Từ kết quả nghiên cứu toàn quốc về đột biến gen globin, chúng tôi bước đầu nghiên cứu về đặc điểm một số đột biến gen beta globin hiếm gặp ở người Việt Nam. Mô tả cắt ngang. 12.555 mẫu máu ngoại vi chống đông bằng EDTA được tách chiết ADN và phân tích 9 đột biến gen beta globin bằng phương pháp PCR. 58 mẫu âm tính với PCR được tiếp tục chuẩn bị thư viện theo và giải trình tự gen trên hệ thống MiSeq (Illumina, Mỹ) để tìm các đột biến hiếm gặp.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 KHẢO SÁT MỘT SỐ ĐỘT BIẾN GEN BETA GLOBIN HIẾM GẶP Ở NGƯỜI VIỆT NAM BẰNG PHƯƠNG PHÁP NGS Nguyễn Hồng Sơn*, Trần Tuấn Anh*, Nguyễn Lê Anh*, Nguyễn Thùy Trang*, Bạch Quốc Khánh*, Dương Quốc Chính* TĨM TẮT Mục tiêu: Từ kết nghiên cứu toàn quốc đột biến gen globin, bước đầu nghiên cứu đặc điểm số đột biến gen beta globin gặp người Việt Nam Đối tượng: Tổng số 58 mẫu máu ngoại vi người nghi ngờ mang gen bệnh beta thalassemia với tiêu chí sau: hồng cầu nhỏ (MCV < 80), nhược sắc (MCH < 28), tỷ lệ huyết sắc tố A2 tăng (HbA2 > 3,5%) có kết PCR âm tính với đột biến phổ biến gen beta globin Phương pháp nghiên cứu: Mô tả cắt ngang 12.555 mẫu máu ngoại vi chống đơng EDTA tách chiết ADN phân tích đột biến gen beta globin phương pháp PCR 58 mẫu âm tính với PCR tiếp tục chuẩn bị thư viện theo giải trình tự gen hệ thống MiSeq (Illumina, Mỹ) để tìm đột biến gặp Kết quả: Kết phân tích đặc điểm đột biến 58 mẫu nghiên cứu phương pháp giải trình tự tồn gen beta globin (HBB) phương pháp NGS cho thấy tỷ lệ phát đột biến cao (chiếm 53%) Kiểu hình β0 / β chiếm tỷ lệ 71%, đột biến codon 26 (G>T) tạo ba kết thúc chiếm tỷ lệ cao (51,6%) tổng số gen đột biến phát Đột biến codon 15 (G>A) tạo thành ba kết thúc với kiểu hình β0 tương tự codon26 (G>T) Các đột biến -29 (A>G), -30 (T>C) xảy vùng promoter gen beta globin, gây rối loạn trình phiên mã Đột biến IVS-II-848 (C>G), thay C vị trí 848 intron làm giảm hiệu việc lắp ráp mARN Bên cạnh chúng tơi phát biến thể huyết sắc tố (Hope) gặp đột biến gen beta globin Kết luận: Chúng phát đột biến gen beta globin gặp, mở rộng liệu đột biến gen beta globin gây bệnh beta thalassemia Việt Nam; phát biến thể huyết sắc tố bất thường (Hope) - biến thể gặp giới, Việt Nam chưa có báo cáo biến thể Đồng thời chúng tơi thấy vai trò, giá trị việc ứng dụng phương pháp giải trình tự gen NGS việc phát đột biến đột biến Từ nhìn mặt thiếu hụt dẫn đến nhầm lẫn, sai sót phương pháp điện di huyết sắc tố Còn nhiều đột biến gen beta globin mà chúng tơi chưa tìm ra, chúng tơi tin nghiên cứu góp phần việc phát đột biến gen mới, đột biến gen gặp Từ khóa: beta thalassemia, alen đột biến, kiểu gen β-globin ABSTRACT CHARACTERISTICS OF RARE BETA GLOBIN GENE MUTATIONS IN VIETNAM BY NGS METHOD Nguyen Hong Son, Tran Tuan Anh, Nguyen Le Anh, Nguyen Thuy Trang, Bach Quoc Khanh, Le Xuan Hai, Duong Quoc Chinh * Ho Chi Minh City Journal of Medicine * Supplement of Vol 23 – No - 2019: 400 - 408 Objective: From the