NGHIÊN cứu THÀNH PHẦN, PHÂN bố các LOÀI nưa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - TRẦN VĂN TIẾN Tên luận án: NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN, PHÂN BỐ CÁC LỒI NƯA (AMORPHOPHALLUS SPP.) CỦ CĨ GLUCOMANNAN VÀ CHỌN LỒI CĨ TRIỂN VỌNG PHÁT TRIỂN TRỒNG Ở MỘT SỐ TỈNH MIỀN NÚI PHÍA BẮC VIỆT NAM Chuyên ngành: Thực vật học Mã số: 62 42 01 11 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội - 2017 Cơng trình hồn thành tại: Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Người hướng dẫn khoa học 1: TS Nguyễn Văn Dư Người hướng dẫn khoa học 2: PGS TS Hà Văn Huân Phản biện 1: … Phản biện 2: … Phản biện 3: … Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Học viện, họp Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam vào hồi … ’, ngày … tháng … năm 201… MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài luận án Một số loài chi Nưa Amorphophallus, thuộc họ Ráy (Araceae) củ có chứa glucomannan, loại đường phân tử lớn có cấu trúc mạch trồng nhiều nước giới Nhật Bản, Trung Quốc, Ấn Độ, v.v để lấy củ làm nguyên liệu chế biến thực phẩm thực phẩm chức Theo Chua M., Baldwin TC., Hocking TJ., Chan K (2010) củ số lồi Nưa chứa glucomannan, loại đường polysaccharide tan nước Các sản phẩm chứa glucomamnan củ Nưa, có tác dụng điều chỉnh nồng độ đường, làm giảm tỷ lệ mỡ máu, làm giảm thèm ăn người béo phì Ở Việt Nam, củ Nưa sử dụng làm thức ăn truyền thống từ lâu đời người dân tộc số tỉnh miền núi phía Bắc Tuy nhiên, củ Nưa khai thác sử dụng phạm vi hẹp số địa phương với ăn chế biến giống đậu phụ gọi Mò gỉ (tiếng Nùng) hay Cò ký thơ (tiếng Mơng), mỳ, bánh rán,.v.v (Nguyễn Văn Dư, 2012) Các nghiên cứu Nưa Việt Nam số lồi Nưa có hàm lượng glucomannan, đặc điểm phân bố có nghiên cứu bước đầu nhân giống trồng loài Nưa Bên cạnh đó, theo số liệu Tổng cục thống kê năm 2016, tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam với địa hình đồi núi, người dân thu nhập bình quân đầu người thấp với 337,2 nghìn đồng/tháng Do thu nhập người dân thấp nên tỷ lệ hộ đói nghèo cao 41,42%, nhiều hộ thiếu ăn - tháng/năm Vì vậy, để đưa Nưa trở thành nông nghiệp phát triển kinh tế miền núi phía Bắc Việt Nam, việc nghiên cứu sâu lồi Nưa có giá trị kinh tế biện pháp nghiên cứu nhân giống trồng cần thiết Xuất phát từ lý trên, tác giả chọn đề tài nghiên cứu “Nghiên cứu thành phần, phân bố lồi Nưa (Amorphophallus spp.) củ có glucomannan, lựa chọn lồi có triển vọng phát triển trồng số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam” làm đề tài nghiên cứu luận án Mục tiêu nghiên cứu luận án - Đánh giá thành phần phân bố loài Nưa (Amorphophallus spp.) củ có glucomannan số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam; - Lựa chọn lồi nưa có glucomannan cao triển vọng phát triển trồng để nhân giống, trồng số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam; - Nhân giống trồng thử nghiệm lồi Nưa có triển vọng phát triển số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Nội dung nghiên cứu luận án - Điều tra đánh giá thành phần loài, phân bố tri thức địa lồi Nưa củ có glucomannan miền núi phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh trưởng phát triển lựa chọn lồi Nưa có hàm lượng glucomannan cao, triển vọng phát triển số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu số kỹ thuật nhân giống loài Nưa có hàm lượng glucomannan cao triển vọng phát triển số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu trồng, phát triển Nưa konjac số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án - Ý nghĩa khoa học: Kết luận án góp phần bổ sung hồn chỉnh kiến thức loài Nưa (Amorphophalluss spp.) thuộc chi (Amorphophalluss) Việt Nam Bên cạnh kết luận án nhằm phục vụ cho nghiên cứu chuyên ngành sâu lĩnh vực khác loài Nưa - Ý nghĩa thực tiễn: Là sở khoa học cho việc phát triển số giống Nưa có hàm lượng glucomannan cao Việt Nam, phục vụ sản xuất thực phẩm chức số ngành khác Bố cục luận án Ngoài phần mở đầu, kết luận, kiến nghị, tài liệu tham khảo phụ lục luận án cấu trúc gồm chương: Chương 1: Tổng quan vấn đề nghiên cứu - 25 trang, Chương 2: Đối tượng, nội dung, phương pháp nghiên cứu - 22 trang, Chương 3: Kết quả nghiên cứu thảo luận - 70 trang CHƢƠNG TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Tình hình nghiên cứu chi Nƣa 1.1.1 Vị trí phân loại chi Nưa Theo từ điển thuốc Việt Nam Võ Văn Chi (2012), phân loại chi Nưa giới thực vật sau: Chi Nưa (Amorphophallus) thuộc họ Ráy (Araceae), tên gọi khác Khoai Nưa, Khoai ngái, Tò ngủ (Tày), Mò gỉ (Nùng), Cò kí thơ (H'mơng) 1.1.2 Đặc điểm hình thái chi Nưa Các lồi chi Nưa thảo, thân củ, chiều cao từ 10 cm (A pulsilus) tới hàng mét (A titanum) (Mayo, 1997; Bown, 2000) Củ Nưa có nhiều hình dạng khác nhau, từ thn dài, hình củ cải, hình cầu hay hình đầu, khơng lồi có thân củ phần gần hình cầu phần lại phân nhánh Rễ Nưa dạng rễ chùm, thường tập trung phần đỉnh củ, xuất phát chồi đỉnh Rễ thường mập, dài tới 15 cm Lá Nưa thường đơn độc, có 2-3 với nhau; cuống thường mập, màu xanh, có đốm trắng, màu nâu có đốm trắng, có nhiều chấm đen, ngồi nhẵn, có gai mềm, ngồi bao bọc vảy phần gốc lúc non Phiến đơn, thường xẻ thùy lớn, thùy lớn lại xẻ thứ cấp đến nhiều lần thành phiến dạng “chét” hình lơng chim Hoa Nưa cụm hoa dạng bơng mo, lưỡng tính, đơn độc; mo bơng nạc đa dạng hình dạng kích thước 1.1.3 Đặc điểm thành phần phân bố loài Nưa 1.1.3.1 Đặc điểm thành phần lồi Nưa Trên giới chi Nưa có khoảng 200 loài phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới thuộc Châu Phi Châu Á (Hetterscheid Ittenbach, 1996; Sedayu, 2010) Ở Việt Nam số loài chi lên tới 25 lồi, theo Nguyễn Văn Dư cộng có lồi củ có chứa glucomannan 1.1.3.2 Đặc điểm phân bố loài Nưa Các loài chi Nưa phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới thuộc Châu Phi Châu Á Chúng loài thực vật đặc hữu vùng rừng mưa nhiệt đới Đông Nam Á Nhiệt độ trung bình năm thích hợp cho lồi Nưa vào khoảng 24oC (Hetterscheid, 1994; Mayo, 1997; Liu, 2004) Ở Việt Nam với 25 loài Nưa phân bố phạm vi Nước có lồi phân bố tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam, 17 lồi lại phân bố đa dạng theo nhiều điều kiện sinh thái khác từ Bắc vào Nam Việt Nam 1.1.4 Đặc điểm sinh thái sinh trưởng phát triển lồi Nưa củ có glucomannan  Đặc điểm sinh thái Các loài Nưa sinh trưởng tốt mơi trường bóng râm với đất nước nhanh giàu mùn khống có độ pH từ 6,5 đến 7,5 Đặc biệt lồi Nưa có hàm lượng glucomannan cao cần điều kiện tránh ánh sáng trực tiếp thấp nhiệt độ thích hợp từ 20-250C  Đặc điểm sinh trưởng phát triển Liu & cs (1998) nghiên cứu sinh trưởng phát triển số loài Nưa Trung Quốc điều kiện sinh thái Nưa Theo nhóm nghiên cứu, Nưa khơng phải đòi hỏi nhiều nước, không chịu ngập úng Về nhiệt độ, Nưa ưa ấm, có khả chịu biến thiên nhiệt độ từ - 430C, nhiệt độ tối thích 20 - 250C, nhiệt độ xuống 00C lên 480C chết sau ngày Cây Nưa sinh trưởng phát triển theo mùa, chúng thường rụng vào mùa đông hay mùa khô 1.1.5 Giá trị tình hình sử dụng lồi Nưa Các loài Nưa thuộc chi Amorphophallus từ lâu sử dụng vùng nhiệt đới cân nhiệt châu Á nguồn thức ăn loại thuốc y học cổ truyền (Liu, 1998) Một loài biết đến nhiều Amorphophalus konjac trồng Trung Quốc từ 2000 năm trước (Liu, 1998; Long, 1998) Phần củ loài dùng làm thuốc đông y để chữa hen suyễn, ho, chứng thoát