Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 6508:1999 - ISO 1211:1984(E)

Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 6508:1999 - ISO 1211:1984(E) giới thiệu đến các bạn nội dung về sữa - xác định hàm lượng chất béo – phương pháp khối lượng (phương pháp chuẩn). Hy vọng đây là tài liệu tham khảo hữu ích cho các bạn.

TIÊU CHUẨN VIỆT NAM TCVN 6508:1999 ISO 1211 : 1984 (E) SỮA - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO – PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN) Milk –Determination of fat content – Gravimetric method (reference method) Lời nói đầu TCVN 6508 : 1999 hoàn toàn tương đương với ISO 1211 : 1984 (E) TCVN 6508 : 1999 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn TCVN/TC/F12 Sữa sản phẩm sữa biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn – Đo lường – Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học, Công nghệ Môi trường ban hành Giới thiệu Tiêu chuẩn soát xét từ ISO/R 1211 Hiện việc cố gắng để xây dựng phương pháp RoseGottlieb thành tiêu chuẩn riêng biệt để áp dụng cho tất sản phẩm sữa khơng thực Do đó, việc sốt xét hài hòa phương pháp chuẩn hành cho sản phẩm riêng biệt cho nhóm sản phẩm tiêu chuẩn hóa phương pháp tương tự cho nhóm sản phẩm mà trước chưa xây dựng định Những sửa đổi so với ISO/R 1211 sau: a) Sử dụng bình chiết chất béo kiểu Mojonnier dùng ly tâm để tách dung môi; b) Bổ sung etanola trước chiết lần hai; c) Cần làm nguội bình thu nhận chất béo đến nhiệt độ môi trường trước cân; Dùng ly tâm để tách nhanh lớp dung mơi hạn chế việc tái hòa tan chất béo chiết hạn chế việc lặp lại phép xác định Cho etanola trước chiết lần hai để giảm nguy tạo thành lớp chất lỏng sánh quánh, đặc biệt sản phẩm chứa xacaroza (thí dụ: sữa đặc có đường, kem lạnh thực phẩm mức thấp sữa bột) Người ta tìm thấy việc bổ sung đặc biệt tăng độ xác phương pháp Việc nhấn mạnh vấn đề cần thiết phải làm nguội bình thu nhận chất béo đến nhiệt độ môi trường trước cân sai số nguồn gốc 0,01% chất béo 0C xác nhận sữa dạng lỏng Do khơng quy định việc sử dụng tủ hút ẩm, chừng mực việc bình kiểm tra rỗng bù vào sai số Người ta cho thấy sử dụng bình với mẫu trắng 10 ml nước thực với phép xác định phức tạp khơng cải tiến độ xác Tuy nhiên, cần phải sử dụng bình kiểm tra rỗng phải quy định tiến hành thử trắng để kiểm tra thuốc thử để tránh đánh giá sai có mặt hay khơng có mặt chất không bay TCVN 6508 : 1999 SỮA - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHẤT BÉO – PHƯƠNG PHÁP KHỐI LƯỢNG (PHƯƠNG PHÁP CHUẨN) Milk –Determination of fat content – Gravimetric method (reference method) Phạm vi lĩnh vực áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp chuẩn để xác định hàm lượng chất béo sữa nguyên liệu sữa chế biến dạng lỏng, sữa tách phần chất béo sữa tách hoàn toàn chất béo việc tách phân