Luận án thông qua tuyển chọn một số giống hoa cẩm chương mới thích hợp với điều kiện sinh thái của ác tỉnh phía Bắc Việt Nam, phương pháp lai hữu tính gây đột biến thực nghiệm để tạo nguồn vật liệu khởi đầu cho công tá chọn giống; hoàn thiện quy trình kỹ thuật nhân giống, thâm canh áp dụng cho các giống hoa cẩm chướng đã được tuyển chọn.
Bộ giáo dục v đo tạo trờng đại học nông nghiệp h nội Lê đức thảo Nghiên cứu chọn tạo v số biện pháp kỹ thuật nhân, sản xuất hoa Cẩm chớng (Dianthus caryophyllus L.) Chuyên ngành: Di truyền Chọn giống trồng Mã số: 62 62 05 01 Tóm tắt luận án tiến sĩ nông nghiệp H nội - 2010 Công trình đợc hoàn thành Trờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội Ngời hớng dẫn khoa học: PGS.TS Hoàng Ngọc Thuận GS.TS Nguyễn Xuân Linh Ph¶n biƯn 1: TS L· Tn NghÜa ViƯn Di truyền Nông nghiệp Phản biện 2: PGS.TS Nguyễn Thị Ngọc Huệ Trung tâm Tài nguyên thực vật Phản biện 3: PGS.TS Nguyễn Hồng Minh Trờng ĐH Nông nghiệp Hà Nội Luận án đợc bảo vệ trớc Hội đồng chấm luận án cấp Trờng họp Trờng Đại học Nông nghiƯp Hµ Néi vµo håi 8h giê 30 ngµy 26 tháng 11 năm 2010 Có thể tìm hiểu luận án th viện: Quốc gia Đại học Nông nghiệp Hà Nội Danh mục công trình đ công bố liên quan đến luận án Lê Đức Thảo, Nguyễn Xuân Linh, Lê Sỹ Dũng (2004), Kết đánh giá số giống Cẩm chớng nhập nội, Tạp chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, Tạp chí Khoa học - Công nghệ Bộ Nông nghiệp v Phát triển Nông thôn số 7/2004, tr 960-962 Lê Đức Thảo, Hong Ngọc Thuận, Nguyễn Thị Kim Lý (2008), Nghiên cứu quy trình nhân giống hoa Cẩm chớng SP1 (Dianthus caryophyllus Topaz) phơng pháp nuôi cấy mô tế bo, Tạp chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, Tạp chí Khoa học v Công nghệ Bộ Nông nghiệp v Phát triển Nông thôn số 1/2008, tr 26-31 Lê Đức Thảo, Hong Ngọc Thuận, Nguyễn Thị Kim Lý, Hong Xuân Lam, Nguyễn Viết Dũng (2008), Kết nghiên cứu v tuyển chọn số giống Cẩm chớng đơn (Standard carnation) nhËp néi t¹i Sa Pa – Lμo Cai”, T¹p chÝ Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam, Viện Khoa häc N«ng nghiƯp ViƯt Nam, sè 2/2008, tr 31-36 Lê Đức Thảo, Hong Ngọc Thuận, Nguyễn Thị Kim Lý, Nguyễn Tuấn Phong (2009), Kết nghiên cứu v tun chän mét sè gièng CÈm ch−íng chïm (Spray carnation) nhËp néi t¹i Sa Pa – Lμo Cai”, T¹p chÝ Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam, Viện Khoa häc N«ng nghiƯp ViƯt Nam, sè 2/2009, tr 13-18 Lê Đức Thảo, Hong Ngọc Thuận, Nguyễn Thị Kim Lý, Trần Hoi Hơng (2009), Nghiên cứu quy trình nhân gièng hoa CÈm ch−íng SP25 (Dianthus caryophyllus Make up) b»ng phơng pháp nuôi cấy mô tế bo, Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam, Viện Khoa häc N«ng nghiƯp ViƯt Nam, sè 2/2009, tr 76-82 Lê Đức Thảo, Nguyễn Thị Kim Lý (2009), ứng dụng kü thuËt chiÕu x¹ In vitro b»ng tia gamma chọn tạo giống hoa Cẩm chớng, Tạp chí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, Tạp chí Khoa học v Công nghệ Bộ Nông nghiệp v Phát triển Nông thôn số 9/2009, tr 9-13 1 mở đầu Tính cấp thiết đề tài Trong loại hoa cắt, Cẩm chớng l loại hoa đợc ngời tiêu dùng biết đến nhờ đa dạng mu sắc, hoa bền, tơi lâu, dễ bảo quản v vận chuyển xa Các giống Cẩm chớng đợc trồng miền Bắc l giống nhập nội, giống chủ yếu đợc nhân giống vô tính qua nhiều hệ mét thêi gian dμi, kü tht vμ ®iỊu kiƯn sản xuất lạc hậu Vì vậy, việc sản xuất hoa Cẩm chớng phục vụ xuất bị hạn chế chất lợng hoa thấp v vấn đề quyền giống Để đẩy mạnh công tác nghiên cứu, phát triển sản xuất Cẩm chớng điều kiện Việt Nam, cần có giải pháp tổng thể từ khâu chọn tạo giống, kỹ thuật nhân giống v thâm canh đồng Bắc bộ, điều kiện khí hậu cho phép trồng hoa Cẩm chớng vụ/năm, việc giữ giống qua mùa hè điều kiện nóng ẩm để nhân giống cho vụ sau l khó khăn Vì vậy, năm gần đây, giống hoa Cẩm chớng cung cấp cho sản xuất tỉnh phía Bắc phụ thuộc vo nguồn giống nhập nội Để giải vấn đề ny, việc nhân giống vùng núi cao nh Bắc Hμ, Sa Pa, vơ HÌ nh»m cung cÊp giống cho vùng đồng l đáp ứng yêu cầu thực tiễn sản xuất Nhằm mục đích nghiên cứu chọn tạo giống v số biện pháp kỹ thuật sản xuất, góp phần phát triển sản xuất hoa Cẩm chớng điều kiện Việt Nam, thực đề ti: Nghiên cứu chọn tạo số biện pháp kỹ thuật nhân, sản xuất hoa Cẩm chớng (Dianthus caryophyllus L.) Mục tiêu đề tài - Tuyển chän mét sè gièng hoa CÈm ch−íng míi thÝch hỵp với điều kiện sinh thái tỉnh phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu