Nghiên cứu triển khai kỹ thuật sắc ký định lượng đồng thời acid eicosapentaenoic và acid docosahexaenoic trong một số viên nang mềm

BỘ G IÁO DỤC VÀ ĐÀ O TẠO TRƯ Ờ NG Đ Ạ I HỌC BỘ Y TÊ D ược HÀ NỘI đ o th a n h b ìn h NGHIÊN CỨU TRIỂN KHAI KỸ THUẬT SẮC KÝ KHÍ ĐỊNH LƯỢNG Đồ NG THỜI ACID EICOSAPENTAENOIC vÀ ACID DOCOSAHEXAENOIC TRONG MỘT SỐ VIÊN NANG Mề M LUẬN VĂN THẠC s ĩ D ợ c HỌC C huyên ngành: K iểm nghiệm thuốc Độc chất M a số : 60 73 15 Người hướng dẫn khoa học: PG S TS Trịnh Văn Lẩu C m ã-í/b^ừv HÀ N Ộ I - 0 i i íf LỊI CẢM ON Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS.Trịnh Văn Lâu tận tinh hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi cho suốt q trình học tập nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc Viện Kiểm nghiệm, tập thể cán phòng Đơng Dược - Viện Kiểm nghiệm, ThS Phạm Thị Giảng, ThS Nguyễn Tuấn Anh, ThS Nguyễn Đức Toàn quan tâm, tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành nhiệm vụ học tập nghiên cứu thời gian qua Xin trân trọng cảm ơn thầy cô Ban Giám hiệu nhà trường, cảm ơn Phòng Đào tạo Sau đại học Bộ mơn Phân Tích Trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện tốt cho thời gian học tập trường Tôi gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban lãnh đạo sở Y tế tỉnh Ninh Binh, Ban lãnh đạo Trung tâm Kiểm nghiệm Dược phẩm Mỹ phẩm tỉnh Ninh Bình tạo điều kiện cho học tập nâng cao kiến thức Cuối xin cảm ơn gia đình bạn bè ln động viên khích lệ, giúp đỡ tơi tận tình Hà nội, ngày 25 tháng 12 năm 2005 Đ o T h a n h B ìn h MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN DANH MỤC KÝ HIỆU CHỮ VlẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG s ố LIỆU DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỂ PHẨN 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan acid béo 1.1.1 Đặc điểm cấu trúc, tính chất acid béo 1.1.2 Tiêu hoá hấp thu acid béo 1.1.3 Vai trò acid béo lipid thể 1.2 Tổng quan EPA DHA 1.2.1 Nguồn gốc EPA DHA 1.2.2 Tính chất, cơng thức EPA DHA 1.2.3 Vai trò EPA DHA đối vói thể 1.2.4 Một sô' chế phẩm chứa EPA DHA 10 1.3 Cơ sở lý thuyết sắc ký khí 13 1.3.1 Các đại lượng đặc trưng cho trình sắc ký 13 1.3.2 Thiết bị sắc ký khí 16 1.3.3 Phương pháp định lượng tính kết sắc ký khí 16 1.4 Các phương pháp định tính, định lượng acid béo 18 1.4.1 Sắc ký lóp mỏng 18 1.4.2 Chuẩn độ acid-base 18 1.4.3 Ký lỏng hiệu cao (HPLC) 18 1.4.4 Quang phổ hồng ngoại (IR) 20 1.4.5 Sắc ký khí (GC) 21 PHẦN 2: ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG TIỆN, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Đôi tượng nghiên cứu 24 2.2.1 Dụng cụ 24 2.2.2 Hoá chất 24 2.3 Nội dung phương pháp nghiên cứu 25 2.3.1 Lựa chọn kỹ thuật tạo dẫn xuất 25 2.3.2 Chuẩn bị mẫu thử mẫu chuẩn 26 2.3.3 Xây dựng phương pháp định tính định lượng EPA, DHA 26 2.3.4 Thẩm định phương pháp xây dựng 