Nghiên cứu một số đặc điểm lâm sàng, kiểu gen của helicobacter pylori ở bệnh nhân ung thư dạ dày

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm nhận xét một số đặc điểm lâm sàng, tỷ lệ kiểu gen CagA và VacA của Helicobacter pylori ở bệnh nhân ung thư dạ dày. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết của tài liệu.

TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, KIỂU GEN CỦA HELICOBACTER PYLORI Ở BỆNH NHÂN UNG THƢ DẠ DÀY Nguyễn Quang Duật*; Phạm Quang Phú*; Phạm Cao Kỳ* TÓM TẮT Nghiên cứu 60 bệnh nhân (BN) ung thư dày (UTDD) nhiễm H pylori, phân tích kết lâm sàng kiểu gen vi khuẩn (VK), rút kết luận sau: Tỷ lệ BN UTDD có triệu chứng đầy bụng (98,3%), sút cân (86,7%), triệu chứng thường gặp chán ăn (73,3%) đau vùng thượng vị khơng có chu kỳ (71,7%), xuất huyết tiêu hóa (51,7%) - Tỷ lệ gen VacA m1: 37/60 BN (61,6%), gen VacA m2: 11/60 BN (18,3%) - Tỷ lệ mang hai gen CagA(+) VacA m1(+) 70%, mang gen CagA(+) VacA m2(+) 6% Ngược lại, VK mang đơn gen CagA(-)/VacA m1(+) 20% CagA(-)/VacA m2(+) 80% (p < 0,01) - Nhiễm H pylori týp I mang đồng thời kiểu gen CagA(+) VacA(+) chiếm tỷ lệ cao (68,3%) Tỷ lệ týp III [CagA(+), VacA(-)) týp IV (Cag(-), VacA(+) 15% 16,7%] Khơng có trường hợp nhiễm VK thuộc týp II [CagA(-) VacA (-)] - Nhiễm H pylori nhóm CagA(+) mang kiểu gen VacA m1/s1 (có độc tính cao) chiếm 56,7%, kiểu gen VacA s1/m2 VacA s2/m2 (mang độc tính vừa) chiếm tỷ lệ thấp, tương ứng 6%, 7% 3,3%, không gặp trường hợp mang gen VacA s2/m1 * Từ khóa: Ung thư dày; Đặc điểm lâm sàng; H pylori; Kiểu gen Study of clinical features, genotype of H pylori in patients with gastric cancer summary Research on 60 patients with gastric cancer infected with H pylori, analysis of clinical outcomes, and genotype of bacteria, we take out some conclusions: - The ratio of symptoms: bloating (98.3%), weight loss (86.7%), the most common symptom is loss of appetite (73.3%) and epigastric pain without frequency (71.7%), gastrointestinal bleeding (51.7%) - The ratio of genes: VacA m1: 37/60 (61.6%),VacA m2: 11/60 (18.3%) CagA(+) and VacA m1(+) 70%, CagA gene(+) and VacA m2(+) 6%; CagA(-)/VacA m1(+) 20% and CagA(-)/VacA m2(+) 80% (p < 0.01) - The infection with H pylori subtype and genotype I that bring CagA(+) and VacA(+) is the highest ratio of 68.3% The ratio with type III [CagA(+), VacA(-)] and with type IV [CagA(-), VacA(+)] is 15% and 16.7%) No cases of infection with type II [CagA(-) VacA(-) is recorded - The infection with H pylori in group CagA(+) carrying genotypes VacA m1/s1 (highly toxic) is 56.7%, genotype s1/m2 VacA and VacA s2/m2 (medium toxic) is 6.7% and 3.3%, no cases withVacA s2/m1 gene is recorded * Key words: Gastric cancer; Clinical features; H pylori; Genotype * Bệnh viện Quân y 103 Người phản hồi (Corresponding): Phạm Quang Phú (bsphu79@yahoo.com) Ngày nhận bài: 10/03/2014; Ngày phản biện đánh giá báo: 06/04/2014 Ngày báo đăng: 10/04/2014 