chia chất béo thể khơng rõ ràng (xem thích 8.1) Chú thích – Khi yêu cầu độ xác cao sữa tách chất béo, thí dụ để tách kem làm việc có hiệu quả, nên sử dụng phương pháp đặc biệt sản phẩm tách hoàn toàn chất béo quy định ISO 7208 Sữa tách hoàn toàn chất béo, whey, buttermilk – Xác định hàm lượng chất béo – Phương pháp trọng lượng (phương pháp chuẩn) Tiêu chuẩn trích dẫn TCVN 6400 : 1998 Sữa sản phẩm sữa – Phương pháp lấy mẫu (ISO 707) ISO 3889 Sữa sản phẩm sữa – Xác định hàm lượng chất béo – Bình chiết chất béo kiểu Mojonnier Định nghĩa Hàm lượng chất béo sữa: tất chất xác định phương pháp quy định tiêu chuẩn Hàm lượng chất béo tính phần trăm khối lượng Nguyên tắc Chiết phần mẫu thử dung dịch etanola chứa amoniac ete dietyl xăng nhẹ, loại bỏ dung môi cách chưng cất cho bay hơi, xác định khối lượng chất chiết hòa tan xăng nhẹ (điều thường gọi nguyên tắc Rose – Gottlieb) Thuốc thử Tất thuốc thử phải loại phân tích để lại lượng tro không đáng kể thực phép thử theo phương pháp Sử dụng nước cất nước có độ tinh khiết tương đương Để kiểm tra chất lượng thuốc thử, tiến hành thử mẫu trắng theo quy định 8.3 Sử dụng bình thu nhận chất béo rỗng, chuẩn bị theo 8.4 để kiểm tra khối lượng Các thuốc thử không để lại lượng tro lớn 0,5 mg (xem 10.1) Nếu lượng tro thuốc thử trắng lớn 0,5 mg, xác định lượng tro dung mơi riêng rẽ cách chưng cất 100 ml ete dietyl xăng nhẹ Dùng bình kiểm tra rỗng để thu lấy khối lượng thực tro mà khối lượng không vượt 0,5 mg Thay loại thuốc thử dung mơi khơng thích hợp, chưng cất lại dung môi 5.1 Dung dịch amoniac, chứa khoảng 25% (m/m) NH3, ρ = 910 g/l Chú thích – Nếu khơng có sẵn dung dịch amoniac nồng độ sử dụng dung dịch có nồng độ biết trước cao (xem 8.5.1) 5.2 Etanola, etanola bị metanola làm biến tính, 94%(V/V) (Xem 10.5) 5.3 Dung dịch phẩm đỏ Congo Hòa tan g đỏ Congo nước pha loãng đến 100ml Chú thích – Việc sử dụng dung dịch nhằm phân biệt rõ ranh giới dung môi lớp nước tùy ý (xem 8.5.2) Có thể sử dụng dung dịch màu dạng lỏng khác với điều kiện chúng không ảnh hưởng đến kết xác định 5.4 Ete dietyl, không chứa peroxit (xem 10.3) không chứa có chứa khơng lớn mg/kg chất chống oxi hóa tuân thủ yêu cầu thử mẫu trắng (xem điều 5, 10.1 10.4) 5.5 Xăng nhẹ, có nhiệt độ sơi khoảng từ 300C đến 600C 5.6 Dung môi hỗn hợp, chuẩn bị trước sử dụng cách trộn thể tích ete dietyl xăng nhẹ (5.5) 6 Thiết bị Cảnh báo – Vì việc xác định buộc phải sử dụng dung môi bay dễ cháy, thiết bị điện dùng phải tuân theo quy định an toàn sử dụng dung mơi Sử dụng thiết bị thí nghiệm thơng thường dụng cụ sau: 6.1 Cân phân tích 6.2 Máy li tâm, có bình cầu chiết chất béo có ống nghiệm (6.6) quay từ 500 vòng đến 600 vòng phút để tạo trường hấp dẫn khoảng 80 g đến 90 g miệng bình cầu ống nghiệm Chú thích – Nên sử dụng máy li tâm không bắt buộc phải dùng (xem 8.5.5) 6.3 