Nghiên cứu này được thực hiện nhằm xác định đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 trên bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu hụt enzym 21- hydroxylase. 56 bệnh nhân được chẩn đoán xác định bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu enzym 21 - hydroxylase được lựa chọn nghiên cứu. Kỹ thuật Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) kết hợp với giải trình tự gen được sử dụng để phát hiện đột biến.
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC PHÁT HIỆN ĐỘT BIẾN XÓA ĐOẠN GEN CYP21A2 GÂY BỆNH TĂNG SẢN THƯỢNG THẬN BẨM SINH THỂ THIẾU 21 - HYDROXYLASE Vũ Chí Dũng, Trần Huy Thịnh, Tạ Thành Văn, Trần Vân Khánh Trường Đại học Y Hà Nội Tăng sản thượng thận bẩm sinh thiếu hụt enzym 21- hydroxylase bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể thường gây nên đột biến gen CYP21A2 Đột biến điểm loại đột biến phổ biến nhất, chiếm tỉ lệ khoảng 70 - 75%, đột biến xóa đoạn chiếm tỉ lệ thấp khoảng 20 - 25% Ở Việt Nam, chưa có nghiên cứu tồn diện tiến hành xác định đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh Vì nghiên cứu thực nhằm xác định đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu hụt enzym 21- hydroxylase 56 bệnh nhân chẩn đoán xác định bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu enzym 21 - hydroxylase lựa chọn nghiên cứu Kỹ thuật Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification (MLPA) kết hợp với giải trình tự gen sử dụng để phát đột biến Kết cho thấy 14/56 (25%) bệnh nhân phát có đột biến xóa đoạn gen CYP21A2, đó, 10/14 bệnh nhân có đột biến xóa đoạn đồng hợp tử từ exon đến exon 3, 1/14 bệnh nhân có đột biến xóa đoạn đồng hợp tử từ gen C4B đến exon gen CYP21A2 bệnh nhân có đột biến xóa đoạn dị hợp tử exon - kết hợp với đột biến điểm 656A > G R356W Từ khóa: tăng sản thượng thận bẩm sinh, đột biến xóa đoạn gen CYP21A2, MLPA I ĐẶT VẤN ĐỀ Tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu dẫn đến trình tự vùng gen giả enzym 21 - hydroxylase (21 - OH) bệnh di (CYP21A1P) chuyển sang gen CYP21A2 dẫn đến đột biến gây bệnh [3; 4] truyền lặn nhiễm sắc thể số Bệnh gây nên đột biến gen CYP21A2 làm rối loạn trình sinh tổng hợp hormon vỏ thượng thận, gây bệnh cảnh lâm sàng suy thượng thận cấp nam hóa trẻ gái, dậy sớm giả trẻ trai [1, 2] Gen CYP21A2 mã hóa cho 21 - OH nằm cánh ngắn nhiễm sắc thể số (6p21.3), gồm 10 exon, có kích thước 3.4 kb Đột biến gây thiếu hụt 21 - OH bắt chéo không đồng cặp nhiễm sắc thể trình phân bào giảm nhiễm Sự bắt chéo Cho đến nay, nhiều dạng đột biến phát đột biến điểm, đột biến xóa đoạn, đột biến điểm chiếm tỉ lệ cao khoảng 70 - 75%, đột biến xóa đoạn chiếm tỉ lệ thấp khoảng 20 - 25% [4; 5; 6] Kỹ thuật giải trình tự thường áp dụng để xác định đột biến điểm gen CYP21A2 [4; 5; 6; 9] Với đột biến xóa đoạn, có nhiều kỹ thuật xác định, nhiên phương pháp kinh điển PCR thường bị hạn chế mặt thời gian, kỹ thuật MLPA kỹ thuật xác định đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 nhanh chóng, Địa liên hệ: Trần Vân Khánh, Trung tâm Gen - Protein, Trường Đại học Y Hà Nội Email: vankhanh73md@yahoo.com Ngày nhận: 16/11/2015 Ngày chấp thuận: 26/02/2016 xác ứng dụng rộng rãi [7, 8] Đề tài thực với mục tiêu: Xác định đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu hụt enzym 21-hydroxylase TCNCYH 99 (1) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Đối tượng: 56 bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu enzym 21 - 2oC trước cho 3µl hỗn hợp chứa đoạn oligonucleotid probe Hỗn hợp ủ 60oC 16 Thêm 32µl hỗn hợp hydroxylase chẩn đoán điều trị ligase buffer, ủ 54oC 15 phút Tăng nhiệt độ lên 98oC phút, giữ 4oC Khoa Nội tiết - Chuyển hóa - Di truyền, Bệnh viện Nhi Trung ương Khuếch đại sản phẩm lai: Thêm 10µl sản phẩm lai vào 30µl hỗn hợp PCR buffer, giữ Tiêu chuẩn chẩn đoán Bệnh nhân có biểu muối, nước từ nhẹ đến nặng, Na+ giảm K+ tăng; Biểu mơ hồ giới tính sau sinh trẻ gái dậy sớm trẻ trai Nồng độ 17 - OH tăng 10.000 ng/dl thể cổ điển tăng từ 20010.000 ng/dl thể không cổ điển [2] Phương pháp 2.1 Kỹ thuật tách chiết DNA DNA tách chiết từ bạch cầu máu ngoại vi theo quy trình phenol/chloroform Tất mẫu DNA tiến hành đo nồng độ độ tinh sạch, có mẫu DNA đạt giá trị 1,8-2,0 đạt yêu cầu tinh sử dụng để phân tích 2.2 Kỹ thuật MLPA Sử dụng kit MLPA P050B2 (MRC - Holland) Thành phần kit gồm đầu dò 60oC trước thêm 10µl hỗn hợp PCR master vào hỗn hợp, thực chu trình nhiệt sau: [95oC - 30 giây, 60oC - 30 giây, 72oC - phút] x 35 chu kỳ; 72oC - 20 phút; bảo quản 4oC Điện di mao quản huỳnh quang máy giải trình tự để phân tích kết Nếu có đột biến xóa đoạn, probe khơng gắn vào gen đích, kết điện di khơng xuất đỉnh tương ứng exon đột biến Đột biến dị hợp tử chiều cao đỉnh 1/2 so với mẫu đối chứng Kỹ thuật giải trình tự gen: tiến hành theo quy trình mô tả trước [9] Đạo đức nghiên cứu Nghiên cứu tuân thủ tuyệt đối quy định đạo đức nghiên cứu y sinh Bệnh nhân hoàn toàn tự nguyện tham gia vào nghiên cứu Bệnh nhân hồn tồn có quyền (probe) để khuyếch đại gen CYP21A2, rút lui khỏi nghiên cứu không đồng ý tiếp tục tham gia vào nghiên cứu Bệnh nhân đầu dò tương ứng với vùng gen Ngồi ra, có đầu dò đặc trưng cho gen thông báo kết xét nghiệm gen để giúp cho bác sỹ tư vấn di truyền lựa người sử dụng để làm đối chứng đầu dò cho nhiễm sắc thể X Y để xác chọn phác đồ điều trị phù hợp Các thơng tin định giới tính Sản phẩm khuếch đại điện di mao quản máy giải trình tự Số III KẾT QUẢ lượng sản phẩm khuếch đại đầu dò Bằng kỹ thuật MLPA kết hợp với giải trình tự gen, 14/56(25%) bệnh nhân phát tỷ lệ thuận với số copy đoạn DNA đích đặc hiệu với đầu dò Quy trình MLPA Cho 5µl DNA vào ống PCR, biến tính 98oC phút Nhiệt độ chuyển TCNCYH 99 (1) - 2016 cá nhân đảm bảo bí mật có đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 đó: 10/14 bệnh nhân có đột biến xóa đoạn đồng hợp tử exon đến exon (exon1-3 deletion) TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC bệnh nhân có đột biến xóa đoạn đồng exon đến exon kết hợp đột biến điểm hợp tử từ gen C4B đến exon gen CYP21A2 (C4B - exon deletion) 656A > G bệnh nhân có đột biến xóa đoạn dị hợp tử exon đến exon kết hợp đột bệnh nhân có đột biến dị hợp tử xóa