Bài viết này thông báo kết quả ứng dụng phần mềm tin học Modde 5.0 để thiết kế và tối ưu hóa quy trình tổng hợp altretamin. Altretamin được tổng hợp từ phản ứng giữa cyanuric clorid với dimethylamin trong dung môi aceton và sử dụng NaOH làm chất trung hòa axít.
TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2014 MỐI LIÊN QUAN GIỮA OSTEOCALCIN, CTX HUYẾT THANH VỚI T-SCORE VÀ YẾU TỐ NGUY CƠ LOÃNG XƢƠNG Ở PHỤ NỮ SAU MÃN KINH Hoàng Văn Dũng*; Lê Bạch Mai**; Nguyễn Thị Ngọc Lan***; Vũ Xuân Nghĩa**** TÓM TẮT Mục tiêu: tìm hiểu mối liên quan nồng độ osteocalcin, CTX huyết với T-score số yếu tố nguy loãng xương phụ nữ mãn kinh Đối tượng phương pháp nghiên cứu: phụ nữ nông thôn mãn kinh tự nhiên năm, tuổi từ 50 - 70, đo mật độ xương (MĐX) phương pháp siêu âm định lượng vị trí gót chân, định lượng osteocalcin CTX huyết phương pháp điện hoá phát quang miễn dịch Kết quả: osteocalcin huyết trung bình 19,92 ± 5,32 ng/ml, tăng 17,2% nhóm lỗng xương so với nhóm có MĐX bình thường; giảm dần theo nhóm tuổi, nhiên khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê với p > 0,05 CTX huyết trung bình 0,65 ± 0,19 ng/ml, tăng 57,7% nhóm lỗng xương so với nhóm có MĐX bình thường; tương quan nghịch với MĐX, thời gian mãn kinh tương quan thuận với tuổi, p < 0,05 Kết luận: nồng độ osteocalcin CTX tăng lên BN loãng xương Nồng độ CTX huyết tương quan thuận với tuổi, thời gian mãn kinh, tương quan nghịch với T-score, p < 0,05 * Từ khóa: Lỗng xương; Phụ nữ sau mãn kinh; Osteocalcin; CTX huyết Investigation of Correlations between Serum Osteocalcin, CTX Serum with Mineral Bone Density and Risk Factors in Postmenopausal Women Summary Objective: To investigate the correlations between serum osteocalcin, CTX and T-score and risk factors of osteoporosis in postmenopausal women Subjects and methods: Rural women have at least years lnatural postmenopausal, aged 50 - 70 T-score was measured by quantitative ultrasounds in the heel bone, osteocalcin and CTX were measured by electrochemical luminescent immune Results: Mean serum osteocalcin was 19.92 ± 5.32 ng/ml; increased 17.2% in the osteoporosis group compared with normal bone density group; decreased with age, but the difference was not statistically significant with p > 0.05 Mean serum CTX was 0.65 ± 0.19 ng/ml; increased 57.7% in the osteoporosis group; inversely correlated with bone mineral density, menopausal duration correlated with age with p < 0.05 Conclusion: Osteocalcin and CTX levels increased significantly in patients with osteoporosis CTX serum concentrations correlated with age, menopausal duration, inversely correlated with T-score, p < 0.05 Key words: Osteoporosis; Postmenopausal women; Osteocalcin; CTX * Bệnh viện Bạch Mai ** Viện Dinh dưỡng Quốc Gia *** Đại học Y Hà Nội **** Học viện Quân y Người phản hồi (Corresponding): Hoàng Văn Dũng (dungnoitru26@yahoo.com) Ngày nhận bài: 20/10/2014; Ngày phản biện đánh giá báo: 26/11/2014 Ngày báo đăng: 03/12/2014 120 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2014 ĐẶT