27 2.3.5 Phương pháp xử lý đánh giá kết 29 PHẨN 3: KẾT QUẢ THựC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN 30 3.1 Lựa chọn kỹ thuật tạo dẫn xuất 30 3.2 Xây dựng phương pháp định tính định lượng đồng thời EPA, 30 DHA 3.2.1 Khảo sát chương trình nhiệt độ cột 30 3.2.2 Khảo sát tốc độ dòng khí mang 35 3.2.3 Khảo sát lựa chọn nội chuẩn thích hợp 35 3.3 Thẩm định phương pháp xây dựng 39 3.3.1 Định tính EPA DHA 39 3.3.2 Khảo sát tính thích hợp hệ thống sắc ký 44 3.3.3 Khảo sát khoảng tuyến tính phương pháp định lượng 45 3.3.4 Xác định giới hạn định lượng 48 3.3.5 Khảo sát độ lặp lại phương pháp 52 3.3.6 Khảo sát độ phương pháp 53 3.4 Bàn luận 55 3.5 Áp dụng phưoỉng pháp xây dựng để định lượng EPA DHA 56 sô viên nang mềm KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 PHỤ LỤC DANH MỤC KÝ HIỆU CHỮ VIẾT TẮT CHD Bệnh m ạch vành (coronary heart disease) DHA A cid docosahexaenoic ELSD D etector tán xạ ánh sáng bay (evaporative light scattering detection) EPA A cid eicosapentaenoic FID D etector ion hoá lửa (flam e ionization detector) GC Sắc ký khí (gas chrom atography) GC-M S Sắc ký khí khối phổ (gas chorm atography m ass spectrom eter) GSC Sắc ký khí - rắn (gas solid chrom atography) GLC Sắc ký khí - lỏng (gas liquid chrom atography) HD L L ipoprotein tỷ trọng cao (high density lipoprotein) HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (high perform ance liquid chrom atography) LDL Lipoprotein tỷ trọng thấp (low density lipoprotein) LOD Giới hạn phát (lim it of detection) LOQ Giới hạn định lượng (lim it o f quantitation) PU FA A cid béo không no nhiều nối đôi (polyunsaturated fatty acids) DANH MỤC CÁC BẢNG số LIỆU Ký hiệu Bảng ỉ ỉ Nội dung Một sô'acid béo tự nhiên Trang Bảng 1.2 Một sô'chê'phẩm viên nang mềm có chứa EPA DHA 11 Bảng 3.1 Kết khảo sát tính thích hợp hệ thống 45 Bảng 3.2 Kết khảo sát khoảng tuyến tính EPA DHA 46 Bảng 3.3 Kêt khảo sát giới hạn phát 49 Bảng 3.4 Kết xác định RSD(%) tỷ lệ diện tích píc EPA 50 DHA giới hạn định lượng Bảng 3.5 Kết khảo sát độ lặp lại phương pháp 53 Bảng 3.6 Kết khảo sát độ phương pháp 54 Bảng 3.7 Một số kết định lượng áp dụng phương pháp xây dựng 57 DANH MỤC CÁC HÌNH Nội dung Ký hiệu Trang Hình 3.1 Đường biểu diễn chương trình nhiệt độ khảo sát 33 Hình 3.2 Sắc ký đồ mẫu chuẩn hỗn hợp EPA DHA khdũ sát 33 theo chương trình Hình 3.3 Sắc ký đồ mẫu chuẩn hổn hợp EPA DHA khảo sát 34 theo chương trình Hình 3.4 Sắc kỷ đồ mẫu chuẩn hỗn hợp EPA DHA khảo sát 34 theo chương trình Hình 3.5 Sắc ký đồ mẩu chuẩn hỗn hợp EPA DHA có nội chuẩn 37 methyl tricosanoic Hình 3.6 Sắc ký đồ mầu nội chuẩn methyl behenate 37 Hình 3.7 Sắc ký đồ mẩu chuẩn hỗn hợp EPA DHA có nội chuẩn 38 methyl behenate Hình 3.8 Sắc kỷ đồ mẫu thử UBB® ALASKA FISH OIL Omega-3 38 có nội chuẩn methyl behenate Hình 3.9 Sắc kỷ đồ mẫu chuẩn hỗn hợp EPA DHA 40 