Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết được nghiên cứu với mục đích nhằm xác định tỷ lệ và đánh giá mức độ đứt gãy ADN tinh trùng (TT) trong các trường hợp sẩy thai, thai lưu. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết của tài liệu.
TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 ĐÁNH GIÁ SỰ ĐỨT G Y ADN CỦA TINH TRÙNG NAM GIỚI TRONG CÁC CẶP VỢ CHỒNG SẨY THAI, THAI LƢU Đoàn Thị Kim Phượng*; Phạm Thị Xuân*; Lương Thị Lan Anh*; Trần Đức Ph n* TÓM TẮT Mục tiêu: xác định tỷ lệ đánh giá mức độ đứt gãy ADN tinh trùng (TT) trường hợp sẩy thai, thai lưu Đối tượng phương pháp: nghiên cứu mô tả cắt ngang trên152 mẫu tinh dịch người chồng cặp vợ chồng có tiền sử sẩy thai, thai lưu đến xét nghiệm Trung tâm Tư vấn Di truyền, Bệnh viện Trường Đại học Y Hà Nội với kết mật độ TT > triệu/ml Kết quả: 19,7% mẫu tinh dịch có DFI < 15%; 79,3% mẫu tinh dịch có DFI > 15% Nhóm sẩy thai > lần có 100% trường hợp tỷ lệ đứt gãy ADN trung bình cao Tỷ lệ đứt gãy ADN TT tăng theo tuổi bệnh nhân (BN) Mức độ đứt gãy ADN TT phân loại theo QNS khơng có mối liên quan đến số lần sẩy thai, thai lưu Kết luận: tỷ lệ đứt gãy ADN TT bất thường (DFI > 15%) gặp chủ yếu BN có tiền sử sẩy thai, thai lưu Tỷ lệ đứt gãy ADN TT tỷ lệ thuận với số lần sẩy thai, thai lưu tăng theo tuổi BN * Từ khóa: Đứt gãy ADN tinh trùng; FDI; Sẩy thai; Thai lưu Assessment of the Sperm DNA Fragmentation in Semen Samples from Couples with Pregnancy Loss Summary Objectives: To determine the rate of sperm DNA fragmentation in cases of miscarriage, stillbirth and evaluation the level of sperm DNA damage in couples with pregnancy loss Subjects and methods: A cross-sectional study was conducted on 152 semen samples from couples with a history of pregnancy loss and sperm concentration > millions/mL Results: 19.7% of sperm samples with DFI < 15%; 79.3% of sperm samples with DFI > 15% The above - times - group of miscarriage with 100% cases of high or moderate DFI The rate of sperm DNA fragmentation increased with age of the patient The levels of sperm DNA fragmentation classified according to halo size are not related to the number of pregnancy loss Conclusion: The high rate of sperm DNA damage (DFI > 15%) are found predominantly in patients with a history of pregnancy loss The rate of sperm DNA fragmentation is proportional to the number of miscarriage and increases with age of the patient * Keywords: Sperm DNA fragmentation; DFI; Miscarriage; Stillbirth * Trường Đại học Y Hà Nội Người phản hồi (Corresponding): Đoàn Thị Kim Phượng (phuongdk75@gmail.com) Ngày nhận bài: 27/07/2017; Ngày phản biện đánh giá báo: 29/08/2017 Ngày báo đăng: 01/09/2017 277 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ-2017 ĐẶT VẤN ĐỀ Sẩy thai, thai lưu hay bất thường