VẤN ĐỀ Đo MĐX phương pháp hấp thụ tia X lượng kép (DEXA) cho biết mật độ khoáng xương (g/cm2), không cho biết tổn thương vi cấu trúc chất lượng xương Tốc độ chu chuyển xương phản ánh chất lượng xương, tốc độ chu chuyển xương tăng làm tăng phá hủy vi cấu trúc phần bè xương, làm giảm chất lượng xương, tăng nguy loãng xương tăng khả gãy xương Mỗi đơn vị chu chuyển xương diễn - tháng Tốc độ chu chuyển xương phản ánh tốc độ trình tạo xương hủy xương Xét nghiệm nồng độ dấu ấn chu chuyển xương cho phép đánh giá tốc độ chuyển xương, nồng độ dấu ấn chu chuyển xương tăng lên phản ánh tốc độ chu chuyển xương nguy loãng xương tăng gãy xương [5] Hiện nay, số xét nghiệm dấu ấn chu chuyển xương ứng dụng phổ biến nghiên cứu thực hành lâm sàng với độ nhạy độ đặc hiệu cao Thường phối hợp hai dấu ấn hai trình hủy xương tạo xương để đánh giá chu chuyển xương [4] + Đánh giá trình hủy xương: CTX (Carboxy-terminal collagen crosslinks Beta CrossLab) máu nước tiểu, NTX (N-telopeptid collagen), DPD (deoxypyridinoline) nước tiểu + Đánh giá trình tạo xương: osteocalcin, phosphatase kiềm đặc hiệu xương (BSAP - Bone Specific Alkalin Phosphatase) procollagen týp (P1NPProcollagen type N-terminal propeptide) Việc sử dụng dấu ấn chu chuyển xương để đánh giá nguy gãy xương 121 theo dõi điều trị loãng xương đưa vào hướng dẫn quốc gia quản lý BN loãng xương nước phát triển số nước khu vực Đông Nam Á Tại Việt Nam, có số nghiên cứu ứng dụng vai trò dấu ấn chu chuyển xương, nhiên chưa phổ biến Chúng tiến hành đề tài nhằm: - Khảo sát giá trị nồng độ osteocalcin CTX huyết phụ nữ sau mãn kinh - Tìm hiểu mối liên quan nồng độ osteocalcin, CTX huyết với T-score số yếu tố nguy loãng xương phụ nữ mãn kinh ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu - Nghiên cứu tiến hành xã Tam Hưng, huyện Thanh Oai, TP Hà Nội - Thời gian: tháng 01 đến tháng 06 năm 2013 - Đối tượng nghiên cứu: phụ nữ nông thôn mãn kinh tự nhiên ≥ năm, tuổi ≥ 50 ≤ 70 tuổi (sinh năm từ 1942 đến 1962) Loại trừ phụ nữ mãn kinh phẫu thuật buồng trứng, tử cung, phụ nữ mắc bệnh liên quan đến chuyển hóa (đái tháo đường, Basedow), người có dị tật xương - khớp bẩm sinh, mắc bệnh (ung thư, suy thận), gãy xương, phẫu thuật xương khớp vòng năm, dùng thuốc điều trị lỗng xương: calcitonin, estrogen, corticoid vòng tháng gần Phƣơng pháp nghiên cứu Nghiên cứu điều tra cắt ngang 141 phụ nữ mãn kinh tự nhiên thoả mãn đủ tiêu chuẩn nghiên cứu TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2014 * Nội dung nghiên cứu: - Tuổi đối tượng nghiên cứu - Chỉ số khối thể + C-telopeptide crosslink (CTX) huyết thanh: đánh giá trình hủy xương * Phân tích xử lý số liệu: - Thời gian mãn kinh, mãn kinh tự nhiên hay sau phẫu thuật tử cung, buồng trứng, số lần sinh đẻ - Các số liệu xử lý máy vi tính phương pháp thống kê y học theo chương trình SPSS 16.0 - Khám lâm sàng khai thác tiền sử: phát bệnh tật liên quan - Trung bình, độ lệch chuẩn tỷ lệ dùng để mô tả đặc điểm đối tượng nghiên cứu - Đo MĐX: phương pháp siêu âm định lượng vị trí gót chân, sử dụng máy đo