Hình 3.10 Sắc kỷ đồ mẫu thử viên nang mềm UBB® ALASKA FISH 41 OIL Omega-3 Hình 3.11 Sắc ký đồ mẩu chuẩn hỗn hợp EPA DHA với detector 42 khối p h ổ MS-QP5050A Hình 3.12 Sắc kỷ đồ so sánh mảnh phổ píc EPA, DHA 43 methyl behenate với thư viện phổ Hình 3.13 Đồ thị khảo sát khoảng tuyến tính EPA 47 Hình 3.14 Đồ thị khảo sát khoảng tuyến tính DHA 47 Hình 3.15 Sắc ký đồ xác định giới hạn phát EPA 51 Hình 3.16 Sắc ký đồ xác định giới hạn phát DHA 51 Hình 3.17 Sắc ký đồ khảo sát RSD(%) EPA DHA giới hạn định 52 lượng ĐẶT VÂN ĐỂ Acid eicosapentaenoic (EPA) acid docosahexaenoic (DHA) acid béo không no nhiều nối đôi, biết đến chất có tác dụng bảo vệ tim m ạch làm giảm nguy phát triển bệnh m ạch vành Các acid béo có tác dụng làm giảm cholesterol triglycerid m áu giúp ngăn ngừa bệnh tim m ạch, bệnh béo phì, DHA có vai trò quan trọng cấu tạo nên m não, chất xám võng mạc m [22_ H iện nhà bào chế nghiên cứu sản xuất nhiều chế phẩm có chứa EPA D H A có dạng viên nang m ềm nhằm mục đích ngăn ngừa bệnh tim m ạch, cao huyết áp, xơ vữa động m ạch, làm bền vững thành m ạch Ngồi ra, sản phẩm có tác dụng bổ não, cung cấp dưỡng chất cho tế bào chất xám não, dinh dưỡng mô võng mạc mắt Kỹ thuật sắc ký khí sử dụng phổ biến để xác định hàm lượng acid béo thực phẩm , dược phẩm có ưu điểm chọn lọc độ xác cao Việt N am chưa có tài liệu pháp quy quy định phương pháp xác định hàm lượng đồng thời EPA D H A viên nang m ềm om ega-3 Trong đó, thuốc loại nhập vào Việt N am có đưa tiêu chuẩn để kiểm tra chất lượng hồ sơ đăng ký, thực tế việc kiểm nghiệm theo tiêu chuẩn nhà sản xuất đưa gặp khó khăn M ặt khác, m ột số công ty dược nước nghiên cứu sản xuất viên nang m ềm om ega-3 đăng ký để luu hành thị trường Vì vậy, cần phải nghiên cứu m ột phương pháp định lượng EPA DHA có tính khả thi, cho kết xác độ chọn lọc cao nhằm tăng cưòỉng quản lý chất lượng từ khâu sản xuất đến lun thông thuốc X uất phát từ yêu cầu thực tế đây, tiến hành thực đề t i : “N ghiên cứu triển khai kỹ thuật sắc ký khí định lượng đồng thời acid eicosapentaenoic (EPA) acid docosahexaenoic acid (DH A) sô viên nang m ềm ” M ục tiêu cơng trình là: X ảy dựng phư ơng ph p định tính, định lượng đồng thời EPA DH A viên nang m ềm đủ tin cậy, nhanh chóng, thuận tiện, có chọn lọc, độ xác độ dún g cao Q ua đó, sở phân tích sở sản xuất áp dụng để kiểm tra chất lượng loại thuốc này, hay xây dựng tiêu chuẩn chất lượng sản phẩm Để thực m ục tiêu trên, nội dung luận văn gồm có phần sau: + N ghiên cứu xây dựng chương trình sắc ký thích hợp cho phép tách để định tính định lượng hai thành phần EPA DH A viên nang mềm + Thẩm định phương pháp xây dụmg + Áp dụng phương pháp xây dựng để định lượng m ột số viên nang m ềm om ega-3 có chứa hai thành phần hoạt chất PHẨN : TỔNG QUAN 1.1 T Ổ N G Q U A N VỂ A C ID BÉO 1.1.1 Đ ặc điểm cấu trúc, tính chất acid béo A cid