PHÂN LẬP, ĐỊNH SEROTYPE VIRUS GÂY BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM VÀ PHÒNG BỆNH CHO GÀ THỊT BẰNG VACCINE

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ************************* NGUYỄN THỊ KIM YẾN PHÂN LẬP, ĐỊNH SEROTYPE VIRUS GÂY BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM VÀ PHÒNG BỆNH CHO GÀ THỊT BẰNG VACCINE LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 12/2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH ************************* NGUYỄN THỊ KIM YẾN PHÂN LẬP, ĐỊNH SEROTYPE VIRUS GÂY BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM VÀ PHÒNG BỆNH CHO GÀ THỊT BẰNG VACCINE Chuyên ngành: Thú Y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Hướng dẫn khoa học: TS VÕ THỊ TRÀ AN Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 12/2011 PHÂN LẬP, ĐỊNH SEROTYPE VIRUS GÂY BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM VÀ PHÒNG BỆNH CHO GÀ THỊT BẰNG VACCINE NGUYỄN THỊ KIM YẾN Hội đồng chấm luận văn Chủ tịch: TS TRẦN THỊ BÍCH LIÊN Hội Thú y Việt Nam Thư ký: TS NGUYỄN TIẾN THÀNH Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM Phản biện 1: PGS.TS TRẦN ĐÌNH TỪ Hội Thú y Việt Nam Phản biện 2: TS NGUYỄN THỊ PHƯỚC NINH Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM Ủy viên: TS NGUYỄN TẤT TỒN Trường Đại học Nơng Lâm TP.HCM i LÝ LỊCH CÁ NHÂN Tôi tên Nguyễn Thị Kim Yến sinh ngày 20 tháng 03 năm 1972 huyện Di Linh, tỉnh Lâm Đồng Tốt nghiệp PTTH trại trường trung học phổ thông Di Linh, tỉnh Lâm Đồng năm 1990 Tốt nghiệp đại học hệ qui ngành Thú y Trường Đại Học Nông Lâm, thành phố Hồ Chí Minh năm 1996 Q trình cơng tác: Năm 1996: chuyên viên Trạm khuyến nông Đà Lạt, tỉnh Lâm Đồng Năm 1999: chuyên viên Trạm khuyến nông Di linh, tỉnh Lâm Đồng Năm 2003 đến nay: chuyên viên Trung tâm Nông nghiệp Di linh, tỉnh Lâm Đồng Tháng 10 năm 2009 theo học Cao học ngành thú y Trường Đại học Nông Lâm, Thủ Đức, thành phố Hồ Chí Minh Địa liên lạc: số 1110, đường Hùng Vương, thị trấn Di Linh, huyện Di Linh, tỉnh Lâm Đồng Điện thoại: 0907122102 Email: Kimyen.ttnn@gmail.com ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công bố luận văn trung thực phần đề tài cấp Bộ mã số CS-CB11-CNTY-05 TS Võ Thị Trà An làm chủ nhiệm Những số liệu luận văn phép công bố với đồng ý chủ nhiệm đề tài Nguyễn Thị Kim Yến iii LỜI CẢM ƠN Chân thành cám ơn TS Võ Thị Trà An giảng dạy, hướng dẫn giúp đỡ tơi việc thực hồn thành luận văn tốt nghiệp Cảm ơn tất thầy cô Khoa Chăn Ni Thú Y, Phòng Đào Tạo Sau Đại Học, Ban Giám Hiệu giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi học tập hồn thành đề tài nghiên cứu Đặc biệt cảm ơn anh Hồ Hồng Dũng nhiệt tình giúp đỡ, cung cấp tài liệu đóng góp nhiều ý kiến chun mơn hữu ích Chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo anh em phận chăn nuôi thú y Trung tâm Nông nghiệp Di Linh, Trung tâm Nông nghiệp Đức Trọng, Trung tâm Nông nghiệp Bảo Lộc đặc biệt anh Dương Củi, Nguyễn Văn Sinh em Nguyễn Thế Nam, Nguyễn Minh Khánh, K’ Xuân Trần Thị Ngọc Hân nhiệt tình