sử dụng phơng pháp lai hữu tính v gây đột biến thực nghiệm để tạo nguồn vật liệu khởi đầu cho công tác chọn tạo gièng hoa CÈm ch−íng ë ViƯt Nam - Sư dơng thị phân tử RAPD để đánh giá sai khác di truyền số dòng, giống đợc chọn phục vụ công tác chọn giống Cẩm chớng - Nghiên cứu, hon thiện qui trình kỹ thuật nhân giống, thâm canh áp dụng cho giống hoa Cẩm chớng đợc tuyển chọn Thời gian địa điểm nghiên cứu -Thời gian nghiên cứu: Từ năm 2004 - 2009 - Địa điểm nghiên cứu: + Trại Thí nghiệm Hoa Sa Pa - Lo Cai + Bộ môn Đột biến v Ưu lai - Viện Di truyền Nông nghiƯp + Bé m«n Kü tht Di trun - ViƯn Di truyền Nông nghiệp + Hợp tác xã Nông nghiệp Tây Tựu - Từ Liêm - H Nội ý nghĩa đề tài 4.1 ý nghĩa khoa học: - Đề ti đánh giá khả sinh trởng, phát triển nh suất, chất lợng hoa v khả chống chịu sâu bệnh giống Cẩm chớng nhập nội, lm sở để tuyển chọn giống míi vμ lμm phong phó thªm vËt liƯu cho chän tạo giống - Đã tạo đợc vật liệu khởi đầu phục vụ cho công tác nghiên cứu chọn tạo gièng CÈm ch−íng míi ®iỊu kiƯn ViƯt Nam - Đề ti nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhân giống v sản xuất chất lợng cao cho giống đợc tuyển chọn - Các kết nghiên cứu đề ti l dẫn liệu khoa học phục vụ cho công tác chọn tạo giống Cẩm chớng, đo tạo v hớng dẫn cho sở sản xuất 4.2 ý nghĩa thực tiễn: - Đề ti tuyển chọn đợc giống Cẩm chớng cho suất v chất lợng hoa đáp ứng đợc yêu cầu sản xuất, hai giống SP11 v SP13 đợc cho phép nhân giống v sản xuất thử diện rộng Giống SP25 đợc khảo nghiệm số tỉnh phía Bắc - Đề xuất v ứng dụng thnh công hớng phát triển nhân giống Cẩm chớng vùng Sa Pa cung cấp cho vùng đồng - Đã hon thiện đợc qui trình nhân giống v qui trình sản xuất cho giống đợc tuyển chọn, góp phần đa nhanh giống sản xuất Những điểm luận án - Đề ti l công trình nghiên cứu có hệ thống bao gồm nội dung tuyển chọn v tạo giống cách lai hữu tính v đột biến thực nghiệm, ứng dụng thị phân tử chọn tạo giống, hon thiện quy trình nhân giống vô tính giâm cnh, in vitro v số biện pháp kĩ thuật sản xuất hoa Cẩm chớng - Kết đề ti đóng góp sở lý luận việc nghiên cứu tạo vật liệu khởi đầu phục vụ công tác chọn tạo giống Cẩm chớng điều kiện Việt Nam lai hữu tính v đột biến thực nghiệm - Đề ti tiếp cận v bớc đầu thnh công việc ứng dụng thị phân tử phục vụ chọn tạo giống Cẩm chớng Việt Nam Xác định đợc loại mồi dùng để nhận dạng dòng SP25-1 đột biến, loại mồi nhận dạng giống đơn v loại mồi nhận dạng giống chùm Sử dụng thị phân tử RAPD xác định đợc hệ số tơng đồng di truyền dòng, giống đợc chọn phục vụ lai tạo giống Bố cục cđa ln ¸n: Ln ¸n gåm 159 trang, bè cơc qua phần: mở đầu (6 trang), tổng quan (38 trang), vật liệu, nội dung v phơng pháp nghiên cứu (20 trang), kết nghiên cứu v thảo luận (93 trang), kết luận v đề nghị (2 trang) Luận văn có 52 bảng, 17 hình v trang hình ảnh thí nghiệm 3 Chơng Tổng quan ti liệu Trên sở tổng hợp v phân tích ti liệu tham khảo v ngoi nớc, nhận thấy rằng: - Qua đặc điểm, nguồn gốc v yêu cầu ngoại cảnh Cẩm chớng thấy, Cẩm chớng thích hợp với vùng khí hậu mát mẻ Ngoi ra, vùng ny phù hợp với trình thụ phấn Cẩm chớng nên thuận lợi cho việc lai tạo, tạo vật liệu khởi đầu v dòng, giống cho sản xuất Trong năm qua, diện tích trồng Cẩm chớng miền Bắc bị thu hẹp đáng kể sản xuất đợc vo vụ Đông đồng v việc trì giống qua vụ Hè khó khăn Vì vậy, việc nghiên cứu, nhân giống v phát triển Cẩm chớng Sa Pa cung cấp cho đồng có ý nghÜa lín s¶n xt - Chän gièng CÈm chớng từ nguồn vật liệu khởi đầu l giống nhập nội; từ biến dị thu đợc từ lai hữu tính v xử lý đột biến l hớng phù hợp v đợc nh khoa học giới thực thnh công Việc xử lý đột biến cách chiếu xạ tia Gamma nguồn Co60 nuôi cấy mô, tế bo Cẩm chớng đợc số tác giả thực thnh công liều lợng chiếu xạ từ 1-3 krad - Việc ứng dụng thị phân tử để kiểm định sai khác di truyền góp phần quan trọng việc xác định tổ hợp lai, biến dị mức ®é ph©n tư cđa gièng chän gièng, nh©n gièng - Việc nghiên cứu ứng dụng công nghệ nuôi cấy mô thực vật Cẩm chớng có ý nghĩa quan trọng, giúp rút ngắn trình nghiên cứu chọn tạo giống nh nhân nhanh giống phục vụ sản xuất Bên cạnh việc nhân nhanh lợng lớn bệnh, khoẻ mạnh v đồng cho sản xuất, nuôi cấy mô tế bo l tảng quan träng gióp cho viƯc øng dơng c¸c thμnh tùu công nghệ sinh học khác công tác chọn tạo giống hoa nh đột biến, chuyển gen, cứu phôi lai xa, lμm phong phó thªm ngn vËt liƯu khëi đầu v rút ngắn đáng kể