vị, đau ngực, bỏng rối loạn da (Niwa, 2000; Xu, 2001) Gần đây, bột Nưa ý cơng dụng tiềm chất xơ thực phẩm Các chất sơ thực phẩm này, kháng lại enzim tiêu hóa, giúp no lâu (McCleary, 2003) Phân tử có hoạt tính sinh học chủ yếu củ konjac sợi hòa tan, bao gồm polysaccharide khơng chứa xenluloza glucomannan (Takigami, 2000; Edison, 2010; Parry, 2010) Ở Việt Nam, củ Nưa sử dụng làm thức ăn truyền thống từ lâu đời Tuy nhiên, thức ăn từ củ Nưa sử dụng phạm vi hẹp địa phương dân tộc miền núi sử dụng đói (nạn đói), chưa sử dụng thức ăn phổ biến Theo nghiên cứu điều tra thực vật dân tộc học Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật Nưa Huế Nưa trồng Quảng Thọ, Quảng Điền từ hàng trăm năm trước trở thành ăn quen thuộc “Chột Nưa” thơ “Con cá chột Nưa” nhà thơ Tố Hữu phần cuống dân địa phương sử dụng loại rau đặc sản (N.V Dư, 2012) 1.2 Khái quát nghiên cứu glucomannan củ Nƣa 1.2.1 Giới thiệu glucomannan củ Nưa Glucomannan polysacarit mạch thẳng, khối lượng phân tử khoảng 200 ÷ 2000 Kda, tan nước gồm mắt xích D-mannose D-glucose liên kết với liên kết β-(1→ 4) glucozit Hàm lượng glucomannan củ Nưa phụ thuộc vào môi trường sống, điều kiện canh tác, thời gian sinh trưởng, phát triển qui trình tách chiết, chế biến từ nguồn nguyên liệu ban đầu sau thu hoạch 1.2.2 Nghiên cứu đánh giá hàm lượng glucomannan củ Nưa Để đánh giá hàm lượng glucomannan sử dụng chủ yếu phương pháp so màu, phương pháp định lượng hóa sinh chất thực vật kinh điển áp dụng Một số phương pháp định lượng glucomannan sử dụng phương pháp dùng thuốc thử 3,5-dinitrosalicylic axit (3,5-DNS), Phương pháp so màu phenol-sunfuric axit 1.3 Tình hình nghiên cứu nhân giống Nƣa 1.3.1 Trên giới Các lồi Nưa nhân giống từ hạt từ quan sinh dưỡng Trong Các lồi Nưa nhân giống từ hạt từ quan sinh dưỡng Trong nuôi trồng thương mại, Nưa nhân giống từ quan sinh dưỡng củ chồi (củ con) sử dung phổ biến (Follett Douglas, 2002; Edison, 2010) Chồi gắn liền với thân củ gốc cắt vào vụ thu hoạch vùi cát đất mùn độ ẩm 60% độ sâu 10 đến 15 cm nhằm ngăn rễ phát triển vùng sống lưng củ củ khô vụ gieo trồng (Follett and Douglas, 2002) Mặt khác, việc nhân giống từ hạt lại không phổ biến hạt Nưa vơ khó nảy mầm điều kiện tự nhiên (O’Hair Asokan, 1986) Tuy nhiên phía Nam Trung Quốc, người dân địa làm cho việc nhân giống trở nên dễ dàng cách loại bỏ vỏ chín, sau trộn với cát ẩm với tỉ lệ 1:4; lấp lại lớp đất dầy (Long, 1998) Các nghiên cứu nhân giống mô lá, mô sẹo nhà sinh học nước tiến hành nghiên cứu từ vài chục năm Năm 1991, Kobayashi & M Yonai, S.đã giới thiệu phương pháp nhân giống Nưa konjac từ cuống lá, củ củ Theo tác giả tỉ lệ củ nhiễm virus mosaic tới 92% Củ dùng để nuôi cấy bệnh chọn từ giống mẹ Từ mô củ tháng tác giả nhân 1.000 Từ mô sẹo cuống với trọng lượng 10 mg, tháng nhân 1.000 1.3.2 Ở Việt Nam Ở Việt Nam, Nưa chưa phải kinh tế có cấu trồng tài liệu nghiên cứu nhân giống loài Nưa Việt Nam ít, đặc biệt việc nghiên cứu với lồi Nưa có hàm lượng gluconmannan cao Gần đây, nghiên cứu Lê Xuân Đắc, Nguyễn Văn Dư năm 2014 cho kết quả, môi trường thích hợp để tạo đa chồi Nưa mơi trường AMNA2 (MS + 30 g/l đường saccharose + 8g/l agar + mg/l BAP + 0,2 mg/l NAA) với hệ số nhân chồi 5,7 Môi trường tốt để tạo hồn chỉnh mơi trường ARIB6 (MS + 30 g/l đường saccharose + g/l agar + 0,6 mg/l IBA) với tỉ lệ tạo rễ 100%, số rễ trung bình/chồi 5,8 sinh trưởng phát triển tốt Giá thể thích hợp để trồng sau in vitro cho Nưa trấu hun + đất với tỉ lệ sống 95,3% Các nghiên cứu cho thấy, khả nhân giống Nưa phương pháp nuôi mô đảm bảo để tạo bệnh nhân với số lượng lớn Tuy nhiên, giá thành nhân giống lại cao 1.4 Tình hình nghiên cứu trồng, thu hoạch chế biến Nưa giới Việt Nam 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 1.4.1.1 Nghiên cứu trồng Nưa Hầu hết phương thức trồng Nưa kết kinh nghiệm tích lũy từ nhiều hệ nơng dân nước Trung Quốc, Nhật Bản, Ấn Độ,.v.v Các ứng dụng dựa nghiên cứu khoa học điều áp dụng năm gần (O’Hair Asokan, 1986) Ở Nhật Bản, quy trình ni trồng Nưa truyền thống (“quy trình Jinenjo”), sử dụng từ 100 năm trước, Nưa trồng liên tục nhiều năm củ đạt trọng lượng để thu hoạch chế biến Bên cạnh đó, Nhật Bản trồng Nưa theo quy trình trồng trọt đại (“Hệ thống Uedama”), củ chia theo nhóm tuổi trồng tách biệt mà khơng trồng xen kẽ tán (Kurrihara, 1979; Douglas, 2006) Thông thường, chồi nuôi cấy với mật độ dày đặc vòng năm để tạo nguyên liệu nhân giống cho mùa vụ (Douglas, 2005) Sau thu hoạch, thân củ lớn bán số lại lưu giữ theo nhóm tuổi nhà kho thoáng mát qua tháng mùa đông, để trồng vào mùa xuân năm sau (Kurihara, 1979; Douglas, 2006) Mặc dù sản lượng củ cao so với phương pháp nuôi cấy “Jinenjo” truyền thống, phương pháp ghi nhận nhiều vấn đề gia tăng bệnh đất sâu bệnh hại, sinh trưởng phát triển chậm, chất lượng củ suy giảm sau từ năm trồng liên tục (Kurihara, 1979) 1.4.1.2 Các nghiên thu hoạch chế biến củ Nưa Thời điểm thu hoạch yếu tố quan trọng tác động đến sản lượng chất lượng củ Nghiên cứu cho thấy hàm lượng glucomannan củ thay đổi suốt mùa vụ đạt đỉnh trước rụng, trước gian đoạn ngủ đông (Liu, 1998; Bown, 2000) Thu hoạch sớm trước trưởng thành hồn tồn củ cản trở ngủ đông ban đầu ngăn sinh khối tán phân tách khỏi củ, cản trở phát triển cuối củ (Bown, 2000) Như nêu trên, Nhật Bản, củ lớn thu hoạch để bán vào cuối mùa thu; số lại giữ nguyên cánh đồng để tiếp tục sinh trưởng vào mùa tiếp theo, lưu trữ thành nhóm phân chia theo tuổi thọ nhà kho thống khí qua hết mùa đơng (Kurihara, 1979; Follett, 2002; Douglas, 2006) 1.4.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 1.4.2.1 Các nghiên cứu trồng Nưa Có số nghiên cứu trồng Nưa Việt Nam kể đến Nguyễn Thị Ngọc Huệ, Đinh Thế Lộc loài Nưa (Amorphophallus spp.) thời gian trồng hàng năm vào tháng tháng trồng muộn vào tháng 56 thời gian sinh trưởng ngắn không cho suất cao, vật liệu trồng củ lượng phân bón cho Nưa phân chuồng 1,5 lượng N:K:P với tỷ lệ 13:13:21 với mật độ trồng cây/1m2 Các nghiên cứu kỹ thuật trồng Nưa Việt Nam, đề tài “Nghiên cứu sinh trưởng Nưa chuông (Amorphophallus paeoniifolius) Thừa Thiên Huế” tác giả Võ Thị Mai Hương, Trần Vũ Ngọc Thi, Nguyễn Thị Thu Phương trường Đại học Khoa học – Đai học Huế Qua phân tích số liệu thu được, đề tài kết luận rằng, thời gian hình thành chột 1, chột chột khoảng 20 ngày, 55 ngày 83 ngày sau giâm củ Thời gian sinh trưởng chột khoảng 65 ngày, chột khoảng 87ngày, chột khoảng 78 ngày Chiều cao, đường kính chột chiều dài chột tăng nhanh vào khoảng 5-6 tuần đầu trình sinh trưởng Chiều cao chột đạt 39,9796,94cm, cao chột Đường kính chột đạt 2,48-3,92cm chiều dài đạt 40,82-71,12cm Năng suất lý thuyết chột đạt 149,2, cao suất chột (đạt 58,8 tấn/ha) 1.4.2.2 Các nghiên cứu thu hoạch chế biến củ Nưa Ở Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu ứng dụng Nưa đời sống hàng ngày Theo Nguyễn Văn Dư cs (2012), củ Nưa dùng cộng đồng dân tộc Mơng, Nùng hay Hà Nhì để chế biến “Mò gỉ” hay “Cò ký Thơ” Thời gian thu hoạch Nưa vào tháng 11, Nưa hoàn toàn lụi thời tiết vào mùa khơ, củ Nưa có tỉ lệ phần trăm khối lượng khô cao nhiều so với thời điểm thu hoạch vào tháng 9, Nưa lụi CHƢƠNG VẬT LIỆU, NỘI DUNG, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu Mẫu vật nghiên cứu loài Nưa mọc tự nhiên tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Tổng số mẫu vật nghiên cứu 159 mẫu vật phạm vi số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Mẫu tiêu làm bảo quản Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Viện hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam 2.1.