58 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 ĐẶT VẤN ĐỀ - BN đồng ý hợp tác nghiên cứu Ung thư dày bệnh lý hay gặp bệnh ung thư đường tiêu hóa, bệnh nặng thường phát muộn Nguyên nhân UTDD đến chưa hoàn toàn sáng tỏ Tổ chức Y tế Thế giới xếp H pylori vào nhóm I (các tác nhân gây UTDD) Gần đây, gen CagA VacA mã hóa tổng hợp protein tương ứng H pyroli chứng minh liên quan đến chế bệnh sinh bệnh lý dày-tá tràng, đặc biệt UTDD Vì vậy, tiến hành đề tài với mục tiêu: Nhận xét số đặc điểm lâm sàng, tỷ lệ kiểu gen CagA VacA Helicobacter pylori BN UTDD ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu 60 BN UTDD có nhiễm H pylori khám điều trị Bệnh viện Quân y 103 từ tháng 08 - 2012 đến 02 - 2013, với tiêu chuẩn chọn sau: - BN UTDD có nhiễm H pylori chẩn đoán xác định nội soi mô bệnh học (MBH) * Tiêu chuẩn loại trừ: - BN UTDD H pylori (-) - BN cắt đoạn dày - BN không hợp tác nghiên cứu Phƣơng pháp nghiên cứu Nghiên cứu theo phương pháp tiến cứu, mô tả cắt ngang BN khám lâm sàng ghi nhận dấu hiệu lâm sàng theo mẫu bệnh án thống Soi dày, sinh thiết chẩn đốn xác định UTDD có nhiễm H pylori dùng phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) đa mồi xác định kiểu gen H pylori Trung tâm Nghiên cứu Y học Quân sự, Học viện Quân y * Phương pháp xử lý số liệu: Dùng phần mềm STATA 7.0 STAVIEW 5.1; n < 5, sử dụng hiệu chỉnh Fisher (one tailed Fisher’s Exact test) So sánh giá trị nghiên cứu test χ2, độ tin cậy 95% xác suất có ý nghĩa thống kê p < 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Nghiên cứu 60 BN UTDD chẩn đoán nội soi MBH Bệnh viện Quân y 103, kết cho thấy sau: ng Phân bố BN theo tuổi giới (n = 39) (n = 21) (n = 60) n Tỷ lệ % n Tỷ lệ % n Tỷ lệ % 20 - 29 3,3 0,0 3,3 30 - 39 1,7 5,0 6,7 40 - 49 6,7 3,3 10,0 59 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 50 - 59 11 18,3 8,3 16 26,7 60 - 69 15,0 8,3 14 23,3 70 - 79 10 16,7 6,7 14 23,3 ≥ 80 3,3 3,3 6,7 Trung bình 60,0 ± 1,3 Về tuổi, qua nghiên cứu thấy UTDD cao khoảng tuổi 50 - 59 (26,7%), tiếp đến tuổi 60 - 69 70 - 79 (23,3%); khoảng tuổi có tỷ lệ thấp 20 - 29 (3,33%), khơng có trường hợp < 20 tuổi Người có tuổi thấp 28, cao 84, tuổi trung bình 59,5 Nguy mắc bệnh UTDD bắt đầu tăng cao từ tuổi 40, nhiều tác giả đưa khuyến cáo: người 40 tuổi có triệu chứng sút cân k m ăn k o dài, nên nội soi để phát UTDD Về giới, theo tác giả, nam có tỷ lệ mắc UTDD cao n , tỷ lệ nam/n dao động khoảng từ 1,3 - 2,2 Trong nghiên cứu chúng tôi, nam mắc bệnh 65%, cao n (35%) tỷ lệ nam/n 1,86 Tuổi mắc bệnh trung bình nam n tương đương (60 so với 59 tuổi) * Triệu chứng lâm sàng UTDD: Chán ăn: 44 BN (73,3%); đầy bụng khó tiêu: 59 BN (98,3%); buồn nôn, nôn: 29 BN (48,3%); đau âm ỉ vùng thượng vị khơng có chu kỳ: 43 BN (71,7%); gày sút cân: 52 (86,7%); hạch thượng đòn: BN (8,3%); sờ thấy u vùng thượng vị: 10 BN (16,7%); xuất huyết tiêu hóa: BN (15,0%) 59,0 ± 1,5 59,5 ± 1,0 * Phân bố theo tỷ lệ gen