hỗ trợ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành đề tài nghiên cứu Cảm ơn chia sẻ thành đạt với cha mẹ, anh chị, bạn lớp cao học thú y, chăn nuôi 09 đặc biệt chồng, tạo nguồn động viên to lớn cho tơi hồn thành q trình học tập đề tài nghiên cứu iv TÓM TẮT Đề tài “Phân lâp, định serotype virus gây bệnh viêm phế quản truyền nhiễm phòng bệnh vaccine” tiến hành từ tháng 10/2010 đến 10/2011 Mục tiêu nghiên cứu xác định serotype virus gây bệnh viêm phế quản truyền nhiễm (Infectious Bronchitis, IB) trại gà thịt Lâm Đồng đánh giá khả phòng bệnh vaccine Kết ghi nhận sau: (1) Thông tin thu thập 100 mẫu bệnh phẩm khí quản từ 100 trại gà (tại tỉnh Lâm Đồng) có triệu chứng chảy nước mắt, nước mũi, sưng mặt, ngáp, khó thở, hắt hơi, âm rale khí quản tiêu chảy phân trắng, loãng nghi ngờ bệnh virus IB Bệnh tích phổ biến khí quản xuất huyết thận sưng, tích urate (2) Phân lập virus từ 100 mẫu bệnh phẩm phương pháp tiêm xoang niệu mơ phơi gà ngày tuổi cho thấy có 54% mẫu có bệnh tích phơi còi cọc, phơi uốn cong 33% mẫu phơi tích urate thận Xác định diện virus IB kỹ thuật RT –PCR cho kết mẫu dương tính Xác định serotype phương pháp giải trình tự gene mẫu cho thấy có chủng thuộc serotype Massachusett (chủng H120) chủng thuộc serotype 793B (chủng 4/91) (3) Chương trình vaccine cho 4080 gà thịt chủng ngừa vaccine IB H120 lúc ngày tuổi cho lô Chỉ lô lô tái chủng với IB 4/91 IB 88 lúc 14 ngày tuổi Hiệu giá kháng thể lúc 35 ngày tuổi xác định ELISA lô 1, 663, 1184 1125 Tỉ lệ chết có khác biệt lô (2,5%) lô (2,4%) so với lô (9,6%) Trọng lượng cuối kỳ lô 1, 3,4 kg, 3,5 kg 2,9 kg Kết chương trình vaccine lơ khống chế bệnh IB mang lại hiệu kinh tế cao lô v SUMMARY The thesis “Isolation and serotype determination of the avian infectious bronchitis (IB) virus and prevention for broiler flocks by vaccine” was conducted from Oct 2010 to Oct 2011 The objectives were to determine serotype among field isolates of infectious bronchitis virus from broiler in Lam Dong and to evaluate the efficacy of vaccine program for broilers to prevent and control IB disease The results showed that: (1) Information from 100 samples from 100 poultry farms (in Lam Dong province) suspected IB includes respiratory signs such as sneezing, tracheal rale sound and wet dropping increased water intake Common gross lesions were tracheal hemorrhage and swollen urated kidneys (2) Virus isolation from 100 specimens by injection into allantoic of IB negative-embryonated eggs (9 day old) showed that 54% sample having embryotic dwarfing and curling lesion and 33% sample having embryotic urated kidney Determination on the presence of IB virus by RT – PCR technique resulted with nine positive samples Identification of IB serotype by nucleotide sequencing for samples showed that there are one isolate belonging to serotype Massachusetts (strain H120) and four isolates belonging to serotype 793B (strain 4/91) (3) Vaccine programs using 4080 broilers inoculated the IB H120 vaccine at day old divided into