DI TRUYỀN TẾ BÀO VÀ DI TRUYỀN PHÂN TỬ 4-2012

NGUYÊN LÝ CHẨN ĐOÁN BỆNH BẰNG DI TRUYỀN TẾ BÀO VÀ DI TRUYỀN PHÂN TỬ Ths Ngô Diễm Ngọc Khoa Di Truyền Sinh Học Phân Tử ĐẶT VẤN ĐỀ (1)  Thế giới:  7.6 triệu trẻ em/năm mắc dị tật bẩm sinh bệnh di truyền  90% thuộc nước phát triển  Nguyên nhân thứ hai gây tử vong trẻ sơ sinh, trẻ nhỏ  Tần suất 25-60 trẻ/1000 trẻ đẻ sống ĐẶT VẤN ĐỀ (2)  Chi phí cho chẩn đốn điều trị bệnh di truyền: (OMIM - Medelian Inheritance in Man) ĐẶT VẤN ĐỀ (3)  Việt Nam: Khoa Di truyền Sinh Học Phân Tử - Bệnh Viện Nhi TƯ, 2010 ĐẶT VẤN ĐỀ (4)  Việt Nam: Khoa Di truyền Sinh Học Phân Tử - Bệnh Viện Nhi TƯ, 2010 ĐẶT VẤN ĐỀ (5)  Bệnh di truyền đơn gen:  3917 bệnh thuộc nhóm di truyền đơn gen  84% biết nguyên nhân ~1990 gen  16% chưa xác định nguyên nhân  Tần suất bệnh di truyền đơn gen gây hậu nặng nề: 0.36%  Chiếm 6-8% nguyên nhân nhập viện trẻ (Nghiên cứu triệu trẻ đẻ sống - OMIM - Medelian Inheritance in Man) GIỚI THIỆU GIỚI THIỆU Di truyền tế bào Di truyền phân tử Proteomic DI TRUYỀN TẾ BÀO - CYTOGENETIC  Di truyền tế bào phát bất thường nhiễm sắc thể:  Chậm phát triển: 3% dân số  Tự kỷ: ~ 1:150 cá thể  Dị tật sơ sinh: ~ 1:33 trẻ đẻ sống  Thai lưu, sảy thai  Tần suất bất thường nhiễm sắc thể:  3.7% trẻ chậm phát triển  7.4% trẻ tự kỷ  1% trẻ đẻ sống  >60% trường hợp lưu thai tháng đầu thai kỳ DI TRUYỀN TẾ BÀO - CYTOGENETIC  Mối liên quan số lượng, cấu trúc nhiễm sắc thể bệnh lý  Bất thường số lượng (thêm/bớt), cấu trúc (lặp, mất, chuyển đoạn)  Là nguyên nhân gây nhiều bệnh lý phát triển  Là yếu tố có mặt nhiều loại bệnh ung thư DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Molecular workflow: Mẫu bệnh phẩm DNA extraction MLPA PCR reaction Giải trình tự gen Điện di sản phẩm PCR Microarray DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC Chẩn đoán bệnh di truyền Xác định người mang gen bệnh Xác định đặc trưng cá thể HLA Chẩn đoán trước sinh Xác định quan hệ huyết thống DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Ứng dụng di truyền phân tử chẩn đoán trước, sau sinh xác định người mang gen bệnh cho bệnh di truyền sau:  Beta Thalassemia  Alpha Thalassemia  Thoái hóa tủy – SMA  Loạn dưỡng Duchenne – DMD  Tăng sản thượng thận bẩm sinh  Thiếu hụt Citrin  Bệnh Wilson DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Bệnh Thối hóa tủy (SMA):  Bệnh thần kinh  Suy yếu gốc chi đối xứng  Di truyền lặn NST thường: 5q13  Tỷ lệ mắc: 1/ 10.000 trẻ đẻ sống  Tỷ lệ người mang gen bệnh: 1/ 50  ≈ 30 bệnh nhân SMA mới/ năm DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Bệnh Thối hóa tủy (SMA): M Lane 4: Chị thứ thai nhi, tuổi, đoạn exon SMN1 Lane 6: Chị thứ thai nhi, 10 tháng, đoạn exon SMN1 Lane 7: Thai nhi 18 tuần – Bình thường DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Bệnh Loạn dưỡng Duchenne (DMD):  Bệnh thần kinh  Đột biến gen Dystrophy  Di truyền lặn NST giới X  Tỷ lệ mắc: 1/3.300 trẻ trai đẻ sống  Lâm sàng: • Bệnh tiến triển • Dấu hiệu Gower (+) • Suy yếu cơ: đối xứng, gốc chi, nhiều vị trí • Giả phì đại bắp chân DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Bệnh Loạn dưỡng Duchenne (DMD): A B C Lane 3: Anh trai thai nhi Lane 4: Thai nhi • A: Mất đoạn