CagA(+), CagA(-): CagA(+): 50 BN (83,3%); CagA(-): 10 BN (6,7%) Gần đây, số nghiên cứu khác Việt Nam cho thấy gen CagA có tỷ lệ từ 71 - 92% người bị nhiễm H pylori [2] Tỷ lệ CagA(+) BN UTDD Kumar S Kumar A, Trần Ngọc Ánh 100%; 80, 9% [1] Tỷ lệ VK mang gen CagA H pylori báo cáo từ vùng khác giới từ 50 - 70% nước châu Âu chiếm > 90% châu Á [5] Ở H pylori mang gen Cag A mã hóa, protein CagA chuyển dời vào tế bào đích thơng qua hệ cấu tiết trực tiếp, hoạt hóa, hoạt động yếu tố tăng trưởng, tác động nhiều protein truyền tín hiệu nội bào SHP-2, TFSS, ZO-1 (zonula occludens-1), JAM (junctional adhesion molecule), STAT3, Src, CYP1A2…, làm rối loạn trình tăng sinh, phát triển biệt hóa tế bào, hậu q trình biến tính ung thư [4, 9] Ngồi ra, vai trò gen CagA coi yếu tố với độc lực cao gây UTDD Protein CagA kết hợp với protein VacA khác H pylori gây nguy với biểu lâm sàng 60 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 mức độ khác BN UTDD Protein CagA chia làm hai loại chính: CagA WSS (Western CagA-specific sequence) CagA ESS (Easten Asian CagA-specific sequence), CagA ESS có khả gây bệnh cao có mối liên quan đến UTDD nhiều CagA WSS Theo Tạ Long, protein CagA người Việt Nam từ chủng H pylori phân lập chủ yếu mang mô týp protein CagA Đông Á, giống với quần thể người Nhật Bản, Hàn Quốc Trung Quốc [2] VacA s2-: 56 BN (93,3%); VacA m1+: 38 BN (63,3%); VacA m1-: 22 BN (36,7%); VacA m2+: 11 BN (18,3%); VacA m2-: 49 BN (81,7%) * Phân bố theo tỷ lệ gen VacA(+), VacA(-): Uchida CS tác VacA(+): 41 BN (68,3%); VacA(-): BN (15,7%) Kết nghiên cứu cho thấy gen VacA s2 chiếm tỷ lệ thấp Kết phù hợp với số tác giả nước: gen VacA s2 thường không xuất [2, 7], xuất với tần số từ thấp đến trung bình quần thể nghiên cứu [5] * Phân bố tỷ lệ kiểu gen VacA: H pylori mang gen VacA s1 chiếm tỷ lệ cao (83,3%) so với gen VacA m1 (63,3%) VacA m2 (18,3%), gen VacA s2 chiếm tỷ lệ thấp (6,7%) Kết phù hợp với nghiên cứu ngồi nước, đó, kiểu gen VacA s1 chiếm tỷ lệ cao quần thể Nghiên cứu giả Việt Nam năm 2009 thấy gen VacA s1 100% đối tượng, gen VacA m1: 43% Hà Nội so với 31% TP Hồ Chí Minh Gen VacA m2 Hà Nội 41% so với 65% TP Hồ Chí Minh Các tác giả kết luận: gen VacA m1 chủng H pylori phân lập BN Hà Nội, nơi có xuất độ UTDD cao, có ý nghĩa so với chủng H pylori phân lập TP Hồ Chí Minh VacA s1+: 50 BN (83,3%); VacA s1-: 10 BN (16,7%); VacA s2+: BN (6,7%); đưa giả thuyết gen VacA m1 gen kết hợp với UTDD BN Việt Nam [8] B ng 2: Mối liên quan gi a gen VacA CagA H pylori BN UTDD CagA(+) (n = 50) CagA(-) (n = 10) n Tỷ lệ % n Tỷ lệ % n Tỷ lệ % p VacA s1(+) 40 80 10 100 50 83,3 0,121 VacA s1- 10 20 0 10 16,7 VacA s2(+) 0 6, VacA s2(-) 46 92 10 100 56 93, VacA m1(+) 35 70 20 37 61, VacA m1(-) 15 30 80 23 38, (n = 60) VacA 0,354 0,003 61 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 VacA m2(+) 80 11 18, VacA m2(-) 47 94 20 49 81, 0,001 B ng 3: Tỷ lệ kiểu gen CagA VacA s/m H pylori BN UTDD VacA