Nghiên cứu với mục tiêu trình bày về đột biến gen BRCA1 đã được khẳng định là yếu tố nguy cơ ung thư vú. Nghiên cứu này nhằm phát hiện đột biến gen BRCA1 trên bệnh nhân Việt Nam bị ung thư vú và người chưa phát bệnh thuộc nhóm nguy cơ cao bị ung thư vú.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 PHÁT HIỆN ĐỘT BIẾN GEN BRCA1 TRÊN PHỤ NỮ VIỆT NAM THUỘC NHÓM NGUY CƠ CAO BỊ UNG THƯ VÚ Hoàng Anh Vũ*, Lê Phương Thảo*, Phan Thị Xinh*, Đoàn Thị Phương Thảo*, Hứa Thị Ngọc Hà*, Nguyễn Sào Trung* TĨM TẮT Mục tiêu: Đột biến gen BRCA1 ñược khẳng ñịnh yếu tố nguy ung thư vú Nghiên cứu nhằm phát ñột biến gen BRCA1 bệnh nhân Việt Nam bị ung thư vú người chưa phát bệnh thuộc nhóm nguy cao bị ung thư vú Đối tượng, phương pháp: Chúng giải trình tự chuỗi DNA tồn vùng mã hóa gen BRCA1 cho 50 trường hợp bao gồm 26 bệnh nhân (khởi phát ung thư vú trước 40 tuổi có người quan hệ bậc I bị ung thư vú 24 người chưa phát bệnh thuộc gia đình ung thư vú Kết quả: Có tất 18 kiểu thay đổi gen BRCA1 ñược phát nghiên cứu này, với kiểu ñột biến ñã ñược chứng minh gây ung thư vú R1751X 1792X gặp 10 người (20%) thuộc gia đình có nhiều người ung thư vú Các kiểu đột biến chưa rõ chức gồm có Glu143Lys, Glu149Ala, Tyr856His Val1247Ile gặp bệnh nhân khác, đột biến Glu149Ala exon ñột biến lần ñầu tiên ñược phát chưa ñược báo cáo sở liệu BIC Đột biến Tyr856His gặp người gia đình, đột biến 1792X phát tổng số 24 người thuộc gia đình khác Kết luận: Đột biến gen BRCA1 đóng vai trò quan trọng gây ung thư vú gia đình Việt Nam Khảo sát ñột biến gen BRCA1 nên ñược thực cho người ung thư vú sớm có yếu tố gia đình Từ khóa: Đột biến gen BRCA1, ung thư vú ABSTRACT DETECTION OF BRCA1 MUTATIONS IN VIETNAMESE WOMEN AT HIGH RISK FOR BREAST CANCER Hoang Anh Vu, Le Phuong Thao, Phan Thi Xinh, Doan Thi Phuong Thao, Hua Thi Ngoc Ha, Nguyen Sao Trung * Y Hoc TP Ho Chi Minh – Vol.14 - Supplement of No – 2010: 674 - 681 Purpose: It is well established that mutations in BRCA1 gene significantly increase the risk of breast cancer This study was conducted to determine BRCA1 mutations in Vietnamese patients and relatives at high-risk for breast cancer Materials and methods: The whole coding region of BRCA1 were sequenced in 50 individuals including 26 patients with early-onset disease (diagnosed with breast cancer before 40 years old) or with family history, and 24 predictive cases from high risk families who did not have breast cancer Results: Here we report a total of 18 BRCA1 sequence alterations, of which two are deleterious mutations (R1751X and 1792X) found in 10 individuals (20%) from families with multiple breast cancer Mutations of uncertain significance such as Glu143Lys, Glu149Ala, Tyr856His, and Val1247Ile were detected in patients, of which the Glu149Ala in exon has not been reported previously in BIC database The Tyr856His mutation was present in individuals from one family, while the 1792X mutation in of 23 individuals tested from another family Conclusion: This study confirmed the relevance of BRCA1 mutations in