three groups Only group and group were boosteed with IB 4/91 and IB 88 vaccine, respectively, at 14 day old The antibody titre at 35 day old examinated by ELISA in group 1, and were 663, 1184 and 1125, respectively Incidences of death were different between group (2.5%) and (2.4%) compared to group (9,6%) The similar figure is for growth performance The final weights of group 1, and were 3.4 kg, 3.5 kg and 2.9 kg, respectively The results showed that vaccine programs of group and were more effective and more economically for controlling IB than that of group vi MỤC LỤC TRANG CHUẨN Y i LÝ LỊCH CÁ NHÂN ii LỜI CAM ĐOAN iii LỜI CẢM ƠN iv TÓM TẮT v SUMMARY vi MỤC LỤC vii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT x DANH SÁCH CÁC BẢNG xi DANH SÁCH CÁC HÌNH xii MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Bệnh viêm phế quản truyền nhiễm 1.1.1 Lịch sử bệnh .3 1.1.2 Căn bệnh 1.1.3 Biến đổi cấu trúc kháng nguyên phương pháp định type .6 1.1.4 Cơ chế sinh bệnh 1.1.5 Phương thức truyền lây 1.1.6 Triệu chứng 10 1.1.7 Bệnh tích 12 1.1.8 Chẩn đoán bệnh .13 1.1.9 Miễn dịch 17 1.1.10 Phòng bệnh 18 1.1.11 Vaccine đánh giá hiệu vaccine 18 1.2 Kỹ thuật reverse transcriptase - polymerase chain reaction (RT - PCR) 20 1.2.1 Nguyên tắc .20 1.2.2 Các yếu tố ảnh hưởng 22 vii 1.2.3 Ứng dụng 23 1.3 Tình hình chăn nuôi gia cầm Lâm Đồng 28 1.4 Sơ lược số nghiên cứu trước Việt Nam liên quan đến đề tài 29 Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 30 2.2 Đối tượng nghiên cứu 30 2.3 Nội dung phương pháp thực 30 2.3.1 Nội dung 30 2.3.2 Phương pháp thực .31 2.3.2.1 Thông tin liên quan đến trại gà triệu chứng, bệnh tích đại thể vi thể gà bệnh hơ hấp nghi ngờ bệnh virus IB .31 2.3.2.2 Phân lập mẫu gà bệnh hô hấp nghi ngờ bệnh virus IB, xác định diện định serotype virus gây bệnh IB .33 2.3.2.3 Khả phòng bệnh IB vaccine 38 2.4 Xử lý số liệu 40 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Thông tin liên quan đến trại gà triệu chứng, bệnh tích đại thể vi thể gà bệnh hơ hấp nghi ngờ bệnh virus IB 41 3.1.1 Thông tin liên quan đến trại gà nghi ngờ bệnh virus IB .41 3.1.2 Triệu chứng, bệnh tích đại thể vi thể gà nghi ngờ bệnh virus IB .42 3.2 Phân lập, xác định diện định serotype virus gây bệnh IB 45 3.2.1 Phân lập môi trường phôi trứng .45 3.2.2 Xác định diện virus IB phân lập 46 3.2.2.1 Xác định hiện virus IB phân lập 46 3.2.2.2 So sánh kết RT - PCR dương tính kết khảo sát nội dung1 47 3.2.3 Định serotype IB phân lập phương pháp giải trình tự gene 52 3.3 Khả phòng bệnh IB vaccine 53 3.3.1 Hiệu giá kháng thể 54 viii | | | |||| |||||||||||||||||| ||||| || | | | | || || |||| 4/91 21730 GAACT-GGCCGAGGTTTTATTACTAATGTAACTGACTCAT-CATCTAGTTATAATTATT 21786 Mẫu75 587 TAGCAGATGGTGGGTTAGCTATCTTAGATACGTCTGGAGCCATAGACACCT TTGTTGTAC 646 |||||| ||| ||||| ||||| |||||||| || || |||||||||| ||| ||||||| 4/91 21787 TAGCAGCTGGAGGGTTGGCTATTTTAGATACATCAGGTGCCATAGACATCT TCGTTGTAC 21846 Mẫu75 647 AAGGTGTACATGGTCGTAACTATTATAAGGTTAATCCTTGTGAAGATGTAA ACCAGCAGT 706 |||||| |||||||| ||| ||||| ||||||||||| |||||||||||||||||||||| 4/91 21847 AAGGTGAACATGGTCTTAATTATTACAAGGTTAATCCCTGTGAAGATGTAA ACCAGCAGT 21906 Mẫu75 707 TTGTAGTTTCTGGTGGTAAATTAGTAGGTATTCTTACCTCACGTAATGCAAC AGGTTCTC 766 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||| 4/91 21907 TTGTAGTTTCTGGTGGTAAATTAGTAGGTATTCTTACCTCACGTAATGAAAC AGGTTCTC 21966 Mẫu75 767 AGCCTCTTGAGAATCAATTTTACATTAAACTCACTAAAGAGACACGCCGTC TTAGACGTT 826 ||||||||||||||||||| || ||||||||||||||||||||||| ||| ||||||||| 4/91 21967 AGCCTCTTGAGAATCAATTCTATATTAAACTCACTAAAGAGACACGTCGTT TTAGACGTT 22026 104 Mẫu75 827 CTACTAGTGAAAATGTAACAAGTTGTTCTTATGTAAGTTATGGCAGGTTTTG TATACAAC 886 ||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 22027 CTACTAGTGAAAATGTAACAAGTTGCTCTTATGTAAGTTATGGCAGGTTTT GTATACAAC 22086 Mẫu75 887 CTGATGGTTCTATTAAGCAAATAGTACCGCAAGAATTAAAAAATTTTGTGG CACCTTTGT 946 |||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||||| 4/91 22087 CTGATGGTTCTATTAAGCAAATAGTACCGCAAGAATTAGAAAATTTTGTGG CACCTTTGT 22146 Mẫu75 947 TAAATGTTACTGAAAATGTGCTCATACCTAACAGTTTTAATTTAACTGTTAC AGATGAGT 1006 ||||| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||| 4/91 22147 TAAATTTTACTGAAAATGTGCTCATACCTAACAGTTTTAATTTGACTGTTAC AGATGAGT 22206 Mẫu75 1007 ACATACAAACACGTATGGATAAAGTTCAAATTAATTGCCTGCAATATGTTT GTGGTAATT 1066 |||||||||||||||||||||| || ||||| |||||||| ||||||||||| || |||| 4/91 22207 ACATACAAACACGTATGGATAAGGTCCAAATCAATTGCCTTCAATATGTTT GCGGCAATT 22266 Mẫu75 1067 CTTTGGATTGTAGGAAGTTATTTCAACAATATGGTCCTGTCTGTGAAAACAT ATTGTCTA 1126 ||||||| ||||| || || ||||||||||||||||| || ||||| || ||||||||| 105 4/91 22267 CTTTGGAGTGTAGAAAATTGTTTCAACAATATGGTCCGGTTTGTGATAATAT ATTGTCTG 22326 Mẫu75 1127 TAGTAAATAGTGTTGGTCAAAAAGAAGATATGGAACTTTTAAGTTTCTATT CTTCTACTA 1186 | |||||||||||| |||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||| 4/91 22327 TTGTAAATAGTGTTAGTCAAAAAGAAGATATGGAACTTTTAAGCTTCTATT CTTCTACTA 22386 Mẫu75 1187 AACCAGCTGGTTATAATGCACCTGTTTTTAGTAATATTAGTACTGGTGATTT TAATATTT 1246 ||||| |||||| || |||| ||| |||||||| | || |||||||| || ||||||| 4/91 22387 AACCAAAGGGTTATGATACACCAGTTCTTAGTAATGTAAGCACTGGTGAAT TCAATATTT 22446 Mẫu75 1247 CTCTTTTATTAAGACCACCTAGTAGTCCTAGAGGTCGTTCTTTTATAGAAGA T-TTGTTA 1305 ||||| | || | ||| |||||||||||||| || |||||||| || |||||| || | | 4/91 22447 CTCTTCTCTTGACACCCCCTAGTAGTCCTAGTGGGCGTTCTTTCATTGAAGA TCTTCT-A 22505 Mẫu75 1306 TTTACAAGTGTTGAAACAGTTGGTTTGCCAACTGATGCTGAATATAAAAAA TGCACAGCA 1365 |||||||||||||||||||||||||| || ||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 22506 TTTACAAGTGTTGAAACAGTTGGTTTACCGACTGATGCTGAATATAAAAAA TGCACAGCG 22565 106 Mẫu75 1366 GGACCTTTAGGTACTCTTAAGGATCTTATCTGTGCTAGGGAATATAATGGTT TATTAGTG 1425 |||||||| ||||| ||||| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 22566 GGACCTTTGGGTACCCTTAAAGATCTTATCTGTGCTAGGGAATATAATGGT TTATTAGTG 22625 Mẫu75 1426 TTGCCTCCAATTATTACGGCGGATATGCAAACAATGTATACTGCTTCTTTAG TTGGTGCC 1485 ||||||||||| ||||||||||||||||||||||||||||| || |||||||| ||||| 4/91 22626 TTGCCTCCAATCATTACGGCGGATATGCAAACAATGTATACCGCGTCTTTA GTAGGTGCT 22685 Mẫu75 