đối tượng 2: BN trữ phôi thủy tinh hóa (khơng hạn chế t̉i chuyển phơi, khơng hạn chế số lần IVF, không hạn chế nguyên nhân vô sinh, bao gồm xin phôi, xin trứng), sau rã đơng chuyển phơi 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ: Mẹ mắc bệnh toàn thân 2.2 Địa điểm nghiên cứu: Trung tâm Hỗ trợ sinh sản Quốc gia, Bệnh viện Phụ sản Trung ương 2.3 Thời gian nghiên cứu: từ tháng 1/2013 đến tháng 4/2019 2.4 Phương pháp nghiên cứu:Mô tả theo dõi dọc 2.5 Cỡ mẫu nghiên cứu:Cỡ mẫu tính theo cơng thức nghiên cứu mơ tả theo dõi dọc [103] n = Cỡ mẫu nghiên cứu =1,96 với Hệ số tin cậy 95% (α= 0,05) d =sai số tuyệt đối, chọn d = 0,09 p = Tỷ lệ có thai Với nhóm đơng phơi chậm:tỷ lệ có thai theo nghiên cứu El- Toukhy – 2004 11,3% [79] Với nhóm thuỷ tinh hố:tỷ lệ có thai theo nghiên cứu Hán Mạnh Cường – 2010 30,1% [91] Thay vào cơng thức tính : Cỡ mẫu tối thiểu 48 bệnh nhân cho nhóm đơng chậm 99 bệnh nhân cho nhóm thủy tinh hóa Trên thực tế nghiên cứu thực 220 bệnh nhân nhóm đơng phơi chậm ( với 58 bệnh nhân đông phôi ngày 162 bệnh nhân đông phôi ngày 2) 324 bệnh nhân nhóm thuỷ tinh hố (với 162 bệnh nhân đông phôi ngày 162 bệnh nhân đông phôi ngày 2) 2.7 Sơ đồ nghiên cứu 2.8 Các tiêu nghiên cứu 2.8.1 Phôi: Số lượng phôi trước đông, sau rã, trước chuyển loại tốt, trung bình, xấu.Tỷ lệ phôi sống sau rã đông Tỷ lệ phôi rã đơng thối hố hồn tồn Tỷ lệ phơi sống nguyên vẹn 100% Tỷ lệ phôi phân chia tiếp 2.8.2 Một số yếu tố liên quan đến tỷ lệ có thai: Tuổi mẹ, số lượng phôi chuyển, chất lượng phôi, độ dày niêm mạc tử cung, điểm chuyển phôi 2.8.3 Thai: tỷ lệ có thai, tỷ lệ sinh sống, tỷ lệ thai ngừng tiến triển 2.8.4 Diễn biến thai kỳ.: Có thai sinh hố, có thai lâm sàng, thai sảy, thai lưu, đe non 2.8.5 Trí tuệ tâm vận động từ sinh đến tre tuổi - Cân nặng, chiều cao, phát triển trí tuệ, tâm vận động lúc tháng, tháng, tháng, 12 tháng, tuổi, tuổi, tuổi 2.9 Xử lý phân tích sớ liệu: Thu thập theo phiếu điều tra, xử lý số liệu theo SPSS 17.0 Vẽ biểu đồ phần mềm Excel 2010 2.10 Khống chế sai số yếu tố nhiễu 2.11 Vấn đề đạo đức nghiên cứu - Đề tài hội đồng khoa học hội đồng y đức thông qua - Thông tin cá nhân bảo đảm giữ bí mật Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Đặc điểm phôi trước sau rã đông phương pháp 3.1.3 Chất lượng phôi trước sau rã đông Bảng 3.14 Chất lượng phơi sau rã trước chuyển tính theo tỷ lệ Đơng lạnh chậm Thủy tinh hóa Nhóm Nhóm Nhóm Nhóm Tỷ lệ phơi phơi phơi phơi P P ngày ngày (Ia) (Ib) (IIa) (IIb) Tỷ lệ sống 460/736 143/253 552/700 391/556 p0,05 36 22,2 35 21,6 sàng Sảy thai 4,9 4,9 Thai lưu 0 3,7 Đe sống 28 17,3 21 13 p>0,05 Khơng có 126 77,8 125 77,2 thai 15 Tởng 162 100 162 100 Bảng 3.44 Tỷ lệ có thai và diễn tiến thai kỳ của phương pháp Đông chậm n % 32/220=14, Kết Có thai Thai ngừng tiến triển Đe sống Đe non Đa thai Cân nặng trung bình sinh T̉i thai trung bình sinh 7/220=3,2 25/220=11, 2/220=0,91 3/220= 1,4 Thủy tinh hóa n % 73/324=22, 73 24/324=17, 