Thiết bị chưng cất làm bay hơi, để làm bay dung mơi etanola từ bình cầu cần làm bay từ cốc đĩa (xem 8.5.12) nhiệt độ không vượt 100 0C 6.4 Lò sấy, đốt nóng điện, có cửa mở thơng gió, trì nhiệt độ 102 ± 20C tồn buồng làm việc Lò gắn với nhiệt kế thích hợp 6.5 Nồi cách thủy, trì nhiệt độ 350C đến 400C 6.6 Bình cầu chiết chất béo kiểu Mojonnier, quy định ISO 3889 Chú thích – Cũng dùng ống nghiệm chiết chất béo, có si phơng nối với chai rửa, quy trình có khác quy định phần phụ lục Các bình cầu (hoặc ống nghiệm, xem thích) phải có nút bần chất lượng tốt có nắp đậy làm vật liệu khác (thí dụ cao su silicon) để không bị ảnh hưởng thuốc thử sử dụng Nút bần phải rửa ete dietyl (5.4), giữ nhiệt độ 60 0C lớn 15 phút sau làm lạnh nước cho chúng bão hòa nước sử dụng 6.7 Giá để giữ bình cầu (hoặc ống nghiệm) chiết chất béo (xem 6.6) 6.8 Chai rửa, thích hợp để dùng với dung môi hỗn hợp (5.6) Không dùng chai rửa làm plastic 6.9 Bình thu nhận chất béo, thí dụ bình cầu đun sơi (đáy phẳng), có dung tích từ 125 ml đến 250ml, bình nón có dung tích 250 ml, đĩa kim loại Nếu sử dụng đĩa kim loại, tốt làm thép khơng gỉ, đáy phẳng, có rãnh rót, đường kính từ 80mm – 100 mm có chiều cao khoảng 50 mm 6.10 Chất trợ sơi, không chứa chất béo, sứ không xốp cacbua silicon (không bắt buộc trường hợp dùng đĩa kim loại) 6.11 Ống đong, có dung tích 5ml 25 ml 6.12 Pipet chia độ, có dung tích 10 ml 6.13 Bộ kẹp, làm kim loại thích hợp để giữ bình cầu, giữ cốc đĩa Lấy mẫu Xem TCVN 6400 : 1998 (ISO 707) Tất mẫu thí nghiệm phải giữ nhiệt độ khoảng từ 0C đến 60C từ lấy mẫu tiến hành thử nghiệm Cách tiến hành Chú thích – Cách tiến hành khác dùng ống nghiệm chiết chất béo có si phơng gắn với chai rửa (xem thích 6.6) mơ tả phụ lục 8.1 Chuẩn bị mẫu thử Chỉnh nhiệt độ mẫu thí nghiệm (điều 7) khoảng 35 0C – 400C, cần dùng nồi cách thủy (6.5) Lắc kỹ mẫu cách nhẹ nhàng, cách đảo chiều chai đựng mẫu tránh tạo bọt tạo kem, làm nguội nhanh đến khoảng 200C Sữa đánh thành kem khơng làm nguội cân nhiệt độ 30 0C – 400C 8.2 Chú thích – Giá trị thực hàm lượng chất béo không thu khi: a) sữa đánh thành kem; b) cảm nhận mùi đặc trưng axit béo tự do; c) suốt trình hay sau chuẩn bị mẫu thử, nhìn thấy hạt trắng bám thành chai đựng mẫu mảng chất béo nhỏ bề mặt mẫu thử 8.2 Phần mẫu thử Trộn mẫu thử (8.1) cách đảo ngược chai nhẹ nhàng ba lần bốn lần cân ngay, từ 10 g đến 11 g mẫu thử xác đến 1mg, cho trực tiếp gián tiếp vào bình chiết (6.6) Phải chuyển tồn phần mẫu thử sang bầu thấp (nhỏ) bình chiết 8.3 Thử mẫu trắng Tiến hành thử mẫu trắng đồng thời với việc xác định, sử dụng quy trình dùng loại thuốc thử, thay phần mẫu thử 10 ml nước (xem 10.2) 8.4 Chuẩn bị bình thu nhận chất béo Làm khơ bình (6.9) vài hạt trợ sơi (6.10) lò (6.4) vòng h (Xem thích 1) Để bình nguội (bảo vệ để tránh bụi) đến nhiệt độ phòng cân (bình