thời gian chọn tạo giống Các công trình nghiên cứu nớc ta Cẩm chớng v kết nghiên cứu cho thÊy nu«i cÊy m« th−êng xt hiƯn hiƯn tợng thuỷ tinh hoá, yếu v tỷ lệ sống sau nuôi cấy mô thấp - Nghiên cứu nhằm hon thiện qui trình kỹ thuật nhân v sản xuất cho giống hoa Cẩm chớng đợc tuyển chọn l biện pháp kỹ thuật quan trọng để đa nhanh giống hoa mới, có chất lợng cao cho sản xuất nh phục vụ cho nghiên cứu chọn tạo giống 4 Chơng Vật liệu, nội dung v phơng pháp nghiên cứu 2.1 Vật liệu nghiên cứu - Tập đon 14 giống Cẩm chớng ®¬n vμ 11 gièng CÈm ch−íng chïm nhËp néi, lÊy giống Cẩm chớng đơn v chùm mu đỏ đợc trồng phổ biến ngoi sản xuất lm đối chứng - 14 måi RAPD cđa h·ng Bioneer 2.2 Néi dung nghiªn cøu 2.2.1 Tun chän mét sè gièng hoa CÈm ch−íng có triển vọng 2.2.2 Nghiên cứu khả lai hữu tÝnh cđa mét sè gièng CÈm ch−íng 2.2.3 Nghiªn cøu phơng pháp chiếu xạ đột biến chọn tạo Cẩm chớng 2.2.4 Kiểm định khác biệt di truyền mức độ phân tử số dòng, giống đợc tuyển chọn thị phân tử RAPD 2.2.5 Nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhân giống cho giống Cẩm chớng đợc tuyển chọn 2.2.6 Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật làm tăng st, chÊt l−ỵng mét sè gièng hoa CÈm ch−íng 2.2.7 Hoàn thiện qui trình kỹ thuật nhân sản xuất cho số giống Cẩm chớng đợc tuyển chọn 2.3 Phơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Tuyển chọn số giống hoa CÈm ch−íng cã triĨn väng ThÝ nghiƯm bè trÝ theo phơng pháp khối ngẫu nhiên đầy đủ (RCB), lần nhắc lại, diện tích ô thí nghiệm 10 m2, khoảng cách trồng 20 x 20 cm Các tiêu theo dõi đợc đánh giá theo phơng pháp Trung tâm thơng mại quốc tế sản xuất hoa cắt (ITC), năm 2001 Thuỵ Sĩ 2.3.2 Nghiên cứu khả lai hữu tính số giống Cẩm chớng Nghiên cứu giống SP1, SP3, SP5, SP10, SP12, SP15, SP17, SP21 vμ SP25 ThÝ nghiƯm tù thơ phÊn trªn giống v lai giống với 2.3.3 Nghiên cứu phơng pháp chiếu xạ đột biến chọn tạo Cẩm chớng 2.3.3.1 Nghiên cứu gây đột biến chiếu xạ tia Gamma nguồn Co60 giâm cành Dùng phơng pháp chiếu xạ tia Gamma nguồn Co60 Thí nghiệm theo dõi công thức chiếu xạ từ 1krad - krad Cây sau chiếu xạ đợc trồng thí nghiệm theo phơng pháp khối ngẫu nhiên đầy đủ (RCB) 2.3.3.2 Nghiên cứu gây đột biến chiếu xạ tia Gamma nguồn Co60 chồi Cẩm chớng in vitro Đối tợng nghiên cứu l giống SP25, SP2 v SP11 đợc nuôi cấy môi trờng nhân nhanh Chiếu xạ theo công thức khác tõ 0,5 krad - krad C¸c mÉu sau chiếu xạ đợc theo dõi, cấy chuyển qua lần v sau chuyển sang môi trờng rễ v chuyển vờn ơm Thí nghiệm phòng bố trí theo phơng pháp ngẫu nhiên hon ton, lần nhắc lại Thí nghiệm ngoi đồng ruộng theo phơng pháp khối ngẫu nhiên đầy đủ (RCB), lần nhắc lại 2.3.4 Kiểm định khác biệt di truyền mức độ phân tử số giống đợc tuyển chọn thị phân tử RAPD Các mẫu non giống Cẩm chớng đợc sử dụng lm nguyên liệu tách chiết ADN Mỗi dòng, giống lấy mẫu ngẫu nhiên: Dòng SP25-1 (mẫu 1, 2, 3), SP1 (mÉu 4, 5, 6), SP25 (mÉu 7, 8, 9), SP3 (mÉu 10, 11, 12) vμ SP17 (mÉu 13, 14, 15) Sư dơng 14 måi RAPD cđa h·ng Bioneer - Phơng pháp tách chiết ADN: Chọn phơng pháp có sử dơng CTAB cđa P Obara-Okeyo & Kako (1998) cã mét số cải tiến nhỏ để tiến hnh tách chiết ADN tỉng sè tõ 15 mÉu thc gièng CÈm ch−íng nghiên cứu Sau nhân gen kỹ thuật PCR v điện di gel agarose - Các số liệu đợc đa vo xử lý theo chơng trình NTSYSpc 2.1 cđa F J Rohlf (2002) ®Ĩ tÝnh ma trËn tơng đồng cặp mẫu 2.3.5 Nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhân giống cho giống Cẩm chớng đợc tuyển chọn 2.3.5.1 Nhân giống phơng pháp nuôi cấy mô tế bào (In vitro) Thí nghiệm nhân giống SP1, SP25 qua giai đoạn: - Tạo nguồn mẫu ban đầu: Nghiên cứu ảnh hởng chất khử trïng vμ thêi gian khư trïng ®Õn tû lƯ sèng mẫu - ảnh hởng chất điều tiết sinh trởng đến khả tái sinh v nhân nhanh chồi - ảnh hởng chất điều tiết sinh trởng đến khả rễ v tạo hon chỉnh - ảnh hởng giá thể đến tỉ lệ sống in vitro giai đoạn ngoi vờn ơm 2.3.5.2 Nhân giống vô tính phơng pháp giâm cành Thí nghiệm nghiên cứu ảnh hởng thời vụ giâm, giá thể v nồng độ NAA đến tỷ lệ sống v khả rễ cnh giâm Thí nghiệm in vitro bố trí theo phơng pháp ngẫu nhiên hon ton, lần nhắc lại Thí nghiệm ngoi đồng ruộng theo phơng pháp khối ngẫu nhiên đầy đủ (RCB), lần nhắc lại 2.3.6 Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật làm tăng suất, chất lợng số giống hoa CÈm ch−íng ThÝ nghiƯm ¶nh h−ëng cđa thêi vơ trång, phơng pháp bấm ngọn, mật độ trồng, phân bón