1486 ATGGCTTTTGGTGGTATTACAGCAGCAGGTGCCATACCATTTGC 1529 ||||||||||||||||||||| |||| | || ||||| ||||| 4/91 22686 ATGGCTTTTGGTGGTATTACATCAGCTGCAGCTATACCTTTTGC 22729 Độ tương đồng nucleotide mẫu 76 so với dòng chuẩn IB 4/91 serotype 793B Mẫu76 TACTAGTCTTGTTTTACATAATTTTACTTTTCATAATGAGACTAATG-CACAACCTAAT 60 ||||| |||| ||| || || || |||||| ||||||| ||||||| | | ||||| 4/91 21206 TACTACTCTTACTTTAACCAACTTCACTTTTTATAATGAAACTAATGCCTC-GCCTAA- 21262 Mẫu76 61 TTAGTAGGTAATGTTAATAGTATTCCAACTTATCAAACGCAAACAGCTCAG AGTGGTTAT 120 || |||| ||| ||| ||| ||||||||||||| ||||||||||||||||||||| 107 4/91 21263 TT-CAGGTGGTGTCAATTCCATTTCAACTTATCAAACACAAACAGCTCAGAGTG GTTAT 21320 Mẫu76 121 TATAATTTTAATTTATCATTTCTGAGTAGGTTTGTGTATAAACACTCTGATT ACATGTAT 180 |||||||||||||||||||||||| |||| |||||||||||| | ||| ||| ||||||| 4/91 21321 TATAATTTTAATTTATCATTTCTGGGTAGTTTTGTGTATAAAGAGTCTAATT TCATGTAT 21380 Mẫu76 181 GGGTCTTACCACCCTGCATGTAATTTTAGATTAGAAACTATTAATAATGGCTTGTGGTT 239 |||||||||||||| | |||||||||||||| |||||| |||||||| ||| || ||||| 4/91 21381 GGGTCTTACCACCCATCATGTAATTTTAGACTAGAAATTATTAATAGTGGTTTATGGTT 21439 Mẫu76 240 TAATTCACTGTCAGTTTCATTAGCTTACGGACCACTTCAAGGTGGGTGTAAGCAGTCAG 298 ||| ||||| ||| |||| || ||||||||||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 21440 TAACTCACTTTCAATTTCGCTTGCTTACGGACCACTTCAAGGTGGGTGTAAGCAGTCAG 21498 Mẫu76 299 TTTTTAGTGGTAGGGCAACGTGTTGCTATGCCTACTCTTACAATGGCCCGAT A-GCCTGT 357 |||||||| |||| || || ||||| ||||| || || || || || || | | || ||| 4/91 21499 TTTTTAGTAGTAGAGCCACTTGTTGTTATGCTTATTCATATAAAGGTCCACACGCTTGT 21557 108 Mẫu76 358 AAAGGTGTCTATTCAGGCGAATTACAGACTAATTTTGAATGTGGATTGCTGGTTTATGT 416 || ||||| || |||| || || | | | |||||||||||||||||| |||||||||| 4/91 21558 AAGGGTGTTTACGCAGGTGAGTTCCGTAAAAATTTTGAATGTGGATTGTTGGTTTATGT 21616 Mẫu76 417 TACTAAGARTGATGGCTCTCGTATACAAACTAGATCA-GAACC-CTTAG-TATTAACTC 472 |||||||| |||||||||||||||||||| | || ||||| | || || |||||| 4/91 21617 TACTAAGAGCGATGGCTCTCGTATACAAAC-GGCCACCGAACCAC-CAGTTA-TAACTC 21672 Mẫu76 473 AATACAATTATAATAATATTACTTTAGATAAGTGTGTTGATTATAATATATA TGGCAG-A 531 || ||||||||||||||||||||||| ||| |||||||||||||||||||||||||| | 4/91 21673 AACACAATTATAATAATATTACTTTAAATACTTGTGTTGATTATAATATATA TGGCAGAA 21732 Mẫu76 532 GTAGGCCAAGGTTTTATTACTAATGTGACTGATTC-TGCTGGCAATTTTAGTTATCTAG 589 | |||| |||||||||||||||||| ||||| || | | | | || || |||| ||| 4/91 21733 CT-GGCCGAGGTTTTATTACTAATGTAACTGACTCAT-CATCTAGTTATAATTATTTAG 21789 Mẫu76 590 CAGATGGTGGGTTAGCTATCTTAGATACGTCTGGAGCCATAGACACCTTTG TTGTACAAG 649 ||| ||| ||||| ||||| |||||||| || || |||||||||| ||| |||||||||| 4/91 21790 CAGCTGGAGGGTTGGCTATTTTAGATACATCAGGTGCCATAGACATCTTCG TTGTACAAG 21849 109 Mẫu76 650 GTGTACATGGTCGTAACTATTATAAGGTTAATCCTTGTGAAGATGTAAACC AGCAGTTTG 709 ||| |||||||| ||| ||||| ||||||||||| ||||||||||||||||||||||||| 4/91 21850 GTGAACATGGTCTTAATTATTACAAGGTTAATCCCTGTGAAGATGTAAACC AGCAGTTTG 21909 Mẫu76 710 TAGTTTCTGGTGGTAAATTAGTAGGTATTCTTACCTCACGTAATGCAACAG GTTCTCAGC 769 ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||| 4/91 21910 TAGTTTCTGGTGGTAAATTAGTAGGTATTCTTACCTCACGTAATGAAACAG GTTCTCAGC 21969 Mẫu76 770 CTCTTGAGAATCAATTTTACATTAAACTCACTAAAGAGACACGCCGTCTTA GACGTTCTA 829 |||||||||||||||| || ||||||||||||||||||||||| ||| |||||||||||| 4/91 21970 CTCTTGAGAATCAATTCTATATTAAACTCACTAAAGAGACACGTCGTTTTA GACGTTCTA 22029 Mẫu76 830 CTAGTGAAAATGTAACAAGTTGTTCTTATGTAAGTTATGGCAGGTTTTGTAT ACAACCTG 889 |||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 22030 CTAGTGAAAATGTAACAAGTTGCTCTTATGTAAGTTATGGCAGGTTTTGTAT ACAACCTG 22089 Mẫu76 890 ATGGTTCTATTAAGCAAATAGTACCGCAAGAATTAAAAAATTTTGTGGCAC CTTTGTTAA 949 ||||||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||||||||||| 110 4/91 22090 ATGGTTCTATTAAGCAAATAGTACCGCAAGAATTAGAAAATTTTGTGGCAC CTTTGTTAA 22149 Mẫu76 950 ATGTTACTGAAAATGTGCTCATACCTAACAGTTTTAATTTAACTGTTACAGA TGAGTACA 1009 || ||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||| 4/91 22150 ATTTTACTGAAAATGTGCTCATACCTAACAGTTTTAATTTGACTGTTACAGA TGAGTACA 22209 Mẫu76 1010 TACAAACACGTATGGATAAAGTTCAAATTAATTGCCTGCAATATGTTTGTG GTAATTCTT 1069 ||||||||||||||||||| || ||||| |||||||| ||||||||||| || ||||||| 4/91 22210 TACAAACACGTATGGATAAGGTCCAAATCAATTGCCTTCAATATGTTTGCG GCAATTCTT 22269 Mẫu76 1070 TGGATTGTAGGAAGTTATTTCAACAATATGGTCCTGTCTGTGAAAACATAT TGTCTATAG 1129 |||| ||||| || || ||||||||||||||||| || ||||| || ||||||||| | | 4/91 22270 TGGAGTGTAGAAAATTGTTTCAACAATATGGTCCGGTTTGTGATAATATAT TGTCTGTTG 22329 Mẫu76 1130 TAAATAGTGTTGGTCAAAAAGAAGATATGGAACTTTTAAGTTTCTATTCTTC TACTAAAC 1189 ||||||||||| |||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||| 4/91 22330 TAAATAGTGTTAGTCAAAAAGAAGATATGGAACTTTTAAGCTTCTATTCTT CTACTAAAC 22389 111 Mẫu76 1190 CAGCTGGTTATAATGCACCTGTTTTTAGTAATATTAGTACTGGTGATTTTAA TATTTCTC 1249 || |||||| || |||| ||| |||||||| | || |||||||| || |||||||||| 4/91 22390 CAAAGGGTTATGATACACCAGTTCTTAGTAATGTAAGCACTGGTGAATTCA ATATTTCTC 22449 Mẫu76 1250 TTTTATTAAGACCACCTAGTAGTCCTAGAGGTCGTTCTTTTATAGAAGATTTGTTATTT 1308 || | || | ||| |||||||||||||| || |||||||| || |||||| || | |||| 4/91 22450 TTCTCTTGACACCCCCTAGTAGTCCTAGTGGGCGTTCTTTCATTGAAGATCT TCT-ATTT 22508 Mẫu76 1309 ACAAGTGTTGAAACAGTTGGTTTGCCAACTGATGCTGAATATAAAAAATGC ACAGCAGGA 1368 ||||||||||||||||||||||| || ||||||||||||||||||||||||||||| ||| 4/91 22509 ACAAGTGTTGAAACAGTTGGTTTACCGACTGATGCTGAATATAAAAAATGC ACAGCGGGA 22568 Mẫu76 1369 CCTTTAGGTACTCTTAAGGATCTTATCTGTGCTAGGGAATATAATGGTTTAT TAGTGTTG 1428 ||||| ||||| ||||| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 22569 CCTTTGGGTACCCTTAAAGATCTTATCTGTGCTAGGGAATATAATGGTTTAT TAGTGTTG 22628 112 Mẫu76 1429 CCTCCAATTATTACGGCGGATATGCAAACAATGTATACTGCTTCTTTAGTTG GTGCCATG 1488 |||||||| ||||||||||||||||||||||||||||| || |||||||| ||||| ||| 4/91 22629 CCTCCAATCATTACGGCGGATATGCAAACAATGTATACCGCGTCTTTAGTA GGTGCTATG 22688 Mẫu76 1489 GCTTTTGGTGGTATTACAGCAGC 1511 |||||||||||||||||| |||| 4/91 22689 GCTTTTGGTGGTATTACATCAGC 22711 Độ tương đồng nucleotide mẫu 80 so với dòng chuẩn IB 4/91 serotype 793B Mẫu80 AATACTAGTCTTGTTTTACATAATTTTACTTTTCATAATGAGACTAATG-CACAACCTA 58 ||||||| |||| ||| || || || |||||| ||||||| ||||||| | | |||| 4/91 21204 