Sốt xuất huyết Dengue là bệnh truyền nhiễm do vi rút Dengue gây nên. Bệnh xảy ra quanh năm, thường gia tăng vào mùa mưa. Bệnh gặp ở cả trẻ em và người lớn. Đặc điểm của sốt xuất huyết Dengue là sốt, xuất huyết và thoát huyết tương, có thể dẫn đến sốc giảm thể tích tuần hoàn, rối loạn đông máu, suy tạng, nếu không được chẩn đoán sớm và xử trí kịp thời dễ dẫn đến tử vong.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học TÌNH TRẠNG NHIỄM VI RÚT SỐT XUẤT DENGUE Ở TRẺ CÓ SỐT CẤP THAM GIA NGHIÊN CỨU CYD14 TẠI TIỀN GIANG Lê Tấn Giàu*, Trương Công Đầy*, Tạ Văn Trầm* TÓM TẮT Mở đầu: Sốt xuất huyết Dengue bệnh truyền nhiễm vi rút Dengue gây nên Bệnh xảy quanh năm, thường gia tăng vào mùa mưa Bệnh gặp trẻ em người lớn Đặc điểm sốt xuất huyết Dengue sốt, xuất huyết huyết tương, dẫn đến sốc giảm thể tích tuần hồn, rối loạn đơng máu, suy tạng, khơng chẩn đốn sớm xử trí kịp thời dễ dẫn đến tử vong Mục tiêu: Mơ tả tình trạng nhiễm vi rút Dengue trẻ có sốt cấp tham gia nghiên cứu CYD14 Tiền Giang Phương pháp nghiên cứu: Hồi cứu, mô tả hàng loạt trường hợp Kết quả: Lơ nghiên cứu có 45/738 trẻ (6,1%) có NS1 dương tính Mẫu máu cấp có 7/45 trẻ (15,6%) có IgM dương tính, 30/45 trẻ (66,7%) có IgG dương tính Mẫu máu hồi phục có 41/45 trẻ (91,1%) có IgM dương tính, 43/45 trẻ (95,6%) có IgG dương tính Về huyết học, mẫu máu cấp có 24/45 trẻ (53,3%) giảm bạch cầu máu, 11/45 trẻ (24,4%) có giảm tiểu cầu, 1/45 trẻ (2,2%) có Hct tăng theo tuổi Mẫu máu hồi phục có 9/45 trẻ (20%) giảm bạch cầu máu, 2/45 trẻ (4,4%) giảm tiểu cầu máu, khơng có trẻ có Hct tăng Về sinh hóa, mẫu máu cấp có 16/45 trẻ (35,5%) tăng men SGOT, 6/45 trẻ (13,3%) tăng men SGPT, mẫu máu hồi phục có 21/45 trẻ (46,7%) tăng men SGOT, 18/45 trẻ (40%) tăng men SGPT Kết luận: Trẻ nhiễm vi rút Dengue, xét nghiệm NS1 có tính xác cao chun biệt Mẫu máu giai đoạn cấp IgM dương tính thấp, tỉ lệ dương tính cao mẫu máu giai đoạn hồi phục Bạch cầu, tiểu cầu máu giảm giai đoạn cấp, dần trở bình thường giai đoạn hồi phục Từ khóa: Sốt xuất huyết Dengue ABSTRACT INFECTION DENGUE VIRUS IN CHILDREN HAD ACUTE FEBRILE ILLNESS STUDYING PARTICIPANT CYD IN TIEN GIANG PROVINCE Le Tan Giau, Truong Cong Day, Ta Van Tram * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement of Vol 20 - No - 2016: 65 - 69 Backgrounds: Dengue hemorrhagic fever is an infectious disease caused by the dengue virus The disease occurs throughout the year; usually increase during the rainy season The disease occurs in both children and adults Features of dengue fever, dengue and exit the plasma, which can lead to hypovolemic circulatory shock, coagulopathy, and organ failure, if not diagnosed early and treated in time can lead to dead Objective: Describe infection Dengue virus in children had acute febrile illness studying participant CYD in Tien Giang province Methods: Retrospective, descriptive case series Results: Plot studies had 45/738 (6.1%) had positive NS1 Blood samples acute with 7/45 children (15.6%) had positive IgM, 30/45 children (66.7%) had