v chiếu sáng bổ sung đến khả sinh trởng v suất, chất lợng số giống hoa Cẩm chớng Thí nghiệm bố trí theo phơng pháp khối ngẫu nhiên đầy đủ (RCB), lần nhắc lại 2.4 Các tiêu phơng pháp theo dõi Theo dõi tiêu đặc tính thực vật học, sinh trởng, phát triển, tỷ lệ bệnh, chất lợng hoa giống thí nghiệm 2.5 Phơng pháp xử lý số liệu: Số liệu đợc xử lý theo phơng pháp phân tích phơng sai (ANOVA) chơng trình IRRISTAT 5.0 Chơng Kết nghiên cứu v thảo luận 3.1 Tuyển chọn mét sè gièng hoa CÈm ch−íng cã triĨn väng 3.1.1 Tuyển chọn số giống hoa Cẩm chớng đơn (standard carnation) có triển vọng 3.1.1.2 Đặc điểm hoa đặc điểm sinh trởng phát triển giống Cẩm chớng đơn nhập nội TT 10 11 12 13 14 15 Bảng 3.2 Đặc điểm sinh trởng, phát triển giống Cẩm chớng đơn vụ Hè năm 2004 - 2006 t¹i Sa Pa Thêi gian tõ trång ChiỊu cao Số Số cành/cây Tên giống - hoa (ngày) (cm) (lá) (cành) SP1 128,3 72,2 124,2 6,7 SP2 146,7 78,5 108,6 6,1 SP3 134,3 68,8 113,2 6,6 SP4 150,7 58,4 97,6 5,4 SP5 141,7 71,2 112,2 6,3 SP6 147,3 57,7 115,4 5,3 SP7 136,7 56,1 96,2 5,2 SP8 143,3 58,4 75,6 3,4 SP9 140,7 70,6 122,4 5,6 SP10 147,3 72,4 105,8 5,9 SP11 132,7 75,5 114,4 7,2 SP12 148,7 73,8 109,6 5,4 SP13 134,7 78,1 132,6 7,0 SP14 136,3 66,8 94,2 5,6 §C 144,2 68,3 96,4 5,4 CV% 3,0 4,4 1,6 LSD0,05 4,1 5,0 1,2 Kết đánh giá tiêu cho thấy, điều kiện Sa Pa, số giống có khả sinh trởng tốt, có khả cho suất cao nh SP1, SP3, SP5, SP10, SP11, SP13 Mét sè gièng sinh tr−ëng kÐm nh− SP7, SP8, SP14 Gièng ®èi chøng cã thêi gian sinh tr−ëng dμi vμ sè cμnh cho hoa/c©y thÊp so với giống nhập nội 3.1.1.3 Một số đặc điểm hoa chất lợng hoa giống thí nghiệm Bảng 3.3 Một số tiêu chất lợng hoa giống Cẩm chớng đơn thí nghiệm Ký hiƯu gièng ChiỊu dµi cµnh (cm) SP1 SP2 SP3 SP4 SP5 SP6 SP7 SP8 SP9 68,6 75,3 65,0 53,8 67,1 54,3 53,6 54,9 65,1 vụ Hè năm 2004 - 2006 Sa Pa Đờng Đờng Đờng Số Tỷ lệ vỡ Độ bền kính kính nụ kính hoa cánh đài hoa tự nhiên cành (cm) (cm) hoa (%) (ngày) (cm) 0,62 1,5 7,6 55,4 12,5 15,3 0,7 1,7 8,1 53,7 15,1 13,1 0,55 1,4 7,3 54,4 18,7 14,8 0,48 1,3 6,8 46,1 14,6 11,3 0,61 1,4 7,4 58,3 11,3 13,7 0,44 1,3 5,7 50,4 16,6 10,7 0,47 1,3 5,9 51,3 12,1 8,3 0,51 1,4 6,1 49,7 10,5 8,7 0,63 1,5 7,4 56,8 16,1 13,1 Độ bền hoa cắt (ngày) 13,4 10,7 12,4 10,7 11,0 8,5 7,6 7,3 10,7 SP10 SP11 SP12 SP13 SP14 §C CV% LSD0,05 68,3 71,6 70,3 73,2 60,4 62,5 3,9 4,0 0,65 0,65 0,61 0,68 0,53 0,51 2,8 0,16 1,5 1,5 1,4 1,5 1,3 1,3 3,0 0,1 7,5 8,2 7,2 7,9 6,6 6,3 3,4 1,5 62,7 60,9 58,6 60,4 53,5 46,3 3,7 3,8 15,3 9,8 11,3 11,2 14,7 10,6 - 13,8 13,5 12,1 14,1 9,5 9,7 3,2 2,3 11,2 12,6 10,5 12,2 6,8 7,2 4,7 2,0 Trong số giống Cẩm chớng đơn thí nghiệm, giống sinh trởng phát triển tốt, ổn định, cho suất v chất lợng cao, l giống SP1, SP3, SP5, SP11, SP13 Giống SP2 có tiêu cao nhng hình thái thân cong, dễ gẫy Một số gièng sinh tr−ëng ph¸t triĨn kÐm nh− SP6, SP7, SP8, SP14 3.1.2 Tun chän mét sè gièng hoa CÈm ch−íng chùm (spray carnation) có triển vọng 3.1.2.2 Khả sinh tr−ëng ph¸t triĨn cđa c¸c gièng CÈm ch−íng chïm nhËp nội Bảng 3.7 Một số tiêu sinh trởng, phát triển giống Cẩm chớng chùm vụ Hè năm 2004 - 2006 t¹i Sa Pa Thêi gian tõ ChiỊu cao Ký hiƯu trång - hoa TT Sè l¸ Số cành Số hoa/cành (cm) giống (ngày) SP15 126,6 61,3 130,6 7,4 5,7 SP16 130,8 61,4 106,7 6,2 4,5 SP17 139,7 64,1 142,0 7,6 6,3 SP18 138,4 58,2 124,1 5,8 5,2 SP19 143,3 52,6 104,9 6,3 5,0 SP20 145,6 53,6 77,0 4,8 4,4 SP21 140,4 50,7 107,1 6,2 4,8 SP22 136,3 52,0 118,9 5,8 5,4 SP23 138,1 51,6 110,1 6,8 5,7 10 SP24 135,4 51,4 113,9 5,5 5,9 11 SP25 133,3 64,5 135,7 8,5 6,8 12 §C 128,3 56,4 134,1 6,8 5,8 CV% 4,8 3,0 3,6 2,1 2,7 LSD0,05 3,1 2,2 1,3 0,3 0,4 Qua đánh giá đặc điểm sinh tr−ëng cđa c¸c gièng cho thÊy mét sè gièng có khả sinh trởng tốt, đạt suất cao lμ SP15, SP17 vμ SP25 Nh÷ng gièng sinh tr−ëng kÐm l SP20, SP21, SP23 Mặc dù giống đối chứng có thời gian sinh trởng ngắn nhng tiêu khác thấp so với giống SP15, SP17 v SP25 3.1.2.3 Một số đặc điểm hoa chất lợng hoa giống Cẩm chớng chùm thí nghiệm Bảng 3.8 Một số tiêu chất lợng hoa cđa c¸c gièng CÈm ch−íng chïm thÝ nghiƯm vơ Hè năm 2004 - 2006 Sa Pa Chiều Đờng Đờng Đờng Số cánh Độ bền tự Độ bền dài kÝnh Ký hiƯu kÝnh nơ kÝnh hoa hoa nhiªn hoa cắt STT cành cành giống (cm) (cm) (cánh) (ngày) (ngày) (cm) (cm) SP15 58,1 0,54 1,1 5,1 33,7 16,9 12,7 8 10 11 12 SP16 SP17 SP18 SP19 SP20 SP21 SP22 SP23 SP24 SP25 §C CV% LSD0,05 56,3 60,4 52,5 48,8 48,9 