Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 9958:2013 được xây dựng dựa trên cơ sở JECFA Monograph 11 (2011), Compendium of Food Additive Specifications. Tiêu chuẩn này áp dụng cho chất tạo màu B-apo-8''-carotenal được sử dụng làm phụ gia thực phẩm.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 9958:2013 PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT TẠO MÀU - B-APO-8'-CAROTENAL Food additives - Colours - -apo-8'carotenal Lời nói đầu TCVN 9958:2013 xây dựng dựa sở JECFA Monograph 11 (2011), Compendium of Food Additive Specifications; TCVN 9958:2013 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F4 Gia vị phụ gia thực phẩm biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT TẠO MÀU - B-APO-8'-CAROTENAL Food additives - Colours - -apo-8'carotenal Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn áp dụng cho chất tạo màu -apo-8'-carotenal sử dụng làm phụ gia thực phẩm CHÚ THÍCH: Lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận (ADI), tính theo tổng -caroten, apo-8'-carotenal dạng metyl, etyl ester axit -apo-8'-carotenoic từ mg/kg đến mg/kg thể trọng Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 6469:2010, Phụ gia thực phẩm - Phương pháp đánh giá ngoại quan xác định tiêu vật lý TCVN 6470:2010, Phụ gia thực phẩm - Phương pháp thử chất tạo màu TCVN 8900-2:2012, Phụ gia thực phẩm - Xác định thành phần vô - Phần 2: Hao hụt khối lượng sấy, hàm lượng tro, chất không tan nước chất không tan axit TCVN 8900-6:2012, Phụ gia thực phẩm - Xác định thành phần vô - Phần 6: Định lượng antimon, bari, cadimi, crom, đồng, chì kẽm đo phổ hấp thụ nguyên tử lửa TCVN 8900-7:2012, Phụ gia thực phẩm - Xác định thành phần vô - Phần 7: Định lượng antimon, bari, cadimi, crom, đồng, chì kẽm đo phổ phát xạ nguyên tử plasma cảm ứng cao tần (ICP-AES) TCVN 8900-8:2012, Phụ gia thực phẩm - Xác định thành phần vô - Phần 8: Định lượng chì cadimi đo phổ hấp thụ ngun tử dùng lò graphit Mơ tả 3.1 Chế phẩm -apo-8'-carotenal chủ yếu gồm đồng phân trans -apo-8'-carotenal (alltrans- -apo-8'-carotenal) Chế phẩm chứa lượng nhỏ carotenoid khác alltrans-crocetindialdehit, all-trans- -apo-12'-carotenal all-trans- -caroten Các chế phẩm -apo8'-carotenal thương mại dùng cho thực phẩm có dạng huyền phù dầu thực phẩm, dạng nhũ tương dạng bột phân tán nước Chế phẩm chứa đồng phân cis 3.2 Tên gọi Tên hóa học: -apo-8'-carotenal; 8'-apo- -caroten-al; 2E,4E,6E,8E,10E,12E,14E,16E)-2,6,11,15-tetrametyl-17-(2,6,6-trimetyl-1cyclohexenyl)heptadeca-2,4,6,8,10,12,14,16-octaenal Tên khác: CI Food Orange 6; CI (1975) No 40820 3.3 Kí hiệu INS (mã số quốc tế phụ gia thực phẩm): 160e