positive IgG Blood samples recovered with 41/45 children (91.1%) had positive IgM, 43/45 children (95.6%) had positive IgG About hematology, blood samples acute with 24/45 * Bệnh viện Đa Khoa Tiền Giang Tác giả liên lạc: PGS TS.BS Tạ Văn Trầm, Chuyên Đề Nhi Khoa ĐT: 0913771779, Email: tavantram@gmail.com 65 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 children (53, 3%) had leukopenia, 11/45 children (24.4%) had thrombocytopenia, 1/45 children (2.2%) had increased hematocrit with age Blood samples recovered with 9/45 children (20%) had neutropenia blood, 2/45 children (4.4%) had thrombocytopenia, no children had increased hematocrit About biochemistry, blood samples acute with 16/45 children (35.5%) had increased enzymes SGOT, 6/45 children (13.3%) had increased SGPT enzymes, blood samples recovered with 21/45 children (46.7%) had increased enzymes SGOT, 18/45 children (40%) had increased SGPT enzymes Conclusions: Children infected with Dengue virus, NS1 test with high accuracy and specialized Blood samples IgM-positive acute phase of low, high positive rate in blood samples recovery period Leukemia, blood platelet levels reduced in stages, gradually returning to normal in the recovery phase Keywords: Dengue hemorrhagic fever ĐẶT VẤN ĐỀ Sốt xuất huyết Dengue gây bốn tuýp vi rút Dengue, lây truyền sang người muỗi Aedes đốt Vi rút Dengue thường gặp vùng nhiệt đới cận nhiệt đới giới năm khoảng 50 đến 100 triệu người bị lây nhiễm Có khoảng 390 triệu ca nhiễm Dengue diễn năm có khoảng 96 triệu người mắc bệnh có triệu chứng lâm sàng rõ rệt Sốt Dengue vùng Châu Á - Thái Bình Dương chiếm khoảng 70% gánh nặng bệnh tật chung tăng lên khoảng 30 lần 50 năm qua Bốn týp vi rút gây bệnh theo tỷ lệ mà thay đổi cách không dự đoán theo thời gian từ nơi sang nơi khác, quốc gia Tỷ suất mắc gia tăng nhóm tuổi cao nhiều quốc gia lưu hành sốt Dengue(1,7) Chưa có vắc xin cấp phép lưu hành chưa có biện pháp điều trị đặc hiệu để ngăn ngừa nhiễm vi rút Dengue Một thử nghiệm vắc xin ngừa sốt xuất huyết bốn týp trẻ em khỏe mạnh từ đến 14 tuổi Châu Á tài trợ Sanofi Pasteur từ ngày 03 tháng đến ngày 01 tháng 12 năm 2011 Đây thử nghiệm lâm sàng giai đoạn 3, quan sát mù, ngẫu nhiên, có đối chứng, đa trung tâm quốc gia thuộc khu vực Châu Á Thái Bình Dương, có tỉnh Tiền Giang(4) Do chúng tơi tiến hành nghiên cứu tình trạng nhiễm vi rút Dengue trẻ có sốt cấp tham gia nghiên cứu nhằm mục tiêu Mơ tả tình trạng nhiễm vi rút Dengue 66 trẻ có sốt cấp tham gia nghiên cứu CYD14 Tiền Giang từ 01/7/2011 đến 30/10/2013 Mục tiêu nghiên cứu Xác định tỉ lệ trẻ có xét nghiệm NS1 dương tính đợt sốt cấp Xác định tỉ lệ Mac Elisa dương tính đợt sốt cấp Xác định tỉ lệ thay đổi số huyết học sinh hóa nhiễm vi rút Dengue ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Thiết kế nghiên cứu Hồi cứu, mô tả hàng loạt trường hợp Dân số mục tiêu Bệnh nhi nhiễm vi rút Dengue có sốt cấp tham gia nghiên cứu CYD14 Tiền Giang Dân số chọn mẫu Bệnh nhi nhiễm vi rút Dengue có sốt cấp tham gia nghiên