Nghiên cứu tính an toàn và tác dụng của viên nang balanoxi trên thực nghiệm và lâm sàng ở bệnh nhân suy giảm tinh trùng tt

Phần A: GIỚI THIỆU LUẬN ÁN ĐẶT VẤN ĐỀ Theo Tổ chức Y tế giới, tỉ lệ cặp vợ chồng cộng đồng bị vô sinh chiếm từ 12 - 18% tùy nước, trung bình 15% Suy giảm tinh trùng (SGTT) ngày gia tăng chiếm tỷ lệ cao Theo nghiên cứu WHO, mật độ tinh trùng tối thiểu giảm từ 40 triệu/ml (1980) xuống 20 triệu/ml (1999), 15 triệu/ml (2010) Tỉ lệ tinh trùng tiến tới giảm từ 50% (1999) xuống 32% (2010) Việc điều trị SGTT gặp nhiều khó khăn, chủ yếu SGTT có nhiều nguyên nhân phức tạp Y học đại (YHHĐ) có nhiều phương pháp điều trị SGTT, kết chưa theo mong muốn thầy thuốc người bệnh hay có tác dụng khơng mong muốn thường phải điều trị kéo dài ảnh hưởng không nhỏ tới sức khỏe kinh tế người bệnh Tỏa dương thuộc chi Balanophora, thấy ba loài Balanophora fungosa indica, Balanophora latisepala, Balanophora laxiflora phân bố tỉnh Tun Quang, Hòa Bình, Lào Cai Yên Bái Nhân dân thường sử dụng Tỏa dương sắc ngâm rượu uống điều trị yếu sinh lý nam, liệt dương, di tinh, mộng tinh, vô sinh cho kết khả quan Hiện loài tỏa dương bắt đầu nghiên cứu tác dụng dược lý mặt bệnh liên quan đến sinh lý nam giới Viên nang cứng Balanoxi bào chế từ cao khơ tồn phần lồi tỏa dương (Balanophora indica) MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI Nghiên cứu độc tính cấp, bán trường diễn viên nang cứng Balanoxi động vật thực nghiệm Đánh giá tác dụng viên nang cứng Balanoxi mơ hình thực nghiệm gây suy giảm tinh trùng động vật thực nghiệm Nghiên cứu tác dụng viên nang cứng Balanoxi điều trị bệnh nhân vô sinh suy giảm tinh trùng Ý NGHĨA THỰC TIỄN VÀ ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN Luận án nghiên cứu công trình khoa học tiến hành cách hệ thống từ thực nghiệm đến lâm sàng loài Tỏa dương Balanophora indica dược liệu quý Việt Nam sử dụng từ lâu dân gian Kết nghiên cứu cho thấy: Viên nang Balanoxi không thấy xuất độc tính đường uống, có tác dụng bảo vệ phục hồi sinh sản Làm tăng testosteron huyết thanh, tăng số lượng chất lượng tinh trùng Ứng dụng điều trị chăm sóc sức khoẻ sinh sản nam giới cộng đồng Kết luận án đóng góp thiết thực Cấu trúc luận án: Ngoài phần đặt vấn đề kết luận, luận án có chương: Chương 1: Tổng quan tài liệu 36 trang Chương 2: Đối tượng phương pháp nghiên cứu 16 trang Chương 3: Kết nghiên cứu 45 trang Chương 4: Bàn luận 36 trang Luận án có: 54 bảng, 13 biểu đồ, hình, 19 phụ lục, 118 tài liệu tham khảo (tiếng Việt 44, tiếng Anh 71, tiếng Trung Quốc 3) Phần B: NỘI DUNG LUẬN ÁN CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 QUAN ĐIỂM CỦA Y HỌC HIỆN ĐẠI VỀ TINH TRÙNG, SUY GIẢM TINH TRÙNG VÀ PHƯƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN, ĐIỀU