khác thai di truyền nguyên nhân hay gặp Tìm nguyên nhân gây rối loạn vật chất di truyền TT giúp ích nhiều cho điều trị vơ sinh, điều trị bất thường phôi thai Đứt gãy AND TT rối loạn vật chất di truyền dẫn tới giảm chức chất lượng TT Đây nguyên nhân giảm khả thụ tinh thai thai phát triển, dị tật bẩm sinh, thai chết lưu hay nguy sẩy thai cao [1, Tỷ lệ đứt gãy AND TT (DFI) ảnh hưởng đến tỷ lệ thụ tinh chất lượng phôi thai, làm giảm tỷ lệ thành công biện pháp hỗ trợ sinh sản [3, Vì vậy, chúng tơi tiến hành đề tài nhằm: Xác định tỷ lệ đánh giá mức độ đứt gãy ADN TT trường hợp sẩy thai, thai lưu ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - DFI > 30%: tỷ lệ đứt gãy ADN TT cao DFI (%) = TT có halo nhỏ + TT khơng có halo + TT nhân thối hóa TT đếm * Các biến số mức độ đứt gãy ADN TT: - Quầng nhiễm sắc nhỏ: quầng halo ≤ 1/3 đường kính ngang nhân - Quầng nhiễm sắc thối hóa: TT có nhân bắt màu kém, khơng - Khơng có quầng nhiễm sắc - TT có quầng halo lớn: quầng halo ≥ đường kính ngang nhân - TTcó quầng halo vừa: 1/3 đường kính ngang nhân < kích thước quầng halo < đường kính ngang nhân * Phân tích liệu: phần mềm xác suất thống kê SPSS 22 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU T lệ đứt gãy ADN TT * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT chung trường hợp sẩy thai, thai lưu: Đối tƣợng nghiên cứu 152 người chồng cặp vợ chồng có tiền sử sẩy thai, thai lưu có: - Xét nghiệm tinh dịch đồ Bộ môn Y sinh học - Di truyền, Trường Đại học Y Hà Nội với kết mật độ TT > triệu/ml - Chưa tìm thấy nguyên nhân gây sẩy thai, thai lưu người vợ Phƣơng pháp nghiên cứu Nghiên cứu mô tả cắt ngang * Các biến số tỷ lệ đứt gãy ADN TT: - DFI < 15%: tỷ lệ đứt gãy ADN TT thấp - DFI 15 - 30%: tỷ lệ đứt gãy ADN TT trung bình 278 Biểu đồ 1: Tỷ lệ đứt gãy ADN TT trường hợp sẩy thai, thai lưu Tỷ lệ đứt gãy ADN TTcủa trường hợp sẩy thai, thai lưu tập trung chủ yếu vào nhóm có DFI 15 - 30% (40,8%) DFI > 30% (39,5%) Tỷ lệ đứt gãy ADN TT thấp nhóm DFI < 15% (19,7%) TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT riêng nhóm sẩy thai ho c thai lưu: Biểu đồ 2: Tỷ lệ đứt gãy ADN TT riêng nhóm sẩy thai thai lưu Tỷ lệ đứt gãy ADN TT nhóm sẩy thai: DFI < 15% (17,4%), DFI 15 - 30% (40,6%) DFI > 30% (42%) Nhóm thai lưu: DFI < 15% (19,3%), DFI 15 - 30% (41,3%) DFI > 30% (39,4%) Do đó, nhóm sẩy thai, số mẫu tinh dịch có tỷ lệ đứt gãy trung bình cao lớn so với số mẫu tinh dịch có tỷ lệ đứt gãy thấp Ở nhóm thai lưu có kết tương tự * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT với số lần sẩy thai: DFI < 15% 100% 75% 64.7% 35.3% DFI >= 15% 25% Sảy thai lần Sảy thai lần Sảy thai > lần Biểu đồ 3: Tỷ lệ đứt gãy ADN TT với số lần sẩy thai Trong nhóm sẩy thai lần, sẩy thai lần sẩy thai > lần, tỷ lệ đứt gãy ADN TT tập trung chủ yếu