đoạn biến điểm R356W gen CYP21A2 Bảng Kết phát đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 bệnh nhân Thể bệnh 21 - OH n Allele Allele Kiểu gen Mất muối 0% 10 Exon - deletion Exon - deletion Homozygous Nam hóa 3% Exon - deletion 656A > G Heterozygous Mất muối 0% Exon - deletion 656A > G Heterozygous Mất muối 0% Exon - deletion R356W Heterozygous Mất muối 0% C4B - exon deletion C4B-exon deletion Homozygous Tổng số 14 bệnh nhân Bảng cho thấy, bệnh nhân có đột Kết cho thấy, bệnh nhân mã số 01 biến xóa đoạn đồng hợp tử từ exon đến exon từ gen C4B đến exon gen không thấy xuất đỉnh tương ứng với exon đến exon 3, vậy, bệnh nhân có đột CYP21A2 chẩn đoán thể bệnh muối Bên cạnh có bệnh nhân có đột biến xóa đoạn từ exon đến exon Tương tự bệnh nhân mã số 08 không thấy xuất biến dị hợp tử xóa đoạn exon đến exon kết hợp đột biến điểm 656A > G R356W đỉnh gen C4B exon 1, 3, 4, 6, gen CYP21A2 bệnh nhân có chẩn đoán thể muối Thể đột biến xóa đoạn đồng hợp tử từ gen C4B muối thể bệnh nặng, biểu bệnh sớm nên bệnh nhân hầu hết đến exon gen CYP21A2 (hình 1) Kết hình cho thấy bệnh nhân mã số chẩn đoán thời điểm từ 2-6 tuần enzym 21 - OH không tổng hợp (21 - 03 có xuất đỉnh tương ứng với exon đến exon 3, nhiên chiều cao đỉnh OH: 0%) Duy có bệnh nhân có đột biến xóa đoạn dị hợp tử exon đến exon exon exon bệnh nhân 1/2 so với mẫu đối chứng người bình kết hợp đột biến điểm 656A > G chẩn thường, chứng tỏ bệnh nhân có đột biến xóa đốn thể nam hóa đơn Thể nam hóa đơn thể bệnh nhẹ nên biểu đoạn dị hợp tử exon đến exon Tiến hành giải trình tự tồn gen CYP21A2 phát bệnh muộn bệnh nhân có hoạt độ enzym 21 - OH 3% thấy bệnh nhân có đột biến dị hợp tử 656A > G kết hợp 10 TCNCYH 99 (1) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Kết bệnh nhân có đột biến xóa đoạn đồng hợp tử gen CYP21A2 Hình Kết đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 Ex1, Ex3, Ex4, Ex6, Ex8, đỉnh tương ứng với vị trí exon 1, 3, 4, 6, gen CYP21A2; E1P, I2P, E10P đỉnh tương ứng với vị trí exon 1, intron2, exon 10 gen giả CYP21A1P; C4A, C4B đỉnh tương ứng với gen C4A, C4B; Y đỉnh tương ứng với NST Y dùng để xác định giới tính (1) Là hình ảnh tương ứng với kết người bình thường, (2) Là hình ảnh tương ứng với kết bệnh nhân mã số 01 bị xóa đoạn exon đến exon 3, (3) Là hình ảnh tương ứng với kết bệnh nhân mã số 08 bị đột biến xóa đoạn từ gen C4B đến exon gen CYP21A2 TCNCYH 99 (1) - 2016 11 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Kết bệnh nhân có đột biến xóa đoạn dị hợp tử gen CYP21A2 kết hợp với đột biến điểm A) A Ex3 Người bình Người bìnhthường thường Ex3 B) B Ex1 Bệnh nhân Bệnh nhân Ex1 656A 656A 656A > G 656A>G Bệnh nhân Bệnh nhân Người thường Người bình bình thường Hình Kết xác định đột biến gen CYP21A2 (A) Kết MLPA: Ex1, Ex3, đỉnh tương ứng với vị trí exon 1, 3, gen CYP21A2;(B) kết giải trình tự gen: mũi tên vị trí đột biến 656A > C IV BÀN LUẬN Nghiên cứu sử dụng kỹ thuật MLPA đột biến xóa đoạn tất vị trí gen kết hợp với giải trình tự gen để xác định đột CYP21A2 Đây ưu đặc biệt MLPA mà phương pháp kinh điển khơng có biến xóa đoạn