Sonost-3000 (Hãng Osteosys, Hàn Quốc) Nguyên lý, máy đo sử dụng hai đầu dò, đầu dò truyền xung siêu âm đầu dò nhận xung siêu âm bên đối diện xương gót chân Trong q trình truyền xung siêu âm, đầu dò di chuyển dọc theo xương gót BN Tốc độ truyền xung tính theo m/s (SOS Speed of Sound) Ở mơ xương bình thường, xung siêu âm truyền qua mơ xương có thời gian ngắn, tốc độ truyền xung nhanh, BN loãng xương, thời gian truyền xung siêu âm dài hơn, tốc độ truyền xung chậm biên độ nhận xung bên đối diện So sánh tốc độ truyền âm qua vị trí xương gót chân người trẻ tuổi, khoẻ mạnh từ sở liệu máy đo (quần thể tham chiếu người châu Á), tính số T (T-score) MĐX bình thường T-score ≥ -1,0; giảm MĐX: -2,5 < T-score < -1,0; loãng xương: T-score ≤ -2,5 [2] - Định lượng nồng độ dấu ấn sinh học chu chuyển xương: phương pháp điện hóa phát quang miễn dịch máy Elecsys - 2010 - Roche Trung tâm Nghiên cứu Y - Dược học quân sự, Học viện Quân y Gồm có tiêu: + Osteocalcin huyết thanh: đánh giá trình tạo xương 122 - Test "χ2 " dùng kiểm định khác biệt tỷ lệ - Test “t” dùng kiểm định khác biệt trị số trung bình - Hệ số tương quan “r”: đánh giá hệ số tương quan với biến liên tục Phân loại mức độ: r < ± 0,3 có mối tương quan yếu; r = ± 0,3 đến ± 0,6 có mối tương quan trung bình, r ≥ ± 0,7 có mối tương quan chặt chẽ - Khoảng tin cậy 95% áp dụng cho toàn test, khác biệt giá trị p < 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Một chu kỳ chu chuyển xương gồm giai đoạn: giai đoạn hủy xương, giai đoạn chuyển đổi giai đoạn tạo xương Thời gian cho chu kỳ chu chuyển diễn khoảng - tháng Định lượng dấu ấn sinh học chu chuyển xương cho phép đánh giá tốc độ chu chuyển xương, từ đánh đánh giá tốc độ xương Đây kỹ thuật mới, nghiên cứu ứng dụng thực hành lâm sàng chẩn đoán, theo dõi điều trị lỗng xương Đặc điểm chung nhóm nghiên cứu - Tuổi trung bình 58,78 ± 4,9 (50 - 70 tuổi) - Thời gian mãn kinh trung bình 10,5 ± 5,7 năm (5 - 33 năm) TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2014 Nồng độ osteocalcin CTX huyết Bảng 1: Đặc điểm nồng độ osteocalcin CTX huyết (ng/ml) Giá trị trung bình (ng/ml) Điểm cắt giá trị xét nghiệm theo đường cong ROC - Nồng độ osteocalcin huyết trung bình 19,92 ± 5,32 ng/ml, 53,2% BN có nồng độ osteocalcin huyết cao > 18,65 ng/ml - Nồng độ CTX huyết trung bình 0,65 ± 0,19 ng/ml, 54,6% BN có nồng độ CTX huyết cao > 0,615 ng/ml Kết cao nghiên cứu Lê Thu Hà: nồng độ osteocalcin trung bình phụ nữ mãn kinh 16,9 ± 9,2 ng/ml, nhóm trẻ tuổi chưa mãn kinh CTX (ng/ml) (n = 141) (n = 141) 19,92 ± 5,32 0,65 ± 0,19 18,65 0,615 < 18,65 (46,8%) < 0,615 (45,4%) ≥ 18,65 (53,2%) ≥ 0,615 (54,6%) 13,8 ± 5,9 ng/ml [1], thấp so với nghiên cứu Marlena C CS phụ nữ mãn kinh người Indonesia Philippines có nồng độ osteocalcin trung bình 31,85 ± 2,62 ng/ml 32,33 ± 2,24 ng/ml [3] Nồng độ dấu ấn chu chuyển xương nói chung tăng dao động lớn, phụ thuộc vào tình trạng lỗng xương, mãn kinh tuổi cao Do đó, đối tượng nghiên cứu khác có kết dao động khác Mối liên quan nồng độ osteocalcin CTX huyết trung bình