exon 51 • A: Khơng đoạn • B: Mất đoạn exon 50, 52 • B: Khơng đoạn • C: Khơng đoạn • C: Không đoạn DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Bệnh Thalassemia:  Thalassemia bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể thường  Bệnh di truyền đơn gen phổ biến giới Đông Nam Á  Đặc trưng thiếu hụt tổng hợp chuỗi α/β globin đột biến gen α/β globin  Là nguyên nhân gây thiếu máu tan máu hàng đầu trẻ em  Vấn đề Thalassemia:  β Thalassemia: • 1.5 % dân số giới • 5.1 triệu người Việt nam  α Thalassemia: • 250 triệu người mang gen α+ Thalassemia • 60 triệu người mang gen α0 Thalassemia • Tập trung chủ yếu Châu Phi, Ấn Độ, Đông Nam Á Bệnh nhân đến khám nghi ngờ mắc Thal Khám lâm sàng Cơng thức máu, Phân tích Hb, Fe huyết Người mắc Thal, người mang gen bệnh Tách chiết DNA từ máu ngoại vi Multi-Gap-PCR AMRS-PCR sàng lọc đột biến thường gặp Sequencing gen globin phát đột biến điểm khác Kiểu gen người mang gen Thal (bố/mẹ/anh chị em) Kiểu gen người mắc Thalassemia Theo dõi tư vấn di truyền Chẩn đoán trước sinh bệnh Thal Chọc hút dịch ối, tách chiết DNA từ tế bào ối PCR Seq xác định kiểu gen thai nhi DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Bệnh Tăng sản thượng thận bẩm sinh:  Bệnh di truyền lặn NST thường: 6p21.3  Thiếu hụt cortisol từ cholesterol vỏ thượng thận, thiếu hụt enzyme tổng hợp steroid  Thể muối: Suy thượng thận  Thể nam hóa đơn thuần: Phì đại âm vật trẻ gái, dậy sớm trẻ trai  95% thiếu hụt hoạt động enzyme 21 hydroxylase  Tỷ lệ mắc: 1/ 5,000 đến 1/ 15,000 trẻ đẻ sống  Kiểu đột biến gene có liên quan đến mức độ nặng bệnh DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Bệnh Wilson:  Di truyền lặn NST thường (13q14.3)  Đột biến gen ATP7B  Rối loạn q trình vận chuyển đồng  Đồng tích tụ gan, não, mắt…  Tần suất: 1/30.000  Gây tử vong biến chứng muộn  Đáp ứng tốt với điều trị  Chẩn đoán xác định, chẩn đoán, điều trị sớm DI TRUYỀN PHÂN TỬ - MOLECULAR GENETIC  Bệnh Thiếu hụt Citrin:  Di truyền lặn nhiễm sắc thể thường  Đột biến gen SLC25A13  Protein Citrin vận chuyển aspartat-glutamate  Có vai trò chu trình ure  Tỷ lệ: 1/ 23.000 - 1/ 100.000  NICCD (Neonatal intrahepatic cholestasis caused by citrin deficiency) • Khởi phát sớm: < tuổi • Nhiều loại aa tăng cao: thr, met, tyr, agr  CTLN2 (Adult-onset type II citrullinemia ) • Khởi phát muộn: >10 tuổi • Xuất triệu chứng thần kinh, tăng Citrullin, amoniac máu… KHOA DI TRUYỀN VÀ SINH HỌC PHÂN TỬ BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƯƠNG 18/879 Đường La Thành - Đống Đa - Hà nội Tel: 04.38343334 (333) Website: http://www.ditruyen.com ... cặn tế bào DI TRUYỀN TẾ BÀO - CYTOGENETIC Hội chứng Down 47,XX,+21 DI TRUYỀN TẾ BÀO - CYTOGENETIC Hội chứng Edward 47,XX,+18 DI TRUYỀN TẾ BÀO - CYTOGENETIC Hội chứng Patau 47,XY,+13 DI TRUYỀN TẾ... Medelian Inheritance in Man) GIỚI THIỆU GIỚI THIỆU Di truyền tế bào Di truyền phân tử Proteomic DI TRUYỀN TẾ BÀO - CYTOGENETIC  Di truyền tế bào phát bất thường nhiễm sắc thể:  Chậm phát triển:... Patau 47,XY,+13 DI TRUYỀN TẾ BÀO - CYTOGENETIC Hội chứng Turner 45,XO DI TRUYỀN TẾ BÀO - CYTOGENETIC Hội chứng Kleinerfeilter 47,XXY DI TRUYỀN TẾ BÀO - FISH DI TRUYỀN TẾ BÀO - FISH  Hội chứng Prader