gen cho 56 bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu enzym 21 - OH, cần phản ứng MLPA khuếch đại toàn 10 exon gen CYP21A2 [7; 8] Như vậy, vòng ngày xác định 12 Bằng kỹ thuật MLPA,14/56 (25%) bệnh nhân phát đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 với dạng đột biến khác nhau, đột biến xóa đoạn đồng hợp tử từ TCNCYH 99 (1) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC exon đến exon chiếm tỉ lệ cao với nghiên cứu với 11/14 bệnh nhân 10/14 trường hợp, lại đột biến xóa đoạn đồng hợp tử từ gen C4B đến exon gen có đột biến đồng hợp tử xóa đoạn 2/14 bệnh nhân có đột biến dị hợp tử xóa đoạn kết CYP21A2 chiếm tỉ lệ thấp với 1/14 trường hợp Nghiên cứu phát bệnh hợp với đột biến điểm (656A > G R356W) chẩn đoán lâm sàng thể nhân có đột biến xóa đoạn dị hợp tử exon đến exon kết hợp với đột biến điểm 656A > muối Sự phù hợp kiểu gen kiểu hình nghiên cứu đóng vai trò đặc G R356W Đột biến gen CYP21A2 biệt quan trọng thực hành lâm sàng nghiên cứu rộng rãi nhiều nước giới, có 150 đột biến chẩn đoán điều trị bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh; đặc biệt với trường hợp trẻ khác báo cáo [4 - 9] Các đột biến điểm hay gặp gen CYP21A2 bao chẩn đoán lâm sàng sớm dựa vào sàng lọc sơ sinh; trường hợp xét gồm 656 A/C > G, I172N, R356W đột biến xóa đoạn với tỷ lệ khác tùy nghiệm hormon không rõ ràng Trong biểu muối chưa xuất hiện, kết chủng tộc Trong nghiên cứu này, tỷ lệ phát phân tích gen CYP21A2 có giá trị định hướng đột biến xóa đoạn tương tự với nhiều nghiên cứu tác giả khác Nghiên cứu phân loại định điều trị hormon thay hydrocortisone đơn cho thể nam hóa Huynh T cộng bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh Úc phát đơn hay kết hợp với hormon chuyển hóa muối nước fludrocortisone (Florinef) 35,5% bệnh nhân có đột biến xóa đoạn [11] Theo nghiên cứu khác châu Âu thể muối Tuy nhiên, phát thấy trường hợp bệnh nhân có đột biến xóa châu Mỹ, tỉ lệ bệnh nhân có đột biến xóa đoạn đoạn dị hợp tử kết hợp với 656A > G thể 30kb khoảng 20 - 25% phát bệnh nhân thể muối [4] Trong nghiên cứu này, nam hóa đơn thuần, trường hợp bệnh nhân khơng có tương xứng kiểu gen tỷ lệ gặp đột biến xóa đoạn có cao so với số quốc gia khác Một nghiên cứu kiểu hình, để hiểu rõ chế cần thêm thời gian để theo dõi bệnh nhân có Brazil, xét nghiệm gen cho 41 gia đình có người bị bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh nghiên cứu sâu Những năm gần đây, ngày nhiều thể thiếu enzym 21 - OH nhận thấy tỷ lệ gặp nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật MLPA để xác dạng đột biến xóa đoạn 8,1% [10], đột biến xóa đoạn 30kb tìm thấy với tỷ lệ định đột biến xóa đoạn lớn gen CYP21A2 thay cho kỹ thuật PCR thấp (4,5%) bệnh nhân thể muối so với nghiên cứu khác [5] Tỷ lệ đột biến Southern blot [7; 8] Việc phát đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh bước khởi xóa đoạn phát thấp quốc gia vùng châu Á Nhật 11,8%, Hồng Kong Trung Quốc 9,5% Singapore (gốc Trung đầu cho nghiên cứu để phát đột biến điểm bệnh nhân lại Kết Quốc, Ấn Độ, Malaysia) 3,9% [12; 13] Đột biến xóa đoạn