TRỊ SUY GIẢM TINH TRÙNG 1.1.1 Các nguyên nhân gây suy giảm tinh trùng - Suy giảm tinh trùng rối loạn hormon hướng sinh dục Một số nội tiết tố sinh sản giữ vai trò định việc sản sinh phát triển tinh trùng nói chung giai đoạn biệt hóa tinh trùng Những bệnh lý gây rối loạn nội tiết tố sinh sản dẫn tới thay đổi lớn số lượng chất lượng tinh trùng + Thiểu nội tiết tố hướng sinh dục + Bài tiết nội tiết mức: - Suy giảm tinh trùng rối loạn q trình tạo tinh trùng tinh hồn + Suy giảm tinh trùng bệnh gen + Suy giảm tinh trùng tổn thương tinh hoàn + Suy giảm tinh trùng số nguyên nhân khác + Do chế độ ăn uống, nhiễm khuẩn, nhiệt độ cao, yếu tố miễn dịch, môi trường sống, tia X, suy giảm tinh trùng mắc bệnh toàn thân, stress… 1.1.2 Các phương pháp điều trị SGTT theo YHHĐ Do nguyên nhân gây SGTT phức tạp thường xen kẽ nên cần thiết phải định lúc, kết hợp điều trị nội khoa, ngoại khoa phương pháp hỗ trợ sinh sản để tăng tỉ lệ có - Điều trị nội khoa: Các định điều trị nội khoa SGTT trường hợp không rõ nguyên nhân không nguyên nhân thực tổn - Các thuốc điều trị SGTT thường dùng: Các thuốc chống oxy hoá: Glutathion, L-arginin Nội tiết tố: Gonadotropin; Androgen; Kháng estrogen receptor; - Điều trị phẫu thuật: Trong số bệnh gây ảnh hưởng tới đời sống tinh trùng cần phải tiến hành phẫu thuật như: giãn tĩnh mạch thừng tinh, tinh hoàn lạc chỗ, nước màng tinh hồn vị bẹn Phẫu thuật kết nối được chỉ định trường hợp bệnh nhân bị vô tinh trùng tắc nghẽn cách nối ống dẫn tinh hay nối ống dẫn tinh - mào tinh - Các kỹ thuật hỗ trợ sinh sản điều trị vô sinh nam SGTT: gồm ba kỹ thuật IUI, IVF, ICSI 1.2 QUAN ĐIỂM CỦA Y HỌC CỔ TRUYỀN VỀ TINH TRÙNG, SUY GIẢM TINH TRÙNG VÀ PHƯƠNG PHÁP CHẨN ĐOÁN, ĐIỀU TRỊ SGTT 1.2.1 Quan niệm YHCT trình tạo tinh, yếu tố ảnh hưởng đến trình tạo tinh - Tinh theo quan niệm y học cổ truyền: Tinh gồm hai loại (Tinh tiên thiên Tinh hậu thiên), vật chất để cấu tạo nên thể dinh dưỡng thể Trong trình phát triển thể, tinh luôn bị tiêu hao thường xuyên tỳ vị bổ xung để trì hoạt động sống Cả hai loại tinh tàng tạng thận 1.2.2 Các thể lâm sàng điều trị SGTT theo YHCT * Thận âm hư: sắc mặt không tươi, chóng mặt, ù tai, lưng gối yếu mỏi, trồi rụng, râu tóc bạc sớm, tinh thần mệt mỏi hay quên, trí nhớ giảm sút, đần độn, chân tay mềm yếu, động tác chậm chạp, mau già yếu, dương nuy, không thụ thai, lượng tinh dịch ít, số lượng tinh trùng thiếu nên khơng có Mạch xích trầm tế vơ lực, có âm hư hỏa vượng có ngũ tâm phiền nhiệt, chất lười đỏ, rêu, mạch tế Pháp điều trị: Bổ ích tinh tủy, tư bổ thận âm Phương dược: Bài Tả quy hồn gia giảm; Bài Ngũ tử diễn tơng hồn hợp lục vị hoàn gia giảm * Thận dương hư: sắc mặt tối sạm, sợ lạnh, chân lạnh, lưng gối mỏi lạnh, tinh thần mệt mỏi