24 49/324=15, 49 7/324=2,2 6/324= 1,9 2936 ± 603,4 2900 ± 417,3 38,7 ± 38 ± 1,8 3.2.3.2 .Kết theo dõi tre sau sinh đến tuổi phương pháp Bảng 3.45 Cân nặng trung bình thơ trẻ sơ sinh trai, gái tương ứngvới tuổi thai 28-42 tuần Đơng chậm (Cân nặng trung bình gram) T̉i thai (tuần Trai ) (Ia) n= 15 32 33 35 36 2700 Gái (Ib) n= 13 1700 2000 Thủy tinh hóa (Cân nặng trung bình gram) Trai Gái (IIa) (IIb) n= n= 29 26 2200 2100 1900 2450 2523 2400 Trẻ sinh tư nhiên (Cân nặng trung bình gram)* Gái Trai (IIIb (IIIa) ) 1717 1907 2255 2456 1699 1893 2201 2428 p P Ia-IIIa>0,05 P IIa-IIIa>0,05 P Ib-IIIb>0,05 P IIb-IIIb>0,05 16 37 3054 2791 2952 2865 2841 2726 38 3189 3054 3215 3012 3084 3023 39 3268 3200 3489 3109 3284 3119 40 3353 3276 3134 3011 3342 3199 3.2.3.2 .Kết theo dõi tre sau sinh đến tuổi phương pháp Bảng 3.46 Cân nặng, chiều cao trung bình thơ trẻ sơ trai, gái tương ứng từ tháng đến tuổi Tuổi Đông chậm Thủy tinh hóa (Cân nặng – chiều (Cân nặng – chiều cao trung bình) cao trung bình) Trai (Ia) Gái (Ib) Trai (IIa) n=14 n=12 n=27 tháng 6,6kg62,3cm tháng 7,9kg68,3cm tháng 8,8kg71,5cm 12 9,5kgtháng 74,5cm tuổi 12,1kg86,3cm tuổi 14,3kg95,7cm tuổi 15,9kg100,2cm 6,0kg60,8cm 7,2kg65,1cm 8,3kg71,3cm 9,1kg75,2cm 11,7kg87,3cm 13,8kg94,8cm 15,4kg99,7cm 6,5kg60,8cm 7,8kg68,1cm 8,7kg71,1cm 9,7kg76cm 12,0kg86,9cm 14,5kg95,9cm 16,0kg101,1cm Trẻ sinh tư nhiên (Cân nặng – chiều cao trung bìnhs)* Gái (IIb) n=24 Trai (IIIa) Gái (IIIb) 6,1kg60,2cm 7,4kg66,1cm 8,0kg69,6cm 9,0kg74,8cm 11,7kg86,9cm 14,1kg96,3cm 15,6kg101,8c m 6,4kg61,4cm 7,9kg67,6cm 8,9kg72,0cm 9,6kg75,7cm 12,2kg87,8cm 14,3kg96,1cm 16,3kg103,3c m 5,8kg59,8cm 7,3kg65,7cm 8,2kg70,1cm 8,9kg74,0cm 11,5kg86,4cm 13,9kg95,1cm 16,1kg102,7c m P pIa-IIIa>0,05 pIIa-IIIa>0,05 pIb-IIIb>0,05 pIIb-IIIb>0,05 3.2.3.2.3 Phát triển trí tuệ, tâm vận động, bệnh lý tre sinh sau chuyển phôi trữ lạnh (Phụ lục 6) Bảng 3.47 Phát triển trí tuệ, tâm vận đợng, bệnh lý ở trẻ sinh sau chuyển phôi trữ lạnh 17 Số tre Mất dấu Bình thường Bệnh lý di truyền, dị tật bẩm sinh Đông chậm (n=28) N Tỷ lệ 2/28(7,1%) 26/26(100 %) Thủy tinh hóa (n=55) N Tỷ lệ 3/55(5,5%) 49/52(94,2 49 %) 0/26 (0%) 3/52 (5,8%) Chương 4: BÀN LUẬN 4.2 Bàn luận về đặc điểm phôi trước và sau đông của phương pháp 4.2.3.Đánh giá chất lượng phôi sau rã trước chuyển phương pháp trữ lạnh 4.2.3.2 Đánh giá chất lượng phôi sau rã trước chuyển tính theo tỷ lệ sống * So sánh giữa nhóm phơi ngày nhóm phơi ngày 3: - Tỷ lệ sống, tỷ lệ sống nguyên vẹn, tỷ lệ phơi phân chia tiếp nhóm phơi ngày cao có ý nghĩa thống kê so vói nhóm phơi ngày Đồng thời, tỷ lệ phơi thối hố hồn tồn nhóm phơi ngày cao hẳn nhóm phơi ngày với p < 0.05 (Bảng 3.14) Kết phù hợp với nhiều nghiên cứu Việt Nam thế giới Các nghiên cứu cho số lượng phôi bào tăng hủy hoại tế bào nhiều tăng diện tích tiếp xúc bề mặt, dù áp dụng phương pháp trữ đông Chất lượng phôi sau rã đông đánh giá sau rã đông giờ, phản ánh ảnh hưởng trình trữ lạnh – rã đông lên phôi Trong nghiên cứu chúng tơi ghi nhận q trình trữ lạnh – rã đơng làm thay đởi cấu trúc, hình thái số lượng phôi so với trước trữ lạnh * Đánh giá so sánh giữa phương pháp trữ lạnh - Tỷ lệ sống, tỷ lệ sống nguyên vẹn, tỷ lệ phôi phân chia tiếp phương pháp thủy tinh hóa có xu hướng cao phương pháp đơng chậm.Tỷ lệ phơi thối hóa hồn tồn phương pháp thủy tinh hóa có xu hướng thấp phương pháp đông chậm.Kết nghiên cứu 18 trùng hợp với kết nghiên cứu tác giả Debrock S- 2015, Zhu HY-2015 4.3.Bàn luận một số yếu tố liên quan tiên lượng phương pháp trữ lạnh 4.3.1 Đặc điểm bệnh nhân và mối liên quan đến kết quả có thai 4.3.1.1 Tuổi Tuổi trung bình BN chuyển phơi đơng lạnh từ 33.1 đến 33.9 (Bảng 3.18) Kết nghiên cứu cho thấy phần lớn cặp vợ chồng mong muốn tìm kiếm hội có độ tuổi sinh đe từ 18 đến 35 Quyết định nhận vào nghiên cứu trường hợp bệnh nhân lớn tuổi chuyển phơi đơng lạnh, có xin trứng, đưa tới kết khơng thấy có khác biệt tỷ lệ có thai giữa nhóm t̉i 35 35 (p=0.068) [Bảng 3.19] Kết ủng hộ lập luận tỷ lệ thành công giảm phụ nữ 35 tuổi chủ yếu giảm chất lượng số lượng trứng có kích thích buồng trứng Ở phụ nữ lớn tuổi, phát triển NMTC thích hợp cho làm tở phát triển phơi hồn tồn điều khiển nội tiết tố ngoại sinh Ở đối tượng chuyển phơi đơng chậm thủy tinh hóa, khơng có khác biệt so sánh độ t̉i trung bình giữa nhóm BN chuyển phơi ngày ngày 4.3.1.2 Độ dày NMTC Trong nghiên cứu này, để xác định điểm cắt giá trị độ dày NMTC chu kỳ chuyển phôi đông lạnh thành công bao nhiêu, toàn BN chuẩn bị NMTC nội tiết ngoại sinh chuyển phôi Theo kết nghiên cứu, độ dày NMTC có giá trị tiên lượng tốt kết có thai diện tích đường cong ROC: 0,718 – p < 0,0001 Điểm cắt độ dày NMTC có giá trị chẩn đốn 8.05mm, có độ nhạy 77.9%, độ đặc hiệu 65,2% [Biểu đồ 3.1] Tại điểm cắt = 14.15mm, độ đặc hiệu 100% Nghĩa khơng có có thai mà độ dày NMTC > 14mm [Bảng 3.21] Kết tương tự Junwei Yang (2018), Zhang T (2018), Bu-Z (2016)thấy tỷ lệ có thai giảm NMTC 14mm Khi đánh giá tỷ suất chênh kết có thai giữa nhóm độ dày NMTC nhận thấy: Nếu NMTC khoảng >8- 14mm, làm tăng khả có thai lên 1,161 lần có ý nghĩa thống kê (p14mm, làm giảm khả có thai xuống còn 36,3% có ý nghĩa thống kê (p 8mm = điểm cho niêm mạc Vậy kỹ thuật chuyển phơi cần điểm, tức để có thai Catheter sau chuyển phơi khơng có máu, khơng sót phơi khơng nong cổ tử cung chuyển phôi Kết đồng thuận với tác giả Nguyễn Xuân Huy, Hán Mạnh Cường (2010), Candido Tomas (2002), Hassan N Sallam (2004), Wenhao Shi (2013 20 4.3.2.4 Bàn giá trị số lượng phôi tốt (độ 3) ở từng giai đoạn kỹ thuật tiên lượng kết có thai 4.3.2.4.1.Bàn giá trị số lượng phôi tốt (độ 3) trước đơng tiên lượng kết có thai * Cùng phương pháp thủy tinh hóa, so sánh nhóm phôi ngày ngày nhận thấy: Để tiên lượng có thai: số lượng phơi tốt trước đơng nhóm phơi ngày cần (≥ phơi), nhiều nhóm phơi ngày cần (≥1 phơi) Để tiên đốn khả có thai cộng dồn 100%: số lượng phơi tốt trước đơng nhóm