thủy tinh để 1h, đĩa kim loại 30 phút) (Xem thích 2) Dùng kẹp (đặc biệt tránh nhiệt độ khác nhau), đặt bình lên cân cân xác đến 0,1 mg Chú thích 1) Chất trợ sôi để giúp cho sôi nhẹ suốt q trình loại bỏ dung mơi, đặc biệt trường hợp bình thủy tinh; khơng bắt buộc phải dùng trường hợp đĩa kim loại 2) Khơng nên đặt bình tủ hút ẩm, tránh để nguội thời gian làm nguội lâu 8.5 Xác định 8.5.1 Thêm ml dung dịch amoniac (5.1), thể tích tương ứng dung dịch amoniac đậm đặc (xem thích 5.1), vào phần mẫu thử bầu nhỏ bình cầu lắc kỹ Tiến hành xác định sau thêm amoniac 8.5.2 Thêm 10 ml etanola (5.2) lắc kỹ cách nhẹ nhàng cách cho lượng chứa bình cầu chảy chảy lại hai bầu; không chất lỏng dâng lên gần cổ bình Tốt nên cho thêm hai giọt dung dịch đỏ Congo (5.3) 8.5.3 Thêm 25 ml ete dietyl (5.4), đậy bình nút bần bão hòa nước (xem 6.6) đậy nút làm chất liệu khác (xem 6.6) làm ướt nước, lắc mạnh bình vòng phút khơng lắc q mạnh (để tránh tạo nhũ) giữ tư nằm ngang bầu nhỏ hướng lên trên, cho chất lỏng bầu lớn chảy sang bầu nhỏ cách định kỳ Nếu cần, làm mát bình dòng nước chảy, sau mở nút cách cẩn thận, dùng chai rửa (6.8) tráng nút cổ bình cầu dung môi hỗn hợp (5.6) cho nước rửa chảy vào bình cầu 8.5.4 Thêm 25 ml xăng nhẹ (5.5), đậy bình nút bần nút khác thấm lại nước (bằng cách ngâm vào nước) lắc bình cầu nhẹ nhàng vòng 30 giây mơ tả 8.5.3 8.5.5 Li tâm bình cầu đậy nút từ phút đến phút tốc độ quay từ 500 vòng/phút đến 600 vòng/phút Nếu khơng có máy li tâm, đặt bình cầu giá đỡ (6.7) 30 phút thấy có lớp bề mặt rõ rệt phân biệt rõ với lớp chất lỏng Nếu cần, làm mát bình cầu dòng nước chảy 8.5.6 Cẩn thận lấy nút ra, tráng nút phía cổ bình dung môi hỗn hợp cho nước rửa chảy vào bình cầu Nếu mặt lớp phân cách thấp chỗ thắt cổ bình, cần nâng cao lên chút cách nhẹ nhàng cho thêm nước theo thành bình (xem hình 1) để dung mơi kết tủa dễ dàng Chú thích – Trên hình mơ tả ba loại bình quy định ISO 3889 chọn, điều khơng có nghĩa ưu tiên loại khác Hình - Trước gạn Hình 2- Sau gạn (8.5.6, 8.5.10, 8.5.11) (8.5.7, 8.5.10, 8.5.11) 8.5.7 Giữ bình chiết bầu nhỏ, cẩn thận gạn nhiều tốt lớp bề mặt vào bình nhận chất béo (8.4) có chứa chất trợ sơi (6.10) trường hợp bình nón thủy tinh (còn đĩa kim loại tùy ý) tránh khơng gạn tý chất lỏng vào bình (xem hình 2) 8.5.8 Tráng phía ngồi cổ bình chiết dung mơi hỗn hợp, thu lấy nước rửa vào bình nhận chất béo ý khơng để dung mơi hỗn hợp tràn thành ngồi bình chiết Nếu cần, loại bỏ dung mơi phần dung mơi khỏi bình nhận cách chưng cất làm bay mô tả 8.5.12 8.5.9 Thêm 5ml etanola (5.2) vào lượng chất chứa bình chiết, dùng etanola để tráng thành cổ bình trộn mô tả 8.5.2 8.5.10 Thực chiết lần hai cách lặp lại thao tác mô tả 8.5.3 đến hết 8.5.7, dùng 15 ml ete dietyl (5.4) 15 ml xăng nhẹ (5.5); dùng ete để tráng thành cổ bình chiết Nếu cần, nâng cao mặt lớp