không phấn chấn, tiểu lượng nhiều són đái, đái nhiều lần, đại tiện nát vào lúc sáng sớm, số lượng tinh trùng ít, sức hoạt động tinh trùng yếu, liệt dương, hoạt tinh, mạch trầm tế trầm trì, chất lưỡi nhợt, rêu trắng Pháp điều trị: ôn thận tráng dương, cố tinh ích khí Phương dược: Bài “Kim quỹ thận khí hồn” hợp “Ngũ tử diễn tơng” gia giảm Bài Hữu quy ẩm * Tỳ hư tinh tổn: mệt mỏi, sắc mặt không tái, sức, đầu váng, mắt hoa, ngủ hay mê, hay quên, ăn kém, cảm giác đầy chướng bụng, đại tiện phân nát, số lượng tinh trùng ít, sức sống tinh trùng yếu, liệt dương, hoạt tinh, chất lưỡi bệu, nhót, có vét hằn răng, rêu lưỡi trắng, mạch vơ lực Pháp điều trị: ích khí, kiện tỳ, dưỡng huyết sinh tinh Phương dược: Bài Quy tỳ thang gia giảm (Tễ sinh phương) bài: “Bát chân sinh tinh thang” gia giảm * Can khí uẩt kết, khí trệ huyết ứ: tinh trùng yếu, chết nhiều, số lượng tinh trùng ít, hay nhói đau tinh hồn, giãn tĩnh mạch tinh, bất lực, ngực sườn đầy chướng, hay cáu gắt, chất lưỡi tối có chấm ứ huyết, mạch huyền sáp huyền khẩn Pháp điều trị: sơ can, giải uất, kiện tỳ hòa doanh.Hoạt huyết hóa ứ thơng tinh Phương dược: Bài Hắc tiêu dao tán (hòa tễ cục phương) hợp Huyết phủ trục ứ thang (Y lâm cải thác) gia giảm * Thấp nhiệt hạ tiêu: sau kết khơng có con, đau mỏi lưng, hai chân mỏi, người mệt mỏi vô lực, miệng đắng, biếng ăn, đầu váng, miệng khô đắng mà không muốn uổng nước, ngứa tức nặng phận sinh dục, đau tức chướng hội âm tinh hoàn, tinh dịch đặc mùi hơi, suy tinh dịch có nhiều hồng cầu, bạch cầu, số lượng tinh trùng ít, tỉ lệ tinh trùng chết nhiều, tiểu tiện đục nhỏ giọt, cảm giác nóng rát niệu đạo tiểu phóng tinh, lười đỏ, rêu lưỡi vàng nhớt, mạch hoạt sác nhu sác Phương pháp điều trị: nhiệt, lợi thấp, giải độc Phương dược: Tỳ giải phân ẩm gia giảm (Đan khê tâm pháp) Bài Long đởm tả can thang, gia giảm (Y tôn kim giám) 1.2.3 Tổng quan Tỏa dương Trên giới có khoảng 20 lồi Tỏa dương thuộc chi Balanophora Ở Việt Nam, chi Balanophora thấy ba loài hữu Balanophora fungosa indica, Balanophora latisepala, Balanophora laxiflora Loài Tỏa dương (Balanophora indica) ba loài phân bố Việt Nam thường phát tìm thấy chúng rừng kín thường ẩm rừng rộng núi đá vơi Mẫu thực vật lồi Tỏa dương (Balanophora indica) thu hái vào tháng 12/2015 đỉnh núi Hồng thuộc xóm Khn Mản, xã Bình Yên, huyện Sơn Dương, tỉnh Tuyên Quang Tên khoa học giám định Viện Dược Liệu Việt Nam Ở Việt Nam dân gian loài thường dùng làm thuốc bổ, dùng cho phụ nữ sau sinh, thuốc kích thích ăn ngon Đặc biệt lồi thường ngâm rượu dùng cho đàn ông loại thuốc tăng cường sinh lực, cương dương Ở Malaysia, toàn củ gió đất dùng làm thuốc kích thích tình dục Tác dụng theo Y học cổ truyền - Dược tính: Vị cam, tính ơn, qui kinh lạc gan, thận, đại