phơi ngày cần (≥11 phơi), nhóm phơi ngày cần (≥17 phơi) * Kết luận chung giá trị số lượng phơi tốt trước đơng tiên lượng kết có thai phương pháp là: Số lượng phôi tốt trước đơng nhiều khả có thai cao Để tiên lượng có thai: số lượng phơi tốt ngày trước đông phương pháp đông chậm cần (≥2 phơi), nhiều phương pháp thủy tinh hóa cần (≥1 phơi) Để tiên đốn khả có thai cộng dồn 100%: số lượng phôi tốt trước đông phương pháp đơng chậm cần (≥15 phơi), phương pháp thủy tinh hóa cần (≥17 phơi) 4.3.2.4.2 Bàn giá trị số lượng phôi tốt (độ 3) sau rã tiên lượng kết có thai * Cùng phương pháp thủy tinh hóa, sau rã, so sánh nhóm phôi ngày ngày nhận thấy: Để tiên lượng có thai: nhóm phơi ngày cần (≥2 phơi), nhiều nhóm phơi ngày cần(≥1 phơi) Nếu sau rã có phơi tốt, giá trị chẩn đốn dương tính phơi ngày (70%) cao phôi ngày (66,7%) * Kết luận chung giá trị số lượng phôi tốt sau rã tiên lượng kết có thai phương pháp: Số lượng phơi tốt sau rã nhiều khả có thai cao Để tiên lượng có thai: số lượng phôi tốt sau rã phương pháp nhau, cần phôi tốt 4.3.2.4.3 Bàn giá trị số lượng phôi tốt (độ 3) trước chuyển tiên lượng kết có thai * Như vậy, phương pháp thủy tinh hóa, trước chuyển, so sánh nhóm phơi ngày ngày nhận thấy: Để tiên lượng có thai: nhóm phơi ngày cần ≥2 phơi tốt, nhiều nhóm phơi ngày cần ≥1 phôi tốt) * Kết luận chung giá trị số lượng phôi tốt trước chuyển 21 tiên lượng kết có thai phương pháp: Số lượng phơi tốt trước chuyển nhiều khả có thai cao Để tiên lượng có thai, số lượng phôi tốt trước chuyển phương pháp nhau, cần ≥1 phôi tốt 4.3.3 Bàn luận về kết và tiên lượng của phương pháp trữ lạnh 4.3.3.1 Kết có thai diễn tiến thai kỳ sau chuyển phơi - So sánh giữa nhóm phôi ngày ngày 3, hai phương pháp đơng, thấy tỷ lệ có thai tỷ lệ đe sống, khơng có khác biệt (bảng 3.43, bảng 3.44), trung bình số phơi tốt (độ 3) trước đơng/ chu kỳ FET hai nhóm (bảng 3.8) - Đánh giá tỷ lệ có thai, tỷ lệ đe non tỷ lệ thai ngừng tiến triển thấy phương pháp thủy tinh hóa có xu hướng cao phương pháp đông chậm Tuy nhiên, chung tỷ lệ đe sống phương pháp thủy tinh hóa có xu hướng cao phương pháp đơng chậm Nhiều tác giả khác đưa kết tương tự: Debrock S – 2015, Rienzi L- 2017, khác với nghiên cứu hồi cứu Zhu HY – 2015 4.3.3.2 Phát triển thể chất tâm vận động ở trẻ sinh từ phương pháp trữ lạnh Trong nghiên cứu này, theo dõi phát triển thể chất tâm vận động tre chuyển phôi trữ lạnh từ sau sinh đến tuổi, thông qua dữ liệu tăng trưởng, cân nặng, chiều cao, thời điểm phát triển tâm vận động so sánh với biểu đồ tổ chức y tế thế giới thấy khơng có khác biệt giữa phương pháp trữ lạnh khơng có khác biệt với tre sinh từ thụ thai tự nhiên (bảng 3.45, bảng 3.46) Theo dõi từ lúc tre sinh đến lúc t̉i: Ở nhóm đơng chậm khơng ghi nhận trường hợp dị tật bẩm sinh Ở nhóm thủy tinh hóa, ghi nhận tre có dị tật bẩm sinh, trường hợp tử vong, chiếm tỷ lệ 3/52 (5,8%) Trường hợp tứ chứng Fallot, có phơi xin từ phụ nữ 36 t̉i, khó xác định