C.A.S (mã số hóa chất): 1107-26-2 3.4 Cơng thức hóa học: C30H40O 3.5 Cơng thức cấu tạo (xem hình 1) Hình - Cơng thức cấu tạo all-trans- -apo-8'-carotenal (hợp chất chính) 3.6 Khối lượng phân tử: 416,65 Các yêu cầu 4.1 Ngoại quan Tinh thể có ánh kim bột tinh thể, màu tím đậm, nhạy với oxy ánh sáng CHÚ THÍCH: Bảo quản chế phẩm bao bì tránh ánh sáng mơi trường khí trơ 4.2 Độ hòa tan Khơng tan nước, tan etanol, tan dầu thực vật 4.3 Phép thử carotenoid Đạt yêu cầu phép thử quy định 5.2 4.4 Phép đo quang phổ Đạt yêu cầu phép thử quy định 5.3 4.5 Các tiêu lí - hóa Các tiêu lí - hóa -apo-8'-carotenal theo quy định Bảng Bảng - Chỉ tiêu lí - hóa -apo-8'-carotenal Tên tiêu Mức yêu cầu Hàm lượng chất màu tổng số, % khối lượng, không nhỏ 96 Hàm lượng chất màu phụ tính theo carotenoid ngoại trừ -apo-8'carotenal, % khối lượng so với chất màu tổng số, không lớn 3 Hàm lượng tro sulfat, % khối lượng, khơng lớn Hàm lượng chì, mg/kg, khơng lớn Phương pháp thử 5.1 Xác định độ hòa tan, theo 3.7 TCVN 6469:2010 0,1 5.2 Phép thử carotenoid Thêm dung dịch natri nitrit 5% dung dịch axit sulfuric 0,5 M vào dung dịch mẫu thử axeton, dung dịch mẫu thử bị màu 5.3 Phương pháp nhận biết đo quang phổ Xác định độ hấp thụ (A) dung dịch mẫu thử pha loãng (xem 5.4) bước sóng 461 nm 488 nm Tỷ số A488/A461 phải nằm khoảng từ 0,80 đến 0,84 5.4 Xác định hàm lượng chất màu tổng số, theo 3.3.1.4 (Phương pháp đo quang phổ) TCVN 6470:2010 5.4.1 Điều kiện xác định quang phổ - Khối lượng mẫu thử: 0,08 g ± 0,01 g; - Dung tích bình định mức: V1 = V2 = V3 = 100 ml; - Dung tích pipet: v1 = v2 = ml; - Độ hấp thụ riêng chất chuẩn: A 11%cm = 2640; - Bước sóng tương ứng với độ hấp thụ cực đại: khoảng 461 nm 5.4.2 Tính kết Hàm lượng chất màu tổng số mẫu thử, X1, tính phần trăm khối lượng (%) theo cơng thức sau: X1 A V1 D A11% cm w A độ hấp thụ dung dịch mẫu thử pha lỗng hai lần bước sóng 461 nm; A 11%cm độ hấp thụ riêng -caroten ( A cm = 2640); V1 dung tích bình định mức, tính mililít (V1 = 100 ml); D hệ số pha loãng ( D w khối lượng mẫu thử, tính gam (g) 1% V2 V3 ); v1 v2 5.5 Xác định hàm lượng chất màu phụ 5.5.1 Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử tinh khiết phân tích, nước sử dụng phải nước cất nước có chất lượng tương đương 5.5.1.1 Hydroxytoluen butyl hóa (BHT) 5.5.1.2 2-Propanol 5.5.1.3 N-etyldiisopropyl-amin 5.5.1.4 Amoni axetat, dung dịch 0,2 % 5.5.1.5 Axetonitril 5.5.1.6 Metanol 5.5.1.7 Etanol 5.5.1.8 Tetrahydrofuran 5.5.1.9 Dung mơi pha động Hòa tan 50 mg BHT (5.5.1.1) 20 ml 2-propanol (5.5.1.2) đựng bình định mức 000 ml Thêm 0,2 ml N-etyldiiopropyl-amin (5.5.1.3), 25 ml dung dịch amoni axetat 