tràng Tỏa dương gồm hai công hiệu chữa trị chủ yếu: bổ thận trợ dương thích hợp điều trị chứng liệt dương, vô sinh, hai chân mệt mỏi, đuối sức Hai nhuận tràng, thông tiện thích hợp điều trị chứng huyết hư thiếu chất dịch dẫn đến đường ruột khơ, táo bón - Chủ trị yếu sinh lý, liệt dương, lãnh cảm, đau lưng mỏi gối, biếng ăn CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU NGHIÊN CỨU Mẫu thực vật loài Tỏa dương (Balanophora indica) thu hái vào tháng 12/2015 đỉnh núi Hồng thuộc xóm Khn Mản, xã Bình Yên, huyện Sơn Dương, tỉnh Tuyên Quang Tên khoa học giám định Viện Dược Liệu Việt Nam Tỏa dương chiết thành cao toàn phần từ dược liệu tỏa dương (Balanophora indica) Đóng viên nang cứng Trung tâm nghiên cứu ứng dụng sản xuất thuốc đông y - Viện Y học cổ truyền Quân Đội đạt tiêu chuẩn sở 2.2 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU Chuột nhắt trắng, chủng Swiss, giống đực cái, cân nặng 18 - 22 gam, dùng để nghiên cứu độc tính cấp, ảnh hưởng mẫu thử khả sinh sản nhiễm sắc thể Thỏ chủng Newzeland White (Thử độc tính bán trường diễn), lơng trắng, khỏe mạnh, hai giống, có trọng lượng 1,8 -2,5kg; Trung tâm chăn nuôi Viện Kiểm nghiệm cung cấp 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.3.1 Nghiên cứu độc tính viên nang cứng Balanoxi động vật thực nghiệm 2.3.1.1 Nghiên cứu độc tính cấp * Nguyên tắc tiến hành Độc tính cấp viên nang cứng Balanoxi xác định chuột nhắt trắng theo đường uống phương pháp Litchfied- Wilcoxon Thực Khoa nghiên cứu thực nghiệm/ Viện Y học cổ truyền Quân Đội * Cách tiến hành Chuột nhắt trắng đực cân nặng 18 - 22 gam được chia thành lô, mỗi lô Cho từng lô chuột uống Balanoxi với liều tăng dần, từ liều cao nhất không gây chết chuột nào đến liều thấp nhất gây chết toàn bộ chuột thí nghiệm Theo dõi chuột liên tục vòng 24 giờ đầu, tình trạng chung chuột ngày sau uống thuốc Xác định tỷ lệ chuột chết lô 72 sau uống th́c để xác định LD50 (nếu có) 2.3.1.2 Độc tính bán trường diễn Độc tính bán trường diễn viên nang cứng Balanoxi xác định thỏ trắng chủng Thỏ chủng Newzeland White, lông trắng, khỏe mạnh, hai giống, có trọng lượng 1,8 -2,5kg; Trung tâm chăn nuôi Viện Kiểm nghiệm cung cấp Được thực Khoa nghiên cứu thực nghiệm/ Viện Y học cổ truyền Quân Đội theo hướng dẫn WHO quy định Bộ Y tế Việt Nam 2.3.2 Nghiên cứu tác dụng viên nang cứng Balanoxi mơ hình gây suy giảm tinh trùng động vật thực nghiệm Natri valproat * Nghiên cứu tác dụng bảo vệ Balanoxi chuột cống trắng đực bị gây suy giảm tinh trùng Natri valproate Chuột cống trắng đực chia ngẫu nhiên thành lô, lô 15 con: - Lô 1: Uống Natri clorid 0,9% + DM pha thuốc - Lô 2: Uống Natri valproat 500mg/kg/ngày + uống DM pha thuốc - Lô 3: Uống Natri valproat 500mg/kg/ngày + uống Balanoxi 0,7g/kg