béo m ono carboxylic có số carbon chẩn, hầu hết acid béo tự nhiên sản phẩm thuỷ phân lipid Trong m áu, acid béo gắn chủ yếu vào album in huyết - Chuỗi hydrocarbon acid béo có từ đến 36 carbon, no hay không no - Danh pháp đơn giản m ỗi acid béo biểu thị độ dài chuỗi số liên kết đơi Vị trí liên kết đơi biểu số mũ A (delta) Vị trí liên kết đơi cách nhau, thơng thường béo có m ột liên kết đơi thêm A'^, acid acid béo có nhiều liên kết đơi Các liên kết đơi không liên hợp (-CH=CH-CH=CH-) m cách m ột nhóm m ethylen (-CH =CH -CH 2-CH=CH-) Trong tự nhiên, liên kết đôi hầu hết acid béo khơng no có cấu hình cis O m ega-3 danh pháp khơng thức acid béo không no nhiều nối đôi m vị trí nối đơi cách nhóm -C H carbon - Tính chất lý học acid béo phụ thuộc độ dài chuỗi carbon mức độ khơng bão hồ acid béo V í dụ, điểm chảy acid béo tăng theo độ dài chuỗi giảm theo số liên kết đôi [5], Những acid béo thường gặp nêu bảng P3 1.2.3 Chương trình D ata:Ữ M E-C TU D 01 C h K o n :0 M E -C T i* C M e t h o d :0M E-CTI*.M 01 Back chrom : R T: 6.80 Level; 7 í )tten: R T :n Level: 26T167 ỉ) t t e n : 1.2.4 Chương trình D a t a : Ữ M E - C T D Chron:0M E-C T5-C 01 M e t h o d : r i E - C T M01 Back ch ro n : C lì » P4 1.2.5 Chương trình D ata:Ữ M E-C T6.00 C h r o iii: M E - C T C01 M e t h o d :0 M E-CT6.M 01 Back chrom : R T :4 Level: 4 At t e n : RT:1.01 Level: 271805 A tte n :8 mV 100 il Ắt 1.2.6 Chương trình 10 Data:O M E-CT10.D 01 C hroấi:O M E-C T 10.C 01 M e th od;0M E -C T 10 M e i Back ch ro n : Ch=1 mV_ 200- 100- ưL_ lũ 15 20 25min P5 1.3 Sắc ký đồ khảo sát tốc độ dòng khí mang 1.3.1 Tốc độ 0,5 ml/phút (35 kPa) D a t a : 1 K S 01 C h r o n : 1 K S Ĩ C01 M e th o d :1012KS1-M 01 Back c ỉiro n : Ch=1 R T ,9 Level, fttten:8 R T :0 n Level: 274388 fltte n :8 1.3.2 Tốc độ 0,75 ml/phút (50 kPa) O ata:O M E 3T T U ,D 01 C h ro ri:O M E ĨT i* C M e t h o d :0M E 23 T T U M Back ch ro n : Ch=1 P6 1.3.3 Tốc độ 1,0 ml/phút (63 kPa) D ata:1012K S2-D 01 C h ro m :1 l2 K S C M e th o d :1012KS2-M 01 Back ch ro n : Ch=1 R T :0 Level: 0 fltten:9 RT: 0.28 Level: 392574 f ì t t e n :9 1.3.4 Tốc độ 1,5 ml/phút (87 kPa) D ata:1 K S3 D C h ro ri:1 O K S C M e th o d :1 2KS3-M01 Back ch ro n : Ch=1 r/ Phụ lục 2: Sác ký đồ khảo sát khoảng tuyến tính phương pháp 2.1 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn hỗn hợp EPA (481,7 Ịig/ml), DHA (356,9 CLASS-GCIŨ Ver.=1.62 DATA=0ME2 T T DOI 05/11/23 Sample Omega Detector WFID Operator Dao Thanh Binh 09:08:24 Column: SPB {30m x O , 32nưn,0.2 m c m ) Nhiet 2 C (1’)- , C / '- C (5' FID = 290C, SPL = 260C Flow: 50kPa (0,76 ml/min) - Split: 1/30 Mau chuan Omega Khao sat khoang tuyen tinh, mau chuan (TTl) Nong EPA 481,7mcg/ml DHA , m c g / m l *** C h r o m a t o g r a m mV * * * F i l e n a m e : M E T T CŨ1 200 rH rrH 100 rH CO I— lO Ị o Ĩ— I— < Cu < U] a: Q 20 10 *** Peak Report PKNO TIME 10.616 14.495 16.171 AREA 100277 67378 407258 HEIGHT 24237 12839 73260 574913 110337 **■* Column Performance Report *** NAME Plate # k' 144297 0.00 EPA 0.37 DHA 174998 144518 0.52 IS CONC NAME EPA DHA IS Resolution Tailing 01 30, 98 96 0.84 , 86 - 1/1 05/12/26 19:59:55 2.2 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn hỗn hợp EPA (802,9 Mg/ml), DHA (594,8 íig/ml) CLASS-GCIO Ver.=1.62 DATA=OME2 T T DOI 05/11/23 Omega Sample WFID Detector Operator Dao Thanh Binh 10:38:46 Column: SPB (30m x O ,3 m m , 25mcm) Nhiet 2 C (1')-2, C / 1'-2 c (5 ') FID = 290C, SPL = 260C Flow: SOkPa (0,76 ml/min) - Split: 1/30 Mau chuan Omega Khao sat khoang tuyen tinh, mau chuan (TT2) Nong EPA 802,9 mcg/ml DHA 594,8 mcg/ml *** Chrom a t o g r a m mV F i l e n a m e :OME2 T T CŨ1 20 100 *** Peak Report PKNO TIME 10.501 14.372 16.048 AR E A 176583 115926 446985 HEIGHT 40147 21624 79061 739494 140832 Column Performance Report R.TIME k' NAME 10.501 3.20 EPA 14.372 DHA 4.75 16.048 5.42 IS CONC NAME EPA DHA IS *** Plate # 66799 161479 188457 - 1/1 Tailing Resolution 1.02 25 34 1.00 11.52 0.85 05/12/26 20:05:02 2.3 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn hỗn hợp EPA (1605,8 |ig/m l), DHA (1189,7 CLASS-GCIO Ver.=1.62 D A T A = O M E T T DŨI 05/11/23 12:12:46 Sample Omega Detector WFID Operator Dao Thanh Binh Column; SPB {30m x O , m m , 0.2 m c m ) Nhiet 2 C (1')-2,5 C / '- C {5' FID = 290C, SPL = 260C Flow: 50kPa (0,76 ml/min) - Split: 1/30 Mau chuan Omega Khao sat khoang tuyen tinh, ma u chuan ( T T ) Nong EPA 1605,2 mcg/ml DHA 1189,7 mcg/ml *** Chroma t o g r a m *** Filename:OME23TT3.C01 mV *** Peak Report PKNO TIME 10.545 14.417 16.078 AREA 333993 225457 410688 HEIGHT 79329 41689 72501 970138 193519 Column Performance Report NAME k' R.TIME EPA 0.00 10.545 37 DHA 14.417 0.52 IS 16.078 CONC NAME EPA DHA IS *** Plate # 130634 6377 171631 - 1/1 Resolution Tail i n g 92 9.23 0.94 3.79 85 05/12/26 20:08:34 2.4 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn hỗn hợp EPA (3211,7 |ig/m l), DHA (2379,4 Ịig/ml) CLASS-GCIO Ver.=1.62 D A T A = O M E T T DOI 05/11/23 Sample : Omega Detector : WFID Operator : Dao Thanh Binh 13:42:06 Column: SPB (30m X Ũ ,3 m m , m c m ) Nhiet 2 C (1')-2,5 C / ' - 27 Ũ C (5') FID = 290C, SPL = 260C Flow: 50kPa (0,76 ml/min) - Split: 1/30 Mau chuan Omega Khao sat khoang tuyen tinh, ma u chuan (TT4) Nong E P A 3211,7 mcg/ml, DHA 2379,4 m c g / m l *** Chroma t o g r a m *** mV F i l e n a m e :0 M E T T CO 200 100 *** Peak Report PKNO TIME 10.524 14.389 16.033 AREA 678070 456602 413492 HEIGHT 147858 85096 75439 1548164 308393 *** Column P erformance Report NAME k' R.TIME EPA 0.00 10.524 0.37 DHA 14 389 52 IS 16.033 CONC NAME EPA DHA IS *** Plate # 19560 163923 216 - 1/1 Tailing R esolution 0.77 17.44 0.89 87 0.73 05/12/26 20:10:07 2.5 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn hỗn hợp EPA (6423,3 Ịig/ml), DHA (4758 CLASS-GCIO Ver.