phân cách đến cổ bình (xem hình 1) để gạn hết dung mơi nhiều tốt (xem hình 2) 8.5.11 Thực chiết lần ba, không cho thêm etanola, cách lặp lại thao tác mô tả 8.5.3 đến hết 8.5.7, dùng 15 ml ete dietyl (5.4) 15 ml xăng nhẹ (5.5); dùng ete để tráng thành cổ bình chiết Nếu cần, nâng cao mặt lớp phân cách đến cổ bình (xem hình 1) để gạn hết dung mơi nhiều tốt (xem hình 2) Chú thích – Lần chiết thứ ba bỏ qua sữa có hàm lượng chất béo nhỏ 0,5% (m/m) 8.5.12 Loại bỏ dung môi (kể etanola) hồn tồn tốt khỏi bình cách chưng cất, loại khỏi cốc hay đĩa cách cho bay (xem 6.3), tráng thành cổ bình dung mơi hỗn hợp (5.6) trước bắt đầu chưng cất 8.5.13 Đun nóng bình thu nhận chất béo (đặt bình nằm nghiêng để dung mơi được) 1h lò sấy khơ (6.4) nhiệt độ 1020C ± 20C Lấy bình thu nhận chất béo khỏi lò, để nguội (khơng để bình hút ẩm, cần tránh nhiễm bẩn) tới nhiệt độ phòng cân (đối với bình thủy tinh tối thiểu 1h, đĩa kim loại tối thiểu 0,5h) cân xác đến 0,1 mg Khơng lau bình trước lúc cân Dùng kẹp để đặt bình lên cân (đặc biệt, để tránh thay đổi nhiệt độ) 8.5.14 Lặp lại thao tác mô tả 8.5.13 khối lượng bình thu nhận chất béo giảm chừng 0,5 mg hơn, tăng lần cân liên tục Ghi khối lượng tối thiểu khối lượng bình thu nhập chất béo chất chiết 8.5.15 Cho thêm 25 ml xăng nhẹ vào bình thu nhận chất béo để kiểm tra xem chất chiết có tan hết hay khơng Đun nóng nhẹ khuấy dung mơi tồn chất béo tan hết Nếu chất chiết tan hết hoàn toàn xăng nhẹ, khối lượng chất béo hiệu số khối lượng cuối bình chứa chất chiết (xem 8.5.14) khối lượng ban đầu bình (xem 8.4) 8.5.16 Nếu chất chiết khơng tan hết hồn tồn xăng nhẹ, nghi ngờ mục đích quy định trường hợp có tranh cãi, cần chiết hết chất béo khỏi bình cách rửa liên tục với xăng nhẹ ấm Để cho vết chất không tan lắng hết cẩn thận gạn bỏ xăng nhẹ mà không làm chất không tan Lặp lại thao tác ba lần nữa, dùng xăng nhẹ để tráng phía cổ bình Cuối cùng, tráng phía bình dung mơi hỗn hợp cho dung mơi khơng tràn ngồi bình Loại bỏ xăng nhẹ khỏi bình cách đun nóng bình 1h lò sấy (6.4) 1020C ± 20C, để nguội cân theo mô tả từ 8.5.13 đến 8.5.14 Khối lượng chất béo hiệu số khối lượng xác định 8.5.14 khối lượng cuối Biểu thị kết 9.1 Phương pháp tính cơng thức Hàm lượng chất béo, biểu thị phần trăm khối lượng, theo công thức: (m1 m2 ) (m3 m4 ) x 100 m0 đó: m0 khối lượng phần mẫu thử (8.2), tính gam; m1 khối lượng bình thu nhận chất béo chất chiết xác định theo 8.5.14, tính gam m2 khối lượng bình thu nhận chất béo (xem 8.4), hoặc, trường hợp chất rắn khơng hòa tan khối lượng bình thu nhận chất béo tro khơng tan xác định theo 8.5.16 tính gam; m3 khối lượng bình thu nhận chất béo sử dụng thử mẫu trắng (8.3) chất chiết xác định 8.5.14, tính gam; m4 khối lượng bình thu nhận chất béo (xem 8.4) sử dụng thử mẫu trắng (8.3), trường hợp chất rắn không hòa tan khối lượng