thể trọng Chuột đực lô uống thuốc dung môi pha thuốc liên tục tuần Chuột cho uống với thể tích ml/100g cân nặng chuột uống lần/ ngày, khoảng cách lần uống Sau tuần, cho chuột đực lô giao phối cách ghép chuột đực với chuột chuồng tuần * Nghiên cứu tác dụng phục hồi viên nang cứng Balanoxi chuột cống trắng đực gây suy giảm tinh trùng Natri valproat Chuột cống đực trưởng thành, chia ngẫu nhiên thành lô nghiên cứu, lô 15 - Gây suy giảm tinh trùng cho chuột cống đực Natri valproat: + Lô (chứng sinh học): không uống Natri valproat, uống Natri clorid 0,9% 20ml/kg/ngày + uống dung môi pha thuốc với thể tích 20ml/kg thể trọng + Lơ 2: uống Natri valproat liều 500mg/kg/ngày tuần + Uống dung mơi pha thuốc với thể tích 20ml/kg thể trọng + Lô 3: uống Natri valproat liều 500mg/kg/ngày tuần + Uống Balanoxi 0,7g/kg thể trọng Thời gian uống thuốc tuần 2.3.3 Nghiên cứu tác dụng lâm sàng viên nang cứng Balanoxi điều trị bệnh nhân vô sinh suy giảm tinh trùng - Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu tiến cứu, thử nghiệm lâm sàng mở, so sánh khác biệt trước sau điều trị - Cỡ mẫu: Cỡ mẫu 30 (cỡ mẫu thuận tiện) bệnh nhân nam từ 2060 tuổi bị suy giảm tinh trùng thể thận dương hư - Tiêu chuẩn lựa chọn: Theo Y học đại: Tuổi từ 20 đến 60; Các bệnh nhân vô sinh loại I vô sinh loại II suy giảm tinh trùng; Tự nguyện tham gia vào nghiên cứu; Thực nghiên túc, đầy đủ y lệnh hướng dẫn Bác sỹ suốt trình nghiên cứu Theo Y học cổ truyền: Bệnh nhân bị suy giảm tinh trùng thể thận dương hư - Liều lượng cách dùng sản phẩm nghiên cứu: Uống ngày 10 viên nang cứng Balanoxi 500mg, chia lần sáng chiều, sau ăn, liên tục 10 tuần * Các xét nghiệm - Sinh hoá máu trước điều trị: Urê, Creatinin, AST, ALT để đánh giá loại trừ bệnh nhân có bệnh lý gan, thận Xét nghiệm lại số bệnh nhân lựa chọn sau điều trị, để đánh giá tình trạng chức Gan, Thận có bị ảnh hưởng sau dùng Balanoxi hay khơng - Định lượng Testosteron, huyết trước điều trị; định lượng testosteron huyết bệnh nhân lựa chọn sau điều trị - Tinh dịch đồ trước sau điều trị Tinh dịch đồ xét nghiệm quan trọng để đánh giá khả sinh sản cùa người chồng Tiêu chuẩn thực cách đánh giá theo WHO (1999) (2010) [Error: Reference source not found],[Error: Reference source not found] - Siêu âm tinh hoàn, tĩnh mạch thừng tinh trước điều trị để loại trừ nguyên nhân khác gây suy giảm tinh trùng Xét nghiệm tinh dịch đồ, sinh hóa, huyết học, hóc mơn Testosteron làm labo xét nghiệm Viện Y học cổ truyền Quân đội 2.4 Xử lý số liệu: Các số liệu nghiên cứu xử lý thống kê theo phương pháp t-test Student Số liệu biểu diễn dạng : X ±SD Sự khác biệt có ý nghĩa p < 0,05 2.5 Vấn đề đạo đức nghiên cứu: Sau nghiên cứu độc tính tác dụng Balanoxi động vật thực nghiệm chứng