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 2.1.2.1 Địa điểm nghiên cứu - Nghiên cứu điều tra thành phần, phân bố tri thức địa khai thác sử dụng lồi Nưa củ có glucomannan thực tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu nhân giống hữu tính nhân giống ni cấy mô tế bào thực khu thực nghiệm Hợp tác xã Linh Dược Sơn, tiểu khu 10, thành phố Hòa Bình, tỉnh Hòa Bình - Nghiên cứu nhân giống vơ tính củ thực xã Vân Hồ, huyện Vân Hồ, tỉnh Sơn La - Nghiên cứu trồng Nưa thực xã Vân Hồ, huyện Vân Hồ, tỉnh Sơn La - Cây Nưa trồng thực nghiệm xã Vân Hồ, huyện Vân Hồ, tỉnh Sơn La; xã Quyết Tiến, huyện Quản Bạ, tỉnh Hà Giang; xã Ngọc Sơn, huyện Lạc Sơn, tỉnh Hòa Bình 2.1.2.2 Thời gian nghiên cứu Từ tháng 12/2013 - 3/2017 2.2 Nội dung nghiên cứu - Điều tra đánh giá thành phần, phân bố tri thức địa lồi Nưa củ có glucomannan miền núi phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh trưởng phát triển lựa chọn lồi Nưa có hàm lượng glucomannan cao, triển vọng phát triển số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu số kỹ thuật nhân giống lồi Nưa có hàm lượng glucomannan cao triển vọng phát triển số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu trồng, phát triển Nưa konjac số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp kế thừa Trong trình nghiên cứu tác giả kế thừa kết nghiên cứu hệ thống đánh giá thành phần loài, tài liệu chuyên khảo nhân giống, trồng chế biến loài Nưa giới Việt Nam 2.3.2 Phương pháp điều tra thu thập mẫu vật Phương pháp điều tra thu thập mẫu vật theo Phương pháp nghiên cứu thực vật năm 2007 Cẩm nang nghiên cứu đa dạng sinh vật năm 1997 Nguyễn Nghĩa Thìn Cơng tác điều tra thu thập mẫu vật tiến hành 14 tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Đã tiến hành 14 chuyến điều tra 14 tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam là: Hòa Bình (Tân Lạc, Lạc Sơn, thành phố Hòa Bình), Sơn La (Vân Hồ, Thuận Châu, Mộc Châu), Phú Thọ (Tân Sơn), Điện Biên (Điện Biên), Lai Châu (Mường Tè), Lào Cai (Bát Xát), Yên Bái (Văn Chấn), Tuyên Quang (Sơn Dương), Thái Nguyên (Định Hóa), Hà Giang (Quản Bạ, Phó Bảng), Cao Bằng (Ngun Bình, Thạch An), Lạng Sơn (Tràng Định), Bắc Giang (Lục Ngạn), Bắc Kạn (Ngân sơn) 2.3.3 Phương pháp đánh giá thành phần loài Để nghiên cứu thành phần loài Nưa (Amorphophalluss spp.) miền núi phía Bắc Việt Nam, đề tài luận án sử dụng phương pháp hình thái so sánh dựa vào tài liệu nghiên cứu loài Nưa Võ Văn Chi (2012), Nguyễn Văn Dư (2005), Phạm Hồng Hộ (2003), v.v Cơng tác phân tích mẫu vật tiến hành phòng Tiêu thực vật, Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, tác giả tham khảo số mẫu vật loài Nưa internet số nước Trung Quốc, Nhật Bản, Thái Lan, v.v đặc biệt mẫu vật chuẩn (Typus) 2.3.4 Phương pháp lựa chọn lồi Nưa có triển vọng phát triển trồng số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Để trồng góp phần phát triển kinh tế miền núi phía Bắc Việt Nam, lồi Nưa lựa chọn phải lồi có giá trị kinh tế khả sinh trưởng phát triển tốt, phù hợp với điều kiện sinh thái vùng Vì vậy, tác giả lựa chọn theo tiêu chí sau: Tiêu chí 1: Lựa chọn loài theo hàm lượng glucomannan cao Mẫu củ loài Nưa thu thập sau xác định tên loài, tiến hành phân tích hàm lượng glucomannan theo phương pháp so màu Melinda Chua cộng (2012), với thuốc thử 3,5-dinitro salicylic acid bước sóng 550nm Viện hóa học hợp chất thiên nhiên Tiêu chí 2: Lựa chọn lồi theo triển vọng phát triển trồng số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Từ lồi lồi Nưa tìm thấy phân tích có glucomannan cao, tác giả tiến hành đánh giá, lựa chọn lồi có triển vọng phát triển trồng miền núi phía Bắc Đối với sản xuất nơng nghiệp để lựa chọn lồi có triển vọng phát triển trồng phải lồi có giá trị kinh tế khả sinh trưởng phát triển tốt Vì tác giả tiến hành đánh giá đặc điểm sinh trưởng phát triển, khả dễ nhân giống giá trị kinh tế loài để lựa chọn.Trong trình điều tra thực địa, dựa vào tài liệu nghiên cứu loài Nưa của Võ Văn Chi (2012), Nguyễn Văn Dư (2005), Phạm Hoàng Hộ (2003), v.v tác giả tiến hành đánh giá khả sinh trưởng, sinh sản, điều kiện sinh thái, từ lựa chọn loài phù hợp cho việc phát triển trồng miền núi Phía Bắc 2.3.5 Phương pháp điều tra tri thức địa khai thác sử dụng lồi Nưa số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Luận án sử dụng phương pháp điều tra tri thức địa theo phương pháp điều tra thực vật dân tộc học Gary J Martin (2002), Nhà xuất Nơng nghiệp phương pháp PRA có tham gia cộng đồng dân địa,phát phiếu điều tra, vấn (Bảng hỏi trình bày Phụ lục 2) 2.3.6 Phương pháp nghiên cứu nhân giống Nưa konjac Phương pháp sử dụng nhân giống theo giáo trình Modun sản xuất giống hạt (Bộ Nông nghiệp phát triển nông thôn, 2010) và bố trí thí nghiệm theo phương pháp bố trí thí nghiệm nông nghiệp Nguyễn Thị Lan Phạm Tiến Dũng - Học viện Nông nghiệp, Nhà xuất Hà Nội năm 2005 2.3.6.1 Phương pháp nghiên cứu nhân giống hạt a Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng thời điểm thu hái tới tỷ lệ nảy mầm hạt Nưa konjac Thí nghiệm bao gồm cơng thức, CTH1, CTH2, CTH3 sở thời gian thu hoạch khác dựa vào màu sắc trạng thái vỏ (độ quả) CTH1: Vỏ xanh, CTH2: Vỏ chín, CTH3: Vỏ chín nứt b Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng phương pháp bảo quản hạt tới tỷ lệ nảy mầm hạt Nưa konjac Thí nghiệm bố trí cơng thức sau: BQ1: Bảo quản lạnh 5oC, BQ2: Bảo quản khô chum, vại c Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng thời gian bảo quản hạt tới tỷ lệ nảy mầm Nưa konjac Thí nghiệm bố trí cơng thức sau: TGQ1: Thời gian bảo quản tháng, TGQ2: Thời gian bảo quản tháng, TGQ3: Thời gian bảo quản tháng d Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng phương pháp xử lý hạt giống tới tỷ lệ nảy mầm hạt sinh trưởng phát triển vườn ươm Thí nghiệm bố trí cơng thức sau: XLH1: Rửa hạt nước đem gieo, XLH2: Ngâm hạt nước ấm 40-50°C giờ, XLH3: Ngâm hạt nước ấm 40-50°C giờ, XLH4: Ngâm hạt nước ấm 40-50°C giờ, XLH5: Ủ giữ ẩm túi vải, hạt nứt nanh đem gieo 2.3.6.2 Phương pháp nghiên cứu nhân giống củ a Thí nghiệm 5: Ảnh hưởng phương pháp xử lý vết cắt củ tới tỷ lệ nảy chồi, tỷ lệ nhiễm bệnh, tỷ lệ sống Nưa konjac Thí nghiệm bố trí cơng thức sau: XVC1: Để vết cắt khô đem bảo quản, XVC2: Xử lý vết cắt tro bếp, XVC3: Xử lý vết cắt vôi bột, XVC4: Xử lý vết cắt xi măng b Thí nghiệm 6: Ảnh hưởng phương pháp bảo quản tới tỷ lệ nảy chồi, tỷ lệ nhiễm bệnh, tỷ lệ sống Nưa konjac Ảnh hưởng giá thể đến tỷ lệ sống Nưa konjac in vitro vườn ươm Để xác định ảnh hưởng thành phần giá thể trồng đến tỷ lệ sống sinh trưởng Nưa konjac in vitro đưa trồng thử nghiệm vườn ươm, tiến hành thử nghiệm với công thức từ GT1, GT2, GT3, GT4 lần lượ là 100% đất tầng B; 100% cát; 50% đất : 50% cát; 50% đất tầng B : 30% cát : 20 % trấu hun 2.3.7 Phương pháp nghiên cứu số kỹ thuật trồng Nưa konjac Phương pháp sử dụng nghiên cứu trồng Nưa konjac theo phương pháp bố trí thí nghiệm nơng nghiệp Nguyễn Thị Lan Phạm Tiến Dũng - Học viện Nông nghiệp, Nhà xuất Hà Nội năm 2005 Các thí nghiệm bố trí theo khối ngẫu nhiên đầy đủ (RCBD) với lần nhắc