46,8 47,2 46,7 47,5 60,3 52,2 3,0 2,2 0,34 0,55 0,37 0,32 0,26 0,47 0,44 0,45 0,50 0,58 0,51 2,7 0,2 0,8 1,1 0,8 0,7 0,6 0,9 0,7 0,9 0,9 1,1 0,8 2,7 0,1 4,4 5,0 4,3 4,5 4,1 4,8 4,8 4,5 4,6 5,3 4,6 4,0 0,2 31,2 32,6 25,4 24,7 25,8 30,6 29,7 28,6 32,6 28,9 28,3 2,9 2,5 13,8 14,1 10,4 12,7 11,2 12,7 11,6 13,2 12,3 17,9 12,4 2,5 1,2 8,1 9,6 6,6 7,0 7,1 8,2 7,0 7,5 7,6 12,3 8,4 2,5 0,9 Trong sè 11 giống Cẩm chớng chùm, tuyển chọn đợc giống (SP15, SP17, SP25) cho suất, chất lợng cao v khả chống chịu sâu bệnh vợt trội so với giống khác v giống đối chứng Những giống có khả sinh trởng phát triển l SP20, SP21, SP23 Mặc dù giống đối chứng có thời gian sinh trởng ngắn nhng tiêu khác thấp so với giống SP15, SP17 v SP25 3.1.3 Đánh giá khả sinh trởng, phát triển giống đợc tuyển chọn Hà Nội Qua kết theo dõi cho thấy, nhìn chung tiêu giống thấp trồng Sa Pa, nhiên chênh lệch không lớn Các tiêu chất lợng hoa đáp ứng đợc yêu cầu thị trờng Vì vậy, giống đợc chọn đủ tiêu chuẩn để đa vo sản xuất vùng đồng Bắc vụ Thu Đông Nhận xét chung phần tuyển chän gièng: Trong c¸c gièng tham gia thÝ nghiƯm, b−íc đầu tuyển chọn đợc giống có triển vọng cho sản xuất gồm giống đơn (SP1, SP3, SP5, SP11, SP13) vμ gièng chïm (SP15, SP17, SP25) C¸c gièng SP3, SP12, SP15 v SP17 có mu sắc đẹp, sinh trởng tốt nhng có số nhợc điểm nh số cnh/cây thấp, thời gian sinh trởng di, tỷ lệ vỡ cao nên cần nghiên cứu thêm số biện pháp kỹ thuật để tăng suất, chất lợng cho c¸c gièng nμy C¸c gièng kh¸c cã thĨ sư dụng lm vật liệu khởi đầu cho công tác chọn tạo giống 3.2 Nghiên cứu khả lai hữu tính số giống Cẩm chớng 3.2.1 Một số đặc ®iĨm sinh häc hoa cđa c¸c gièng thÝ nghiƯm Bảng 3.13 Một số đặc điểm sinh học hoa Cẩm chớng vụ Hè năm 2007 - 2008 Sa Pa Chỉ tiêu Ngày Ngày Chiều theo nhuỵ phấn cao vòi nhuỵ dõi chín chín (ngày) (ngày) (cm) Giống SP1 SP3 SP5 SP10 SP12 SP15 SP17 SP21 SP25 11,3 9,7 8,1 10,3 8,7 10,6 7,8 6,9 10,5 5,7 5,4 4,9 5,6 5,1 6,2 4,7 4,1 5,6 3,2 3,6 3,4 3,1 3,0 2,9 3,4 3,1 2,8 ChiỊu cao Sè vßi vßi nhị nhuỵ (cm) 1,6 1,8 1,4 1,7 1,4 1,3 1,8 1,7 1,4 2 2 2 Số Số bao vòi phấn nhị 18,1 22,4 10,6 14,8 16,1 21,6 24,6 25,7 28,4 1,4 1,1 0,8 1,2 1,3 8,4 7,6 6,4 8,1 CV% LSD0,05 3,2 0,8 2,3 0,6 Nghiên cứu giống SP1, SP3, SP5, SP10, SP12, SP15, SP17, SP21 vμ SP25 cho thÊy: C¸c gièng cã thêi gian phÊn chÝn tõ 4,1- 6,2 ngμy sau hoa nở, thời gian nhuỵ chín sinh lý từ 6,9 -11,3 ngy Chiều cao vòi nhuỵ chín l 2,8 - 3,6 cm, vòi nhị cao 1,3 - 1,8 cm Về số vòi nhuỵ, hầu hết giống có số vòi nhuỵ l 2, riêng SP10 có vòi nhuỵ Số bao phấn thu đợc l thấp, có 0,8 - 8,4 bao phấn/bông, thÊp nhÊt lμ gièng SP5 vμ cao nhÊt lμ SP15 3.2.2 Nghiên cứu khả tự thụ số phÐp lai CÈm ch−íng KÕt qu¶ thơ phÊn cïng gièng cho thấy khả đậu thấp, cao lμ gièng chïm SP15 (21,4%), SP17 (22,6%), SP21 (22,0%) vμ SP25 (27,4%) Ngoμi ë c¸c phÐp lai: (SP1xSP25), (SP3xSP25) v (SP1xSP17), tỷ lệ đậu 8-10% 3.2.3 Nghiên cứu khả nảy mầm hạt Cẩm chớng Kết theo dõi khả nảy mầm cho thấy tỷ lệ nảy mầm hạt thấp Hạt giống phép lai cho tỷ lệ nảy mầm thấp (15,4 - 18,4%), hạt giống tự thụ giống chùm có tỷ lệ nảy mầm cao giống đơn Hạt giống có tỷ lệ nảy mầm cao l giống SP25 đạt 37,9% Đề ti bớc đầu thnh công thu đợc số hạt v gieo hạt nảy mầm từ nhiều công thức thụ phấn v phép lai thực Hiện nay, vật liệu ny đợc theo dõi đánh giá phục vụ trình chọn tạo giống Mặt khác, để nâng cao hiệu công tác chọn giống, cần thí nghiệm ứng dụng số phơng pháp ứng dụng CNSH nh phơng pháp cứu phôi, nuôi cấy hạt phấn, 10 3.3 Nghiên cứu phơng pháp chiếu xạ đột biến chọn tạo Cẩm chớng 3.3.1 Nghiên cứu gây đột biến chiếu xạ tia Gamma nguồn Co60 giâm cành giống Cẩm chớng SP25 3.3.1.1 ảnh hởng liều lợng phóng xạ đến sinh trởng phát triển giống SP25 Kết cho thấy tỷ lệ chết tăng dần theo cờng độ chiếu x¹, ë CT5 cho tû lƯ chÕt lμ 56,3%, nh− vËy cã thĨ thÊy7 krad lμ ng−ìng g©y chÕt chiÕu x¹ Theo dâi ë thÕ hƯ M1V1 cho thÊy ë CT2 đợc chiếu xạ sinh trởng phát triển gần nh sai khác với đối chứng Các tiêu CT3 v CT4 thấp v đờng kính hoa nhỏ, yếu v sinh trởng phát triển không 3.3.1.2 Khả xuất biến dị chiÕu x¹ CÈm ch−íng SP25 ë CT1 vμ CT2, cha phát thấy biến dị, CT3 xuất biến dị cao (0,7%), thấp (1,0%) v xẻ thuỳ (0,7%) CT4 xuất số biến dị nh thấp cây, dạng thay đổi, bạch tạng, đốt ngắn nhng tỷ lệ biến dị thấp, từ 0,7-2,3% Các biến dị thấp cây, cao v mu sắc hoa thay đổi l biến dị có lợi cho công tác chọn tạo giống CT4 