minh tính an tồn hiệu quả, trình Hội đồng khoa học Viện YHCT Quân đội đồng ý thử nghiệm người bệnh tình nguyện CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Kết thử độc tính viên nang cứng balanoxi 3.1.1 Nghiên cứu độc tính cấp Chuột nhắt trắng uống thuốc đến liều cao 20g/kg cân nặng khơng có chuột chết, khơng xuất triệu chứng bất thường 72 sau uống thuốc suốt ngày 3.1.2 Kết nghiên cứu độc tính bán trường diễn theo đường uống Balanoxi thỏ Trong suốt thời gian thí nghiệm, thỏ lơ ăn uống, hoạt động bình thường, nhanh nhẹn, mắt sáng, lơng mượt, ăn uống tốt, phân khô Không thấy biểu đặc biệt lơ thỏ suốt thời gian nghiên cứu Sau tuần uống Balanoxi: số lượng hồng cầu, hàm lượng Huyết sắc tố, Hematocrit, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu số lượng tiểu cầu, xét nghiệm đánh giá chức gan (hoạt độ AST, ALT, GGT, Bililubin toàn phần), xét nghiệm đánh giá chức thận (nồng độ Creatinin, Ure) máu thỏ lô thử lơ thử khơng có khác biệt so sánh với lô đối chứng so sánh lô dùng thuốc thử thời điểm theo dõi (p>0,05) Trên tất thỏ thực nghiệm (cả lô chứng lô nghiên cứu), không quan sát thấy có thay đổi bệnh lý mặt đại thể hình ảnh vi thể gan, thận lơ thử lô thử 3.2 Kết tác dụng bảo vệ phục hồi viên nang cứng balanoxi mơ hình thực nghiệm 3.2.1 Tác dụng bảo vệ Bảng Tác dụng bảo vệ Balanoxi lên trọng lượng quan sinh dục chuột cống đực bị gây suy giảm tinh trùng natri valproat Lơ Tinh hồn Lơ 1: chứng sinh học Natri clorid + nước Lô 2: chứng bệnh (Valproat + nước) p2-1 Lô 3: (lô thử) Valproat + Balanoxi p3-1 p3-2 1,157 ± 0,086 0,991 ± 0,092 0,05 Trọng lượng quan sinh dục (mg/100g thể trọng) Tuyến Tuyến Đầu Túi tinh Cơ nâng tiền liệt Cowper dương vật 0,270 0,144 0,041 0,054 0,359 ± ± ± ± ± 0,057 0,021 0,007 0,006 0,047 0,049 0,350 0,207 0,119 0,036 ± ± ± ± ± 0,005 0,036 0,070 0,013 0,006 0,05 0,05 < 0,05 < 0,05 0,039 ± 0,006 > 0,05 >0,05 > 0,05 0,052 ± 0,007 > 0,05 > 0,05 > 0,05 0,352 ± 0,029 > 0,05 > 0,05 Nhận xét: Chuột lô có trọng lượng tinh hồn tăng so với lơ khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Trọng lượng túi tinh, tuyến tiền liệt tăng có ý nghĩa thống kê so với lơ (p < 0,05) Trọng lượng tuyến Cowper, đầu dương vật nâng lơ khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với lô (p > 0,05) Bảng Tác dụng bảo vệ Balanoxi lên nồng độ testosteron máu chuột cống đực gây suy giảm tinh trùng natri valproat Lô Lô 1: chứng sinh học Natri clorid + nước Lô 2: chứng bệnh (Valproat + nước) p2-1 Lô 3: (lô thử) Valproat + Balanoxi p3-1 p3-2 Testosteron (nmol/l) 8,91 ± 1,38 6,09 ± 1,20 < 0,01 8,50 ± 1,08 > 0,05 < 0,01 Nhận xét: Nồng độ testosteron máu chuột lô tăng so với lô (p0,05) Bảng Tác dụng Balanoxi lên mật độ tỉ lệ tinh trùng sống chuột cống đực