0,2% (5.5.1.4), 455 ml axetonitril (5.5.1.5) khoảng 450 ml metanol (5.5.1.6) Để cho hỗn hợp nhiệt độ phòng thêm metanol đến vạch Sử dụng dung môi pha động vòng ngày sau chuẩn bị 5.5.2 Thiết bị, dụng cụ Sử dụng thiết bị, dụng cụ phòng thử nghiệm thông thường cụ thể sau: 5.5.2.1 Thiết bị HPLC, trang bị detector UV/VIS detector mảng diot, bơm mẫu tự động có làm lạnh tích phân 5.5.2.2 Cột sắc kí, ví dụ: cột pha đảo C18, Suplex pkb-100 (kích thước 250 mm x 4,6 mm, cỡ hạt m) loại tương đương 5.5.2.3 Bình định mức, dung tích 100 ml 000 ml 5.5.2.4 Cân phân tích, cân xác đến 0,1 mg 5.5.3 Cách tiến hành 5.5.3.1 Chuẩn bị dung dịch mẫu thử Cân 10 mg mẫu thử, xác đến 0,1 mg, hòa tan tetrahydrofuran (5.5.1.8) (đã ổn định dung dịch BHT 0,025 %) Chuyển hỗn hợp sang bình định mức 100 ml (5.5.2.3) thêm tetrahydrofuran đến vạch Pha loãng dung dịch thu với etanol (5.5.1.7) theo tỉ lệ thể tích : 10 5.5.3.2 Điều kiện sắc kí - Bước sóng detector: 463 nm; - Cột: theo 5.5.2.2; - Pha động: dung mơi 5.5.1.9; - Rửa giải: đẳng dòng; - Nhiệt độ cột: 30 0C; - Tốc độ dòng: 0,6 ml/min; - Thể tích bơm: 10 l; - Nhiệt độ bơm lấy mẫu tự động: khoảng 15 0C; - Thời gian chạy sắc kí: khoảng 35 5.5.3.3 Tiến hành sắc kí Bơm dung dịch mẫu thử vào hệ thống HPLC Thời gian lưu all-trans- -apo-8'-carotenal nằm khoảng từ đến tương ứng với pic lớn sắc kí đồ Thời gian lưu tương đối carotenoid có hàm lượng nhỏ so với all-trans- -apo-8'-carotenal là: all-transcrocetindialdehit (0,54), all-trans- -apo-12'-carotenal (0,84) all-trans- -caroten (2,55) Tích phân diện tích pic sắc kí đồ 5.5.4 Tính kết Hàm lượng carotenoid ngoại trừ -apo-8'-carotenal, X2, biểu thị phần trăm khối lượng so với chất màu tổng số, tính theo công thức sau: X2 At Aa At 100 đó: At tổng diện tích pic sắc kí đồ, ngoại trừ pic dung mơi, tính theo đơn vị diện tích; Aa diện tích pic -apo-8'-carotenal sắc kí đồ, tính theo đơn vị diện tích 5.6 Xác định hàm lượng tro sulfat, theo 5.3.3.1.1 TCVN 8900-2:2012, sử dụng g mẫu thử 5.7 Xác định hàm lượng chì, theo TCVN 8900-6:2012, TCVN 8900-7:2012 TCVN 89008:2012 ... yêu cầu phép thử quy định 5.3 4.5 Các tiêu lí - hóa Các tiêu lí - hóa -apo-8'-carotenal theo quy định Bảng Bảng - Chỉ tiêu lí - hóa -apo-8'-carotenal Tên tiêu Mức yêu cầu Hàm lượng chất màu tổng... Xác định hàm lượng tro sulfat, theo 5.3.3.1.1 TCVN 8900-2:2012, sử dụng g mẫu thử 5.7 Xác định hàm lượng chì, theo TCVN 8900-6:2012, TCVN 8900-7:2012 TCVN 89008:2012 ... Nhiệt độ bơm lấy mẫu tự động: khoảng 15 0C; - Thời gian chạy sắc kí: khoảng 35 5.5.3.3 Tiến hành sắc kí Bơm dung dịch mẫu thử vào hệ thống HPLC Thời gian lưu all-trans- -apo-8'-carotenal nằm khoảng