xuất biến dị lm tăng số cánh v mu sắc hoa viền trắng với tỷ lệ 4,3% Từ đó, qua chọn lọc cá thể xuất biến dị, đề ti nhân giống v bớc đầu chọn đợc dòng SP25 - có số đặc điểm có lợi: thời gian từ trồng đến hoa ngắn v đờng kính hoa lớn so với SP25 Về hình thái, mu sắc SP25-1 xanh nhạt SP25 xanh đậm v mu hoa sẫm so với SP25 (bảng 3.18) Bảng 3.18 Một số tiêu sinh trởng phát triển giống SP25 dòng SP25-1 hệ (M1V5) vụ Hè năm 2008 Sa Pa Thời Cao gian Giống trồng - (cm) /Dòng hoa (ngày) SP25 SP25-1 133,1 122,3 64,3 63,5 Sè l¸ (l¸) 138,8 137,7 Sè c¸nh hoa (c¸nh) 28,6 30,3 ĐK hoa (cm) Đặc điểm hình thái 5,2 Thân xanh đậm Lá thuôn di, xanh đậm, góc hẹp Hoa đỏ viền mép trắng nhẹ, cánh xếp 5,5 Thân xanh đậm, cứng Lá thuôn di, xanh nhạt, góc hẹp Hoa đỏ viền trắng rộng, cánh xếp 3.3.2 Nghiên cứu gây đột biến chiếu xạ tia Gamma ngn Co60 trªn chåi CÈm ch−íng in vitro ë mét sè gièng CÈm ch−íng 3.3.2.1 ¶nh h−ëng cđa liều chiếu xạ đến in vitro qua hệ (M1V5) Tia Gamma nguồn Co60 ảnh hởng đến sinh trởng chồi: giảm hệ số nhân v chiều cao chåi ¶nh h−ëng nhiỊu nhÊt vμ râ rƯt nhÊt ë liỊu krad Tia Gamma ngn Co60 lμm gi¶m tû lƯ chåi rƠ 11 vμ lμm chËm sù rễ chồi Giai đoạn ngoi đồng ruộng, qua tuÇn theo dâi cho thÊy: Tia Gamma nguån Co60 ảnh hởng đến chiều cao Khi liều chiếu xạ tăng dần chiều cao bị giảm dần, rõ liều lợng krad gièng ë liỊu 3-4 krad, trªn gièng SP2 vμ SP25 xuất biến dị dạng thân v dạng Các biến dị nh đa thân, thấp sử dụng cho trình chọn tạo giống Bảng 3.24 Đặc điểm sau chiếu xạ giai đoạn đồng ruộng sau tuần Viện Di truyền Nông nghiệp năm 2009 Biến dị phát sinh Liều chiếu Số Giống Tỷ lệ Tỷ lệ Tỷ lệ Thấp Lá xẻ Đa (krad) ban đầu (%) (%) (%) thùy th©n 0,5 50 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 50 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 50 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 SP25 50 6,0 12 5,0 10 7,0 14 50 6,0 12 6,0 12 8,0 16 0,5 50 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 50 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 50 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 SP2 50 4,0 3,0 6,0 12 50 4,0 4,0 8,0 16 0,5 50 0,0 0,0 6,0 12 0,0 0,0 50 0,0 0,0 12,0 24 7,0 14 50 4,0 14,0 28 9,0 18 SP11 50 5,0 10 17,0 34 12,0 24 50 5,0 10 20,0 40 15,0 30 3.4 Kiểm định khác biệt di truyền mức độ phân tử số dòng, giống đợc tuyển chọn thị phân tử RAPD 3.4.2 Kết phản ứng RAPD-PCR Hình 3.2,3 Kết điện di sản phẩm RAPD-PCR mẫu giống Cẩm chớng với đoạn mồi OPAC -13 v OPY-09; (M: marker 1kb) Với 210 phản ứng PCR nhân lên đợc tổng số 1576 băng, kích thớc băng có chiều di nhỏ khoảng 250bp v băng có kích thớc lớn khoảng 3000bp Qua kết đoạn mồi cho thấy: - Có thể sử dụng đoạn mồi OPY-09, OPC-4, BIO-24 để phân biệt dòng SP25-1 vμ c¸c gièng kh¸c - Sư dơng c¸c måi OPAC-20 v OPN-2 để nhận dạng giống thuộc nhóm Cẩm ch−íng chïm - Sư dơng c¸c måi OPM-12 vμ OPAC-07 để nhận dạng giống thuộc nhóm Cẩm chớng đơn 12 3.4.3 Hệ số đồng dạng mối quan hệ di truyền mẫu giống Cẩm chớng Số liệu thu đợc từ 14 mồi RAPD đợc thống kê v phân tích phần mềm NTSYSpc2.1, từ thiết lập đợc bảng hệ số tơng đồng di truyền (bảng 3.26) v sơ đồ hình mối quan hệ di truyền (hình 3.16) Qua kết bảng 3.26 cho thấy hệ số tơng đồng di truyền 15 mẫu giống Cẩm chớng dao động khoảng 0,44 đến 0,97 Cặp mÉu gièng (3-9) cã møc sai kh¸c di trun lín (hệ số tơng đồng di truyền nhỏ l 0,44) Kết ny phù hợp với đánh giá hình thái Cặp mẫu giống (5-6) có hệ số tơng đồng di truyÒn cao nhÊt lμ 0,97 (hai mÉu vμ thuộc giống SP1) Từ sơ đồ hình mối quan hệ di truyền mẫu giống Cẩm chớng (hình 3.16) cho thấy mức độ sai khác di truyền mẫu giống v giống khác Kết xử lý số liệu cho thấy mức tơng đồng 63% chia 15 mÉu gièng CÈm ch−íng thμnh nhãm: B¶ng 3.26 Hệ số tơng đồng di truyền mẫu gièng CÈm ch−íng MÉu 10 11 12 13 14 1,00 0,84 1,00 0,83 0,80 1,00 0,55 0,54 0,59 1,00 0,53 0,54 0,58 0,93 1,00 0,52 0,52 0,56 0,90 0,97 1,00 0,46 0,49 0,51 0,74 0,77 0,77 1,00 0,46 0,50 0,50 0,78 0,76 0,75 0,90 1,00 0,45 0,50 0,44 0,64 0,60 0,60 0,69 0,74 1,00 10 0,56 0,55 0,61 0,78 0,79 0,77 0,74 0,76 0,63 1,00 11 0,49 0,50 0,55 0,68 0,71 0,69 0,65 0,66 0,52 0,78 1,00 12 0,51 0,52 0,54 0,72 0,75 0,72 0,71 0,73 0,58 0,89 0,76 1,00 13 0,49 0,51 0,55 0,70 0,71 0,70 0,81 0,81 0,71 0,78 0,65 0,70 1,00 14 0,53 0,54 0,53 0,67 0,68 0,69 0,83 0,80 0,64 0,70 0,66 0,68 0,80 1,00 15 0,52 0,54 0,56 0,73 0,73 0,73 0,84 0,89 0,69 0,76 