gây suy giảm tinh trùng natri valproat Mật độ tỉ lệ tinh trùng Mật độ tinh trùng Tỉ lệ tinh trùng sống triệu/ml (%) Lô Lô 1: chứng sinh học Natri clorid + nước Lô 2: chứng bệnh (Valproat + nước) p2-1 Lô 3: (lô thử) Valproat + Balanoxi p3-1 p3-2 126,91 ± 18,30 82,917 ± 5,10 80,167 ± 11,49 71,75 ± 6,95 < 0,001 < 0,001 88,58 ± 13,24 81,67 ± 5,36 < 0,001 > 0,05 > 0,05 < 0,01 Nhận xét: Chuột lô (lô uống Balanoxi) mật độ tinh trùng khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng bệnh (p>0,05) Tỉ lệ tinh trùng sống tăng có ý nghĩa thống kê so với lơ chứng bệnh (p 0,05 < 0,01 > 0,05 > 0,05 > 0,05 < 0,001 15,95 > 0,05 > 0,05 Nhận xét: Chuột lơ uống Balanoxi (lơ 3) có tỉ lệ tinh trùng tiến tới nhanh tăng cao rõ rệt so với lô (p0,05); tỉ lệ tinh trùng khơng tiến tới giảm rõ rệt có ý nghĩa thống kê so với lô (p0,05) Tỷ lệ tinh trùng tiến tới chậm tỉ lệ tinh trùng không di động không khác biệt so với lô chứng bệnh (p>0,05) Bảng Tác dụng bảo vệ Balanoxi lên tốc độ di động tinh trùng chuột cống đực gây suy giảm tinh trùng natri valproat Lô Tốc độ di động tinh trùng (µm/s) Lơ 1: chứng sinh học 44,48 ± 6,43 Natri clorid + nước Lô 2: chứng bệnh 36,16 ± 8,87 (Valproat + nước) p2-1 < 0,05 Lô 3: (lô thử) 43,59 ± 5,91 Valproat + Balanoxi p3-1 > 0,05 p3-2 < 0,05 Nhận xét: Tốc độ di động tinh trùng chuột lô giảm có ý nghĩa thống kê so với lơ (p 0,05 > 0,05 8,25 ± 0,96 < 0,05 9,00 ±0,8 > 0,05 > 0,05 7,00 ± 1,15 < 0,01 8,57 ± 0,98 < 0,05 < 0,05 Nhận xét: Ở lô 3, tỉ lệ chuột có thai, số thai phát triển bình thường trung bình/ chuột mẹ tăng có ý nghĩa thống kê so với lơ 2(p 0,05) 3.2.2 Tác dụng phục hồi Kết tác dụng phục hồi viên nang cứng Balanoxi chuột cống trắng đực gây suy giảm sinh sản Natri valproat Bảng Tác dụng phục hồi Balanoxi lên trọng lượng quan sinh dục chuột cống đực bị gây suy giảm sinh sản natri valproat Trọng lượng quan sinh dục (mg/100g thể trọng) Lô Tuyến Tuyến Đầu Cơ Tinh Túi tiền Cowpe dương nâng hoàn tinh liệt r vật Lô 1: chứng 1,004 0,251 0,136 0,050 0,330 0,044 sinh học Natri ± ± ± ± ± ± 0,003 clorid + nước 0,112 0,038 0,010 0,003 0,023 12 Lô 2: chứng bệnh (Valproat + nước) 0,845 ± 0,115 0,202 ± 0,031 0,122 ± 0,099 0,041 ± 0,002 p2-1 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 0,048 ± 0,003 0,316 ± 0,018 > 0,05 > 0,05 0,049 ± 0,002 0,323 ± 0,021 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Nhận xét: Chuột lơ có trọng lượng tinh hồn, túi tinh, tuyến tiền liệt tăng so với lô khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê (p >0,05) Trọng lượng đầu dương vật nâng lô khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với lô (p >0,05) Bảng Tác dụng phục hồi Balanoxi lên nồng độ testosteron máu chuột cống đực gây suy giảm sinh sản