lại, lần nhắc lại diện tích 15m2, tiêu đo đếm 40 cây/CT Các nhân tố tiêu nghiên cứu bảo đảm tính đồng cơng thức thí nghiệm 2.3.7.1 Nghiên cứu ảnh hưởng khối lượng củ giống tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac Thí nghiệm bố trí với cơng thức sau: KL1: Củ giống khối lượng 10-15g, KL2: Củ giống khối lượng 70-100g, KL3: Củ giống khối lượng 300-350g 2.3.7.2 Nghiên cứu ảnh hưởng độ tàn che tới sinh trưởng phát triển Nưa Thí nghiệm bố trí với công thức sau: TC1: Độ tàn che 0%, TC2: Độ tàn che 20%, TC3: Độ tàn che 40 %, TC4: Độ tàn che 60%, TC5: Độ tàn che 80% 2.3.7.3 Nghiên cứu ảnh hưởng thời vụ trồng tới sinh trưởng phát triển Nưa Thí nghiệm bố trí với cơng thức sau: TV1: Trồng ngày 5/2, TV2: Trồng ngày 5/3, TV3: Trồng ngày 5/ 4, TV4: Trồng ngày 5/5 2.3.7.4 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng mật độ trồng tới sinh trưởng phát triển Nưa Thí nghiệm bố trí với công thức sau: MĐ1: Mật độ trồng 50x70cm = 28571 cây/ha, MĐ2: Mật độ trồng 50x50cm = 40000 cây/ha, MĐ3: Mật độ trồng 50x30cm = 66670 cây/ha 2.3.7.5 Nghiên cứu ảnh hưởng tổ hợp lượng phân NPK tới sinh trưởng phát triển Nưa Thí nghiệm bố trí với cơng thức sau: PB1: Khơng bón phân, PB2: 80 kg N + 30 kg P2O5 + 100 kg K2O/ ha, PB3: 100 kg N + 40 kg P2O5 + 120 kg K2O/ ha, PB4: 120 kg N + 50 kg P2O5 + 140 kg K2O/ ha, PB5: 140 kg N + 60 kg P2O5 + 160 kg K2O/ 2.3.7.6 Nghiên cứu tích lũy glucomannan củ Nưa konjac giai đọan sinh trưởng phát triển Thí nghiệm bố trí với thời điểm phân tích hàm lượng glucomannan sau: TL1: Hàm lượng glucomannan bảo quản, TL2: Hàm lượng glucomannan nảy chồi, TL3: Hàm lượng glucomannan phát triển cực đại, TL4: Hàm lượng glucomannan 2/3 chuyển sang màu vàng, TL5: Hàm lượng glucomannan lụi sau tháng 2.3.7.7 Trồng thử nghiệm Nưa konjac số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam 10 Đánh giá suất, hàm lượng glucomannan tính khả thi phát triển trồng Mơ hình trồng bố trí với mơ sau: MH1: Trồng xen Ngô xã Vân Hồ, huyện Vân Hồ, tỉnh Sơn La, MH2: Trồng tán Mận xã Vân Hồ, huyện Vân Hồ, tỉnh Sơn La, MH3: Trồng xen Ngô xã Quyết Tiến, huyện Quản Bạ, tỉnh Hà Giang, MH4: Trồng tán rừng xã Quyết Tiến, huyện Quản Bạ, tỉnh Hà Giang, MH5: Trồng bao tải tán vải xã Tiểu khu 10, thành phố Hòa Bình, MH6: Trồng tán rừng xã Ngọc Sơn, huyện Lạc Sơn, tỉnh Hòa Bình 2.3.8 Chỉ tiêu theo dõi số liệu phương pháp xác định 2.3.8.1 Theo dõi nhân giống hữu tính hạt - Tỷ lệ hạt nảy mầm (%) ( Số hạt nảy mầm/ số hạt gieo ươm), tỷ lệ sống (%) (số sống sau tháng nảy mầm/số nảy mầm) - Chiều cao (cm) (từ gốc đến điểm xẻ thùy lớn) - Tỷ lệ sâu bệnh hại xác định mắt thường, chụp ảnh hỏi ý kiến chuyên gia 2.3.8.2 Theo dõi nhân giống củ - Chiều cao (cm), đường kính (cm), khối lượng (g) củ Nưa - Tỷ lệ củ nảy chồi (%) ( Số hạt củ nảy chồi/ số củ trồng), tỷ lệ sống (%) (số sống sau tháng củ nảy chồi /số củ nảy chồi) - Chiều cao (cm) (từ gốc đến điểm xẻ thùy lớn) - Tỷ lệ sâu bệnh hại xác định mắt thường, chụp ảnh hỏi ý kiến chuyên gia 2.3.8.3 Theo dõi nhân giống nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.8.4 Theo dõi nghiên cứu trồng (1)- Chỉ tiêu sinh trƣởng phát triển Nƣa + Thời gian sinh trưởng (ngày): Tính từ trồng đến có 1/2 chuyển sang màu vàng + Chiều cao (cm): Đo từ giao điểm rễ với thân đến điểm sinh trưởng cao Chọn ngẫu nhiên 40 cây, 15 ngày đo chiều cao lần, tiến hành đo từ mặt đất đến điểm mút cùng, bắt đầu đo mọc 15 ngày - Kích thước lá: Sau thành thục tiến hành đo chiều dài chiều rộng Tiến hành theo dõi 40 đánh dấu 2.3.8.5 Theo dõi sâu bệnh hại Chuẩn đoán sâu bệnh hại theo hướng dẫn Cẩm nang chuẩn đoán bệnh Việt Nam, tác giả Lester W Burgess, Timothy E Knight, Len Tesoriero, Phan Thúy Hiền, xuất Trung tâm Nghiên cứu Nông nghiệp Quốc tế Australia (ACIAR), năm 2009 Đánh giá sâu bệnh hại xác định mắt thường, chụp ảnh hỏi ý kiến chuyên gia [80] 2.3.9 Xử lý số liệu Phương pháp bố trí thí nghiệm xử lý số liệu (tính số trung bình, phân tích Anova phân tích tương quan, v.v.) thu theo dõi tổng hợp xử lý phần mềm phân tích thống kê SPSS 20.0, phân tích nơng nghiệp IRRISTAT 5.0 phần mềm Excel 2010 11 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Thành phần loài, phân bố tri thức địa lồi Nƣa củ có glucomannan miền núi phía Bắc Việt Nam 3.1.1 Thành phần loài 3.1.1.1 Thành phần loài Kết điều tra thực địa thu thập mẫu giám định loài Nưa 14 tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam, tác giả tìm thấy loài Nưa bao gồm loài sau: Amorphophallus konjac K Koch, Amorphophallus corrugatus N E Br., Amorphophallus krausei Engl & Gehrm, Amorphophallus yunnanensis Engl & Gehrm, Amorphophallus yuloensis H Li, Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson, Amorphophallus hayi Hett N-a hay, Amorphophallus coaetaneus S Y Liu & S J Wei Trong số loài Nưa này, qua kết phân tích hàm lượng glucomannan theo phương pháp so màu Melinda Chua cộng (2012), với thuốc thử 3,5-dinitro salicylic acid bước sóng 550nm có lồi củ có chứa glucomannan Kết thể qua bảng 3.1 sau: Bảng 3.1 Thành phần lồi Nưa củ có glucomannan miền núi phía Bắc Việt Nam Hàm lƣợng Tên phổ glucomannan STT Tên khoa học thông bột Nƣa khô (%) Nưa konjac Amorphophallus konjac K Koch 44,97 Nưa đầu nhăn Amorphophallus corrugatus N E Br 28,6 Nưa krausei Amorphophallus krausei Engl & Gehrm 29,2 Amorphophallus yunnanensis Engl & Nưa vân nam 25,97 Gehrm Nưa yuloensis Amorphophallus yuloensis H Li 30,07 Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nưa chuông 6,53 Nicolson 3.1.1.2 Khóa định loại lồi Nưa củ có glucomannan tìm thấy miền núi phía Bắc Việt Nam Từ đặc điểm hình thái mơ tả lồi Nưa củ có glucomannan bao gồm: A konjac K Koch, A corrugatus N E Br., A krausei Engl & Gehrm, A yunnanensis Engl & Gehrm, A yuloensis H Li, A paeoniifolius (Dennst.) Nicolson Luận án xây dựng khóa định loại sau: Khố định loại lồi Amorphophallus củ có chứa glucomannan miền núi phía Bắc Việt Nam 1A Bơng mo có cuống ngắn mo mo 2A Bơng mo lớn; phần phụ màu nâu đỏ 1.Amorphophallus paeoniifolius 2B Bông mo nhỏ; phần phụ màu vàng nhạt 2.Amorphophallus yuloensis 1B Bơng mo có cuống dài mo 3A Mo ngắn mo, phần ống phiến phân biệt 3.Amorphophallus konjac 3B Mo dài mo, ống phiến không phân biệt rõ 12 4A Bơng nạc khơng có cuống Amorphophallus krausei 4B Bơng nạc có cuống 5A Phần phụ nhăn nheo .5 Amorphophallus corrugatus 5B Phần phụ nhẵn Amorphophallus yunnanensis 3.1.2 Đặc điểm phân bố 3.1.2.1 Đặc điểm phân bố lồi Nưa củ có glucomannan theo độ cao Kết điều tra phân bố lồi Nưa củ có glucomannan theo độ cao miền núi phía Bắc Việt Nam thể bảng 3.2 sau: Bảng 3.2 Phân bố lồi Nưa củ có glucomannan theo độ cao miền núi phía Bắc Việt Nam STT Tên lồi Độ cao so với mực nƣớc biển (m) Nưa konjac 800-1600 Nưa đầu nhăn 400-1000 Nưa krausei 600-1000 Nưa vân nam 400-800 Nưa yuloensis 800-1000 Nưa chng 0-300 Từ kết thu q trình điều tra thực địa cho thấy, loài Nưa củ có hàm lượng gluomannan cao phân bố vùng có độ cao lớn so với lồi củ có hàm lượng glucomannan thấp lồi phân bố rộng theo đai cao từ 400-1600m Cụ thể, loài Nưa konjac phân bố độ cao 800-1600m, loài Nưa yuloensis độ cao 800-1000m, loài Nưa krausei độ cao 600-1000m, loài Nưa Vân Nam sống độ cao 400-800m, loài Nưa đầu nhăn sống độ cao 400-1000m, với loài Nưa chuông phân bố độ cao thấp từ 0-300m so với mực nước biển Như