AATACTACTCTTACTTTAACCAACTTCACTTTTTATAATGAAACTAATGCCTC-GCCTA 21261 Mẫu80 59 ATTTAGTAGGTAATGTTAATAGTATTCCAACTTATCAAACGCAAACAGCTC AGAGTGGTT 118 | || |||| ||| ||| ||| ||||||||||||| ||||||||||||||||||| 4/91 21262 A-TT-CAGGTGGTGTCAATTCCATTTCAACTTATCAAACACAAACAGCTCAGAGTG GTT 21318 Mẫu80 119 ATTATAATTTTAATTTATCATTTCTGAGTAGGTTTGTGTATAAACACTCTGA TTACATGT 178 |||||||||||||||||||||||||| |||| |||||||||||| | ||| ||| ||||| 4/91 21319 ATTATAATTTTAATTTATCATTTCTGGGTAGTTTTGTGTATAAAGAGTCTAA TTTCATGT 21378 113 Mẫu80 179 ATGGGTCTTACCACCCTGCATGTAATTTTAGATTAGAAACTATTAATAATGGCTTGTGG 237 |||||||||||||||| | |||||||||||||| |||||| |||||||| ||| || ||| 4/91 21379 ATGGGTCTTACCACCCATCATGTAATTTTAGACTAGAAATTATTAATAGTGGTTTATGG 21437 Mẫu80 238 TTTAATTCACTGTCAGTTTCATTAGCTTACGGACCACTTCAAGGTGGGTGTAAGCAGTC 296 ||||| ||||| ||| |||| || ||||||||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 21438 TTTAACTCACTTTCAATTTCGCTTGCTTACGGACCACTTCAAGGTGGGTGTAAGCAGTC 21496 Mẫu80 297 AGTTTTTAGTGGTAGGGCAACGTGTTGCTATGCCTACTCTTACAATGGCCCG ATA-GCCT 355 |||||||||| |||| || || ||||| ||||| || || || || || || | | || | 4/91 21497 AGTTTTTAGTAGTAGAGCCACTTGTTGTTATGCTTATTCATATAAAGGTCCACACGCTT 21555 Mẫu80 356 GTAAAGGTGTCTATTCAGGCGAATTACAGACTAATTTTGAATGTGGATTGCTGGTTTAT 414 |||| ||||| || |||| || || | | | |||||||||||||||||| |||||||| 4/91 21556 GTAAGGGTGTTTACGCAGGTGAGTTCCGTAAAAATTTTGAATGTGGATTGTTGGTTTAT 21614 Mẫu80 415 GTTACTAAGARTGATGGCTCTCGTATACAAACTAGATCA-GAACC-CTTAG-TATTAAC 470 |||||||||| |||||||||||||||||||| | || ||||| | || || |||| 4/91 21615 GTTACTAAGAGCGATGGCTCTCGTATACAAAC-GGCCACCGAACCAC-CAGTTA-TAAC 21670 114 Mẫu80 471 TCAATACAATTATAATAATATTACTTTAGATAAGTGTGTTGTTTATAATATA TATGGCAG 530 |||| ||||||||||||||||||||||| ||| ||||||| |||||||||||||||||| 4/91 21671 TCAACACAATTATAATAATATTACTTTAAATACTTGTGTTGATTATAATATA TATGGCAG 21730 Mẫu80 531 -AGTAGGCCAAGGTTTTATTACTAATGTGACTGATTCTGCTGGC-AATTTTAGTTATCT 587 | | |||| |||||||||||||||||| ||||| || | | | | || || |||| | 4/91 21731 AACT-GGCCGAGGTTTTATTACTAATGTAACTGACTCAT-CATCTAGTTATAATTATTT 21787 Mẫu80 588 AGCAGATGGTGGGTTAGCTATCTTAGATACGTCTGGAGCCATAGACACCTT TGTTGTACA 647 ||||| ||| ||||| ||||| |||||||| || || |||||||||| ||| |||||||| 4/91 21788 AGCAGCTGGAGGGTTGGCTATTTTAGATACATCAGGTGCCATAGACATCTT CGTTGTACA 21847 Mẫu80 648 AGGTGTACATGGTCGTAACTATTATAAGGTTAATCCTTGTGAAGATGTAAA CCAGCAGTT 707 ||||| |||||||| ||| ||||| ||||||||||| ||||||||||||||||||||||| 4/91 21848 AGGTGAACATGGTCTTAATTATTACAAGGTTAATCCCTGTGAAGATGTAAA CCAGCAGTT 21907 Mẫu80 708 TGTAGTTTCTGGTGGTAAATTAGTAGGTATTCTTACCTCACGTAATGCAACA GGTTCTCA 767 ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||| 115 4/91 21908 TGTAGTTTCTGGTGGTAAATTAGTAGGTATTCTTACCTCACGTAATGAAACA GGTTCTCA 21967 Mẫu80 768 GCCTCTTGAGAATCAATTTTACATTAAACTCACTAAAGAGACACGCCGTCT TAGACGTTC 827 |||||||||||||||||| || ||||||||||||||||||||||| ||| |||||||||| 4/91 21968 GCCTCTTGAGAATCAATTCTATATTAAACTCACTAAAGAGACACGTCGTTTT AGACGTTC 22027 Mẫu80 828 TACTAGTGAAAATGTAACAAGTTGTTCTTATGTAAGTTATGGCAGGTTTTGT ATACAACC 887 |||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 22028 