lớn dẫn đến tồn chức enzym dẫn đến thể lâm sàng phát đột biến gen khơng đóng nặng thể cổ điển muối [3; 6] Điều phù hợp với hầu hết bệnh nhân nhân mà sở quan trọng để phát người lành mang gen bệnh chẩn đoán TCNCYH 99 (1) - 2016 vai trò quan trọng để chẩn đốn xác định bệnh, điều trị sớm tránh biến chứng cho bệnh 13 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC trước sinh cho thành viên gia đình, đặc biệt gia đình có bị bệnh họ có kế hoạch tiếp tục sinh thứ [14] Kết chẩn đoán trước sinh tránh sinh đứa trẻ bị bệnh có kế hoạch điều trị sớm cho bệnh nhân chẩn đoán sớm từ thời kỳ bào thai V KẾT LUẬN 14/56 (25%) bệnh nhân phát có đột biến xóa đoạn đồng hợp tử xóa đoạn dị hợp tử gen kết hợp với đột biến điểm CYP21A2, đột biến xóa đoạn đồng hợp tử exon đến exon chiếm tỉ lệ cao với 10/14 bệnh nhân, đột biến xóa White PC, Speiser PW (2000) Congenital adrenal hyperplasia due to 21hydroxylase deficiency Endocr Rev, 21 (3), 245 - 291 Finkielstain GP., Chen W., Mehta SP (2011) Comprehensive genetic analysis of 182 unrelated families with congenital adrenal hyperplasia due to 21 - hydroxylase deficiency.J Clin Endocrinol Metab, 96 (1), 161 - 172 Satomi.K, Takio.T (2002) Genetic Analysis of Japanese Patients with 21- hydroxylase deficiency: Identification of a patient with a new mutation of a homozygous deletion of adenine at codon 246 and patients without demonstrable mutation within the structural đoạn đồng hợp tử từ gen C4B đến exon gen gene for CYP21 The Journal of clinical Endo- CYP21A2 chiếm tỉ lệ thấp với 1/14 bệnh nhân, 3/14 bệnh nhân với đột biến xóa đoạn dị hợp crinology & Metabolism, 87(6), 2668 - 2673 tử kết hợp với đột biến điểm Lời cám ơn Nghiên cứu thực với hỗ trợ kinh phí đề tài cấp Bộ Y tế: “Nghiên cứu quy trình phát người mang gen bệnh chẩn đoán trước sinh bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh kỹ thuật sinh học phân tử” Wilson RC, Nimkarn S, Dumic M et al (2007) Ethnic specific distribution of mutations in 716 patients with congenital adrenal hyperplasia owing to 21 - Hydroxylase deficiency Mol Genet.Meta, 90(4), 414 - 421 Concolino P, Mello E, Toscano V (2009) Multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) assay for the detection of CYP21A2 gene deletions/duplications in giúp đỡ cán Trung tâm nghiên cứu Gen- Protein, Bộ môn Nhi, Trường congenital adrenal hyperplasia: first technical Đại học Y Hà Nội; Khoa Nội tiết - Chuyển hóa - Di truyền, Bệnh viện Nhi Trung ương Jang JH, Jin DK, Kim JH (2011) Multiplex ligation dependent probe amplification assay for diagnosis of congenital TÀI LIỆU THAM KHẢO Angel.O.K Chan, But.M.W (2011) Molecular analysis of congenital adrenal hyperplasia due to 21- hydroxylase deficiency report Clin Chim Acta, 402 (1 - 2), 164 - 170 adrenal hyperplasia Ann Clin Lab Sci, 41(1), 44 - 47 Concolino P, Mello E, Zuppi C (2010) Molecular diagnosis of congenital adrenal in Hong Kong Chinese patients Steroids, 76, 1057 - 1062 hyperplasia due to 21-hydroxylase deficiency: Saroj N, New M I (2011) Congenital adrenal hyperplasia due to 21 – hydroxylase