vào nhóm đứt gãy trung bình nhiều Tỷ lệ BN thuộc nhóm DFI < 15% giảm dần theo số lần sẩy thai BN So sánh tỷ lệ DFI ≥ 15% nhóm sẩy thai lần với nhóm > lần nhóm sẩy thai lần với nhóm > lần có khác biệt rõ rệt (p < 0,05) Đặc biệt nhóm sẩy thai > lần, tỷ lệ đứt gãy ADN TT mức trung bình cao 279 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ-2017 * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT tuổi BN: Biểu đồ 4: Tỷ lệ đứt gãy ADN TT tuổi BN Ở nhóm tuổi từ 25 - 35, từ 35 - 45 > 45, tỷ lệ BN nhóm đứt gãy nh (DFI < 15%) giảm dần so với độ tuổi BN thuộc nhóm đứt gãy trung bình nhiều tăng dần theo độ tuổi Ở nhóm BN độ tuổi > 45, 55,2% BN có DFI > 30% so với nhóm DFI < 15% 17,2% (p < 0,05) 27,6% BN có DFI 15 - 30% so với nhóm DFI < 15% (p < 0,05) Kết nghiên cứu mức đ đứt gãy AND * Mức độ đứt gãy ADN TT số lần sẩy thai: Bảng 1: Sẩy thai lần (n = 51) Sẩy thai ≥ lần (n = 18) r 8,1 ± 6,0 7,6 ± 4,5 0,4 Khơng có quầng nhiễm sắc (%) 13,4 ± 11,2 11,2 ± 6,4 0,28 Quầng nhiễm sắc thối hóa (%) 10,3 ± 7,9 9,8 ± 5,6 0,12 Mức đ đứt gãy ADN TT Quầng nhiễm sắc nhỏ (%) Mức độ đứt gãy ADN TT phân loại theo quầng nhiễm sắc khơng có mối liên quan đến số lần sẩy thai * Mức độ đứt gãy ADN TT số lần thai lưu: Bảng 2: Thai lƣu lần (n = 58) Thai lƣu ≥ lần (n = 51) r 8,6 ± 7,3 7,7 ± 6,3 0,4 Khơng có quầng nhiễm sắc (%) 13,3 ± 10,8 11,4 ± 10,6 0,3 Quầng nhiễm sắc thối hóa (%) 9,3 ± 7,1 8,8 ± 7,2 0,2 Mức đ đứt gãy ADN TT Quầng nhiễm sắc nhỏ (%) Mức độ đứt gãy ADN TT phân loại theo quầng nhiễm sắc khơng có mối liên quan đến số lần thai lưu 280 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 BÀN LUẬN Đánh giá t lệ đứt gãy ADN TT BN nam * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT: Đứt gãy AND gây tổn thương máy di truyền, hậu làm giảm khả tham gia tạo hợp tử TT gây đột biến nên tăng tỷ lệ sẩy thai, thai lưu Trong nghiên cứu chúng tơi, nam giới mà vợ chồng có tiền sử sẩy thai, thai lưu, tỷ lệ đứt gãy ADN TT nhóm đứt gãy trung bình cao chiếm chủ yếu (79,3%) Đứt gãy ADN TT có DFI ≥ 15% ảnh hưởng rõ rệt đến tiền sử sẩy thai, thai lưu vợ Nghiên cứu Elzanaty Humandai [5, 6] với BN có mức độ đứt gãy ADN TTDFI > 30%, hội thụ thai tự nhiên làm IVF phương pháp hỗ trợ sinh sản khác gần không Nhưng nghiên cứu chúng tơi, 60 BN có TT đứt gãy DFI > 30% có tượng thụ tinh Kết gợi ý quan điểm khác thụ thai nhân tạo với trường hợp FDI > 30% BN có DFI > 30% điều trị sớm điều trị có hội mang thai tự nhiên * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT số lần sẩy thai, thai lưu: Khi so sánh nhóm sẩy thai, tỷ lệ đứt gãy ADN TT bình thường (DFI < 15%) cao nhóm sẩy thai lần giảm dần theo số lần sẩy thai, đặc biệt nhóm sẩy thai > lần, 100% trường hợp BN thuộc nhóm đứt gãy trung bình cao Kết tương tự với nghiên cứu công bố Brahem S: tỷ lệ đứt