cứu CYD14 Tiền Giang từ 01/7/2011 đên 30/10/2013 Cỡ mẫu Lấy trọn mẫu từ 01/7/2011 đến 30/10/2013 Tiêu chí chọn bệnh Tham gia nghiên cứu CYD14 Có sốt cấp Nhiễm vi rút Dengue Tiêu chí loại trừ Trẻ khơng hồn thành nghiên cứu Chun Đề Nhi Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Xử lý liệu Xử lý phân tích số liệu phần mềm SPSS 16 KẾT QUẢ Từ 01/7/2011 đến 30/10/2013 có 45 trẻ tham gia CYD 14 sốt cấp có nhiễm vi rút Dengue thỏa tiêu chí đưa vào nghiên cứu Tỉ lệ NS1 dương tính Chúng tơi ghi nhận 45/738 (6,1%) trẻ sốt cấp tham gia CYD 14 có NS1 dương tính CYD 14 thử nghiệm lâm sàng giai đoạn 3, quan sát mù, ngẫu nhiên, có đối chứng giả dược, đánh giá hiệu lực tính an tồn vắc xin bốn tuýp ngừa sốt xuất huyết, đa trung tâm quốc gia thuộc khu vực Châu Á Thái Bình Dương Các đối tượng nhận mũi tiêm vắc xin sống, giảm độc lực, bốn týp ngừa sốt Dengue (CYD-TDV) giả dược tháng 0, tháng thứ tháng thứ 12 Trong trường hợp trẻ bị sốt cấp tính (sốt từ ngày trở lên), đối lấy thêm mẫu máu Mẫu máu giai đoạn cấp tính (trong vòng ngày kể từ lúc khởi phát sốt) kiểm tra tìm kháng nguyên protein phi cấu trúc vi rút Dengue (NS1) (Labo Platelia Biorad Marnes-La-Coquette, Pháp), sàng lọc vi rút Dengue phương pháp RT-PCR,và xác định týp vi rút gây bệnh phương pháp phản ứng chuỗi polymerase đặc hiệu týp huyết Simplexa (Simplexa denguereal-time PCR assay, Focus Diagnostics, CA, USA)(4) Một ca sốt cấp tính phân loại sốt Dengue xác định xét nghiệm cho kết dương tính Cả mẫu máu thứ mẫu máu thứ hai mà lấy giai đoạn hồi phục vào ngày thứ 7-14 kể từ lúc đối tượng bị sốt cấp tính kiểm tra diện kháng thể IgM IgG (thử nhiệm lâm sàng) NS1 vi rút Dengue glycoprotein, trọng lượng phân tử 46-50 kD Nhiễm vi rút Dengue phát nhiều xét nghiệm như: phân lập vi rút, phản ứng chuỗi polymerase chép ngược (RT-PCR), ELISA phát kháng nguyên, phản ứng ngăn kết hồng cầu Chuyên Đề Nhi Khoa Nghiên cứu Y học (HI), phản ứng miễn dịch hấp phụ gắn men (MAC-ELISA, GAC-ELISA), sắc ký miễn dịch Kíp platelia Dengue NS1 áp dụng nguyên tắc miễn dịch men bước plaque Xét nghiệm thực đơn giản, nhanh dễ đọc kết Bác sĩ lâm sàng sử dụng kết xét nghiệm việc chẩn đoán bệnh giai đoạn sớm cho bệnh nhân nội trú lẫn ngoại trú vài Xét nghiệm có độ nhạy độ đặc hiệu cao Theo Phan Văn Bé Bảy(6) độ nhạy xét nghiệm 94,9%, theo Philippe Dussart(3) độ nhạy 88,7%, Kamarasamy(3) 93,3 % Độ đặc hiệu xét nghiệm theo Phan Văn Bé Bảy, Philippe Dussart 100 %, Hao Xu(8) 98,9%, giá trị tiên đoán dương 100%, giá trị tiên đốn âm cao 94,4% nên hữu ích việc xác định hay loại trừ bệnh nhân bị nhiễm vi rút Dengue Tỉ lệ Mac Elisa dương tính đợt sốt cấp Đối với mẫu máu cấp, ghi nhận 7/45 trẻ (15,6%) có IgM dương tính, 30/45 trẻ (66,7%) có IgG dương tính Mẫu máu cấp mẫu máu lấy vòng ngày từ lúc khởi phát sốt Bảng Tỉ lệ IgM dương tính mẫu máu cấp IgM Dương tính Âm tính Tổng Số ca 38 45 Tỉ lệ % 15,6 84,4 100 Bảng Tỉ lệ IgG dương tính mẫu máu cấp IgG Dương tính Âm tính Tổng Số ca 30 15 45 Tỉ lệ % 66,7% 33,3% 100 Nhận xét: Đối với mẫu máu hồi phục