results of a national study on thalassemia gene mutations, we initially studied the characteristics of some rare beta globin mutations in Vietnam **Viện Huyết học – Truyền máu Trung ương Tác giả liên lạc: TS Dương Quốc Chính ĐT: 0962168505 400 Email: chinh.duong@nihbt.org.vn Hội Nghị Khoa Học BV Truyền máu Huyết học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học Methods: A total of 58 peripheral blood samples of people carrying beta thalassemia gene with the following criteria: Microcytosis (MCV < 80), hypochromic (MCH < 28), percentage of hemoglobin A2 increased (HbA2 > 3,5 %), negative for common mutations in the beta globin gene Cross-sectional description 12,555 peripheral blood samples were subjected to extract DNA and performed PCR analysis for common mutations of beta globin gene 58 samples with PCR negative result were further analized with next-generation sequencing, using Illumina MiSeq sequencer, for rare mutation of beta globin gene Results: The mutant characteristics of 58 subjects analysed by NGS sequencing which showed that the rate of mutant detection is quite high (53%) The phenotype β0 / β accounts for 71%, in which mutation codon 26 (G>T) creates a stop codon with the highest percentage (51.6%) of the total number of mutated genes detected The codon 15 mutation (G>A) also forms a stop codon with a phenotype β0 similar to codon26 (G>T) Rare mutations -29 (A>G), -30 (T>C) occur in the promoter region of the β – globin gene, disrupting the transcription process Mutation IVS-II-848 (C>G), replacement of C at position 848 on intron to decreases the efficiency of splicing mRNA In addition, we also found a rare hemoglobin variant (Hope) due to mutations in beta globin gene Conclusion: We found the rare beta globin gene mutations and extended the beta globin mutation data in Vietnam; discovered the variant of abnormal hemoglobin (Hope) - a very rare variant in the world, this variant has not been reported in Vietnam before At the same time, we also found the role and value of the application of NGS sequencing method in diagnosing the rare and new mutations Since then, we found several shortcomings that lead to confusion and errors of hemoglobin electrophoresis There are many mutations of the beta globin gene that we have not found, we believe that this study will contributed importantly to establish new gene mutations and rare gene mutations data Keywords: beta thalassemia, mutant alleles, β-globin genotype tố bất thường chuỗi beta globin ĐẶT VẤN ĐỀ ghi nhận(24) Ngày nay, tiến Thalassemia nhóm bệnh hemoglobin di việc phát xác định bất thường truyền thiếu hụt tổng hợp hay nhiều thơng qua điện di huyết sắc tố giải trình tự mạch polypeptid globin DNA, biến thể hiếm, đột biến gen hemoglobin Tùy theo nguyên nhân đột biến xác định Chính vậy, để góp phần cho gen alpha (α) hay gen beta (β) mà người ta cơng tác phòng bệnh chúng tơi thực đề tài chia thành α β