Vietnamese patients with breast cancer Women with early-onset and familial breast cancer are candidates for detection of BRCA1 mutations Key words: BRCA1 mutations, breast cancer ĐẶT VẤN ĐỀ Trên giới, ung thư vú loại ung thư thường gặp phụ nữ, với nguy trọn đời khoảng 10%(9) ước tính có triệu trường hợp chẩn đốn năm(4,12) Tần suất ung thư vú có khuynh hướng gia tăng năm nước phát triển nước ñang phát triển Tại Việt Nam, tần suất ung thư vú 12,2/100.000 TPHCM 26,7/100.000 Hà Nội(2) Đây hai ñịa phương có tỷ lệ phụ nữ mắc ung thư vú cao nước, hầu hết trường hợp ngẫu nhiên Tuy nhiên, khoảng 5% trường hợp ung thư vú có mang yếu tố tiền định ung thư di truyền, chủ yếu ñột biến mầm * Đại học Y Dược TPHCM Địa liên lạc: BS Hồng Anh Vũ Email: hoangvuxinh@yahoo.com Chun đề Ung Bướu 674 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 số gen mẫn cảm ung thư Đột biến gen BRCA1 rối loạn di truyền trội nhiễm sắc thể thường hay gặp ung thư vú, chiếm 45% gia đình ung thư vú di truyền, với nguy trọn ñời ñối với người mang gen ñột biến lên ñến 80%(9) Đối với phụ nữ có đột biến làm tăng nguy cơ, biện pháp thực bao gồm tăng cường tầm sốt phát sớm, hóa trị liệu dự phòng phẫu thuật dự phòng Có nhiều kỹ thuật dùng để phát ñột biến BRCA1, SSCP (single strand conformation polymorphism), TPP (protein truncation test), HD (heteroduplex analysis), DGGE (denaturing gradient gel electrophoresis), DHPLC (denaturing highperformance liquid chromatography) giải trình tự chuỗi DNA Đây ñều kỹ thuật tốn nhiều thời gian thực BRCA1 gen chứa nhiều exon lớn Giải trình tự chuỗi DNA ñược coi tiêu chuẩn vàng ñể chẩn đốn đột biến BRCA1 kỹ thuật phát ñược tất thay ñổi nhỏ trình tự chuỗi DNA(1) Trong thời gian dài bệnh ung thư vú Việt Nam chủ yếu ñược nghiên cứu góc độ hình thái học thuộc nhóm tiên lượng kinh điển kích thước, tình trạng di hạch nách, loại mơ học, độ mơ học Tại Việt Nam chưa có nghiên cứu khảo sát đột biến BRCA1 bệnh nhân ung thư vú người có nguy cao bị ung thư dựa vào yếu tố gia đình Việc xác định đột biến BRCA1 giúp có kế hoạch phòng ngừa ung thư vú hiệu nhóm người có nguy cao Mục tiêu nghiên cứu nhằm xác lập ứng dụng quy trình kỹ thuật giải trình tự chuỗi DNA tồn vùng mã hóa BRCA1 để chẩn đốn định danh loại đột biến gặp bệnh nhân người có nguy cao bị ung thư vú Việt Nam ĐỐI TƯỢNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu: Nghiên cứu ñược tiến hành Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh năm 2009 2010 Đối tượng nghiên cứu phụ nữ Việt Nam có yếu tố sau ñây: 1) thân bị ung thư vú trước 40 tuổi; 2) có 01 người quan hệ bậc I (mẹ ruột, gái ruột, chị em gái ruột) bị ung thư vú trước 40 tuổi; 3) có 01 người quan hệ bậc I quan hệ bậc II (bà nội/ngoại ruột, cơ/dì ruột, cháu gái ruột) bị ung thư vú bên ung thư vú kèm ung thư buồng trứng; 4) có từ 02 người quan hệ bậc I quan hệ bậc II bị ung thư vú và/hoặc ung thư buồng trứng (khơng cần tính tuổi khởi phát 5) có từ 01 người nam quan hệ bậc I (cha ruột, trai ruột, anh em trai ruột) quan hệ bậc II (ông nội/ngoại ruột, chú/bác