TACTAGTGAAAATGTAACAAGTTGCTCTTATGTAAGTTATGGCAGGTTTTGT ATACAACC 22087 Mẫu80 888 TGATGGTTCTATTAAGCAAATAGTACCGCAAGAATTAAAAAATTTTGTGGC ACCTTTGTT 947 ||||||||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||||||||| 4/91 22088 TGATGGTTCTATTAAGCAAATAGTACCGCAAGAATTAGAAAATTTTGTGGC ACCTTTGTT 22147 Mẫu80 948 AAATGTTACTGAAAATGTGCTCATACCTAACAGTTTTAATTTAACTGTTACA GATGAGTA 1007 |||| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||| 4/91 22148 AAATTTTACTGAAAATGTGCTCATACCTAACAGTTTTAATTTGACTGTTACA GATGAGTA 22207 116 Mẫu80 1008 CATACAAACACGTATGGATAAAGTTCAAATTAATTGCCTGCAATATGTTTG TGGTAATTC 1067 ||||||||||||||||||||| || ||||| |||||||| ||||||||||| || ||||| 4/91 22208 CATACAAACACGTATGGATAAGGTCCAAATCAATTGCCTTCAATATGTTTG CGGCAATTC 22267 Mẫu80 1068 TTTGGATTGTAGGAAGTTATTTCAACAATATGGTCCTGTCTGTGAAAACAT ATTGTCTAT 1127 |||||| ||||| || || ||||||||||||||||| || ||||| || ||||||||| | 4/91 22268 TTTGGAGTGTAGAAAATTGTTTCAACAATATGGTCCGGTTTGTGATAATAT ATTGTCTGT 22327 Mẫu80 1128 AGTAAATAGTGTTGGTCAAAAAGAAGATATGGAACTTTTAAGTTTCTATTC TTCTACTAA 1187 |||||||||||| |||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||| 4/91 22328 TGTAAATAGTGTTAGTCAAAAAGAAGATATGGAACTTTTAAGCTTCTATTC TTCTACTAA 22387 Mẫu80 1188 ACCAGCTGGTTATAATGCACCTGTTTTTAGTAATATTAGTACTGGTGATTTT AATATTTC 1247 |||| |||||| || |||| ||| |||||||| | || |||||||| || |||||||| 4/91 22388 ACCAAAGGGTTATGATACACCAGTTCTTAGTAATGTAAGCACTGGTGAATT CAATATTTC 22447 Mẫu80 1248 TCTTTTATTAAGACCACCTAGTAGTCCTAGAGGTCGTTCTTTTATAGAAGAT -TTGTTAT 1306 117 |||| | || | ||| |||||||||||||| || |||||||| || |||||| || | || 4/91 22448 TCTTCTCTTGACACCCCCTAGTAGTCCTAGTGGGCGTTCTTTCATTGAAGAT CTTCT-AT 22506 Mẫu80 1307 TTACAAGTGTTGAAACAGTTGGTTTGCCAACTGATGCTGAATATAAAAAAT GCACAGCAG 1366 ||||||||||||||||||||||||| || ||||||||||||||||||||||||||||| | 4/91 22507 TTACAAGTGTTGAAACAGTTGGTTTACCGACTGATGCTGAATATAAAAAAT GCACAGCGG 22566 Mẫu80 1367 GACCTTTAGGTACTCTTAAGGATCTTATCTGTGCTAGGGAATATAATGGTTT ATTAGTGT 1426 ||||||| ||||| ||||| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| 4/91 22567 GACCTTTGGGTACCCTTAAAGATCTTATCTGTGCTAGGGAATATAATGGTTT ATTAGTGT 22626 Mẫu80 1427 TGCCTCCAATTATTACGGCGGATATGCAAACAATGTATACTGCTTCTTTAGT TGGTGCCA 1486 |||||||||| ||||||||||||||||||||||||||||| || |||||||| ||||| | 4/91 22627 TGCCTCCAATCATTACGGCGGATATGCAAACAATGTATACCGCGTCTTTAG TAGGTGCTA 22686 Mẫu80 1487 TGGCTTTTGGTGGTATTACAGCAGC 1511 |||||||||||||||||||| |||| 4/91 22687 TGGCTTTTGGTGGTATTACATCAGC 22711 118 ... đường Hùng Vương, thị trấn Di Linh, huyện Di Linh, tỉnh Lâm Đồng Điện thoại: 0907122102 Email: Kimyen.ttnn@gmail.com ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công bố luận văn trung thực phần đề tài cấp... SEROTYPE VIRUS GÂY BỆNH VIÊM PHẾ QUẢN TRUYỀN NHIỄM VÀ PHÒNG BỆNH CHO GÀ THỊT BẰNG VACCINE NGUYỄN THỊ KIM YẾN Hội đồng chấm luận văn Chủ tịch: TS TRẦN THỊ BÍCH LIÊN Hội Thú y Việt Nam Thư ký: TS NGUYỄN... Ủy viên: TS NGUYỄN TẤT TỒN Trường Đại học Nơng Lâm TP.HCM i LÝ LỊCH CÁ NHÂN Tôi tên Nguyễn Thị Kim Yến sinh ngày 20 tháng 03 năm 1972 huyện Di Linh, tỉnh Lâm Đồng Tốt nghiệp PTTH trại trường