bình nhận chất béo tro không tan xác định theo 8.5.16, tính gam; Ghi kết xác đến 0,01% (m/m) 9.2 Độ xác Chú thích – Giá trị độ lặp lại độ tái lập biểu thị cho 95% mức có khả lấy từ kết thử nghiệm liên phòng thí nghiệm phù hợp với ISO 5725 Độ xác phương pháp thử - Xác định độ lặp lại độ tái lập phép thử liên phòng thí nghiệm 9.2.1 Độ lặp lại Chênh lệch hai kết thử riêng rẽ nguyên liệu thử người phân tích khoảng thời gian ngắn không vượt giá trị sau đây: - sữa nguyên liệu sữa dạng lỏng chế biến: 0,02 g chất béo 100 g sản phẩm; - sữa có hàm lượng chất béo từ 0,5% đến 2% (m/m): 0,02 g chất béo 100 g sản phẩm - sữa có hàm lượng chất béo ≤ 0,5% (m/m): 0,01 g chất béo 100 g sản phẩm 9.2.2 Độ tái lập Chênh lệch hai kết riêng rẽ độc lập nguyên liệu thử hai người phân tích thực phòng thí nghiệm khác không vượt giá trị sau đây: - sữa nguyên liệu sữa dạng lỏng chế biến: 0,04 g chất béo 100 g sản phẩm; - sữa có hàm lượng chất béo từ 0,5% đến 2% (m/m): 0,03 g chất béo 100 g sản phẩm - sữa có hàm lượng chất béo < 0,5% (m/m): 0,025 g chất béo 100 g sản phẩm 10 Các ý cách tiến hành 10.1 Thử mẫu trắng để kiểm tra thuốc thử Trong trường hợp thử mẫu trắng, bình kiểm tra khối lượng sử dụng để thay đổi điều kiện môi trường phòng cân ảnh hưởng nhiệt độ bình thu nhận chất béo không làm ảnh hưởng đến việc xem xét có mặt hay khơng có mặt chất khơng bay có phần chiết thuốc thử Bình dùng bình đối trọng trường hợp cân có hai đĩa cân Mặt khác, chênh lệch khối lượng (m – m4 cơng thức 9.1) bình kiểm tra phải xem xét kiểm tra khối lượng bình thu nhận chất béo dùng thử mẫu trắng Do đó, thay đổi khối lượng ngồi bình thu nhận chất béo, điều chỉnh theo thay đổi khối lượng ngồi bình kiểm tra, khơng tăng q 0,5mg Rất dung mơi có chứa chất bay bị giữ lại nhiều chất béo Nếu thấy có mặt chất thế, cần tiến hành thử mẫu trắng tất thuốc thử dung mơi sử dụng bình chất béo với khoảng g butterfat khan Nếu cần, chưng cất lại dung mơi với có mặt g butterfat 100 ml dung môi Chỉ dùng dung môi khoảng thời gian ngắn sau chưng cất lại 10.2 Tiến hành thử mẫu trắng đồng thời với việc xác định Giá trị thu thử mẫu trắng, tiến hành đồng thời với việc xác định, có khối lượng ngồi chất chiết từ phần mẫu thử (m – m2) chỉnh lại cho có mặt chất khơng bay chiết từ thuốc thử thay đổi điều kiện mơi trường phòng cân vài khác nhiệt độ bình thu nhận chất béo phòng cân hai lần cân (8.5.14 8.5.16) Trong điều kiện thích hợp (giá trị thấp thử mẫu trắng thuốc thử, nhiệt độ cân phòng cân, thời gian làm đủ nguội cho bình đựng chất béo), giá trị ln ln nhỏ 0,5 mg sau bỏ qua phần tính kết trường hợp xác định thông thường Giá trị lớn (dương âm) lên đến 2,5mg thường gặp Sau điều chỉnh giá trị này, kết Khi phải điều chỉnh giá trị lớn 2,5 mg phải nêu lên phần báo cáo kết (điều 11) Nếu giá trị thu phần thử mẫu trắng thường lớn 0,5 