trai ruột, cháu trai ruột) bị ung thư vú Người Chuyên ñề Ung Bướu tham gia nghiên cứu có giấy ñồng ý tham gia tự nguyện Tách chiết genomic DNA: Chúng tơi dùng QIAamp DNA Kit (Qiagen, Hoa Kỳ) để tách chiết genomic DNA từ máu ngoại vi theo hướng dẫn nhà sản xuất Thiết kế mồi cho PCR sequencing: Tồn đoạn mồi thiết kế phần mềm Oligo 4.1 dựa trình tự chuẩn BRCA1 mang accession number NG005905 GenBank Thông tin ñoạn mồi ñược cung cấp ñộc giả có yêu cầu Thực PCR: Trong tube PCR có tổng thể tích 50 µL, thành phần gồm có PCR buffer, dNTP (250 µM cho loại), loại mồi xi ngược (0,5 µM cho loại), TaKaRa TaqTM HotStart Polymerase (1,25 unit) 20 ng genomic DNA Chu kỳ luân nhiệt ñược thực máy GeneAmp® PCR system 9700 (Applied Biosystems, Hoa Kỳ) bao gồm giai đoạn biến tính ban đầu 980C phút, theo sau 40 chu kỳ gồm biến tính 980C 10 giây, gắn mồi 580C 600C (tùy nhiệt ñộ bắt cặp mồi) 15 giây, tổng hợp chuỗi DNA 720C – phút (tùy chiều dài sản phẩm PCR) kết thúc giai ñoạn kéo dài sản phẩm 720C phút Sản phẩm PCR ñược phát ñiện di thạch agarose 1,2% có nhuộm ethidium bromide quan sát soi gel Pringraph (Atto, Nhật Bản) Sản phẩm PCR ñược tinh QIAquick Gel Extraction kit ñược kiểm tra lại ñiện di thạch agarose 1,2% Thực giải trình tự chuỗi DNA: Sản phẩm PCR ñã ñược tinh ñược thực phản ứng cycle sequencing với BigDye V3.1 từ Applied Biosystems, theo chiều xuôi ngược cho exon Sản phẩm sau kết tủa ethanol, hòa tan Hi-Di formamide, biến tính 950C phút trước làm lạnh đột ngột Trình tự DNA ñược ñọc máy ABI 3130 Genetic Analyzer, với POP-7 polymer capillary 50 cm (Applied Biosystems, Hoa Kỳ) Kết phân tích phần mềm SeqScape Số thứ tự nucleotide tính theo chuỗi cDNA bình thường BRCA1 với accession number U14860 GenBank KẾT QUẢ Chúng tơi dùng kỹ thuật giải trình tự chuỗi DNA ñể khảo sát ñột biến gen BRCA1 cho 50 phụ nữ thuộc nhóm nguy cao bị ung thư vú, có 26 bệnh nhân 24 người chưa bị bệnh Trong số 26 bệnh nhân có 15 bệnh nhân khởi phát sớm trước 40 tuổi không kèm yếu tố gia đình, bệnh nhân khởi phát sớm có kèm thêm yếu tố gia đình, bệnh nhân có yếu tố gia đình phát ung thư vú sau 40 tuổi 675 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 Điều kiện PCR ñã ñược xác lập ñể khuếch ñại 24 exon gen BRCA1 15 phản ứng (H.1) Các exon 4, 8, 13, 16, 17 20 ñược khuếch ñại riêng biệt, exon – 3, – 7, – 10, 14 – 15, 18 – 19, 21 – 22 23 – 24 ñược khuếch ñại chung Riêng exon 11 dài, phần ñầu ñược khuếch ñại riêng, phần sau ñược khuếch ñại với exon 12 Các phản ứng PCR cho băng ñặc hiệu tương ứng với sản phẩm có kích thước từ 294 bp ñến 2640 bp A PC R PC R PC R PC R 10 PC R 11 12 P CR P CR 13 14 P CR 18 15 16 PC R 19 PC R 10 20 P CR 17 PC R 1 21 P CR 22 P CR 23 24 PC R B M 10 11 12 13 14 15 2000 1000 100 Hình Khuếch đại tồn vùng mã hóa gen BRCA1 PCR (A) Vị trí đoạn mồi sử dụng 15 phản ứng Exon ñược biểu hình hộp chữ nhật, intron đoạn thẳng xen (B) Hình ảnh minh họa kết điện di sản phẩm PCR M: Kb Plus marker Kết giải trình tự chuỗi DNA phát 18 kiểu thay ñổi BRCA1 exon intron (H.2) Trong đột biến có ý nghĩa lâm