natri valproat Lô Testosteron (nmol/l) Lô 1: chứng sinh học Natri clorid + nước Lô 2: chứng bệnh (Valproat + nước) p2-1 Lô 3: (lô thử) Valproat + Balanoxi p3-1 p3-2 8,42 ± 1,10 6,87 ± 1,14 < 0,01 8,30 ± 1,00 > 0,05 < 0,01 Nhận xét: Nồng độ testosteron máu chuột lô giảm rõ rệt so với lô 1, nồng độ testosteron máu chuột lô tăng so với lô (p 0,05 > 0,05 < 0,01 Nhận xét: Chuột lô (lô uống Balanoxi) có mật độ tinh trùng khơng tăng so với lô chứng bệnh (p>0,05) Tỉ lệ tinh trùng sống tăng có ý nghĩa thống kê so với lơ chứng bệnh (lô 2) (p0,05) Bảng 10 Tác dụng phục hồi Balanoxi lên mức độ di động tinh trùng chuột cống bị gây suy giảm sinh sản natri valproat Tỉ lệ di động/ tiến tới (%) Lô Tiến tới Tiến tới Không tiến Không di nhanh chậm tới động Lô 1: chứng sinh học 34,42 ± 7,87 5,08 ± 1,50 5,58 ± 1,44 54,92 ± 8,03 Natri clorid + nước Lô 2: chứng bệnh 22,08 ± 6,95 7,33 ± 2,01 7,42 ± 2,02 63,17 ± 7,11 (Valproat + nước) p2-1 < 0,01 < 0,01 < 0,05 < 0,05 Lô 3: (lô thử) 32,17 ± 55,17 ± 6,17 ± 1,85 6,50 ± 1,88 Valproat + Balanoxi 13,54 13,67 p3-1 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 p3-2 < 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Nhận xét: Chuột lơ uống Balanoxi (lơ 3) có tỉ lệ tinh trùng tiến tới nhanh tăng cao rõ rệt so với lô (p0,05).Tỷ lệ tinh trùng tiến tới chậm, không tiến tới tỉ lệ tinh trùng không di động không khác biệt so với lô chứng bệnh (p>0,05) Bảng 11 Tác dụng phục hồi Balanoxi lên tốc độ di động tinh trùng chuột cống đực gây suy giảm sinh sản natri valproat Lơ Tốc độ di động tinh trùng (µm/ s) Lơ 1: chứng sinh học Natri clorid + nước Lô 2: chứng bệnh (Valproat + nước) p2-1 Lô 3: (lô thử) Valproat + 42,50 ± 7,53 34,17 ± 8,90 < 0,05 41,67 ± 6,32 14 Balanoxi p3-1 > 0,05 p3-2 < 0,05 Nhận xét: Tốc độ di động tinh trùng chuột lơ giảm có ý nghĩa thống kê so với lô 1(p 0,05 > 0,05 > 0,05 < 0,05 < 0,05 > 0,05 < 0,05 < 0,01 Nhận xét: Ở lô 3, tỉ lệ chuột có thai, số thai phát triển bình thường trung bình/ chuột mẹ tăng có ý nghĩa thống kê so với lơ Số hồng thể/ chuột mẹ khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê so sánh lô với (p > 0,05) 3.3 Kết nghiên cứu tác dụng viên nang cứng Balanoxi 15 bệnh nhân vô sinh suy giảm tinh trùng 3.3.1 Kết nghiên cứu tác dụng điều trị viên nang cứng Balanoxi bệnh nhân vô sinh suy giảm tinh trùng Bảng 13 So sánh nồng độ tesstosteron, huyết trước sau điều trị Chỉ số Tetosteron (nmol/l) Thời điểm p Max- Min X´ ± SD Trước điều trị 16,50 ± 4,79 8,25 - 28,5 0,0038 Sau điều trị 18,20 ± 4,48 9,88 - 27,8 Nhận xét: Tại thời điểm trước điều trị, nồng testosteron huyết trung bình 16,50 ± 4,79 (nmol/l), sau điều trị nồng độ tăng lên 18,20 ± 4,48 (nmol/l) Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p