thalassemia(14,17) Khác với ‘‘Khảo sát số đột biến gen beta globin bệnh alpha Thalassemia chủ yếu đột gặp người Việt Nam phương biến đoạn, beta Thalassemia hình thành pháp NGS’’ chủ yếu đơt biến điểm Năm 2007, có khoảng 200 đột biến mơ tả; đến nay, có 900 đột biến β-globin xác định toàn giới (cập nhập http://globin.cse.psu.edu) Sự đa dạng đột biến đặt vấn đề lớn chương trình dự phòng, chống sinh đứa trẻ bị bệnh thalassemia Ở giới có nhiều báo, nghiên cứu đột biến gen gặp phát đột biến mới(4,6,13,20) Tuy nhiên nghiên cứu, báo cáo vấn đề Việt Nam Bên cạnh đó, có nhiều biến thể huyết sắc ĐỐITƯỢNG- PHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu chọn lọc dựa nghiên cứu cấp quốc gia Thalassemia, thu thập từ 23000 mẫu máu người dân đại diện cho 53 dận tộc Việt Nam phân bố khắp tỉnh thành nước Các mẫu bệnh phẩm trải qua vòng sàng lọc Thalassemia cộng đồng, xét nghiệm bản: tổng phân tích tế bào máu; định lượng sắt huyết thanh, Feritin điện di huyết sắc tố; Các Hội Nghị Khoa Học BV Truyền máu Huyết học 401 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 mẫu có hồng cầu nhỏ (MCVT) [GAG>TAG] (27,1%) codon 15 (G>A) [TGG >TAG] (10,2%) gây đột biến vô nghĩa chiếm tỷ lệ cao Bên cạnh đó, chúng tơi phát đối tượng giải trình tự gen cho kết Bảng Tỷ lệ loại alen đột biến nghiên cứu Stt Đột biến HBB:c.-79A>G HBB:c.-80T>C HBB:c.47G>A HBB:c.79G>T HBB:c.410G>A HBB:c.316-3C>G Âm tính Tổng Tên đột biến -29 (A>G) -30 (T>C) cd 15 (G>A) cd 26 (G>T) Hb Hope IVS-II-848 (C>G) Nghiên cứu Y học huyết sắc tố bất thường – Hb Hope [beta136 (H14) Gly → Asp (GGT>GAT)], đặc biệt có mẫu nghiên cứu trạng thái đồng hợp tử βHope/βHope (Bảng 2) Số allen đột biến 16 27 59 Kiểu đột biến β+ β β+ (unclear) β β Hope β β+ % 1,7 5,1 10,2 27,1 6,8 3,4 45,7 100 Bảng Tỷ lệ kiểu hình ĐBG gặp dương tính với giải trình tự gen Kiểu hình β /β β + β β /β N Tỷ lệ (%) /β 22 71 /β 9.67 9.67 6.45 3.22 cd15 cd26(G>T) -29 IVSII-848 /β, β / β, β + -30 β or β unclear/β β β /β Hope /β HST bất thường Hope β Hope /β Như ĐBG gặp phát được, đột biến gây chuỗi beta (β0) chiếm tỷ lệ cao 71% Ở đối tượng giải trình tự cho kết Hb Hope kết điện di HST cho số HbA1, HbA2, HbF (Bảng 3) Thành phần Hb (%) HbA1: 94,8±1,2% HbA2: 4,85±0,4% HbF: 3,4±1,13%(n=2) HbA1:94±2,2% HbA2: 4,8±0,3% HbF: 3,6% (n=1) HbA1: 95,8±0,17% HbA2: 4,2±0,17% HbA1: 59,4±4,38% HbA2: 2,7±0,1% HbF: 37,9±4,2% HbA1: 2,7% HbA2: 3,2% HbF: 94,1% Đặc điểm phân bố trường hợp βthalassemia phối hợp với α-thalassemia Trong trường hợp giải trình tự gen dương tính có phối hợp với ĐBG alpha globin chiếm tỷ lệ cao 13/31 (41,9%), 11/13 (84,6%) trường hợp ĐBG beta globin phối hợp với tổn thương gen α-globin; có 2/12 (15,4%) trường hợp phối hợp với tổn thương hai gen α-globin ( SEA/αα) (Bảng 4) Bảng Kiểu gen phối hợp đột biến gen alpha beta globin đối tượng nghiên cứu Một số hình ảnh kết phân tích NGS phát đột biến (Hình 1, 2, 3, 4, 5, 6) ĐBG alpha globin 3,7 α /αα CS α α/αα 3,7 α /αα CS α α/αα SEA /αα 