0,67 0,74 0,85 0,88 15 1,00 Nhãm I: Gåm mÉu 1, 2, thuộc dòng SP25-1 Hệ số tơng đồng di truyền mẫu với mẫu v lần lựợt l 0,84 v 0,83, mẫu số v mÉu sè lμ 0,80 C¸c mÉu thuéc gièng SP25-1 có tơng đồng nhóm cao nhng lại có có sai khác tơng đối lớn so với 12 mÉu thuéc c¸c gièng kh¸c Nhãm II: Gåm 12 mÉu thuộc thuộc giống khác lại, có giống hoa chùm v giống hoa đơn Nhóm ny đợc chia lm nhóm phụ: Nhóm 2.1: Nhóm giống hoa đơn, gồm mẫu giống 4,5,6 thuéc gièng SP1 vμ mÉu gièng 10, 11, 12 thuộc giống SP3 Đây l hai giống có nhiều đặc điểm khác biệt mặt hình 13 thái nh đặc điểm thân, đặc điểm lá, mu sắc hoa v cách xếp cánh hoa nhng l giống hoa đơn Nhóm 2.2: Nhóm giống hoa chïm, gåm mÉu gièng 7,8,9 thuéc gièng SP25 vμ mÉu gièng 13,14,15 thuéc gièng SP17 C¸c mÉu thuéc nhóm ny l mẫu hoa chùm Hệ số tơng đồng di truyền mẫu nhóm dao ®éng tõ 0,64 ë cỈp mÉu (9 - 14) ®Õn 0,90 cặp mẫu (7 - 8) Hình 3.16: Biểu đồ mối quan hệ di truyền mẫu giống Cẩm chớng 14 3.5 Nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhân giống cho giống Cẩm chớng đợc tuyển chọn 3.5.1 Nhân giống phơng pháp nuôi cấy mô tế bào (In vitro) 3.5.1.1 Nghiên cứu nhân giống SP1 phơng pháp nuôi cấy mô tế bào Từ nghiên cứu giai đoạn, hon thiện qui trình nhân giống SP1 qua bớc: Mẫu đợc khử trïng víi HgCl2 0,1% thêi gian M«i tr−êng nh©n nhanh: MS + 10% n−íc dõa + 6,5 g/l agar + 3% ®−êng bỉ sung BAP 1mg/l + Kinetin 0,5 mg/l Môi trờng tạo hon chỉnh: MS/2 + 6,5 g/l agar + 2% ®−êng, bỉ sung NAA 0,2 mg/l Giá thể hỗn hợp cho giai đoạn vờn ơm: Trấu hun + hạt perlite (7:3) Phun phân bón Pomior 0,3% ngy/lần vo cuối ngy để lm tăng sức sống cho 3.5.1.2 Nghiên cứu nhân giống SP25 phơng pháp nuôi cấy mô tế bào Mẫu nuôi cấy đợc khử trùng với HgCl2 0,1% thời gian phút Rửa lại lần nớc cất vô trùng v cắt đoạn mang mắt ngủ cho vo môi trờng nuôi cấy Môi trờng nhân nhanh: MS + 10% n−íc dõa +2 % ®−êng + g/l agar + 0,7 mg/l BAP + 0,1 mg/l kinetin Giai đoạn tạo hon chỉnh: MS +2 % ®−êng + g/l agar + 0,2 mg/l NAA + 0,05 mg/l IBA Giai đoạn vờn ơm: Cây sau đa khỏi bình nuôi cấy mô đợc rửa môi trờng bám dính rễ nớc sạch, sau giâm vo khay với giá thể hỗn hợp trấu hun + hạt perlite (7:3) 3.5.2 Nhân giống vô tính phơng pháp giâm cành 3.5.2.1 ảnh hởng thời vụ đến số tiêu nhân giống Kết thí nghiệm cho thấy giâm cnh vo tháng trªn gièng SP1 vμ gièng SP25 cho tû lƯ xt vờn cao 3.5.2.2 ảnh hởng giá thể đến thời gian, tỷ lệ rễ tỷ lệ xuất vờn giâm cành Cẩm chớng Kết thÝ nghiƯm ë c¸c gièng SP1 vμ SP25 cho thÊy giá thể cát + trấu hun + đá trân châu ( perlite) tû lÖ 1: 3:1 lμ tèt nhÊt 3.5.2.3 ảnh hởng nồng độ NAA giâm cành Cẩm ch−íng ThÝ nghiƯm cho thÊy sư dơng α-NAA nång ®é 1.200ppm víi SP1 vμ 1.000ppm víi SP25 cho tỷ lệ giống xuất vờn đạt cao vμ thêi gian xt v−ên sím nhÊt 3.6 Nghiªn cøu số biện pháp kỹ thuật làm tăng suất, chất lợng số giống hoa Cẩm chớng 3.6.1 ảnh hởng thời vụ trồng đến sinh trởng, suất, chất lợng hoa Cẩm chớng SP1 SP25 Kết thÝ nghiƯm cho thÊy, ë CT2 (th¸ng 5) c¸c chØ tiêu thời gian trồng đến hoa, cao cây, di cnh, số cnh/cây, đờng kính hoa v đờng kính cnh l tốt 3.6.2 ảnh hởng phơng pháp bấm đến khả sinh trởng suất, chất lợng hoa Cẩm chớng SP1 SP25 Thí nghiệm bấm ngän sau trång 10 ngμy, 15 ngμy, 20 ngμy SP1 CT2 cho tiêu ngy xuất mầm (5,0 ngy), số mầm (7,8), thời gian trồng đến hoa (125,7 ngy), cao (74,5 cm), đờng kính cnh (0,63cm) vμ ®−êng kÝnh hoa (7,8 cm) lμ tèt nhÊt Kết giống SP25 cho thấy bấm 20 ngy (CT3) cho tiêu cao CT2, nhiên sai khác không đáng kể 3.6.3 ảnh hởng mật độ trồng đến sinh trởng, suất chất lợng hoa Cẩm chớng SP1 SP25 ThÝ nghiƯm víi gièng SP1 vơ HÌ Thu 2006 cho thấy: SP1 phù hợp với khoảng cách 20x15 SP25 l giống chùm nên thích hợp với mật độ tha hơn, trồng với mật độ 20 x 15 15 cm (CT2) hc 20 x 20 cm (CT3) 3.6.4 ảnh hởng phân bón đến chất lợng hoa giống Cẩm chớng SP3 SP15 3.6.4.1 ảnh hởng phân phức hữu Pomior đến suất chất lợng hoa Cẩm chớng 3.6.4.2 So sánh ảnh hởng phân phức hữu Pomior số loại phân bón khác đến suất chất lợng hoa Cẩm chớng 3.6.4.3 ảnh hởng kết hợp phân phức hữu Pomior Ca(NO3)2 đến chất lợng hoa Cẩm chớng Kết nghiên cứu cho thấy, bón bổ sung Pomior 0,4% + Ca(NO3)2 1,0% 10 ngy/lần, tiêu đợc cải thiện rõ rệt, đặc biệt tiêu tỷ lệ vỡ hoa giảm xuống đáng kĨ (5,7% so víi 13,5% kh«ng bãn) Ngoμi tiêu khác nh chiều di cnh, đờng kính hoa, số cnh/cây, cao so với đối chứng 3.6.5 ảnh hởng chiếu sáng bổ sung đến sinh