với tuổi lỗng xƣơng Bảng 2: So sánh nồng độ dấu ấn chu chuyển xương nhóm tuổi (n) (ng/ml) CTX (ng/ml) 50 - 54 35 20,88 ± 4,59 0,65 ± 0.18 55 - 59 51 20,11 ± 6,54 0,59 ± 0,16 60 - 64 35 19,69 ± 4,81 0,68 ± 0,17 65 - 70 20 18,19 ± 3,36 0,75 ± 0,19 Tổng 141 p > 0,05 p < 0,01 Nồng độ osteocalcin huyết giảm dần theo tuổi, nhiên khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Ngược lại, nồng độ CTX có xu hướng tăng lên theo tuổi, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01) Osteocalcin dấu ấn sinh học trình tạo xương, người trẻ cân tạo xương cao huỷ xương, nồng độ dấu ấn tạo xương tăng cao nồng độ dấu ấn hủy xương 123 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2014 Bảng 3: So sánh nồng độ dấu ấn chu chuyển xương với mức độ loãng xương (n = 141) CTX (ng/ml) (n = 141) (ng/ml) A Bình thường (≥ -1) 16,46 ± 4,64 0,457 ± 0,115 B Giảm (-2,5 đến -1) 68 20,78 ± 4,10 0,588 ± 0,134 C Loãng xương (≤ -2,5) 69 19,29 ± 6,23 0,721 ± 0,197 Mức độ tăng nồng độ dấu ấn chu chuyển xương nhóm lỗng xương so với nhóm bình thường (%) = (C-A ) x 100/A 17,2 57,7 p p > 0,05 p < 0,001 - Ở nhóm lỗng xương, nồng độ osteocalcin huyết tăng so với nhóm có MĐX bình thường (17,2%), nhiên khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) - Ở nhóm lỗng xương, nồng độ CTX huyết tăng so với nhóm có MĐX bình thường 57,7%, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,001) Ở người già, cân bị đảo lộn, hủy xương cao tạo xương Ở phụ nữ mãn kinh có lỗng xương, tốc độ chu chuyển xương tăng lên, mà tốc độ chu chuyển xương vòng quay tạo xương hủy xương Tuy nhiên, hủy xương mạnh tạo xương Do đó, hai dấu ấn sinh học chu chuyển xương (ostocalcin CTX) tăng lên giai đoạn loãng xương, dấu ấn hủy xương tăng mạnh dấu ấn tạo xương [5] Điều lý giải nồng độ osteocalcin đối tượng nghiên cứu cao so với người trẻ tuổi tăng lên nhóm có lỗng xương mức độ tăng không nhiều dấu ấn hủy xương CTX Mối tƣơng quan osteocalcin CTX huyết với T-score thời gian mãn kinh Bảng 4: Mối tương quan T-score, tuổi, thời gian mãn kinh với dấu ấn chu chuyển xương Nồng độ osteocalcin Nồng độ CTX r = 0,1, p > 0,05 y = -0,175 x tuổi + 0,185 r = - 0,17, p < 0,05 r = -0,14, p > 0,05 y = -0,109 x T-score + 0,381 r = -0,43, p < 0,01 y = 0,008 x tuổi + 0,194 r = 0,21, p < 0,05 y = 0,009 x thời gian mãn kinh + 0,56 r = 0,27, p < 0,01 - Nồng độ osteocalcin huyết khơng có mối tương quan với T-score (r = 0,1; p > 0,05), tương quan nghịch mức độ yếu với tuổi (r = -0,17; p < 0,05) không thấy mối tương quan với thời gian mãn kinh (r = -0,14; p > 0,05) 124 - Nồng độ CTX huyết có mối tương quan nghịch mức độ trung bình với T-score (r = -0,43, p < 0,01), tương quan thuận mức độ yếu với tuổi (r = 0,21, p < 0,01) tương quan thuận mức độ yếu với thời gian mãn kinh (r = 0,27; p < 0,01) TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2014 Kết tương tự nghiên cứu Marlena CS phụ nữ mãn kinh người Indonesia Philippines có nồng độ CTX trung bình 0,57 ng/ml 0,62 ng/ml [3], cao kết Lê Thu Hà với nồng độ CTX trung bình phụ nữ mãn