3,7 α /αα ĐBG beta globin cd26 (G>T) cd26 (G>T) -30 (T>C) cd15 (G>A) Hb Hope IVS-II-848 (C>G) Tổng N 1 13 % 15,4 46,1 7,7 7,7 15,4 7,7 100 BÀN LUẬN Nghiên cứu mô tả cắt ngang từ tháng năm 2017 đến đến tháng năm 2018, thu thập từ 23.000 người dân đại diện cho 53 dân tộc Việt Nam phân bố khắp tỉnh thành nước Các mẫu bệnh phẩm trải qua vòng sàng lọc thalassemia cộng đồng, xét nghiệm Hội Nghị Khoa Học BV Truyền máu Huyết học 403 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 bản: tổng phân tích tế bào máu; định lượng sắt, Feritin điện di huyết sắc tố Sau mẫu nghi ngờ mang gen beta globin xác định lại phương pháp MARMS– PCR với đột biến phổ biến Chúng chọn lọc 58 mẫu nghi ngờ mang gen β-globin mà phương pháp MARMS–PCR cho kết âm tính để phục vụ cho nghiên cứu Hình Phân tích trình tự DNA đột biến gây biến thể HST Hb Hope Mẫu 91087: Hb Hope [beta136 (H14) Gly → Asp (GGT>GAT)] Hình Phân tích trình tự DNA đột biến codon 26 (G>T) Mẫu 82169: Codon 26 (G>T); GAG(Glu)>TAG (stop codon) beta0 Hình Phân tích trình tự DNA đột biến codon 15 (G>A) Mẫu 89312: Codon 15 (G>A); TGG(Trp) > TAG (stop codon) beta0 404 Hội Nghị Khoa Học BV Truyền máu Huyết học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Nghiên cứu Y học Hình Phân tích trình tự DNA đột biến -30 (T>C) Mẫu 85361: -30 (T>C) beta (0 or + unclear) Hình Phân tích trình tự DNA đột biến IVS-II-848 (C>G) Mẫu 92332: IVS-II-848 (C>G); beta+ Hình 6: Phân tích trình tự DNA đột biến -29 (A>G) Mẫu 82738: -29 (A>G) beta+ Hội Nghị Khoa Học BV Truyền máu Huyết học 405 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 Trong nghiên cứu chúng tơi sử dụng phương pháp giải trình tự gen hệ thứ “next generation sequencing” (NGS) phương pháp đại đời từ năm 2005(15,2) Khác với năm trước công nghệ NGS mẻ, cải tiến kỹ thuật NGS có độ xác cao tỷ lệ âm tính giả dương tính giả bị loại bỏ đáng kể(8) Nhiều nghiên cứu chứng minh tính ưu việt NGS độ nhạy độ đặc hiệu, đưa đánh giá toàn diện chiến lược sàng lọc bệnh thalassemia NGS phương pháp sàng lọc cạnh tranh, đặc biệt quần thể có tỷ lệ mắc bệnh cao(10,22,23).Kết phân tích đặc điểm đột biến 58 mẫu nghiên cứu phương pháp giải trình tự gen NGS cho thấy, tỷ lệ phát đột biến cao 31/58 (chiếm 53%) Theo kết Bảng 2, đối tương nghiên cứu người mang đột biến gen beta globin, hầu hết có kiểu hình dị hợp tử, có cá thể có kiểu hình đồng hợp tử βHope / βHope Trong đột biến gây chuỗi beta (β0) chiếm tỷ lệ cao 71% Đột biến gen Codon 26 (G>T) [GAG (Glu)>TAG (stop)] chiếm tỷ lệ cao (16/31, chiếm 51,6%) tất đối tượng có ĐBG tập trung khu vực miền nam Việt Nam Đột biến xảy vị trí với HbE (G>A), biến thể huyết sắc tố phổ biến nước Đơng Nam Á Tại đột biến này, có thay nucleotid G T, thay tạo thành mã ba TAG - mã kết thúc codon 26 gây chấm dứt trình dịch mã tạo đột biến vô nghĩa Đột biến đột biến gen gặp công đồng người Thái Lan(7) Ở Việt Nam, đột biến lần báo cáo nghiên cứu 44 bệnh nhân đột biến gen beta globin tác giả Maria