sàng ñã ñược báo cáo sở liệu BIC (Breast Cancer Information Core: http://research.nhgri.nih.gov/bic/) Arg1751X 1792X Đột biến vô nghĩa thay arginine codon 1751 mã dừng sớm (Arg1751X) gặp bệnh nhân BC-17, trường hợp bị ung thư vú trước 40 tuổi có bà ngoại ruột bị ung thư vú (H.3A) Đột biến có ý nghĩa lâm sàng thứ hai làm lệch khung ñọc ñể tạo mã dừng sớm codon 1792 gặp bệnh nhân chị em ruột, khởi phát trước 40 tuổi (BC-20 BC-21) Bản chất ñột biến ñi nucleotide (cytosine) codon 1779 làm lệch khung ñọc với tạo thành 13 acid amin lạ mã dừng sớm vị trí 1792 (H.3B) Khảo sát ñột biến 22 thành viên chưa phát ung thư gia đình chúng tơi phát thêm trường hợp có mang đột biến 1792X, có chị em song sinh (H.3C) Một người (BC-46) vừa ñược phát có khối u vú phải Chun đề Ung Bướu 676 Nghiên cứu Y học Thay ñổi intron Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 SNP Đột biến nhầm nghĩa Lys38 Lys Glu143Lys IVS7+36delCTT Glu149Ala IVS8-58delT Ser265Ser Ser694Ser Leu771Leu Pro871Leu Glu1038Gly Lys1183Arg Ser1436Ser Ser1613Gly IVS18+66G>A Đột biến mã dừng sớm 10 11 Tyr856His Val1247Ile 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Arg1751X Stop 1792 Hình Vị trí phân bố thay đổi gen BRCA1 tìm thấy nghiên cứu Các exon ñược ñánh số thứ tự từ – 24, vùng xen kẽ tượng trưng cho intron (IVS: intervening sequence) Chuyên ñề Ung Bướu 677 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 Có kiểu đột biến chưa rõ ý nghĩa lâm sàng ñược phát hiện: Glu143Lys, Glu149Ala, Tyr856His Val1247Ile Đột biến Glu149Ala thay adenine cytosine codon 149 exon (Hình 5A), ñột biến chưa ñược báo cáo sở liệu BIC Đột biến Glu149Ala ñột biến Val1247Ile ñược phát bệnh nhân BC-13, bệnh nhân có tuổi khởi phát sớm (27 tuổi) Đột biến Tyr856His ñược phát người: Bệnh nhân BC-25 (có mẹ dì ruột bị ung thư vú) người khác chưa phát bệnh gia đình (BC-26: Con dì bệnh nhân BC-25 BC-27: Con gái bệnh nhân BC-25) Đột biến Glu143Lys gặp bệnh nhân khởi phát sớm bệnh sử gia đình ung thư vú A Bình thường Đột biến B Bình thường Đột biến C 30 32 46 33 29 20 38 43 49 36 37 34 35 41 21 31 39 42 48 44 45 47 50 Hình Các đột biến có ý nghĩa lâm sàng BRCA1 phát nghiên cứu (A) Mất cytosine codon 1779 gây lệch khung ñọc tạo mã kết thúc codon 1792 (B) Đột biến vô nghĩa thay Arginine codon 1751 mã kết thúc sớm TGA (C) Phân tích tính di truyền đột biến 1792X Các khung có đánh số người ñã ñược khảo sát ñột biến (khung vng: Nam, hình tròn: Nữ, tơ đen: Có đột biến) Mũi tên liền nét bệnh nhân, mũi tên dứt nét bệnh nhân xuất khối u thời gian tiến hành nghiên cứu Ngồi ñột biến trên, phát kiểu biến ñổi vùng exon kiểu biến ñổi intron Đây thay đổi coi vơ hại ñối với số chủng tộc ñịnh Các biến đổi làm thay đổi acid amin gồm có Pro871Leu, Glu1038Gly, Lys1183Arg Ser1613Gly Các biến ñổi vùng exon khơng thay đổi acid amin c.114G > A (Lys38Lys), c.795T > C (Ser265Ser), c.2082C > T (Ser694Ser), c.2311T > C (Leu771Leu) c.4308T > C (Ser1436Ser) Thay ñổi intron xảy vùng: Mất CTT intron (IVS7+36delCTT), thymidine intron (IVS8-58delT) thay guanine adenine