bất thường tạo từ trứng bất thường phụ nữ lớn tuổi hay đột biến xuất trình tiêm tinh trùng vào bào tương nỗn (ICSI), hay q trình đơng phơi Trường hợp tre suy giảm thị lực bẩm sinh có bố mắc tật khúc xạ mắt Do vậy, tìm hiểu chế bệnh sinh xác trường hợp dị tật bẩm sinh cần thận trọng nghiên cứu số lượng mẫu lớn Hơn nữa, nghiên cứu nghiên cứu mô tả theo dõi dọc, với đặc trưng chỉ 22 hình thành giả thút thơng qua kết quan sát, hồn tồn khơng thể kiểm định giả thút Do đó, để kết luận dị tật có liên quan tới phương pháp đông hay không cần đánh giá sâu nghiên cứu khác với cỡ mẫu đủ lớn Ngồi ra, trường hợp này, chất lượng phơi trước chuyển có từ đến phơi tốt Do vậy, nghiên cứu chỉ đánh giá chất lượng phôi trước chuyển thơng qua hình thái, mà chưa có sinh thiết phôi để đánh giá di truyền gen, nhiễm sắc thể, nên khơng loại trừ hết nguy có dị tật, bệnh lý bẩm sinh liên quan Kết nghiên cứu này, với nhiều kết nghiên cứu khác cho thấy ưu việt phương pháp trữ lạnh thủy tinh hóa so với phương pháp đông chậm tỷ lệ phôi sống, tỷ lệ có thai tỷ lệ đe sống rõ ràng Tuy nhiên, cần phải nghiên cứu sâu tính an tồn cho những tre sinh từ thủy tinh hóa, tìm kiếm thêm những phương pháp trữ lạnh hiệu nữa KẾT LUẬN Đặc điểm phôi sau rã đông phương pháp đơng chậm thủy tinh hóa * Với phương pháp đông chậm - Tỷ lệ phôi sống, tỷ lệ phôi sống nguyên vẹn sau rã tỷ lệ phôi phân chia tiếp nhóm ngày lần lượt là: (62,5%, 39,3% 39,6%) cao có ý nghĩa thống kê so với nhóm ngày (56,5%, 33,2% 37,1%) - Tỷ lệ phơi thối hố hồn tồn nhóm ngày (35,7%) thấp có ý nghĩa thống kê so với nhóm ngày (41,9%) số chu kỳ khơng có phơi chuyển tồn số phơi trữ bị thoái hoá là: 13,2% * Với phương pháp thủy tinh hóa - Tỷ lệ phôi sống, tỷ lệ phôi sống nguyên vẹn sau rã tỷ lệ phôi phân chia tiếp sau thuỷ tinh hố nhóm ngày lần lượt là: (78,9%, 67,3% 56,7%) cao có ý nghĩa thống kê so với nhóm ngày (70,3%, 68,9% 51,9%) - Tỷ lệ phơi thối hố hồn tồn nhóm ngày 25,6% thấp có ý nghĩa thống kê so với nhóm ngày 3(31,1%) số chu kỳ khơng có phơi chuyển tồn số phơi trữ bị thối hố là: 8,3% * Tỷ lệ phơi sống phương pháp thủy tinh hóa có xu hướng cao 23 phương pháp đơng chậm có ý nghĩa thống kê * Hình thái phơi tốt có khả sống, phân chia tiếp tốt có tương quan số lượng qua giai đoạn ni cấy Phơi trung bình phơi xấu khơng có tương quan sau mỗi bước kỹ thuật Một số yếu tố liên quan tiên lượng phương pháp đơng chậm phơi thủy tinh hóa 2.1 Mợt số yếu tố liên quan đến kết quả có thai và giá trị tiên lượng sau chuyển phôi đông chậm và phơi thủy tinh hóa *Hình thái phơi tốt quan sát giai đoạn nuôi cấy làm tăng khả có thai, có ý nghĩa thống kê Trừ nhóm phơi ngày 3, phương pháp đơng chậm, tăng khơng có ý nghĩa thống kê.Phơi trung bình phơi xấu khơng làm tăng khả có thai * Tỷ lệ có thai tương quan chặt với số phôi chuyển, độ dày niêm mạc tử cung điểm chuyển phơi - Giá trị tiên lượng có thai của: + Số phôi chuyển chu kỳ ≥ phôi + Độ dày niêm mạc tử cung >8,05mm