G Doro cộng khu vực miền trung, chiếm tỷ lệ 6,3% Tuy nhiên khu vực miền bắc miền nam chưa có báo cáo xuất đột biến này(5,25,26) Có thể thấy đột biến gặp nước khu vực miền trung nơi phân bố đột biến Ở 406 Codon 15 (G>A) hình thành đột biến tương tự tạo kết thúc, với kiểu hình β° Đột biến -29 (A>G) -30 (T>C) đột biến hình thành cách thay nucleotid xảy hộp TATA gen beta globin, không thuộc vùng phiên mã mà thuộc vùng promoter(3,11,24) Ở đột biến -29 (A>G), gen đột biến điều khiển mARN beta-globin hoạt động mức 25% so bình thường giảm liên kết yếu tố phiên mã(1), gây giảm tổng hợp chuỗi beta globin Đột biến phổ biến người Mỹ gốc phi Trung Quốc xong tỷ lệ phân bố không cao(1,11) Đột biến gen -30 (T>C) beta (0 or + unclear) đột biến điểm gặp không Việt Nam mà giới, tổn thương gen đột biến khơng rõ ràng gây tổng hợp chuỗi beta globin (β0), có tường hợp làm giảm tổng hợp (β+)(3) Đột biến gen IVSII-848 (C>G) đột biến thay C vị trí 848 cạnh vị trí nối AG intron làm giảm hiệu việc lắp ráp mARN, gây giảm tổng hợp chuỗi beta globin (β+) Đột biến phân bố chủ yếu Nhật Bản với tần số thấp(9) Trong nghiên cứu, bên cạnh ĐBG beta globin hiếm, tìm biến thể HST gặp chuỗi beta – Hb Hope cá thể, biến thể HST phổ biến cộng đồng người Việt Nam; vậy, chúng cần giải thích cách thận trọng Hb Hope [β136 (H14) Gly → Asp (GGT>GAT)], biến thể chuỗi beta globin, mô tả lần gia đình người Mỹ gốc Phi vào năm 1965(12), chúng tìm thấy số gia đình Nhật Bản, Thái Lan, Lào Cuba; thể dị hợp tử thường kết hợp với đột biến Hb S, Hb E với beta thalassemia HST bất thường trạng thái dị hợp tử không gây dấu hiệu lâm sàng bất thường hồng cầu(16), HST không ổn định làm giảm lực với oxy, nói chung vơ hại lâm sàng Tuy vậy, nghiên cứu này, so sánh với kết điện di HST Hội Nghị Khoa Học BV Truyền máu Huyết học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 cá thể mang Hb Hope, thấy kết lạ, kết cho loại HST HbA1, HbA2 HbF Liệu có sai sót kỹ thuật giải trình tự gen hay phân tích HST Tìm hiểu thêm Hb Hope kiểm tra lại kỹ thuật, chúng tơi tìm vài giả thiết góp phần gây nhầm lẫn, sai sót Thứ điện di HST, vùng Hb Hope quán với vùng Hb F, ngồi có số biến thể HST khác tương tự Hb Pyrgos, Hb New York, Hb Kodaira Hb Phimai(18) Thứ hai Hb Hope biến thể gặp Hb F lại gặp tỷ lệ cao cộng đồng Thứ ba việc phân biệt Hb Hope điện di HST khó khăn, Hb Hope yếu tố gây nhiễu việc đưa chẩn đốn xác phương pháp điện di sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC)(19,21) Chẩn đốn Hb Hope dựa giải trình tự gen giải vấn đề này, điện di HST có giá trị tham khảo định hướng có bất thường huyết sắc tố trường hợp Chúng cần làm thêm nhiều nghiên cứu để tìm mối tương quan HST này, mở rộng HST khác Mặc dù biến thể khơng gây hậu lâm sàng, điều quan trọng phải phân biệt chúng với biến thể có ý nghĩa lâm sàng khác Tất mô tả đặt câu hỏi nguồn gốc Hb Hope cộng đồng Việt Nam Để sâu hơn, nghiên cứu tận gốc rễ, cần phải làm thêm nhiều khảo sát nữa, xây dựng