intron 18 (IVS18 + 66G > A) BÀN LUẬN Mặc dù giải trình tự chuỗi DNA coi tiêu chuẩn vàng để chẩn đốn ñột biến BRCA1, nghiên cứu trước ñây phải dùng 40 cặp mồi để khuếch đại tồn exon vùng intron lân cận(11,17) Trong nghiên cứu này, chúng tơi thiết kế 15 cặp mồi để khuếch ñại toàn 24 exon vùng intron lân cận Thành cơng bước đơn giản hóa quy trình khuếch đại tồn vùng mã hóa Chun đề Ung Bướu 678 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 gen BRCA1 giúp cho trình giải trình tự DNA nhanh chóng tiết kiệm Tồn quy trình từ tách chiết genomic DNA có kết tình trạng đột biến BRCA1 thực vòng 72 Chẩn đốn ñột biến BRCA1 cho nhóm ñối tượng có nguy ung thư vú di truyền ñã trở nên khả thi điều kiện trang thiết bị có Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Một chiến lược thiết kế mồi tương tự hồn tồn áp dụng cho gen BRCA2 để đơn giản hóa q trình chẩn đốn đột biến, giúp rút ngắn thời gian chẩn đốn đột biến gen vòng tuần thay trung bình tuần trung tâm chẩn đốn(17) Trong nghiên cứu này, chúng tơi phát kiểu đột biến ñã ñược báo cáo có ý nghĩa lâm sàng Arg1751X 1792X 25 bệnh nhân quan hệ huyết thống, chiếm 8% Tỷ lệ tương ñương với báo cáo tần suất ñột biến có ý nghĩa BRCA1 nghiên cứu khác(8,14,15,16) Đột biến Arg1751X ñã ñược báo cáo bệnh nhân Việt Nam nghiên cứu tổng hợp 200 trường hợp bệnh nhân có nguồc gốc Châu Á Mỹ(10) Khảo sát ñột biến 1792X gia đình ung thư vú, chúng tơi phát 9/22 trường hợp có mang đột biến này, phù hợp với nghiên cứu trước tính di truyền trội nhiễm sắc thể thường ñột biến BRCA1 Trong chúng tơi tiến hành nghiên cứu thành viên BC-46 (người có mang đột biến) vừa phát có khối u vú phải Đây báo cáo ñầu tiên Việt Nam gia đình có đột biến BRCA1 gây bệnh ñược di truyền qua hệ Nghiên cứu chúng tơi khẳng định tầm quan trọng đột biến BRCA1 ñối với nguy ung thư vú người Việt Nam Trong tương lai, ñi với xét nghiệm di truyền để chẩn đốn đột biến, cần phải có bác sĩ tư vấn kết di truyền có chương trình tầm sốt phát sớm ung thư vú cho cá nhân Quan trọng nữa, chúng tơi đề nghị cần có chương trình phối hợp chặt chẽ phẫu thuật viên bác sĩ tư vấn di truyền để giúp người mang gen BRCA1 ñột biến ñịnh chọn lựa biện pháp phẫu thuật phòng ngừa phù hợp Có bệnh nhân mang ñột biến chưa rõ chức năng: Glu143Lys, Glu149Ala , Tyr856His Val1247Ile Trong số này, ñột biến Glu149Ala exon ñột biến lần ñầu tiên ñược phát chưa ñược báo cáo sở liệu BIC Tuy nhiên chúng tơi chưa thể kết luận đột biến người Việt Nam kiểu SNP chúng tơi khảo sát 50 cá thể chưa có nhóm chứng để so sánh tần suất alen Trong nghiên cứu 200 bệnh nhân Châu Á Mỹ, ñột biến Tyr856His ñược xếp vào loại ñột biến gây bệnh ñược phát bệnh nhân người Trung Quốc(10) Một nghiên cứu khác Malaysia phát ñột biến Tyr856His 1/37 bệnh nhân(16) Tuy nhiên, nghiên cứu khác 1306 người Trung Quốc sống Thượng Hải, đột biến Tyr856His tìm thấy bệnh nhân người bình thường(13) Trong nghiên cứu này, chúng tơi phát đột biến Tyr856His người có quan hệ huyết thống (BC-25, BC-26 BC-27) Để khẳng ñịnh ñược ñột biến Tyr856His ñột biến có ý nghĩa