=1.62 D A T A = O M E T T DOI 05/11/23 Omega Sample WFID Detector Dao Thanh Binh Operator 15:15:26 Column: SPB (30m X Ũ , 32min, 5mcm) Nhiet 220C {1' )-2 , C / 1'-2 0C (5 ' FID = 290C, SPL = 260C Flow: 50kPa (0,76 ml/min) - Split: 1/30 Mau chuan Omega Khao sat khoang tuyen tinh, m au chuan (TT5) Nong EPA 6423,3 mcg/ml DHA 4758,8 mcg/ml *** C h romatogram mV Filename;OME2 3TT5.C01 200 100 Peak Report TIME 10.598 14 465 16.077 PKNO AR E A 1394479 947220 456256 HEIGHT 272249 153554 79045 2797956 504848 *** Column Performance Report NAME R.TIME k' 00 EPA 10.598 DHA 14.465 0.36 16.077 0.52 IS CONC Plate # 35892 18655 38352 - / NAME EPA DHA IS Tailing Resolution 67 0.76 11 95 83 4.29 05/12/26 20:13:50 2.6 Sắc ký đổ dung dịch chuẩn hỗn hợp EPA (8029,2 ^Ig/ml), DHA (5947,5 Mg/ml) CLASS-GCIO Ver.=1.62 DATA=OME2 T T DOI 05/11/24 Omega Sample WFID Detector Dao Thanh Binh Operator 08:56:34 Column: SPB (30m x O ,3 m m , m c m ) Nhiet 2 C (1')-2,5 C / '- Ũ C (5' FID = 290C, SPL = 260C Flow: SOkPa (0,76 ml/min) - Split: 1/30 Mau chuan Omega Khao sat khoang tuyen tinh, mau chuan (TT6) Nong EPA 8029,2 m c g / m l DHA 5947,5 mcg/ml '* C h r o m a t o g r a m *** mV Filename:OME2 3TT6.C01 400 200 *** Peak Report PKNO TIME 2.577 664 10.748 14.640 16.226 AREA 333068742 89993261 2666056 1799939 699342 HEIGHT 132202084 38024345 425639 250151 117953 428227341 171020173 Column Performance Report Plate # k' NAME 17 28282 EPA 10453 DHA 68 121273 30 IS CONC NAME EPA DHA IS Tailing Resolution 60 0.67 9.40 0.77 4.18 - 1/1 05/12/26 20:17:26 P13 P h ụ lục 3: Sắc ký đồ k hảo sá t R SD (% ) E PA DHA giới h ạn đ ịn h lượng D A T A = C H R M DOI 05/12/10 CLASS-GCIO Ver.=1.62 Sample WFID Detector Dao Thanh Binh Operator 09:51:50 Column: SPB-5 (30m x O , 32iĩưn, 5mcm) Temp 220C{1') 2.5C/1' 270C(5' FID = 290C, SPL = 260C Flow: 50kPa {0.76ml/min) - Split; 1/30 Mau thu Omega-3: Xac dinh RSD% cua gioi han d i n h luong ( L O Q ) * * * C h r o m a t o g r a m *** F i l e n a m e :0 C H R M CŨI mV * * * PKNO * * * Peak Report TIME 10.555 14.388 16.087 *** AREA 3252 2028 929029 HEIGHT 766 401 151551 934309 152718 Column Performance Report *** Plate # k' NAME 128002 EPA 0.00 177253 DHA 36 126583 52 IS CONC NAME EPA DHA IS Resolu t i o n Tailing 18 30 10 1.00 0.72 10.70 - 1/1 05/12/29 D A T A = C H R M D02 05/12/10 CLASS-GCIO Ver.=1.52 Sample WFID Detector Dao Thanh Binh Operator 10:20:10 Column: SPB-5 (30m x O ,3 m m , m c m ) Temp 220C(1') 2.5C/1' 270C(5' FID = 290C, SPL = 260C Flow: 50kPa (0.76ml/min) - Split: 1/30 Mau thu Omega-3: Xac dinh RSD% cua gioi han dinh luong ( L O Q ) C h r o m a t o g r a m *** mV F i l e n a m e :0 C H R M C02 *** Peak Report PKNO TIME 10.491 14.324 16.023 * * * AREA 2699 1747 857825 HEIGHT 651 352 142434 862272 143437 *** Column Performance Report *** k' NAME Plate # 85993 0.00 EPA 0.37 DHA 157998 84941 IS 0.53 CONC NAME EPA DHA IS Resolution Tailing 1.18 26 68 1.03 34 0.72 11 - 1/1 05/12/29 CLASS-GCIO Ver.