mg nên kiểm tra lại thuốc thử thuốc thử chưa kiểm tra Thuốc thử có lẫn tạp chất có vết cần phải thay làm (xem thích điều 10.1) 10.3 Thử peroxit Để thử peroxit, thêm ml dung dịch kali iodua 100 g/l chuẩn bị vào 10 ml ete dietyl đựng ống đong nhỏ có nắp thủy tinh trước tráng ete Lắc ống đong sau để n phút Khơng quan sát thấy màu vàng lớp Có thể sử dụng phương pháp thử nghiệm thích hợp khác peroxit Để đảm bảo cho ete dietyl không chứa peroxit, xử lý ete sau ba ngày trước sử dụng: Cắt kẽm thành dải để chúng chạm đến nửa chai đựng ete, dùng khoảng 80 cm2 kẽm cho lít ete Trước sử dụng, nhúng tồn dải kẽm phút dung dịch chứa 10 g đồng (II) sunfat ngậm phân tử nước (CuSO 4.5H2O) ml axit sunfuric [98% (m/m)] đậm đặc lít Rửa kỹ dải nhẹ nhàng nước, đặt dải mạ đồng ướt vào chai đựng ete để chúng chai Có thể dùng phương pháp khác với điều kiện chúng không làm ảnh hưởng đến kết xác định 10.4 Ete dietyl có chứa chất chống oxi hóa Ete dietyl có chứa khoảng mg chất chống oxi hóa kilogam có sẵn số nước, đặc biệt dùng để xác định chất béo Hàm lượng khơng dùng cho mục đích đối chiếu Ở số nước, có bán sẵn ete dietyl chứa hàm lượng chất chống oxi hóa cao hơn, thí dụ lên đến 7mg/kg Những ete nên sử dụng xác định thông thường với mẫu thử trắng bắt buộc tiến hành đồng thời với việc xác định để điều chỉnh sai số hệ thống lượng dư chất chống oxi hóa gây Đối với mục đích đối chiếu, loại ete phải chưng cất trước sử dụng 10.5 Etanola Có thể sử dụng etanola biến tính với điều kiện etanola khơng làm ảnh hưởng đến kết việc xác định 11 Báo cáo kết Báo cáo kết phải rõ phương pháp sử dụng kết thu Cũng phải đề cập đến tất chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn này, tùy ý lựa chọn, với chi tiết bất thường khác ảnh hưởng tới kết Chỉ số trắng (m – m4, xem 9.1) phải ghi lại vượt 2,5 mg Báo cáo kết bao gồm tất thông tin cần thiết việc nhận biết hoàn toàn mẫu thử PHỤ LỤC CÁCH TIẾN HÀNH KHÁC DÙNG ỐNG NGHIỆM CHIẾT CHẤT BÉO CĨ SI PHƠNG HOẶC CĨ NỐI VỚI CHAI RỬA (xem thí dụ) A.0 Giới thiệu Nếu sử dụng ống nghiệm chiết chất béo có si phơng có nối với chai rửa tiến hành theo quy định phụ lục A.1 Cách tiến hành A.1.1 Chuẩn bị mẫu thử Xem 8.1 A.1.2 Phần mẫu thử Tiến hành theo quy định 8.2 dùng ống chiết chất béo (xem 6.6) Phần mẫu thử phải cố gắng chuyển hoàn toàn vào đáy ống chiết A.1.3 Thử mẫu trắng Xem 8.3 10.2 A.1.4 Chuẩn bị bình thu nhận chất béo Xem 8.4 A.1.5 Xác định A.1.5.1 Thêm ml dung dịch amoniac (5.1), thể tích tương ứng dung dịch amoniac đậm đặc (xem thích 5.1), lắc kỹ với phần mẫu thử xử lý trước đáy ống nghiệm Sau thêm amoniac, tiến hành xác định A.1.5.2 Thêm 10 ml etanola (5.2) lắc kĩ cách nhẹ nhàng đáy ống Tốt thêm giọt dung dịch đỏ Congo (5.3) A.1.5.3 Thêm 25 ml ete dietyl (5.4), đậy nắp ống nghiệm nút bần bão hòa nước (xem 6.6) nắp làm chất liệu khác làm ướt