VacA(+) s1m1 CagA s1m2 s2m1 VacA(-) s2m2 n % n % n % n % CagA(+) 34 56,7 5,0 6,7 0 3, 50 CagA(-) 5,0 11,7 0 0 10 37 61,6 11 18,3 0 4, 60 Tổng số 51 Vai trò gen VacA bệnh sinh bệnh lý dày tá tràng UTDD chưa hiểu biết đầy đủ Theo Chiba N, độc tố gây hốc tế bào tổn thương tế bào biểu mô bề mặt tạo không bào tế bào biểu mơ có liên quan chưa rõ với bệnh lý dày tá tràng [6] Một số nghiên cứu cho rằng, VacA tác động, góp phần dẫn đến tồn H pylori dai dẳng niêm mạc dày qua chế urease H pylori thủy phân urê phân hủy thành lập phức hợp NH4Cl bảo vệ VK chống lại axít dày s2 (p > 0,05) Trong nghiên cứu chúng tơi, nhóm CagA(+), tỷ lệ kiểu gen gen VacA s1/m1 có độc lực chiếm tỷ lệ cao (56,7%), kiểu gen gen VacA s1/m2 tiết độc tố mức độ vừa phải chiếm 6,7%, kiểu gen VacA s2/m2 không độc 3,3%, kiểu gen genVacA s2/m1 không gặp nghiên cứu Kết thấp Trần Thiện Trung, nhóm CagA(+), kiểu gen VacA s1/m1 63,6%, kiểu gen VacA s1/m2 36,4% [4] Phù hợp với kết Kumar, nhóm CagA (+, kiểu gen VacA s1/m1 58,6%, VacA s1/m2: 43,2% Có khác biệt có ý nghĩa thống kê gi a VK mang đồng thời gen CagA(+) kiểu gen VacA m1(+) chiếm ưu thế, cao rõ rệt so với VK khơng mang gen CagA(-), có VacAm2(+) (p = 0,003) VK mang đồng thời gen CagA(+) gen VacA m2(+) có tỷ lệ cao so với VK có CagA(-) VacA m2(+) (p = 0,001) Tuy nhiên, không thấy khác biệt tỷ lệ VK mang gen CagA với VacA s1 VacA Như vậy, gen CagA(+) kết hợp với kiểu gen VacA s1/m1 gặp tỷ lệ cao UTDD, điều đặt vấn đề phải tầm soát theo dõi BN Việt Nam có nhiễm H pylori có CagA(+) kết hợp với kiểu gen VacA-s1/m1 62 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 B ng 4: Phân bố kiểu gen H pylori theo týp VK TÝP CỦA H pylori KIỂU GEN CỦA H pylori (CagA, VacA) n I Cag(+), VacA(+) 41 68,3 II Cag(-), VacA(-) 0 II Cag(+), VacA(-) 15 IV Cag(-), VacA(+) 10 16,7 60 100 Tổng Tỷ lệ týp I mang gen CagA(+) VacA(+) H pylori chiếm tỷ lệ cao (68,3%) týp mang hai gen độc CagA(+) VacA(+), týp III (15%) týp IV(16,7%), týp II khơng mang gen độc tố (0%) Kết Trần Ngọc Ánh nghiên cứu UTDD gặp týp I 78,6%; týp III 2,4% týp IV 19,0% [1] % Như vậy, týp I có tỷ lệ cao BN UTDD Tuy nhiên, cơng trình nghiên cứu Việt Nam trước chưa có điều kiện để phân tích kiểu gen VacA nhằm đánh giá đầy đủ vai trò VacA s1/s2 VacA m1/m2, mối liên quan gi a kiểu gen với trường hợp có gen CagA(+) bệnh UTDD * Hình nh thực ph n ứng PCR đa mồi mẫu ADN tách từ bệnh phẩm sinh thiết mô UTDD BN: Cột 12, thang chuẩn ADN; Cột số 2, mẫu âm tính; Cột số chứng dương, cột từ đến 11 mẫu BN UTDD Mẫu số s3, s4, s5, s7 dương tính với gen VacA s1, VacA m1 CagA; Mẫu số S1 dương tính với gen VacA S1 VacA m2 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 KẾT LUẬN Tiến hành nghiên cứu 60 BN UTDD nhiễm H pylori, phân tích kết lâm sàng, mô bệnh học kiểu gen VK, rút kết luận sau: * Đặc điểm lâm sàng: tỷ lệ BN UTDD có triệu chứng đầy bụng (98,3%), sút cân (86,7%), triệu chứng thường gặp chán ăn (73,3%) đau vùng