người Việt Nam kiểu SNP, cần có thêm nghiên cứu nhóm chứng người Việt Nam khơng liên quan tới nguy ung thư vú ñể biết ñược tần suất phân bố alen ñột biến cộng ñồng Các ñột biến biến thể ñược phát phân bố toàn chiều dài gen BRCA1, chứng tỏ kỹ thuật giải trình tự chuỗi DNA nghiên cứu đáng tin cậy Hai đột biến có ý nghĩa lâm sàng nằm ngồi exon 11 (Arg1751X 1792X) Một số nghiên cứu khảo sát ñột biến BRCA1 vùng exon 11(6,7) bỏ sót nhiều kiểu ñột biến bệnh nhân ung thư vú Đối với bệnh nhân Việt Nam, khảo sát ñột biến nên bao gồm giải trình tự tồn gen BRCA1 Trong số 26 bệnh nhân, có bệnh nhân khơng mang biến thể BRCA1 14 bệnh nhân mang thay đổi cho vơ hại BRCA1 Mặc dù chưa loại trừ ñược thay ñổi ñó làm tăng nguy người Việt Nam, bệnh nhân mang ñột biến gen BRCA2 gen khác P53, PTEN ñã ñược biết gây tăng nguy ung thư vú Trong ung thư vú, ñột biến BRCA2 tìm thấy với tần suất tương đương ñột biến BRCA(3,11) Đặc biệt, ñột biến BRCA2 ñóng vai trò quan trọng BRCA1 ung thư vú vài chủng tộc định, người Philippine(5) Vì cần mở rộng nghiên cứu để khảo sát toàn diện yếu tố di truyền ñịnh nguy ung thư vú người Việt Nam Chuyên ñề Ung Bướu 679 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 KẾT LUẬN Kỹ thuật giải trình tự chuỗi DNA chẩn đốn đột biến BRCA1 ñã phát ñược ñột biến có ý nghĩa lâm sàng Đây xét nghiệm nên ñược thực cho gia đình có người bị ung thư vú sớm có nhiều người bị ung thư vú, nhằm giúp phát người lành mang gen bệnh để có hướng tầm soát phát sớm ung thư tư vấn giải pháp điều trị phòng ngừa thích hợp Nên mở rộng nghiên cứu với cỡ mẫu lớn ñể khẳng ñịnh ý nghĩa ñột biến ñã ñược phát nghiên cứu khảo sát thêm đột biến gen BRCA2 để hồn chỉnh quy trình phát nguy ung thư vú di truyền cho người Việt Nam theo tiêu chuẩn nước tiên tiến.g TÀI LIỆU THAM KHẢO Andrulis IL, Anton-Culver H, Beck J, Bove B, Boyd J, Buys S, Godwin AK, Hopper JL, Li F, Neuhausen SL and others 2002 Comparison of DNA- and RNA-based methods for detection of truncating BRCA1 mutations Hum Mutat 20(1):65-73 Anh PT, Duc NB 2002 The situation with cancer control in Vietnam Jpn J Clin Oncol 32 Suppl:S92-7 Beristain E, Martinez-Bouzas C, Guerra I, Viguera N, Moreno J, Ibanez E, Diez J, Rodriguez F, Mallabiabarrena G, Lujan S and others 2007 Differences in the frequency and distribution of BRCA1 and BRCA2 mutations in breast/ovarian cancer cases from the Basque country with respect to the Spanish population: implications for genetic counselling Breast Cancer Res Treat 106(2):255-62 Boyle P, Ferlay J 2005 Cancer incidence and mortality in Europe, 2004 Ann Oncol 16(3):481-8 De Leon Matsuda ML, Liede A, Kwan E, Mapua CA, Cutiongco EM, Tan A, Borg A, Narod SA 2002 BRCA1 and BRCA2 mutations among breast cancer patients from the Philippines Int J Cancer 98(4):596-603 Emi M, Matsushima M, Katagiri T, Yoshimoto M, Kasumi F, Yokota T, Nakata T, Miki Y, Nakamura Y 1998 Multiplex mutation screening of the BRCA1 gene in 1000 Japanese breast cancers Jpn J Cancer Res 89(1):12-6 Esteves VF, Thuler LC, Amendola LC, Koifman