= D A T A = C H R M D03 05/12/10 Sample : Detector : WFID Operator : Dao Thanh Binh 10:45:42 Column: SPB-5 (30m x O , 32mra, 25mcm) Temp 220C(1') 2.5C/1' 270C(5' FID = 29ŨC, SPL = 260C Flow: 50kPa (0.76ml/min) - Split: 1/30 Mau thu Omega-3: Xac dinh RSD% cua gioi han dinh luong ( L O Q ) Chrom a t o g r a m mV F i l e n a m e :0 C H R M C03 *** Peak Report PKNO TIME 10.432 14.255 15.959 ★* * AREA 2249 1657 802197 HEIGHT 570 317 129847 806102 130734 Column Perfor m a n c e Report *** k' NAME Plate # 0.00 EPA 12293 0.37 DHA 167687 0.53 IS 22671 - CONC NAME EPA DHA IS Tailing Resolution 1.07 1.15 14.83 0.71 6.05 / 05/12/29 07:30:13 CLASS-GCIO Ver.=1.62 D A T A = C H R M D04 05/12/10 Sample : Detector : WFID Operator : Dao Thanh Binh 11:12:16 Column; SPB-5 (30m x O , m m , m c m ) Temp 220C(1') 2.5C/1' 270C(5') FID = 290C, SPL = 260C Flow: 50kPa (0.76ml/min) - Split: 1/30 Mau thu Omega-3: Xac dinh RSD% cua gioi han dinh luong ( L O Q ) *** C h r o m a t o g r a m *** mV F i l e n a m e :0 C H R M C04 PKNO Peak Report TIME 10.456 14.279 15.981 AREA 2617 1522 837689 HEIGHT 632 308 145146 841828 146086 *** Column Performance Report *** k' NAME Plate # 0.00 EPA 136078 0.37 DHA 96204 0.53 IS 44749 CONC NAỈ EPA DHA IS Tailing Re s o l u t i o n 1.10 25.70 7.00 0.70 - 1/1 05/12/29 06:45:31 CLASS-GCIO V e r =1.62 D A T A = C H R M D05 05/12/10 Sample : Detector : WFID Operator : Dao Thanh Binh 11:38:38 Column: SPB-5 (30m x O , m m , m c m ) Temp 220C{1') 2.5C/1' 27ŨC(5' FID = 290C, SPL = 260C Flow: 50kPa (0.7 m l /min) - Split: 1/30 Mau thu Omega-3; Xac dinh RSD% cua gioi han dinh luong ( L O Q ) Filename:0CHRM1.CO5 '** C h r o m a t o g r a m *** mV *** Peak Report PKNO TIME 10.471 14.295 15.993 *** AREA 2099 1390 830814 834302 Column Performance NAME k' EPA 00 0.37 DHA IS 53 CONC HEIGHT 528 306 135889 NAME EPA DHA IS 136722 Report *** Plate # 77521 118347 Resolu t i o n Tailing 0.90 -0 92 8.68 0.73 13 - 1/1 /12/29 07:31:13 ... thực tế triển khai có m ột số hạn chế Chúng tơi tiến hành “N ghiên cứu triển khai k ỹ thu ật sắc ký k h í định lượng đồng thời acid eicosapentaenoỉc acid docosahexaenoic m ột s ố viên nang mềm' *... detector 250*^c Trong số tài liệu tham khảo định lượng kỹ thuật sắc ký khí, đưa số điều kiện sắc ký cho phương pháp định lượng EPA DHA viên om ega-3 dạng nguyên liệu, việc triển khai áp dụng phưcfng... Y ẾT CỦA SẮC K Ý KHÍ N ăm 1952, báo m áy sắc ký khí cơng bố Jam es M artin, sau kỹ thuật phát triển năm 60 Từ đến kỹ thuật sắc ký khí dần hồn thiện phát triển mạnh Sắc ký khí m ột kỹ thuật tách