lấy từ ngày thứ đến ngày thứ 14 sốt Chúng ghi nhận 41/45 trẻ (91,1%) có IgM dương tính, có đến 43/45 trẻ (95,6%) có IgG dương tính Bảng Tỉ lệ IgM dương tính mẫu máu hồi phục IgM Dương tính Âm tính Số ca 41 Tỉ lệ % 91,1 8,9 67 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học IgM Tổng Số ca 45 Tỉ lệ % 100 Bảng Tỉ lệ IgG dương tính mẫu máu hồi phục IgG Dương tính Âm tính Tổng Số ca 43 24,4% 45 Tỉ lệ % 95,6 4,4 100 Nhận xét: Lần người bị nhiễm vi rút Dengue đáp ứng kháng thể xảy kiểu sơ nhiễm Đáp ứng sơ nhiễm kháng thể IgM xuất sớm, thường vào ngày thứ năm bệnh tăng cao tuần lễ sau giảm dần Kháng thể IgG xuất muộn tương đối thấp Đặc trưng đáp ứng sơ nhiễm kháng thể IgM tăng cao kháng thể IgG mức thấp Trong đáp ứng tái nhiễm kháng thể IgG xuất sớm tăng cao tuần lễ đầu kháng thể IgM mức tương đối thấp Có nhiều phương pháp chẩn đốn phòng thí nghiệm vi rút Dengue phân lập vi rút, chẩn đoán huyết học, phản ứng chuỗi polymerase chép ngược Huyết chẩn đốn gồm có phản ứng ngăn ngưng kết hồng cầu, phản ứng kết hợp bổ thể, phản ứng miễn dịch hấp phụ gắn men IgG gián tiếp, phản ứng trung hòa, phản ứng miễn dịch hấp phụ gắn men thu bắt IgG (Mac-Elisa) đơn giản, rẻ tiền, dễ thực có ưu điểm lấy máu bệnh nhân lần, kháng thể IgM xuất sớm kháng thể IgG tồn 60-90 ngày Vì Mac-Elisa dương tính có ý nghĩa bệnh nhân mắc bệnh người nhiễm vi rút Dengue 2-3 tháng trước(5) Thay đổi số huyết học sinh hóa chẩn đốn sốt xuất huyết Dengue Huyết học Trong mẫu máu cấp, ghi nhận 24/45 trẻ (53,3%) giảm bạch cầu máu, bạch cầu máu trẻ 3.650.000 ± 1000/mm3, 11/45 trẻ(24,4%) giảm tiểu cầu máu, tiểu cầu máu trung bình 116.800 ± 44.000/mm3, tiều cầu thấp 28.000/mm3 68 Bảng Thay đổi số huyết học mẫu máu cấp Thay đổi huyết học Giảm bạch cầu máu Giảm tiểu cầu Tăng Hct Số ca 24 11 Tỉ lệ % 53,3 24,4 2,2 Nhận xét: Trong mẫu máu hồi phục, ghi nhận 9/45 trẻ (20%) giảm bạch cầu máu, bạch cầu trung bình 4.350.000 ± 320/mm3, trẻ có giảm tiểu cầu máu, khơng có trẻ có Hct tăng theo tuổi Sinh bệnh học giảm tiểu cầu sốt xuất Dengue chưa biết rõ, có nhiều giả thuyết: vi rút Dengue ức chế tủy xương sản xuất tiểu cầu bị giảm, Den-2 kết hợp tiểu cầu với diện kháng thể đặc hiệu làm tiêu hủy tiểu cầu, tiêu thụ tiểu cầu đông máu nội mạch lan tỏa tiểu cầu kết dính chỗ tế bào nội mạc bị tổn thương Giảm bạch cầu máu rối loạn miễn dịch(5) Thay đổi SGOT,SGPT Trong mẫu máu cấp, ghi nhận 16/45 trẻ (35,5%) tăng men SGOT, men SGOT trung bình 56,3 ± 15,5 U/L, men SGOT cao 96 U/L, 6/45 trẻ (13,3%) tăng men SGPT, men SGPT trung bình 70 ± 17,4 U/L, men SGPT cao 97 U/L Trong mẫu máu hồi phục, ghi nhận 21/45 trẻ (46,7%) tăng men SGOT, men SGOT trung bình 62,2 ± U/L, men SGOT cao 107 U/L, 18/45 trẻ (40%) tăng men SGPT, men SGPT trung bình 76 ± 2,96, cao 140 U/L Theo Chiou Feng Lin(2), tế bào gan bị nhiễm vi rút Dengue có tượng hoạt hóa chết tế bào theo chương trình Bên cạnh chế gây độc tế bào trực tiếp, có chế giáp tiếp khác gây tổn thương gan thông qua cytokine, chemokine, thâm nhập tế bào bạch cầu vào tổ chức gan(2) KẾT