vậy, thấy độ cao khác có khác biệt khí hậu, địa hình, sinh thái, v.v ảnh hưởng lớn đến tồn loài Nưa củ có glucomannan 3.1.2.2 Phân bố lồi Nưa củ có glucomannan theo sinh cảnh Từ kết điều tra phân bố lồi Nưa củ có glucomannan theo sinh cảnh, thấy lồi Nưa phân bố rộng sinh cảnh khác nhau, chúng xuất rừng, ven đường, nương rẫy vườn nhà Các loài Nưa chủ yếu sống nơi tán che, điều kiện khí hậu mát đất nước khơng bị ngập úng Trong số lồi lồi lồi Nưa konjac sống tán rừng, ven đường, vườn nhà dân, v.v với độ che phủ khác thường từ 20-70% tùy nhiệt độ vùng loài Nưa yuloensis, Nưa krausei tìm thấy nơi có tán có độ che phủ lớn thường 40-70% khu vực rừng trung bình rừng rậm lồi Nưa chuông, Nưa đầu nhăn, Nưa vân nam sống tán rừng thưa đặc biệt lồi Nưa chng phát triển tốt nơi có tán rừng khơng có tán rừng che 3.1.2.3 Phân bố lồi Nưa củ có glucomannan theo hướng phơi Kết nghiên cứu cho thấy, lồi Nưa chng có phân bố theo nhiều hướng phơi, điều chứng tỏ loài Nưa chng thích nghi tốt với thay đổi nhiệt độ cường độ chiếu sáng mặt trời lồi lại có hướng phơi theo hướng đặc trưng hơn, chủ yếu hướng phơi nhận lượng ánh sáng mặt trời Loài Nưa đầu nhăn Nưa vân nam có hướng phơi nhiều với hướng Đ-N, Đ-B, 13 T-N, ba hướng phơi hướng nhận ánh sáng mặt trời hướng Đ-B, Đ-N, T-N, T-B Loài Nưa konjac, Nưa yuloensis, Nưa krausei hướng phơi theo hướng Đ-N, Đ-B, hướng phơi nhận ánh sáng mặt trời nhất, nhiệt độ trung bình khu vực thấp 3.1.3 Sơ đồ phân bố lồi Nưa củ có glucomannan 3.1.3.1 Sơ đồ phân bố loài Nưa konjac Ở miền núi phía Bắc Việt Nam lồi phân bố Ý Tý, Bát Xát - Lào Cai Quản Bạ, Phó Bảng-Hà Giang Sự bắt gặp loài với tần xuất lớn rừng, ven đường, nương rẫy hay vườn nhà dân, nơi có tán che Sự phân bố đặc tính sinh thái lồi phù hợp với vùng có khí hậu mát, độ cao lớn từ 800- 1600m 3.1.3.2 Sơ đồ phân bố lồi Nưa chng Lồi Nưa chng lồi phân bố phổ biến miền núi phía Bắc Việt Nam Các tỉnh xuất gồm Hòa Bình (Tân Lạc, Lạc Sơn, thành phố Hòa Bình), Sơn La (Vân Hồ, Thuận Châu, Mộc Châu), Phú Thọ (Tân Sơn), Yên Bái (Văn Chấn), Tuyên Quang (Sơn Dương), Thái Nguyên (Định Hóa), Cao Bằng (Nguyên Bình, Thạch An), Lạng Sơn ( Tràng Định), Bắc Giang (Lục Ngạn), Bắc Kạn (Ngân Sơn) Chúng có phân bố trải rộng khu vực với nhiều sinh cảnh hướng phơi khác nhau, độ cao 0-600m so với mực nước biển Điều cho thấy đặc tính sinh thái loài phù hợp với nhiều sinh cảnh khác Trên tuyến điều tra tần xuất bắt gặp loài lớn 3.1.3.3 Sơ đồ phân bố loài Nưa đầu nhăn Loài Nưa đầu nhăn loài phân bố tỉnh xuất gồm Hòa Bình (Tân Lạc, Lạc Sơn, thành phố Hòa Bình), Sơn La (Vân Hồ, Thuận Châu, Mộc Châu), Phú Thọ (Tân Sơn), Tuyên Quang (Sơn Dương), Lạng Sơn ( Tràng Định) Chúng có phân bố trải rộng khu vực với nhiều sinh cảnh hướng phơi khác Điều cho thấy đặc tính sinh thái loài phù hợp với nhiều sinh cảnh khác Trên tuyến điều tra tần xuất gặp loài khơng lớn, khả sinh sản lồi hạn chế 3.1.3.4 Sơ đồ phân bố loài Nưa krausei Loài Nưa krausei phân bố tỉnh Sơn La (Vân Hồ, Thuận Châu, Mộc Châu), Cao Bằng (Nguyên Bình, Thạch An) Ở tuyến nghiên cứu tần xuất gặp lồi thấp Chúng có vị trí co cụm số vị trí khu vực điều tra Điều đặc điểm sinh thái lồi phù hợp với sinh cảnh có độ che bóng lớn 3.1.3.5 Sơ đồ phân bố loài Nưa vân nam Loài Nưa vân nam phân bố tỉnh gồm Hòa Bình (Tân Lạc, Lạc Sơn, thành phố Hòa Bình), Sơn La (Vân Hồ, Thuận Châu, Mộc Châu), Cao Bằng (Nguyên Bình, Thạch An), Bắc Kạn (Ngân Sơn) Chúng có phân bố trải rộng khu vực với nhiều sinh cảnh hướng phơi khác Trên tuyến điều tra tần xuất gặp lồi khơng lớn, thấy loài rừng thưa, rừng bụi, ven đường, sườn đồi hay nương 3.1.3.6 Sơ đồ phân bố loài Nưa yuloensis Loài Nưa yuloensis phân bố tỉnh Sơn La (Vân Hồ, Thuận Châu, Mộc Châu), Điện Biên (Tuần Giáo) Ở tuyến nghiên cứu tần xuất gặp loài tương đối lới Chúng co cụm số vị trí khu vực điều tra Điều đặc điểm sinh thái lồi phù hợp với sinh cảnh có độ che bóng lớn 14 3.1.4 Tri thức địa khai thác sử dụng loài Nƣa số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam 3.1.4.1 Khai thác củ Nưa số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam - Thời gian thu hoạch (khai thác) củ Nƣa Với Nưa trồng, có chuyển màu vàng gần hết mùa sinh trưởng khai thác, khoảng thời gian từ tháng đến tháng 11 hàng năm - Dụng cụ Với quy mô nhỏ, địa hình lại khó khăn, người dân khai thác dùng trâu bò, cày, cuốc với dụng cụ để chứa gùi, thúng để vận chuyển - K thuật thu hoạch Với việc khai thác củ tự nhiên, củ Nưa thường mọc tán rừng, sườn dốc nên sử dụng thuổng, cuốc để đào Chỉ lấy củ to củ nhỏ người dân vùi lại để sang năm khai thác tiếp - Bảo quản củ Nƣa Có hai phương pháp thường nông dân sử dụng vùi đất ẩm mát nương bảo quản giàn thoáng mát Sau khai thác củ đủ tiêu chuẩn làm giống, chọn lựa, rũ đất mang củ giống nhà, xếp nơi thoáng, để vài ngày cho Nưa khơ vỏ để lên giàn che có mái che điều kiện ánh sáng Trong thời gian bảo quản thường xuyên kiểm tra loại bỏ củ bị thối - Sơ chế củ Nƣa Sau khai thác loại bỏ bớt đất rễ, đem bảo quản kho, trước đem chế biến, khoai rửa sơ để loại đất cát, chất bẩn vi sinh vật vỏ 3.1.4.2 Chế biến củ Nưa số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Ở Quản Bạ, tỉnh Hà Giang; Y Tý, tỉnh Lào Cai; Nguyên Bình tỉnh Cao Bằng, bột củ Nưa người dân chế biến thành ăn đậu phụ, mỳ xào, trộn cơm Quá trình chế biển đơn giản thủ công Từ lát cắt củ Nưa khô, người dân tiến hành nghiền thành bột máy cối xay Bột sau ngâm nước lọc với tro bếp Sau lọc với tro bếp tùy ăn làm đậu hay mỳ để tiếp tục chế biến 3.2 Lồi Nƣa củ chứa glucomannan có triển vọng phát triển trồng số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Từ q trình điều tra thực địa, nghiên cứu tài liệu đặc điểm sinh trưởng phát triển đánh giá hàm lượng glucomannan lồi Nưa miền núi phía Bắc Việt Nam, số đặc điểm tổng hợp Bảng 3.11 sau: 15 Bảng 3.11 Đặc điểm sinh trưởng, phát triển lồi Nưa củ có glucomannan miền núi phía Bắc Việt Nam Thời gian Khối Số lƣợng Hàm lƣợng sinh Sinh sản lƣợng củ củ glucomannan STT Tên lồi trƣởng hữu tính năm củ năm bột năm (hạt) tuổi (g) tuổi Nƣa khô (%) (ngày) Nưa konjac 158-175 600-1000 5-7 44,97 Nưa đầu 150-160 200-400 0 28,6 nhăn Nưa krausei 153-162 600-800 0 29,2 Nưa vân 145-162 200-300 0 25,97 nam Nưa 147-158 200-300 0 30,07 yuloensis Nưa chuông 154-169 400-600 5-6 6,53 Từ kết bảng 3.11 cho thấy, lồi Nưa konjac có khả sinh trưởng phát triển tốt nhất, củ sau năm trồng khối lượng củ thu từ 600-1000g, củ sinh từ củ tuổi 5-7 củ Như vậy, lồi Nưa konjac lồi có triển vọng phát triển trồng, với củ sau năm trồng khối lượng củ mẹ thu từ 6001000g, củ sinh từ củ tuổi 5-7 củ hàm lượng glucomannan 44,97% 3.3 Nghiên cứu nhân giống loài Nƣa konjac Việt Nam 3.3.1 Nhân giống hữu tính lồi Nưa konjac 3.3.1.1 Ảnh hưởng thời điểm thu hái tới tỷ lệ nảy mầm hạt Kết nghiên cứu cho thấy, có khác rõ tỷ lệ nảy mầm thời điểm thu hái khác từ vỏ xanh, vỏ chín vỏ chín nứt Kết thí nghiệm cho thấy thời điểm thu hái vỏ chín cơng thức CTH2 cho tỷ lệ nảy mầm mầm hạt cao 64,67%, công thức CTH3 vỏ chín nứt, cho tỷ lệ nảy mầm thứ với tỷ lệ nảy mầm 49,33%, công thức CTH1 vỏ xanh cho tỷ lệ nảy mầm thấp 17,33% 3.3.1.2 Ảnh hưởng phương pháp bảo quản hạt tới tỷ lệ nảy mầm hạt Kết nghiên cứu cho thấy, có khác biệt rõ tỷ lệ nảy mầm hạt Nưa konjac hai phương pháp bảo quản lạnh 50C (BQ1) bảo quản khô chum, vại Cụ thể, với số hạt nảy mầm phương pháp bảo quản lạnh cho số hạt nảy mầm 33,33 hạt đạt tỷ lệ 66,67 %, bên cạnh với phương pháp bảo quản khơ chum, vại tỷ lệ nảy mầm đạt 34 % với 17 hạt nảy mầm Từ số liệu thấy với phương pháp bảo quản lạnh 50C cho hiệu tốt với phương pháp bảo quản hạt Nưa konjac điều kiện chum vại Nguyên nhân nguồn gốc Nưa konjac sống vùng có khí hậu nhiệt đới, qua mùa đông lạnh nên hạt bảo quản điều kiện chum vại dễ bị tổn thương độ ẩm khơng khí thấp nhiệt độ q lạnh gây ảnh hưởng tới phát triển phôi hạt 16 3.3.1.3 Ảnh hưởng thời gian bảo quản hạt tới tỷ lệ nảy mầm hạt Có khác biệt rõ tỷ lệ nảy mầm với khoảng thời gian bảo quản khác nhau, điều chứng tỏ thời gian bảo quản hạt Nưa konjac ảnh hưởng tới tỷ lệ nảy mầm hạt loài Trong bảng ta thấy, thời gian bảo quản tháng cho tỷ lệ nảy mầm cao 72,77 %, thời gian bảo quản tháng tỷ lệ nảy mầm hạt giảm xuống 68,33%, sau tháng bảo quản tỷ lệ nảy mầm hạt giảm nhanh 45% Như thời gian bảo quản dài, chất lượng hạt Nưa đặc biệt sau tháng bảo quản 3.3.1.4 Ảnh hưởng phương pháp xử lý hạt giống tới tỷ lệ nảy mầm hạt sinh trưởng phát triển vườn ươm Phương pháp không xử lý cho kết nhất, biện pháp tăng thời gian xử lý hạt lên giờ, giảm thời gian xử lý hạt xuống không xử lý hạt ủ gieo vào cát cho kết so với việc ngâm hạt nước ấm 40-50°C giờ, ủ rửa chua sau gieo hạt vào cát có chiều cao khoảng 5- 10 cm chuyển vào bầu đất cho tỷ lệ nảy mầm, số sống sinh trưởng vườn ươm tốt 3.3.2 Nhân giống loài Nưa konjac củ 3.3.2.1 Ảnh hưởng phương pháp xử lý vết cắt củ tới tỷ lệ nảy chồi củ Xử lý vết cắt củ xi măng cho hiệu xử lý tốt (XVC4), có tỷ lệ nảy chổi cao, số bị nhiễm bệnh thấp tỷ lệ sống cao so với phương pháp xử lý tro bếp, vôi bột không xử lý để vết cắt tự khô Do Nưa konjac củ có hàm lượng glucomannan cao nên vết cắt củ không xử lý củ dễ bị nhiễm khuẩn gây thối củ ảnh hưởng tới tỷ lệ nảy chồi tỷ lệ sống củ Đối với phương pháp xử lý tro bếp cho kết cao với việc không xử lý, thấp so với việc sử dụng vôi bột xin măng, tro bếp có tính diệt khuẩn khả làm khơ nhanh vết cắt, bao kín vết cắt thấp so với vôi bột xi măng nên tỷ lệ nảy chồi cao số củ bị nhiễm lớn dẫn đến tỷ lệ sống thấp Đối với phương pháp xử lý vết cắt củ vôi bột, số củ bị nhiễm bệnh thấp xử lý củ xi măng, phươn pháp tỷ lệ nảy chồi tỷ lệ củ sống lại thấp xử lý xi măng, xử lý vôi củ dễ bị khô gây chết củ 3.3.2.2 Ảnh hưởng phương pháp bảo quản củ giống tới tỷ lệ nảy chồi, tỷ lệ nhiễm bệnh, tỷ lệ sống Kết cho thấy, phương pháp bảo quản, phương pháp bảo quản kho lạnh cho chất lượng củ giống tốt nhất, sau đến việc bảo quản cách vùi cát sạch, đất làm giàn để bảo quản củ 3.3.3 Nghiên cứu nhân giống Nưa konjac kỹ thuật nuôi cấy mơ tế bào 3.3.3.1 Ảnh hưởng hóa chất thời gian khử trùng đến khả tạo mẫu in vitro Công thức khử trùng tốt cho phôi hạt sử dụng Javen 60% thời gian 12 phút cho tỷ lệ mẫu tỷ lệ mẫu tái sinh đạt 100%, sau 15 ngày mẫu nuôi cấy nảy chồi 3.3.3.2 Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến khả tái sinh chồi in vitro 17 Kết cho thấy, cơng thức mơi trường MS mẫu cấy có khả tái sinh tốt (đạt 91,85%), số chồi trung bình/mẫu đạt 2,45 chất lượng chồi tốt (chồi mập, khỏe mạnh, xanh đậm, phát triển nhanh) 3.3.3.3 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến khả tái sinh chồi in vitro Kết cho thấy, công thức môi trường CT4 cho tỷ lệ mẫu tái sinh chồi cao mg/l BAP (đạt 100%), tỷ lệ mẫu tái sinh chồi thấp công thức CT0 đối chứng (0 mg/l BAP), đạt 54,81% Các công thức CT1, CT2, CT3, CT5 CT6 cho tỷ lệ mẫu tái sinh đạt 74% Từ kết thu khẳng định, BAP nồng độ khác có ảnh hưởng mạnh mẽ tới khả phát sinh chồi mẫu cấy Khi tăng hàm lượng BAP cao mg/l BAP thí nghiệm sau số mẫu tái sinh chồi chiều cao chồi giảm, đồng thời thấy xuất khối mô sẹo lớn 3.3.3.4 Ảnh hưởng nồng độ BAP Kinetin đến khả tái sinh chồi Nưa konjac in vitro Kết cho thấy, khác ảnh hưởng tổ hợp Kinetin BAP đến khả tái sinh chồi so với ảnh hưởng riêng rẽ BAP Sau nuôi cấy tuần, công thức CT7, với môi trường MS + mg/l BAP + 0,2 mg/l Kinetin cho tỷ lệ mẫu tái sinh chồi cao (đạt 100%), số chồi trung bình/mẫu cấy 5,22, chiều cao trung bình chồi đạt 3,84 cm 3.3.3.5 Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng đến khả rễ chồi in vitro Kết cho thấy, sau tuần nuôi cấy môi trường rễ có bổ sung đầy đủ chất dinh dưỡng, chất điều hòa sinh trưởng hàm lượng đường khác cho kết chồi rễ với tỷ lệ khác Mẫu nuôi cấy công thức 1/2 MS + g/l Agar + 0,5 mg/l IBA + 14 g/l sucrose cho hiệu cao (đạt 100%), số lượng rễ trung bình/chồi đạt 4,98, chiều dài trung bình rễ đạt 2,67 cm thời gian chồi bắt đầu rễ ngày, chất lượng rễ tốt (rễ mập, khỏe mạnh), khả đâm xuyên mạnh, hình thành mơ sẹo 3.3.3.6 Ảnh hưởng nồng độ IBA đến khả rễ chồi in vitro Kết cho thấy, cơng thức mơi trường kích thích rễ tốt mơi trường 1/2MS + 8g/l Agar + 14 g/l Sucrose + 0,4 mg/l IBA 3.3.3.7 Ảnh hưởng giá thể đến tỷ lệ sống Nưa konjac in vitro vườn ươm Kết cho thấy, công thức giá thể 50% đất + 30% cát + 20% trấu hun cho tỷ lệ sống trung bình sau tuần trồng cao (đạt 94,07%), tiếp cơng thức 50% đất + 50% cát 100% đất tầng B, tỷ lệ sống đạt 63,7 78,52% Với công thức 100% cát tỷ lệ sống đạt thấp (51,85%) 3.4 Nghiên cứu trồng Nƣa konjac Việt Nam 3.4.1 Ảnh hưởng khối lượng củ giống tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac Qua kết nghiên cứu, kết phân tích số liệu cho thấy, có khác sinh trưởng, phát triển khối lượng củ giống Nưa konjac khác Củ khối lượng lớn khả sinh trưởng, phát triển cao Củ khối lượng 300-350 g (Củ trồng năm thứ sau tách từ mẹ) có khả sinh trưởng lớn nhất, sau củ 70-100g (củ trồng năm thứ sau tách từ mẹ) thấp củ tác từ mẹ trồng năm thứ có khối lượng 10-15g Số liệu thu với khối lượng củ giống 10-20g cho kết thấp nhất, sau vụ trồng thu hoạch củ có khối lượng 82g, số củ trung bình củ, khối 18 lượng củ 9,33g, suất trồng 40,27 tạ/ha Củ giống khối lượng 70-100g cho kết cao thứ hai, sau vụ trồng thu hoạch củ có khối lượng 383,33g, số củ trung bình 4,67 củ, khối lượng củ 15,67g, suất trồng 159,60 tạ/ha Củ giống khối lượng lớn 300-350g cho kết cao nhất, sau vụ trồng thu hoạch củ có khối lượng 849,67g, số củ trung bình 5,67 củ, khối lượng củ 16g, suất trồng 346 tạ/ha Kết phân tích hàm lượng glucomannan thu hoạch cho thấy công thức khối lượng củ giống khác cho hàm lượng glucomannan khác Trong củ giống 70-100g cho kết thấp nhất, củ có hàm lượng glucomannan 35,47 Hàm lượng glucomannan đánh giá củ thu trồng từ giống củ công thức KL2 KL3 có hàm lượng glucomannan củ gần công thức KL2 hàm lượng glucomannan 45,20% công thức KL3 hàm lượng glucomannan củ 45,46% Như vậy, thấy để trồng Nưa konjac lấy củ chế biến bột glucomannan cần trồng năm từ củ hiệu kinh tế cao trồng củ có khối lượng khoảng 70-100g khối lượng củ giống cho mức tăng trưởng cao hàm lượng tương đương với tuổi củ lớn Củ trồng năm sau thu hoạch củ đem chế biến có khối lượng tử 300-500g, suất 159,6 tạ/ha hàm lượng glucomannan củ 45,20% 3.4.2 Ảnh hưởng độ che sáng tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac Qua kết nghiên cứu kết phân tích số liệu cho thấy, có ảnh hưởng lớn độ tàn che tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac Ở công thức TC1 (độ tàn che 0%) Nưa konjac có kích thước chiều cao nhỏ (dài 42,33cm, rộng 39,03cm, cao 50,57cm), , thời gian sinh trưởng ngắn 