phả hệ KẾT LUẬN Nghiên cứu chúng tơi góp phần vào việc tìm phát đột biến gen beta globin gặp, mở rộng liệu ĐBG beta globin bệnh Việt Nam; phát biến thể HST bất thường Hb Hope-một biến thể gặp Thế giới, Việt Nam chưa có báo cáo biến thể Đồng thời chúng tơi thấy vai trò, giá trị việc ứng dụng phương pháp giải trình tự gen NGS việc Nghiên cứu Y học chẩn đoán người mang ĐBG beta globin ĐBG Từ nhìn mặt thiếu hụt dẫn đến nhầm lẫn, sai sót phương pháp điện di HST (HPLC) TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 11 12 13 14 15 Hội Nghị Khoa Học BV Truyền máu Huyết học Antonarakis SE, Irkin SH, Cheng TC, et al (1984) BetaThalassemia in American Blacks: novel mutations in the “TATA” box and an acceptor splice site Proc Natl Acad Sci USA, 81(4): 1154–1158 Besser J, Carleton HA, Gerner-Smidt P, et al (2018) NextGeneration Sequencing Technologies and their Application to the Study and Control of Bacterial Infections Clin Microbiol Infect, 24(4):335–341 Cai SP, Zhang JZ, Doherty M, et al (1989) A new TATA box mutation detected at prenatal diagnosis for beta-thalassemia Am J Hum Genet, 45(1):112–114 Chaudhary S, Dhawan D, Bagali PG, et al (2016) Compound heterozygous β+ β0 mutation of HBB gene leading to βthalassemia major in a Gujarati family — A case study Mol Genet Metab Rep, 7:51–53 Doro MG, Casu G, Frogheri L, et al (2017) Molecular Characterization of β-Thalassemia Mutations in Central Vietnam Hemoglobin, 41(2):96–99 Efremov GD (2007) Dominantly Inherited β-Thalassemia Hemoglobin, 31(2):193–207 Fucharoen G, Fucharoen S, Jetsrisuparb A, et al (1990) Molecular basis of HbE-beta-thalassemia and the origin of HbE in northeast Thailand: identification of one novel mutation using amplified DNA from buffy coat specimens Biochem Biophys Res Commun, 170(2):698–704 Haque IS, Lazarin GA, Kang HP, et al (2016) Modeled Fetal Risk of Genetic Diseases Identified by Expanded Carrier Screening JAMA, 316(7):734–742 Hattori Y, Yamamoto K, Yamashiro Y, et al (1992) Three betathalassemia mutations in the Japanese: IVS-II-1 (G A), IVS-II848 (C G), and codon 90 (GAG TAG) Hemoglobin, 16(1– 2):93–97 He J, Song W, Yang J, et al (2017) Next-generation sequencing improves thalassemia carrier screening among premarital adults in a high prevalence population: the Dai nationality, China Genet Med, 19(9):1022–1031 Huang S, Wong C, Antonarakis SE, et al (1986) The same “TATA” box beta-thalassemia mutation in Chinese and US blacks: another example of independent origins of mutation Hum Genet, 74(2):162–164 Ingle J, Adewoye A, Dewan R, et al (2004) Hb Hope [β136(H14)Gly→Asp (GGT→GAT)]: Interactions with Hb S [β6(A3)Glu→Val (GAG→GTG)], Other Variant Hemoglobins and Thalassemia Hemoglobin, 28(4):277–285 Jia S, Lao X, Li W, et al (2003) A rare beta-thalassaemia mutation (C-T) at position -90 of the beta-globin gene discovered in a Chinese family Haematologica, 88(10):1191–1193 Liên Đoàn Thalassemia Quốc Tế (2008) Cơ sở di truyền sinh lý bệnh, Hướng dẫn xử trí lâm sàng bệnh thalassemia Nhà xuất Y học, pp.14-19 Margulies M, Egholm M, Altman WE, et al (2005) Genome sequencing in microfabricated high-density picolitre reactors Nature, 437(7057):376–380 407 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 23 * Số * 2019 16 Minnich V, Hill RJ, Khuri PD, et al (1965) Hemoglobin Hope: A Beta Chain Variant Blood, 25(5):830–838 17 Nguyễn Công Khanh (2008) Thalassemia, Huyết học lâm sàng Nhi khoa Nhà xuất Y học Hà Nội, pp.132-146 18 Panyasai S and Pornprasert S (2016) Detection of Co-inheritance of Hb Hope and Hb Constant Spring in Three Thai Samples by Capillary Electrophoresis Indian J Hematol Blood Transfus, 32(Suppl 1):267–271 19 Panyasai S, Sukunthamala K, Jaiping K, et al (2011) Interference of hemoglobin Hope on beta-thalassemia diagnosis by the capillary electrophoresis Method Am J Clin Pathol, 136(1):14–18 20 Phylipsen M, Amato A, Cappabianca MP, et al (2009) Two new β-thalassemia deletions compromising prenatal diagnosis in an Italian and a Turkish couple seeking prevention Haematologica, 94(9):1289–1292 21 Pornprasert S, Panyasai S and Kongthai K (2012) Comparison of capillary electrophoregram among heterozygous Hb Hope, Hb Hope/α-thalassemia-1 SEA type deletion and Hb Hope/β(0)thalassemia Clin Chem Lab Med, 50(9):1625–1629 22 Shang X, Peng Z, Ye Y, et al (2017) Rapid Targeted NextGeneration Sequencing Platform for Molecular Screening and 408 23 24 25 26 27 Clinical Genotyping in Subjects with Hemoglobinopathies EBioMedicine, 23:150–159 Tan M, Lu S, Wu LS, et al (2015) Application of Next Generation Sequencing to Screen the Neonatal Thalassemia Genes, Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi, 23(5):1404–1409 Thein SL (2013) The Molecular Basis of β-Thalassemia Cold Spring Harb Perspect Med, 3(5) Vo LTT, Nguyen TT, Le HX, et al (2018) Analysis of Common β-Thalassemia Mutations in North Vietnam Hemoglobin, 42(1):16–22 Vũ Hải Toàn cs (2018) Bước đầu phân tích số số sàng lọc Thalassemia cộng đồng Y học Việt Nam, 467:435– 443 Yang Z, Zhou W, Cui Q, et al (2019) Gene spectrum analysis of thalassemia for people residing in northern China BMC Med Genet, 20(1):86 Ngày nhận báo: 15/07/2019 Ngày phản biện nhận xét báo: 20/08/2019 Ngày báo đăng: 15/10/2019 Hội Nghị Khoa Học BV Truyền máu Huyết học ... dứt trình dịch mã tạo đột biến vô nghĩa Đột biến đột biến gen gặp công đồng người Thái Lan(7) Ở Việt Nam, đột biến lần báo cáo nghiên cứu 44 bệnh nhân đột biến gen beta globin tác giả Maria G... đột biến gen beta globin bệnh alpha Thalassemia chủ yếu đột gặp người Việt Nam phương biến đoạn, beta Thalassemia hình thành pháp NGS ’ chủ yếu đôt biến điểm Năm 2007, có khoảng 200 đột biến. .. 29,6% 70,4% 100% tự gen có 31 trường hợp phát đột biến beta n 13 18 31 Dương gen beta globin gặp (chiếm 53%) globin tính Đặc điểm đột biến gen mẫu nghiên cứu Đặc điểm đột biến gen liên quan Tỷ lệ