deficiency Annals of the New York academy Chem Lab Med, 48(8), 1057 - 1062 of sciences, 1192, - 11 14 an update of new CYP21A2 mutations Clin 10 Fernanda B Coeli., Fernanda C Soardi (2010) Novel deletion alleles carrying CYP21A1P/A2 chimeric genes in Brazilian TCNCYH 99 (1) - 2016 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC patients with 21 - hydroxylase deficiency BMC without demonstrable mutation within the medical Genetics BMC Med Genet, 41(1), 44 - 47 structural gene for CYP21 The Journal of 11 Huynh T, McGown I, Cowley D (2009) The clinical and biochemical spectrum of congenital adrenal hyperplasia secondary to 21-hydroxylase deficiency Clin Biochem Rev, 30(2), 75 - 86 12 Satomi.K, Takio.T et al (2002) Genetic Analysis of Japanese Patients with 21 - hydroxylase deficiency: Identification of a patient with a new mutation of a homozygous deletion of adenine at codon 246 and patients clinical Endocrinology & Metabolism, 87(6), 2668 - 2673 13 Angel O K Chan, But.M.W (2011) Molecular analysis of congenital adrenal hyperplasia due to 21- hydroxylase deficiency in Hong Kong Chinese patients Steroids, 76, 1057 - 1062 14 Juan Tian., Guohua Yang (2011) Molecular diagnosis of two families with classic congenital adrenal hyperplasia Gene, 5, 368 - 389 Summary DETECTION OF CYP21A2 GENE DELETION IN CONGENITAL ADRENAL HYPERPLASIA DUE TO 21 - HYDROXYLASE DEFICIENCY Congenital adrenal hyperplasia caused by 21 - hydroxylase deficiency (CAH - 21OH) is an autosomal recessive genetic disorder due to mutation in the CYP21A2 gene Point mutation is the most common mutation in CYP21A2 and accounts for 70 - 75% Deletion mutation is at a lower rate of 20 - 25% In Vietnam, there has been not any report about deletion mutation in CYP21A2 gene of CAH - 21OH patients The aim of this study was to determine deletion mutations of CYP21A2 gene in patients with CAH - 21OH 56 CAH - 21OH patients were selected for this study; MLPA and sequencing techniques were used to identify mutation in CYP21A2 gene The results showed that 14/56 (25%) patients were found to have mutation in CYP21A2 gene, of them all, 10 patients showed homozygous deletion from exon to exon 3, patient showed homozygous deletion from 4B gene to exon of CYP21A2 gene and patients carrying heterozygous deletion from exon - combined with point mutation 656A > G or R365W Keywords: Congenital adrenal hyperplasia, CYP21A2 deletion mutation, MLPA TCNCYH 99 (1) - 2016 15 ... with classic congenital adrenal hyperplasia Gene, 5, 368 - 389 Summary DETECTION OF CYP21A2 GENE DELETION IN CONGENITAL ADRENAL HYPERPLASIA DUE TO 21 - HYDROXYLASE DEFICIENCY Congenital adrenal... hyperplasia caused by 21 - hydroxylase deficiency (CAH - 21OH) is an autosomal recessive genetic disorder due to mutation in the CYP21A2 gene Point mutation is the most common mutation in CYP21A2 and accounts... R356W gen CYP21A2 Bảng Kết phát đột biến xóa đoạn gen CYP21A2 bệnh nhân Thể bệnh 21 - OH n Allele Allele Kiểu gen Mất muối 0% 10 Exon - deletion Exon - deletion Homozygous Nam hóa 3% Exon - deletion