RJ, Koifman S, Frankel PP, Vieira RJ 2009 Prevalence of BRCA1 and BRCA2 gene mutations in families with medium and high risk of breast and ovarian cancer in Brazil Braz J Med Biol Res 42(5):453-7 Katagiri T, Emi M, Ito I, Kobayashi K, Yoshimoto M, Iwase T, Kasumi F, Miki Y, Skolnick MH, Nakamura Y 1996 Mutations in the BRCA1 gene in Japanese breast cancer patients Hum Mutat 7(4):334-9 King MC, Marks JH, Mandell JB 2003 Breast and ovarian cancer risks due to inherited mutations in BRCA1 and BRCA2 Science 302(5645):643-6 10 Kurian AW, Gong GD, Chun NM, Mills MA, Staton AD, Kingham KE, Crawford BB, Lee R, Chan S, Donlon SS and others 2008 Performance of BRCA1/2 mutation prediction models in Asian Americans J Clin Oncol 26(29):4752-8 11 Musolino A, Bella MA, Bortesi B, Michiara M, Naldi N, Zanelli P, Capelletti M, Pezzuolo D, Camisa R, Savi M and others 2007 BRCA mutations, molecular markers, and clinical variables in early-onset breast cancer: a population-based study Breast 16(3):280-92 12 Parkin DM, Bray F, Ferlay J, Pisani P 2005 Global cancer statistics, 2002 CA Cancer J Clin 55(2):74-108 13 Suter NM, Ray RM, Hu YW, Lin MG, Porter P, Gao DL, Zaucha RE, Iwasaki LM, Sabacan LP, Langlois MC and others 2004 BRCA1 and BRCA2 mutations in women from Shanghai China Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 13(2):181-9 14 Tamboom K, Kaasik K, Arsavskaja J, Tekkel M, Lilleorg A, Padrik P, Metspalu A, Veidebaum T BRCA1 mutations in women with familial or early-onset breast cancer and BRCA2 mutations in familial cancer in Estonia Hered Cancer Clin Pract 8(1):4 15 Tang NL, Pang CP, Yeo W, Choy KW, Lam PK, Suen M, Law LK, King WW, Johnson P, Hjelm M 1999 Prevalence of mutations in the BRCA1 gene among Chinese patients with breast cancer J Natl Cancer Inst 91(10):882-5 Chuyên ñề Ung Bướu 680 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 16 Toh GT, Kang P, Lee SS, Lee DS, Lee SY, Selamat S, Mohd Taib NA, Yoon SY, Yip CH, Teo SH 2008 BRCA1 and BRCA2 germline mutations in Malaysian women with early-onset breast cancer without a family history PLoS One 3(4):e2024 17 van der Hout AH, van den Ouweland AM, van der Luijt RB, Gille HJ, Bodmer D, Bruggenwirth H, Mulder IM, van der Vlies P, Elfferich P, Huisman MT and others 2006 A DGGE system for comprehensive mutation screening of BRCA1 and BRCA2: application in a Dutch cancer clinic setting Hum Mutat 27(7):654-66 Chuyên ñề Ung Bướu 681 ... đột biến BRCA1 bệnh nhân ung thư vú người có nguy cao bị ung thư dựa vào yếu tố gia đình Việc xác định đột biến BRCA1 giúp có kế hoạch phòng ngừa ung thư vú hiệu nhóm người có nguy cao Mục tiêu... Minh * Tập 14 * Phụ Số * 2010 số gen mẫn cảm ung thư Đột biến gen BRCA1 rối loạn di truyền trội nhiễm sắc thể thư ng hay gặp ung thư vú, chiếm 45% gia đình ung thư vú di truyền, với nguy trọn ñời... (bà nội/ngoại ruột, cơ/ dì ruột, cháu gái ruột) bị ung thư vú bên ung thư vú kèm ung thư buồng trứng; 4) có từ 02 người quan hệ bậc I quan hệ bậc II bị ung thư vú và/hoặc ung thư buồng trứng (khơng