126 ngày Khi độ tàn che tăng lên từ 20%, 40%, 60% tương đương với cơng thức TC2, TC3 TC4 khả sinh trưởng thời gian sinh trưởng tăng lên Công thức TC2 Nưa konjac có kích thước chiều cao (dài 44,90cm, rộng 41,13cm, cao 56,63cm), thời gian sinh trưởng 147 ngày; Cơng thức TC3 Nưa konjac có kích thước chiều cao (dài 45,73cm, rộng 43,97cm, cao 57,40cm), thời gian sinh 154 ngày; Công thức TC4 Nưa konjac có kích thước chiều cao (dài 49,97cm, rộng 44,33cm, cao 62,1 cm), thời gian sinh trưởng 174 ngày Tuy nhiên, tăng độ tàn che lên 80% cơng thức TC5 khả sinh trưởng giảm xuống thời gian sinh trưởng ngắn hơn, điều thiếu ánh sáng để quang hợp phát triển Từ kết tổng hợp cho thấy, công thức TC4 với độ tàn che 60% cho suất cao (160,40tạ/ha) hàm lượng glucomannan cao 46,07% Công thức TC1 cho suất thấp (87,20 tạ/ha) hàm lượng glucomannan thấp (35,70 %) Các cơng thức lại TC2, TC3, TC5 so với cơng thức TC4 suất thấp hàm lượng glucomannan củ gần tương đương 3.4.3 Ảnh hưởng thời vụ trồng tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac Kết nghiên cứu tổng hợp cho thấy, thời vụ trồng cho kết sinh trưởng cao TV3 (trồng 5/4) với thời gian sinh trưởng 172 ngày, kích thước (dài 47,97 cm; rộng 42,33 cm chiều cao 61,77 cm) Các cơng thức có thời vụ trồng sớm TV1 (trồng 5/2) TV2 (trồng 5/3) cho thời gian sinh trưởng kích thước thấp không nhiều, công thức TV1 thời gian sinh trưởng 168 ngày, kích thước (dài 44,63 cm; rộng 38,50cm) chiều cao 52,23 cm); TV2 thời gian 19 sinh trưởng 168 ngày, kích thước (dài 44,68 cm, rộng 41,33 cm) chiều cao 55,63 cm) Các công thức trồng trước đến khoảng 10/4 nảy chồi nên trình vùi đất bị nhiễm sâu bệnh ảnh hưởng điều kiện thời tiết nên có ảnh hưởng tới sinh trưởng Tuy nhiên ảnh hưởng không lớn Công thức TV4 trồng vào 5/4, trồng muộn nên thời gian sinh trưởng ngắn cho kết sinh trưởng thấp với thời gian sinh trưởng 149 ngày, kích thước (dài 42,68 cm, rộng 38,03 cm) chiều cao 51,77 cm) Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời vụ trồng tới suất hàm lượng glucomannan Nưa konjac cho thấy, thời vụ trồng công thức TV3 cho suất củ cao 160,27 tạ/ hàm lượng glucomannan 45,3% Các công thức trồng sớm TV1 TV2 cho suất thấp 151,8 tạ/ha 155,2 tạ/ha Về hàm lượng glucomannan công thức TV1 TV2 TV3 khác không đáng kể CT4 suất thấp đạt 111,33 tạ/ha; hàm lượng glutamannan đạt 41,63% Khác với công tức TV2 TV1 trồng Nưa konjac muộn tháng so với cơng thức TV3 suất giảm lớn đạt 111,33 tạ/ha hàm lượng glucomannan giảm theo đạt 41,63% 3.4.4 Ảnh hưởng mật độ trồng tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac Kết tổng hợp phân tích cho thấy có ảnh hưởng mật độ trồng tới sinh trưởng, phát triển Nưa konjac Đối với sinh trưởng Nưa konjac cho thấy, công thức MĐ1 mật độ trồng 28571 cây/ha (50x70cm), sinh trưởng tốt nhất, kích thước lớn (dài 48,30 cm, rộng 38,33 cm), chiều cao 62,10 cm) thời gian sinh trưởng 172 ngày Công thức MĐ2 mật độ trồng 40000 cây/ha (50x50cm), sinh trưởng gần tương đương với MĐ1 với chiều dài 47,17 cm, rộng 38,13 cm, chiều cao 58,86 cm) thời gian sinh trưởng 170 ngày Tuy nhiên, tăng mật độ trồng lên 66670 cây/ha (50x30cm), sinh trưởng nhiều so với hai mật độ trước, kích thước (dài 42,97cm, rộng 35,17 cm), chiều cao 49,43 cm) thời gian sinh trưởng 171 ngày Sự ảnh hưởng mật độ trồng tới suất hàm lượng glucomannan Nưa konjac thấy rõ, công thức MĐ1 mật độ trồng 28571 cây/ha (50x70cm), khối lượng củ 418g hàm lượng glucomannan 46,27% cao nhất, suất lại đạt 124,09 tạ/ha mật độ trồng thưa Công thức MĐ2 mật độ trồng 40000 cây/ha (50x50cm), cho khối lượng củ 398g, suất 165,60 tạ/ha, hàm lượng glucomannan 46,23% Với MĐ3, tăng mật độ trồng lên 66670 cây/ha (50x30cm), cho khối lượng củ giảm xuống thấp 284,33g, với mật độ trồng dày nên suất mật độ tính 1ha cao 197,79 tạ/ha, hàm lượng glucomannan 43,40% Từ kết thấy mật độ trồng thích hợp cơng thức trồng Nưa konjac với kích thước củ giống 80-100g 40000 cây/ha (50x50cm) Với mật độ trồng đảm bảo chất lượng glucomannan hiệu kinh tế cao so với mật độ trồng 28571 cây/ha (50x70cm) mật độ trồng lên 66670 cây/ha (50x30cm) 3.4.5 Nghiên cứu ảnh hưởng tổ hợp lượng phân NPK tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac 20 Kết phân tích tổng hợp cho thấy,có ảnh hưởng hàm lượng phân bón NPK tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac Kết thí nghiệm cho thấy, với lượng phân bón tăng dần kích thước Nưa konjac tăng dần từ PB1 tới PB5 Công thức PB1 khơng sử dụng phân bón cho kết sinh trưởng thấp (dài 33,97 cm, rộng 31,17 cm, cao 42,43 cm) Các công thức với lượng phân tăng dần với hàm lượng N từ 80-140kg/ha, hàm lượng P từ 30-60 kg/ha hàm lượng K từ 100-160 kg/ha ta thấy kích thước tăng dần Cơng thức PB2 có kích thước là: chiều dài 41,63 cm, rộng 35,33 cm, cao 52,10 cm.Cơng thức PB3 có kích thước chiều dài 46,30 cm, rộng 44,33 cm, cao 56,43 cm Cơng thức PB4 có kích thước chiều dài 47,83 cm, rộng 45,13 cm, cao 62,86 cm Cơng thức PB5 có kích thước lớn với chiều dài 49,17 cm, rộng 47,80 cm chiều cao 66,53 cm Kết theo dõi ảnh hưởng tổ hợp lượng phân NPK tới suất hàm lượng glucomannan củ Nưa konjac tổng hợp bảng 3.5 cho thấy, khơng sử dụng phân bón cơng thức PB1 cho suất thu thấp đạt 111,87 tạ/ha với hàm lượng glucomannan 41,4% Khi tăng hàm lượng phân bón lên cơng thức PB2 PB3 suất hàm lượng glucomannan tăng lên theo suất 135,33 tạ/ha, 167,33 tạ/ha hàm lượng glucomannan 43,57%, 45,9% Ở công thức PB4 lượng NPK 120 kg N + 50 kg P2O5 + 140 kg K2O cho suất cao với 179,87 tạ/1ha hàm lượng glucomannan 46,73% Khi tăng lượng phân bón lên cơng thức PB5 với 140 kg N + 60 kg P2O5 + 160 kg K2O suất đạt 140,53tạ/ha hàm lượng glucomannan 44,57%, giảm so với công thức PB4 Sự giảm suất với lượng phân đạm lớn, sinh trưởng tốt nên khả chống chịu sâu bệnh điều kiện tự nhiên đi, dẫn đến hay bị bệnh đổ bão nên ảnh hưởng tới suất chất lượng glucomannan Như vậy, công thức PB4 lượng NPK 120 kg N + 50 kg P2O5 + 140 kg K2O công thức bón phân tốt với suất củ 179 tạ/1ha hàm lượng glucomannan 46,73% 3.4.6 Sự tích lũy glucomannan củ Nưa konjac giai đọan sinh trưởng phát triển Qua kết phân tích, tổng hợp cho thấy thời điểm cho hàm lượng glucomannan cao 2/3 Nưa chuyển sang màu vàng với hàm lượng glucomannan phân tích 45,73% Các thời điểm khác hàm lượng glucomannan thấp Ở giai đoạn bảo quản hàm lượng glucomannan 44,07%; Nưa nảy chổi hàm lượng glucomannan 37,57%; hàm lượng glucomannan thấp đạt 23,73% giai đoạn Nưa phát triển cực đại (xòe hồn tồn) Ở giai đoạn sau Nưa lụi tháng hàm lượng glucomannan đạt 43,57% Như vậy, thời điểm thu hoạch Nưa cho hàm lượng glucomannan tốt 2/3 chuyển thành màu vàng 3.4.7 Trồng thử nghiệm Nưa konjac số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam 21 Từ phân tích tổng hợp số liệu cho thấy, mơ hình MH2 (Trồng tán Mận xã Vân Hồ, huyện Vân Hồ, tỉnh Sơn La ) MH4 (Trồng tán rừng xã Quyết Tiến, huyện Quản Bạ, tỉnh Hà Giang) cho suất củ hàm lượng glucomannan lớn đạt 91,22 tạ/1ha, glucomannan 46,1% 91,24 tạ/ha, glucomannan 46,5% Năng suất hai mơ hình cao trồng vùng có khí hậu mát với độ cao so với mặt nước biển 918 874m Hơn hai khu vực trồng che bóng tán rừng vườn Mận Tiếp theo công thức MH3, trồng xen Ngô xã Quyết Tiến, huyện Quản Bạ, tỉnh Hà Giang với suất 74,51 tạ/ha hàm lượng glucomannan 43,1% Hai cơng thức có suất hàm