gãy ADN TT BN mà vợ chồng có tiền sử sẩy thai tăng đáng kể so với nhóm chứng [7] Như vậy, tỷ lệ đứt gãy ADN TT liên quan rõ đến số lần sẩy thai, khác biệt có ý nghĩa thống kê Ở trường hợp sẩy thai lần, sẩy thai, thai lưu nguyên nhân vợ hay đứt gãy ADN TT chịu tác động số yếu tố khác như: mơi trường làm việc có phóng xạ, thụ thai trường hợp người chồng bị ốm hay uống rượu làm chất lượng TT nên tỷ lệ sẩy thai cao (DFI < 15%) Với trường hợp sẩy thai ≥ lần, yếu tố ngoại cảnh ảnh hưởng so với nguyên nhân nội sinh vợ chồng, nên tỷ lệ đứt gãy ADN TT tăng cao * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT theo tuổi: Trong nghiên cứu, DFI trung bình tăng theo tuổi nhóm BN 25 - 35 tuổi, 35 45 tuổi > 45 tuổi tăng rõ rệt theo tuổi Kết phù hợp với nghiên cứu Moskovtsev Theo Moskovtsev, so với nhóm tuổi < 30, nhóm tuổi > 45 có tỷ lệ TT bị đứt gãy DFI tăng gấp đôi (15,2% so với 32,0%) Tỷ lệ đứt gãy ADN TT phụ thuộc vào cá thể BN chịu tác động từ bên hút thuốc lá, tia phóng xạ hay ăn uống có chất độc hại, tích lũy tăng dần lên theo tuổi Ngồi ra, oxy hóa nguyên nhân gây oxy hóa phân tử oxy hóa ADN gây đứt gãy AND Khi tuổi cao, trình oxy hóa phân tử nhiều, ngun nhân gây lão hóa, đồng thời việc oxy hóa gây tổn thương AND nhiều [8] 281 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ-2017 Mức đ đứt gãy ADN TT trƣờng hợp sẩy thai, thai lƣu - Tỷ lệ đứt gãy ADN TT thay đổi rõ rệt theo số lần sẩy thai Trong nghiên cứu chúng tôi, mức độ đứt gãy ADN phân loại theo quầng nhiễm sắc, quầng nhiễm sắc nhỏ, khơng có quầng nhiễm sắc, quầng nhiễm sắc thối hóa khơng có mối liên quan với số lần sẩy thai, thai lưu Theo Muriel L Absalan [8, , trường hợp sẩy thai, thai lưu giảm tỷ lệ quầng nhiễm sắc rộng tăng tỷ lệ quầng nhiễm sắc nhỏ, quầng nhiễm sắc thối hóa khơng có quầng nhiễm sắc so với nhóm chứng khơng có tiền sử sẩy thai, thai lưu - Tỷ lệ đứt gãy ADN TT tăng theo tuổi BN Trên thực tế, điều trị, việc sử dụng thuốc chống oxy hóa cho nam giới để hạn chế khắc phục vô sinh bất thường sinh sản không phụ thuộc vào tỷ lệ đứt gãy ADN cao đến mức mà cần lưu ý đến tỷ lệ mức độ tổn thương ADN, khơng có quầng nhiễm sắc quầng nhiễm sắc thối hóa Đặc biệt, phối hợp thuốc chống oxy hóa điều trị đứt gãy ADN TT cần lưu ý đến mức độ tổn thương ADN TT [10] KẾT LUẬN * Tỷ lệ đứt gãy AND TT trường hợp sẩy thai, thai lưu: - Tỷ lệ đứt gãy ADN TT chung cho nhóm sẩy thai, thai lưu, nhóm DFI < 15% (19,7%), nhóm DFI > 15% (79,3%) Nam giới mà vợ chồng có tiền sử sẩy thai, thai lưu, tỷ lệ đứt gãy ADN TT chủ yếu loại đứt gãy trung bình nhiều 282 * Mức độ đứt gãy ADN TT: - Tỷ lệ loại quầng nhiễm sắc nhỏ, khơng có quầng nhiễm sắc quầng nhiễm sắc thối hóa nhóm sẩy thai, thai lưu lần ≥ lần tương đương - Các mức độ đứt gãy ADN TT phân loại theo quầng nhiễm sắc khơng