nước (xem 6.6) lắc mạnh ống nghiệm, không mạnh (để tránh tạo nhũ) cách đảo chiều khoảng phút Nếu cần, làm mát ống nghiệm dòng nước chảy, sau mở nút cách cẩn thận, dùng chai rửa (6.8) tráng nút cổ ống nghiệm dung môi hỗn hợp (5.6) cho nước rửa chảy vào ống nghiệm A.1.5.4 Thêm 25 ml xăng nhẹ (5.5), đậy ống nghiệm nút bần nút khác thấm lại nước (bằng cách ngâm vào nước) lắc nhẹ ống 30 giây mô tả A.1.5.3 A.1.5.5 Li tâm ống nghiệm đậy nút từ phút đến phút tốc độ quay từ 500 vòng/phút đến 600 vòng/phút Nếu khơng có máy li tâm, đặt ống nghiệm giá đỡ (6.7) 30 phút thấy có lớp lên bề mặt rõ rệt phân biệt rõ với lớp chất lỏng Nếu cần, làm mát ống nghiệm dòng nước chảy A.1.5.6 Cẩn thận tháo bỏ nút, tráng nút phía ống nghiệm dung mơi hỗn hợp cho nước rửa chảy vào ống nghiệm A.1.5.7 Lắp khớp nối si phông nối với chai rửa vào ống nghiệm đẩy ống nối bên khoảng mm cao mặt tiếp xúc lớp Ống nối phía bên phải song song với trục ống chiết Cẩn thận gạn nhiều tốt lớp bề mặt ống nghiệm vào bình nhận chất béo (8.4) có chứa chất trợ sôi (6.10) trường hợp bình cầu (còn đĩa kim loại tùy ý) tránh tý lớp chất lỏng lẫn vào Tráng phía ngồi khớp nối dung môi hỗn hợp, thu lấy nước rửa vào bình thu nhận chất béo A.1.5.8 Tháo khớp nối khỏi cổ ống nghiệm, nâng nhẹ ống nối tráng phần thấp ống nối bên dung môi hỗn hợp Hạ thấp chèn lại ống nối chuyển nước rửa vào bình thu nhận chất béo Tráng rửa khớp nối dung mơi hỗn hợp, cho nước rửa vào bình nhận chất béo Tốt loại bỏ dung môi phần dung mơi khỏi bình nhận cách chưng cất làm bay 8.5.12 A.1.5.9 Tháo lại khớp nối khỏi cổ ống nghiệm, nâng nhẹ ống nối thêm ml etanola vào lượng chứa ống nghiệm, dùng etanola để tráng thành khớp nối lắc mô tả A.1.5.2 A.1.5.10 Thực chiết lần hai cách lặp lại thao tác mô tả A.1.5.3 đến A.1.5.8, dùng 15 ml ete dietyl (5.4) 15 ml xăng nhẹ (5.5); dùng ete để tráng thành khớp nối Trong suốt trình tháo khớp nối khỏi ống nghiệm sau lần chiết lần trước A.1.5.11 Thực chiết lần ba, không cho thêm etanola, cách lặp lại thao tác mô tả A.1.5.3 đến A.1.5.8, dùng 15 ml ete dietyl 15 ml xăng nhẹ tráng thành khớp nối mơ tả A.1.5.10 Chú thích – Lần chiết ba nên bỏ qua sữa có hàm lượng béo nhỏ 0,5% (m/m) A.1.5.12 Tiến hành mơ tả 8.5.12 đến 8.5.16 Kích thước milimét a) Nối với si phông b) Nối với chai rửa Hình – Thí dụ ống chiết ... toàn chất béo quy định ISO 7208 Sữa tách hoàn toàn chất béo, whey, buttermilk – Xác định hàm lượng chất béo – Phương pháp trọng lượng (phương pháp chuẩn) Tiêu chuẩn trích dẫn TCVN 6400 : 1998 Sữa... mẫu (ISO 707) ISO 3889 Sữa sản phẩm sữa – Xác định hàm lượng chất béo – Bình chiết chất béo kiểu Mojonnier Định nghĩa Hàm lượng chất béo sữa: tất chất xác định phương pháp quy định tiêu chuẩn. . .Tiêu chuẩn quy định phương pháp chuẩn để xác định hàm lượng chất béo sữa nguyên liệu sữa chế biến dạng lỏng, sữa