lượng glucomannan thấp MH6 (Trồng tán rừng xã Ngọc Sơn, huyện Lạc Sơn, tỉnh Hòa Bình), MH5 (Trồng bao tải tán vải xã Tiểu khu 10, thành phố Hòa Bình), 19,11 tạ/1ha, glucomannan 37,2% 12,86 tạ/ha, glucomannan 33,6% Các mơ hình MH5 MH6 trồng thành phố Hòa Bình xã Ngọc Sơn, huyện Lạc Sơn, Hòa Bình, với độ cao so với mực nước biển thấp, mùa hè nóng lên tới 35400C độ ẩm khơng khí cao, nên vào mùa hè nhiệt độ nóng liên tục 300C dẫn đến yếu mắc bệnh gây chết hàng loạt Số lượng chết lên tới 50-80% Đối với mơ hình trồng xen Ngô MH1 MH3 Sơn La Hà Giang Có suất hàm lượng glucomannan củ thấp Nưa Konjac sinh trưởng hàng năm khoảng 5-6 tháng thời vụ Ngơ ngắn 3-4 tháng, thu hoạch Ngơ vào tháng Nưa khơng che bóng làm ảnh hưởng tới sinh trưởng phát triển Nưa konjac 3.4.8 Nghiên cứu sâu bệnh hại Nưa konjac Việt Nam 3.4.8.1 Bệnh hại Trong trình nghiên cứu trồng trọt Nưa konjac Việt Nam,một nguyên nhân làm giảm suất bệnh hại Trong số loại bệnh hại chủ yếu nước ta, đáng ý bệnh chủ yếu gây hại đến trồng bao gồm vi khuẩn erwinia mềm thối (Erwinia carotovora) bệnh nấm bệnh đốm (nấm Fusarium solani) Pythium (các loài Pythium) 3.4.8.2 Sâu hại Qua điều tra, theo dõi sâu hại Nưa ít, đơi gặp sâu xám đen cắn KẾT LUẬN & KIẾN NGHỊ Kết luận: 1/ Thành phần lồi Nưa củ có chứa glucomannan miền núi phía Bắc Việt Nam đa dạng với loài bao gồm: Amorphophallus konjac K Koch, Amorphophallus corrugatus N E Br., Amorphophallus krausei Engl & Gehrm, Amorphophallus yunnanensis Engl & Gehrm, Amorphophallus yuloensis H Li, Amorphophallus paeoniifolius (Dennst.) Nicolson Nưa konjac có hàm lượng glucomannan cao bột Nưa khô 44,97% Tiếp theo Nưa yuloensis, Nưa đầu nhăn, Nưa krausei Nưa vân nam 30,7%; 28,6%; 29,2%; 25,97% Nưa chuông thấp (6,53%) Các loài phân bố đa dạng theo độ cao, hướng phơi đặc điểm sinh thái khác Những lồi củ có hàm lượng glucomannan cao 22 thường phân bố nơi có nhiệt độ trung bình hàng năm thấp lồi củ có hàm lượng glucomannan thấp Trong số lồi Nưa củ có glucomannan miền núi phía Bắc Việt Nam lồi Nưa konjac có đặc điểm triển vọng phát triển trồng đem lại giá trị kinh tế cao Một số dân tộc vùng núi phía Bắc Việt Nam Mơng, Nùng, Sán Dìu, v.v khai thác củ từ tháng đến tháng 11 hàng năm, củ thu rửa đất, gọt vỏ, cắt thành lát mỏng sấy khô phơi nắng treo gác bếp đun Củ Nưa chế biến thành số ăn Đậu Phụ, Mỳ, Mò Gỉ, v.v 2/ Thời điểm thu hái Nưa konjac vỏ chín có màu đỏ cam Hạt sau thu hái xử lý bảo quản hạt lạnh 0C cho hiệu tốt Thời gian bảo quản dài, chất lượng hạt Nưa đặc biệt sau tháng bảo quản Do hạt Nưa konjac khó nảy mầm cần xử lý hạt ngâm hạt nước ấm 4050°C giờ, ủ rửa chua sau gieo hạt vào cát có chiều cao khoảng 5- 10 cm chuyển vào bầu đất Xử lý vết cắt củ thu hoạch xi măng cho hiệu xử lý tốt Bảo quản lạnh điều kiện 100C cho tỷ lệ củ nảy chồi cao nhất, số củ bị nhiễm bệnh thấp tỷ lệ sống cao Nhân giống Nưa konjac kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào, chồi đỉnh khử trùng tốt sử dụng dung dịch Javen 60% (NaClO) 12 phút Cơng thức mơi trường dinh dưỡng thích hợp để tái sinh chồi Nưa konjac in vitro MS + mg/l BAP + 0,2 mg/l Kinetin + g/l Agar + 30 g/l sucrose Công thức môi trường rễ tốt 1/2 MS + g/l Agar + 14 g/l Sucrose + 0,4 mg/l IBA + g/l than hoạt tính Giá thể thích hợp cho trồng Nưa konjac in vitro 50% đất + 30% cát + 20% trấu hun 3/ Trồng Nưa konjac củ giống có khối lượng 70-100g độ che sáng phù hợp 60% Thời vụ trồng vào khoảng cuối tháng đầu tháng dương lịch Mật độ trồng 40.000 cây/ha (50x50cm) cho hiệu tốt với suất 165,60 tạ/ha, hàm lượng glucomannan 46,23% Lượng phân NPK 120 kg N + 50 kg P2O5 + 140 kg K2O công thức bón phân tốt Thời điểm thu hoạch cho hàm lượng glucomannan cao 2/3 Nưa chuyển sang màu vàng Kiến nghị: Việc nghiên cứu Nưa củ có glucomannan đạt kết định, nhiên kết nghiên cứu luận án bước đầu Vì vậy, tác giả đề nghị tiếp tục nghiên cứu bảo tồn, nhân giống, lai tạo phát triển loài Nưa konjac Việt Nam, nhằm đưa Nưa konjac trở thành trồng góp phần phát triển kinh tế tỉnh miền núi phía Bắc địa phương khác nước 23 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN - Cho đến cơng trình khoa học đánh giá thành phần loài, phân bố, đánh giá hàm lượng glucomannan lồi Nưa củ có glucomannan lựa chọn lồi có triển vọng phát triển trồng cách đầy đủ miền núi phía Bắc Việt Nam - Đã bổ sung số dẫn liệu phân bố, đặc điểm sinh học, sinh thái hàm lượng glucomannan số loài Nưa ( Amorphophallus spp) tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam - Đã bổ sung 01 loài cho hệ thực vật Việt Nam loài Amorphophallus yuloensis - Đã nghiên cứu kỹ thuật nhân giống Nưa konjac Việt Nam Kỹ thuật nhân giống hữu tính hạt, nhân giống củ kỹ thuật nhân giống Nưa konjac kỹ thuật nuôi cấy mô - Đã nghiên cứu kỹ thuật trồng Nưa konjac miền núi phía Bắc Việt Nam Xác định khối lượng củ giống thích hợp cho trồng thương mại phát triển lấy bột glucomannan Nưa konjac Độ che sáng, thời vụ trồng, mật độ trồng, lượng phân bón NPK, tích lũy hàm lượng glucomannan củ Nưa giai đoạn phát triển DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Nguyễn Văn Dư, Trần Huy Thái, Nguyễn Công Sỹ, Trần Văn Tiến, Một số kết nhân giống hữu tính Nưa (Amorphophallus spp) Báo cáo khoa học Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Hội nghị khoa học toàn quốc lần tứ 6, Nxb Khoa học Tự nhiên Công nghệ, 2015, tr 1323-1328, Hà Nội Nguyen Van Du, Bui Hong Quang, Nguyen Thi Van Anh, Masuno T, Peter J Matthews , Tran Van Tien , Useful aroids and their prospects in Vietnam Aroideana, 2015, 31: 130142 Trần Văn Tiến, Hà Văn Huân, Nguyễn Văn Dư, Tri thức địa khai thác chế biến củ Nưa konjac (Amorphophallus konjac) làm thực phẩm số tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Lâm Nghiệp, 2017, số 1/2017, tr 11-16 Tran Van Tien, Nguyen Van Du, Nguyen Cong Sy, Biological Characteristics and Distribution of the species Amorphophallus yuloensis H Li (Araceae) in Vietnam, Aroideana,2017, 39: 57-63 Trần Văn Tiến, Nguyễn Văn Dư, Hà Văn Huân, Nguyễn Minh Quang, Nhân giống in vitro loài Nưa konjac (Amorphophallus konjac) Việt Nam để bảo tồn phục vụ sản suất Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Việt Nam, 2017, số 6B/2017, tr 35-40 Trần Văn Tiến, Nguyễn Văn Dư, Nguyễn Công Sỹ, Hà Văn Huân, Kiều Thị Thuyên, Nghiên cứu phát triển trồng loài Nưa Konjac (Amorphophallus konjac) miền núi phía Bắc Việt Nam Tạp chí Nơng nghiệp phát triển Nơng thơn, số 18/2017, tr 149-157 Trần Văn Tiến, Nguyễn Văn Dư, Nguyễn Công Sỹ, Một số nghiên cứu nhân giống loài Nưa konjac ( Amorphophallus konjac K.Koch) củ Báo cáo khoa học Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Hội nghị khoa học toàn quốc lần tứ 6, Nxb Khoa học Tự nhiên Công nghệ, 2017, tr 1502-1507, Hà Nội 24 ... gian nghiên cứu 2.1.2.1 Địa điểm nghiên cứu - Nghiên cứu điều tra thành phần, phân bố tri thức địa khai thác sử dụng loài Nưa củ có glucomannan thực tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam - Nghiên cứu. .. PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu Mẫu vật nghiên cứu loài Nưa mọc tự nhiên tỉnh miền núi phía Bắc Việt Nam Tổng số mẫu vật nghiên cứu. .. 400-1600m Cụ thể, loài Nưa konjac phân bố độ cao 800-1600m, loài Nưa yuloensis độ cao 800-1000m, loài Nưa krausei độ cao 600-1000m, loài Nưa Vân Nam sống độ cao 400-800m, loài Nưa đầu nhăn sống