LUẬN Trẻ nhiễm vi rút Dengue, xét nghiệm NS1 có tính xác cao chun biệt, có 45/738 Chuyên Đề Nhi Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 (6,1%) trẻ sốt cấp tham gia CYD 14 có NS1 dương tính Mẫu máu giai đoạn cấp IgM dương tính 7/45 trẻ (15,6%); 30/45 trẻ (66,7%) có IgG dương tính mẫu máu giai đoạn hồi phục Bạch cầu, tiểu cầu máu giảm giai đoạn cấp, dần trở bình thường giai đoạn hồi phục Trong mẫu máu cấp, ghi nhận 16/45 trẻ (35,5%) tăng men SGOT, men SGOT trung bình 56,3 ± 15,5 U/L, men SGOT cao 96 U/L, 6/45 trẻ (13,3%) tăng men SGPT, men SGPT trung bình 70 ± 17,4 U/L, men SGPT cao 97 U/L Trong mẫu máu hồi phục, ghi nhận 21/45 trẻ (46,7%) tăng men SGOT, men SGOT trung bình 62,2 ± U/L, men SGOT cao 107 U/L, 18/45 trẻ (40%) tăng men SGPT, men SGPT trung bình 76 ± 2,96, cao 140 U/L TÀI LIỆU THAM KHẢO Bhatia R (2013), “Changing epidemiology of dengue in South East Asia”, WHO-SEAJPH, 2, p.23-27 Chuyên Đề Nhi Khoa Nghiên cứu Y học Chiou-Feng Lin (2008), “Liver injury caused by antibodies against dengue virus nonstructural protein in a murine model”, Laboratory Investigation, 88, p 1079-1089 Kamarasary V (2007), “Evaluating the sensivity of a commercial dengue NS1 antigen capture ELISA for early diagnosis of acute dengue virus infection, Singapore Med J, 48(7), p.669-673 Maria Rosaario Capeding, Ngoc Huu Tran (2014), “Clinical efficacy and safety of a novel tetravalent dengue vaccine in healthy children in Asia: a phase 3, randomized, observermasked, placebo-controlled trial” The lancet, 384, p.1358-1365 Nguyễn Thanh Bảo (2008) Vi rút Dengue Vi rút học, Nhà xuất Y học, Tp Hồ Chí Minh, tr.119-126 Phan Văn Bé Bảy, Hoàng Tiến Mỹ (2009), “Xét nghiệm Elisa phát kháng nguyên NS1 chẩn đoán sốt Dengue/sốt xuất huyết Dengue” Tạp chí Y học thành phố Hồ Chí Minh, tập13 (1), tr 249-255 Sabchareon A, Wallace D (2012), “Protective efficacy of the recombinant, live attenuated, CYD tetravalent dengue vaccine in Thai schoolchildren: a randomized, controlled phase 2b trial”, The lancet, 380, p 1559-1567 Xu H (2006), “Serotype specific monoclonal antibody based antigen capture immumoassay for circulating nonstructural protein NS1: implications for early diagnosis and serotyping of dengue virus infections, J.Clin.Microbiol, 44, p.2872-2878 Ngày nhận báo: 06/10/2015 Ngày phản biện nhận xét báo: 12/07/2016 Ngày báo đăng: 25/09/2016 69 ... rút Dengue trẻ có sốt cấp tham gia nghiên cứu nhằm mục tiêu Mơ tả tình trạng nhiễm vi rút Dengue 66 trẻ có sốt cấp tham gia nghiên cứu CYD14 Tiền Giang từ 01/7/2011 đến 30/10/2013 Mục tiêu nghiên. .. ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Thiết kế nghiên cứu Hồi cứu, mô tả hàng loạt trường hợp Dân số mục tiêu Bệnh nhi nhiễm vi rút Dengue có sốt cấp tham gia nghiên cứu CYD14 Tiền Giang Dân số chọn mẫu Bệnh nhi nhiễm vi. .. vi rút Dengue có sốt cấp tham gia nghiên cứu CYD14 Tiền Giang từ 01/7/2011 đên 30/10/2013 Cỡ mẫu Lấy trọn mẫu từ 01/7/2011 đến 30/10/2013 Tiêu chí chọn bệnh Tham gia nghiên cứu CYD14 Có sốt cấp