thượng vị chu kỳ (71,7%), xuất huyết tiêu hóa (51,7%) * Đặc điểm kiểu gen mối liên quan kiểu gen H pylori: - Tỷ lệ gen VacA m1 chiếm 37/60 Bn (61,6%), gen VacA m2 chiếm 11/60 BN (18,3%) - Tỷ lệ mang hai gen CagA(+) VacA m1(+) 70%, mang gen CagA(+) VacA m2(+) 6% Ngược lại, VK mang đơn gen CagA (-)/VacA m1(+) 20% CagA (-) /VacA m2(+) 80% (p < 0,01) - Nhiễm H pylori týp I mang đồng thời kiểu gen CagA(+) VacA(+), chiếm tỷ lệ cao (68,3%) Tỷ lệ týp III [CagA(+), VacA(-)] týp IV [Cag(-), VacA(+) 15% 16,7%] Khơng có trường hợp nhiễm VK thuộc týp II (CagA(-) VacA(-) - Nhiễm H pylori nhóm CagA(+) mang kiểu gen VacA m1/s1 (có độc tính cao) chiếm 56,7%, kiểu gen VacA s1/m2 VacA s2/m2 (mang độc tính vừa) chiếm tỷ lệ thấp tương ứng 6, 7% 3,3%, không gặp trường hợp mang gen VacA s2/m1 Tạ Long Bệnh lý dày tá tràng vi khuẩn Helicobacter pylori Nhà xuất Y học 2003, tr 22, 25, 26, 28, 29-29, 73, 98, 101, 105, 125 Nguyễn Thị Nguyệt, Trần Văn Hợp CS Xác định týp gen CagA VagA chủng Helicobacter pylori phân lập từ BN bị viêm, lo t, UTDD Tạp chí Khoa học Tiêu hóa Việt Nam 2010, 19, tr.1265-1272 22 Trần Thiện Trung Helicobacter pylori UTDD Bệnh dày tá tràng nhiễm Helicobacter pylori Nhà xuất Y học 2008, tr.239-270 Boleek B.K, Sail B.A, Sander E Genotyping of Helicobacter pylori strains from gastric biopsies by multiplex polymerase chain reaction How advantageous is it? Microbial Infection 2007, 58, pp.67-70 Chiba N Ulcer disease and Helicobacter pylori infection: Etiology and treatment Evidencebased Gastroenterology and Hepatology 2010, pp.102-138 Molaei M et al Helicobacter pylori cagA status, vacA subtypes and histopathology finding in Iranian with patients chronic gastritis Iranian Journal of Pathology, 2009, (1), pp.1-25 Uchida T, Lam Tung Nguyen Analysis of virulence factors of Helicobacter pylori isolate from Vietnamese population BMC Microbiology 2009, 9, p.175 Wang F, Sun G, Zou Y, Zhong F, Ma T, Li X Protective role of Helicobacter pylori infection in prognosis of gastric cancer: Evidence from 2454 patients with gastric ancer PLoS One 2013, May 7, (5):e62440 TÀI LIỆU THAM KHẢO Trần Ngọc Ánh Nghiên cứu týp gen Helicobacter pylori biểu lộ protein P53 BN UTDD Luận án Tiến sỹ Y học Trường Đại học Y Hà Nội 2006 63 TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 64 ... Nhận xét số đặc điểm lâm sàng, tỷ lệ kiểu gen CagA VacA Helicobacter pylori BN UTDD ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu 60 BN UTDD có nhiễm H pylori khám điều trị Bệnh viện... CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 4-2014 ĐẶT VẤN ĐỀ - BN đồng ý hợp tác nghiên cứu Ung thư dày bệnh lý hay gặp bệnh ung thư đường tiêu hóa, bệnh nặng thư ng phát muộn Nguyên nhân UTDD đến chưa hoàn... phải chiếm 6,7%, kiểu gen VacA s2/m2 không độc 3,3%, kiểu gen genVacA s2/m1 không gặp nghiên cứu Kết thấp Trần Thiện Trung, nhóm CagA(+), kiểu gen VacA s1/m1 63,6%, kiểu gen VacA s1/m2 36,4% [4]