trởng, phát triển giống Cẩm chớng SP12 SP17 Bảng 3.48 ảnh hởng thời lợng chiếu sáng bổ sung đến sinh trởng, phát triển Cẩm chớng vụ Hè năm 2007 Sa Pa Thời Thời ĐK lợng gian Chiều ĐK cành chiếu trồng-ra cao Số cành/cây Số hoa/cành hoa Giống CT sáng hoa (cm) (cm) (cm) (giê) (ngµy) CT1 148,4 73,5 5,5 1,0 7,2 0,60 CT2 138,2 74,1 6,7 1,0 8,2 0,67 CT3 130,4 77,2 8,6 1,0 8,6 0,69 SP12 CT4 129,0 76,8 8,7 1,0 8,5 0,70 CV% 4,4 2,1 4,2 2,7 1,9 LSD0,05 1,11 0,41 0,61 0,44 0,05 CT1 139,0 64,2 7,5 6,2 5,1 0,54 CT2 130,7 68,7 8,3 6,8 5,5 0,59 CT3 122,5 73,2 9,2 7,2 6,1 0,62 SP17 CT4 121,8 72,9 9,3 7,4 6,2 0,62 CV% 5,3 2,2 1,7 2,9 1,9 1,4 LSD0,05 3,72 0,24 0,30 0,39 0,22 0,02 Kết nghiên cøu cho thÊy chiÕu s¸ng bỉ sung chiÕu s¸ng khoảng cách 2,5 x 2,5 m (216,7 lux) thời gian giê rót ng¾n thêi gian sinh tr−ëng cđa cây, tiêu suất v chất lợng hoa tăng rõ rệt 3.7 Hoàn thiện qui trình nhân giống kỹ thuật sản xuất cho số giống đợc tuyển chọn Trên sở nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhân giống v sản xuất, đề ti hon thiện qui trình nhân giống v kỹ thuËt s¶n xuÊt cho gièng SP1 vμ SP25 16 KÕt luận v đề nghị Kết luận Đề ti tuyển chọn đợc giống có triển vọng cho sản xuất gồm giống Cẩm chớng đơn (SP1, SP3, SP5, SP11, SP13) vμ gièng CÈm ch−íng chïm (SP15, SP17, SP25) Bớc đầu thực thnh công phép lai h÷u tÝnh mét sè gièng cÈm ch−íng víi tû lƯ đậu 810%, thụ phấn giống đạt 21,4 - 27,4% Hạt giống phép lai cho tỷ lệ nảy mầm 15,4 - 18,4%, hạt giống SP25 có tỷ lệ nẩy mầm cao đạt 37,9% Khi chiếu xạ tia Gamma nguồn Co60 giâm cnh giống Cẩm chớng SP25, cờng độ chiếu xạ krad cha xuất biến dị, liều lợng - krad xuất biến dị cao cây, thấp cây, xẻ thuỳ, mu sắc hoa thay đổi, l biến dị có lợi cho công tác chọn tạo giống Đã thu đợc số dòng, dòng SP25-1 l dòng có triển vọng cho sản xuất Khi chiếu xạ tia Gamma nguồn Co60 chồi in vitro ë mét sè gièng CÈm ch−íng, ë thÕ hƯ (M1V5), tia Gamma lm giảm hệ số nhân, chiều cao chåi, tû lƯ chåi rƠ vμ lμm chËm sù rƠ cđa chåi, râ rƯt nhÊt ë liỊu krad Giai đoạn ngoi đồng ruộng, chiều cao bị giảm dần theo gia tăng nồng độ chiếu xạ Đã thu đợc số biến dị nh đa thân, thấp cây, sử dụng cho trình chọn tạo giống Kiểm định khác biệt di truyền mức độ phân tử số dòng, giống thị phân tử RAPD cho thấy, dòng đột biến SP25-1 có khác biệt rõ rệt mặt di truyền so với giống khác, đồng thời có phân biệt rõ nhóm giống hoa đơn (SP1, SP3) v nhóm giống hoa chùm (SP17, SP25) Kết ny phù hợp với đánh giá hình thái giống Có thể sử dụng đoạn mồi OPY-09, OPC-4, BIO-24 để phân biệt dòng ®ét biÕn SP25-1 vμ c¸c gièng kh¸c, sư dơng c¸c mồi OPAC-20, OPN-2 để nhận dạng giống thuộc nhóm CÈm ch−íng chïm vμ sư dơng c¸c måi OPM-12, OPAC-07 để nhận dạng giống thuộc nhóm Cẩm chớng đơn Hệ số tơng đồng di truyền mẫu dòng, giống nghiên cứu dao động khoảng 0,44 đến 0,97 Từ kết nghiên cứu, đề ti hon thiện đợc qui trình nhân giống in vitro v in vivo cho giống đợc tuyển chọn l SP1 v SP25 Nghiên cứu biện pháp kỹ thuật cho số giống đợc tuyển chọn cho thấy: Thời vơ trång CÈm ch−íng tèt nhÊt t¹i Sa Pa lμ tháng 5, khoảng cách trồng thích hợp 20 x 15 cm vμ bÊm ngän sau trång 15 - 20 ngμy cho c©y sinh tr−ëng tèt nhÊt Sư dơng ph©n bón phức hữu Pomior 0,4% kết hợp với Ca(NO3)2 1,0%, tới 10 ngy/lần v chiếu sáng bổ sung giờ/ngy bóng đèn 100W với khoảng cách 2,5 x 2,5m cải thiện đáng kể suất v chất lợng hoa giống nghiên cứu Từ đó, đề ti hon thiện quy trình kỹ thuật sản xuất cho giống SP1 v SP25 Đề nghị Giới thiệu giống đợc tuyển chọn với qui trình kü tht s¶n xt vμo s¶n xt thư TiÕp tục nghiên cứu, đánh giá vật liệu khởi đầu đợc chọn tạo Tiếp tục nghiên cứu, sử dụng thị phân tử, phơng pháp lai hữu tính v gây đột biến thực nghiệm lm sở để chọn tạo giống mới, nhằm phát triển sản xuất hoa CÈm ch−íng ë ViƯt Nam ... tiễn sản xuất Nhằm mục đích nghiên cứu chọn tạo giống v số biện pháp kỹ thuật sản xuất, góp phần phát triển sản xuất hoa Cẩm chớng điều kiện Việt Nam, thực đề ti: Nghiên cứu chọn tạo số biện pháp. .. trình nhân giống kỹ thuật sản xuất cho số giống đợc tuyển chọn Trên sở nghiên cứu biện pháp kỹ thuật nhân giống v sản xuất, đề ti hon thiện qui trình nhân giống v kỹ thuật sản xuất cho gièng SP1... giống Cẩm chớng đợc tuyển chọn 2.2.6 Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật làm tăng suất, chất lợng mét sè gièng hoa CÈm ch−íng 2.2.7 Hoµn thiƯn qui trình kỹ thuật nhân sản xuất cho số giống Cẩm chớng