Mục tiêu đề tài nhằm xác định được chất khử trùng và thời gian khử trùng thích hợp nhất để khử trùng mẫu cấy. Xác định được nồng độ BA thích hợp nhất đến sự hình thành chồi cây hoa hồng Nhung. Xác định được nồng độ NAA thích hợp nhất đến sự hình thành rễ cây hoa hồng Nhung trong giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC QUY NHƠN KHOA SINH -KTNN ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƯỞNG BA VÀ NAA ĐẾN SỰ SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA GIỐNG HOA HỒNG NHUNG (ROSA HYBRIDA L) BẰNG PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ ĐỒ ÁN KỸ SƯ NÔNG HỌC GVHD Ths Hồ Tân SVTH Huỳnh Văn Huy Nội dung trình bày ĐẶT VẤN ĐỀ Tổng giá trị hoa cắt cành giới 42 USD tỷ hoa hồng 15 tỷ USD Tổng diện tích trồng hoa hồng nước ta ước tính 30004000ha, sản lượng đạt khoãng tỷ cành/ năm ĐẶT VẤN ĐỀ “ Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng BA NAA đến sinh trưởng phát triển giống hoa hồng Nhung (Rosa hybrida L) phương pháp nuôi cấy mô” MỤC TIÊU ĐỀ TÀI Xác định chất khử trùng thời gian khử trùng thích hợp để khử trùng mẫu cấy ― Xác định nồng độ BA thích hợp đến hình thành chồi hoa hồng Nhung ― Xác định nồng độ NAA thích hợp đến hình thành rễ hoa hồng Nhung giai đoạn tạo hoàn chỉnh ― 3. ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Sử dụng giống hoa hồng Nhung (Rosa hybrida l.) có Khảo sát nồng độ chất khử trùng thời gian khử trùng lệlàng sốnghoa sót Vạn Thạch mẫu cấy nguồnđến gốctỷtại Đà Lạt để nuôi cấy Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả Bộ phận đưa vào nuôi cấy: đoạn thân tạo chồi hoa hồng Nhung môi trườngThời in vitro gian, địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến Thời gian: Từ tháng 1/2017 – tháng 5/2017 sinh trưởng khả tạo rễ hoa hồng Nhung điều kiện in vitro Địa điểm: Thí nghiệm tiến hành phòng Nuôi cấy mô tế bào trường Đại học Quy Nhơn ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thí nghiệm Khảo sát nồng độ chất khử trùng thời gian khử trùng đến tỷ lệ sống sót mẫu cấy Công thức Tên chất khử trùng Nồng độ (%) CT1 (phút) CT2 CT3 Thời gian xử lý 10 12 Javen CT4 CT5 2,5 10 CT6 12 CT7 CT8 CT9 HgCl2 0,1 10 12 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả hình thành chồi chồi hoa hồng mơi trường in vitro Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, gồm công thức, công thức lặp lại lần, lần bình, bình mẫu cấy Các cơng thức thí nghiệm: CT1: MS (ĐC) CT2: MS + 0,5mg/l BA CT3: MS + 1mg/l BA CT4: MS + 1,5mg/l BA CT5: MS + 2mg/l BA Số liệu ghi nhận tuần lần, theo dõi vòng tuần ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến sinh trưởng khả rễ chồi hoa hồng điều kiện in vitro Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, gồm công thức, công thức lặp lại lần, lần bình, bình mẫu cấy Các cơng thức thí nghiệm: CT1: MS (ĐC) CT2: MS + 0,5 mg/l NAA CT3: MS + 1,0 mg/l NAA CT4: MS + 1,5 mg/l NAA CT5: MS + 2,0 mg/l NAA Số liệu ghi nhân tuần/lần theo dõi vòng tuần 3 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Thí nghiệm 1: Khảo sát nồng độ chất khử trùng thời gian khử trùng đến tỷ lệ sống sót mẫu cấy Mẫu Tỷ lệ (%) Mẫu Mẫu sống chết nhiễm Công thức Nồng độ (%) Thời gian (phút) CT1 2 8 8,33f 0,00d 91,67a CT2 2 10 16,67e 1,67d 81,67a CT3 2 12 43,33c 20,00c 36,67d CT4 2,5 8 13,33ef 23,33bc 63,33c CT5 2,5 10 43,33c 25,00bc 33,33d CT6 2,5 12 58,33b 36,67a 5,00e CT7 0,1 8 30,00d 8,33d 61,67c CT8 0,1 10 43,33c 21,67c 35,00c CT9 0,1 12 65,00a 31,67ab 3,33e Mức ý nghĩa * * * CV(%) 10,38 25,92 9.08 LSD0,05 6,42 8.39 7.19 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Mẫu hoa hồng Nhung khử trùng nước HgCl2 12 phút (21 NSKC) KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả hình thành chồi hoa hồng môi trường in vitro Bảng 3.2 Số chồi gia tăng ảnh hưởng nồng độ BA qua thời điểm sau cấy Nồng độ BA (mg/l) Số chồi gia tăng qua thời điểm sau cấy 28 ngày 14 ngày 0,0 0,31c 0,6d 0,5 0,8b 1,1c 1,0 1,2a 1,9b 1,5 1,2a 2,2b 2,0 1,1a 1,73b Mức ý nghĩa * * CV (%) 15,98 8,18 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Bảng 3.3 Chiều cao chồi qua các thời điểm sau khi cấy Nồng độ BA (mg/l) 0,0 Chiều cao (cm) 14 ngày 28 ngày 1,53b 1,84c 0,5 1,76b 2.25b 1,0 1,8ab 2.25b 1,5 2,0a 2.5a 2,0 1,67ab 2.03bc Mức ý nghĩa * * CV (%) 3.97 5.97 LSD0,05 0.42 0.25 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Bảng 3.4 gia tăng số chồi hoa hồng ảnh hưởng nồng độ BA qua thời điểm sau cấy Số lá Nồng độ BA (mg/l) 14 ngày 28 ngày 0,0 3,63d 7,50e 0,5 5,17c 9,67d 1,0 6,7b 12,67b 1,5 8,6a 13,50a 2,0 6,37b 11,67c Mức ý nghĩa * * CV (%) 5,09 2,11 LSD0,05 0,58 0,44 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN CT1 CT4 Chồi hoa hồng 28 ngày nuôi cấy(CT (ĐC): MS; CT 4: MS + 1,5 mg/l BA) KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến sinh trưởng khả rễ chồi hoa hồng điều kiện in vitro Bảng 3.5 số rễ chiều dài rễ chồi hoa hồng ảnh hưởng nồng độ NAA qua tuần sau cấy Nồng độ NAA(mg/l) 0 Số rễ 1,67d Chiều dài rễ (cm) 0,77d 0,5 2,33c 1,1cd 1,0 2,67bc 1,6ab 1,5 3,33a 1,9a 2,0 2,8b 1,3bc Mức ý nghĩa * * CV (%) 9,71 13,76 LSD0,05 0,47 0,35 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Bảng 3.6 Chiều cao chồi gia tăng ảnh hưởng nồng độ NAA qua thời điểm sau cấy Nồng độ NAA (mg/l) 0,0 Sự gia tăng chiều cao chồi (cm) 14 ngày 28 ngày 0,48d 0.62c 0,5 0,78c 1,03bc 1,0 0,92b 1,4ab 1,5 1,33a 1,67a 2,0 1,07b 1,23c Mức ý nghĩa * * CV (%) 8,64 6,14 LSD0,05 0,15 0,42 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Bảng 3.7 Sự gia tăng số ảnh hưởng nồng độ nồng độ NAA qua thời điểm sau cấy Nồng độ NAA (mg/l) Sự gia tăng số lá 14NSKC 28NSKC 0 (ĐC) 1,33c 1,83c 0,5 1,67bc 2,33bc 1,0 2,33a 4,33a 1,5 2,2ab 3,67a 2,0 1,83ab 3,33ab Mức ý nghĩa * * CV (%) 16,07 18,15 LSD0,05 0,57 1,06 KẾT LUẬN - Phương pháp khử trùng mẫu tốt đoạn thân hoa hồng sử dụng nước HgCl2 với nồng độ 0,1% 12 phút có hiệu Với công thức tỷ lệ mẫu sống đạt cao 65% - Môi trường nhân nhanh chồi tốt là: MS + 1,5 mg/l BA Công thức cho số chồi, chiều cao chồi, số đạt giá trị cao tình trạng chồi khỏe, mập, màu xanh thẫm - Môi trường tạo rễ tốt là: MS + 1,5 mg /l NAA Số rễ đạt 3,33 rễ với tình trạng rễ khỏe, mập; chiều dài rễ lớn đạt 1,9 cm ĐỀ NGHỊ Nên sử dụng nôi trường MS có bổ sung BA với nồng độ 1,5 mg/l cho giai đoạn nhân nhanh chồi môi trường MS có bổ sung 1,5 mg/l NAA giai đoạn tạo hoàn chỉnh - Cần tiếp tục nghiên cứu nồng độ khác giai đoạn vườn ươm để xây dựng quy trình nhân giống hoa hồng Nhung hồn chỉnh - MỘT SỐ HÌNH ẢNH GIAI ĐOẠN VÀO MẪU Javen 2,0% Javen 2,5% HgCl2 0,1% MỘT SỐ HÌNH ẢNH GIAI ĐOẠN NHÂN NHANH CT2 CT1 CT4 CT3 CT5 MỘT SỐ HÌNH ẢNH GIAI ĐOẠN VÀO MẪU 0,5 mgl/l 14NSKC 1,0mgl/l 14NSKC 1,5 mg/l 14NSKC 2,0 mg/l 14NSKC CẢM ƠN QUÝ THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ LẮNG NGHE ... trưởng BA NAA đến sinh trưởng phát triển giống hoa hồng Nhung (Rosa hybrida L) phương pháp nuôi cấy mô MỤC TIÊU ĐỀ TÀI Xác định chất khử trùng thời gian khử trùng thích hợp để khử trùng mẫu cấy ―... độ BA đến khả Bộ phận đưa vào nuôi cấy: đoạn thân tạo chồi hoa hồng Nhung môi trườngThời in vitro gian, địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến Thời gian: Từ tháng 1/2017 – tháng... QUẢ VÀ BÀN LUẬN CT1 CT4 Chồi hoa hồng 28 ngày nuôi cấy( CT (ĐC): MS; CT 4: MS + 1,5 mg/l BA) KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NAA đến sinh trưởng khả rễ chồi hoa hồng