kinh 0,56 ± 0,30 ng/ml, nhóm trẻ tuổi chưa mãn kinh 0,28 ± 0,20 ng/ml nồng độ CTX huyết phụ nữ mãn kinh có tương quan thuận với tuổi, thời gian mãn kinh [1] Như vậy, nồng độ dấu ấn chu chuyển xương tăng lên BN loãng xương (osteocaclcin 17,2%, CTX 57,7%) Điều phản ánh tốc độ chu chuyển xương tăng lên nhóm có lỗng xương Tuy nhiên, q trình hủy xương mạnh q trình tạo xương, cân chu chuyển xương thiên hủy xương Việc xác định theo dõi nồng độ dấu ấn chu chuyển xương có ý nghĩa đánh giá tốc độ chu chuyển xương chiều hướng thay đổi cân chu chuyển xương, từ cho phép theo dõi đánh giá hiệu thuốc điều trị loãng xương thời gian - tháng theo chu kỳ chu chuyển xương KẾT LUẬN Nghiên cứu phụ nữ nông thôn mãn kinh ≥ năm, tuổi ≥ 50 ≤ 70 tuổi, kết cho thấy: - Nồng độ osteocalcin huyết trung bình 19,92 ± 5,32 ng/ml; tăng 17,2% nhóm lỗng xương so với nhóm có MĐX bình thường; giảm dần theo nhóm tuổi (r = -0,17, p < 0,05) 125 - Nồng độ CTX huyết trung bình 0,65 ± 0,19 ng/ml; tăng 57,7% nhóm lỗng xương so với nhóm có MĐX bình thường; tương quan nghịch mức độ trung bình với T-score, thời gian mãn kinh tương quan thuận mức độ yếu với tuổi, p < 0,05 TÀI LIỆU THAM KHẢO Lê Thu Hà, Vũ Thị Thanh Hoa, Nguyễn Thị Hương Liên quan nồng độ osteocalcin, beta - crosslab huyết số yếu tố nguy loãng xương phụ nữ mãn kinh Tạp chí Nội khoa Việt Nam, số đặc biệt tháng 10/2013 (chuyên đề Cơ xương khớp, chào mừng Hội nghị khoa học Toàn quốc lần thứ XI Hội Thấp khớp học Việt Nam) 2013, tr.235-243 Langton C M, Langton D K Comparison of bone mineral density and quantitative ultrasound of the calcaneus: site-matched correlation and discrimination of axial BMD status Br J Radiol 2000, 73 (865), pp.31-35 Marlena C, Kruger L.M, Barbara Kuhn-Sherlock, Andon Hestiantoro, Paulus Wijanto, and I.A Julie Li-Yu , Joanne M Todd, Richard Eastell The effect of a fortified milk drink on vitamin D status and bone turnover in post-menopausal women from South East Asia Bone 2010, 46, pp.759-767 Sonia A Talwar MD, George T Griffing MD Bone markers in osteoporosis Medscape (Updated: Jan 3, 2012) Vasikaran S, Eastell R, Bruyère AJ, Foldes P, Garnero A, Griesmacher, McClung M, MorrisH A Markers of bone turnover for the prediction of fracture risk and monitoring of osteoporosis treatment: a need for international reference standards Osteoporos Int 2011, 22, pp.391-420 TẠP CHÍ Y - DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 9-2014 126 ... xương bình thư ng, xung siêu âm truyền qua mơ xương có thời gian ngắn, tốc độ truyền xung nhanh, BN loãng xương, thời gian truyền xung siêu âm dài hơn, tốc độ truyền xung chậm biên độ nhận xung bên... dò, đầu dò truyền xung siêu âm đầu dò nhận xung siêu âm bên đối diện xương gót chân Trong q trình truyền xung siêu âm, đầu dò di chuyển dọc theo xương gót BN Tốc độ truyền xung tính theo m/s (SOS... cung, phụ nữ mắc bệnh liên quan đến chuyển hóa (đái tháo đường, Basedow), người có dị tật xương - khớp bẩm sinh, mắc bệnh (ung thư, suy thận), gãy xương, phẫu thuật xương khớp vòng năm, dùng thuốc