có mối liên quan đến số lần sẩy thai, thai lưu Kết nghiên cứu gợi ý cặp vợ chồng có tiền sử sẩy thai, thai lưu, người chồng nên xét nghiệm đứt gãy ADN TT để xác định ngun nhân từ có phương hướng điều trị thích hợp nhằm tăng chất lượng phôi thai L I CẢM ƠN Nhóm nghiên cứu xin chân thành cảm ơn hỗ trợ đồng nghiệp Bộ môn Y sinh học Di truyền, Trường Đại học Y Hà Nội TÀI LIỆU THAM KHẢO Williams Obstetrics Abortion, 23rd Edition 2010 Said T.M Agarwal A Role of sperm chromatin adnormalities and DNA damage in male inferlitily Human repord Update 2003, 9, pp.331-345 Said T Sharma R.K, Agarwal A Sperm DNA damage and its clinical relevance in assessing reproductive outcome Asian Journal of Andrology 2004, 6, pp.139-148 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 Lost L.K Evenson D.P, Larson K.L Sperm chromatin structural assay: Its clinical use for detecting sperm DNA fragmentationation in male infertility and comparions with other techniques, Asian Journal of Andrology 2002, 23, pp.25-43 Elzanaty S Erenpresis J, Giwercman A Sperm DNA damage in men from infertile couples, Asian Journal of Andrology 2008, 10, pp.786-790 Humaidan P Bungum M, Spano M et al The predictive value of sperm chromatin structure assay (SCSA) parameters for the outcome of intrauterine insemination ,IVF and ICSI, Human Reproduction Update 2004, 19, pp.1401-1408 Mehdi M Brahem S, Landolsi H, Mougou S, Elgheza H, Saad A Semen parameters and sperm DNA fragmentationation as causes of recurrent pregnancy loss Urology 2011 Meseguer M Muriel L, Fernández J, Alvarez J, Remohí J, PellicerA and Garrido N Value of the sperm chromatin dispersion test in predicting pregnancy outcome in intrauterine insemination: a blind prospective study, the 21st Annual Meeting of the ESHRE in Copenhagen (Denmark) 2014 Ghannadi A Absalan F, Kazerooni M, Parifar R, Jamalzadeh F, Amiri S Value of sperm chromatin dispersion test in couples with unexplained recurrent abortion Published online 2011 10 D Jaiswal, Sah, R Agrawal N.K Combined effect of GSTT1 and GSTM1 polymorphisms on human male infertility in north Indian population Reprod Sci 2012, 19, pp.312-316 283 ... CỨU T lệ đứt gãy ADN TT * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT chung trường hợp sẩy thai, thai lưu: Đối tƣợng nghiên cứu 152 người chồng cặp vợ chồng có tiền sử sẩy thai, thai lưu có: - Xét nghiệm tinh dịch... mà vợ chồng có tiền sử sẩy thai, thai lưu, tỷ lệ đứt gãy ADN TT nhóm đứt gãy trung bình cao chiếm chủ yếu (79,3%) Đứt gãy ADN TT có DFI ≥ 15% ảnh hưởng rõ rệt đến tiền sử sẩy thai, thai lưu vợ. .. QUÂN SỰ SỐ CHUYÊN ĐỀ HÌNH THÁI HỌC-2017 * Tỷ lệ đứt gãy ADN TT riêng nhóm sẩy thai ho c thai lưu: Biểu đồ 2: Tỷ lệ đứt gãy ADN TT riêng nhóm sẩy thai thai lưu Tỷ lệ đứt gãy ADN TT nhóm sẩy thai: