Nghiên cứu kiểu hình và kiểu gen ở bệnh nhi beta thalassmia tt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BỘ Y TẾ NGUYỄN HOÀNG NAM NGHI£N CøU KIĨU HÌNH VÀ KIĨU GEN ë BƯNH NHI BETA-THALASSEMIA Chun ngành: Nhi khoa Mã số: 62720135 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2019 Công trinh hoàn thành TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Bùi Văn Viên TS Dương Bá Trực Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Trường Họp Trường Đại học Y Hà Nội Vào hồi giờ, ngày tháng, năm 2019 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Quốc gia - Thư viện Trường Đại học Y Hà Nội ĐẶT VẤN ĐỀ Beta-thalassemia bệnh giảm hay không tổng hợp mạch globin β hemoglobin, đột biến gen β-globin (HBB) Bệnh di truyền theo quy luật alen lặn, nhiễm sắc thể thường Lâm sàng β-thalassemia không đồng nhất, từ thể nhẹ khơng có triệu chứng đến thể nặng Mức độ nặng bệnh liên quan tới cân mạch globin alpha beta, với đặc điểm đột biến kiểu gen HBB Nghiên cứu kiểu hình, kiểu gen β-thalassemia sở khoa học cho chẩn đoán trước sinh Nghiên cứu đột biến gen β-thalassemia Việt Nam chưa đủ, chưa có nghiên cứu mối liên quan kiểu gen-kiểu hình β-thalassemia Xuất phát từ đó, chúng tơi nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu kiểu hình kiểu gen bệnh nhi β -thalassemia” Mục tiêu nghiên cứu: Mô tả kiểu hình lâm sàng, huyết học bệnh nhi mắc betathalassemia Bệnh viện Nhi trung ương; Xác định đột biến gen β -thalassemia trẻ bệnh; Đối chiếu kiểu hình kiểu gen trẻ mắc β -thlassemia thể nặng trung gian TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN β-thalassemia bệnh di truyền phổ biến Viêt Nam Điều trị thalassemia thể nặng trung gian chủ yếu truyền máu, thải sắt suốt đời, ghép tủy xương, gánh nặng cho gia đình xã hội Do việc dự phòng nhằm hạn chế sinh thể bệnh nặng trung gian quan trọng Để có sở khoa học cho việc dự phòng cần phải biết đặc điểm vể di truyền bệnh Vì nghiên cứu cấp thiết, có ý nghĩa khoa học thực tiễn NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN - Đã phát nhiều dạng đột biến nghiên cứu công bố trước Việt Nam -88 - Nghiên cứu đặc điểm đột biến gen HBB thấy xảy nhiều tiến trình dịch mã RNA hoàn thiện RNA phiên mã, đa số exon intron vùng khởi động, nên đa số đột biến có kiểu hình β0 Từ rút kết luận, Việt Nam β0-thalassemia phổ biến β+-thalassemia - Nghiên cứu đối chiếu kiểu gen với kiểu hình thể bệnh nặng trung gian thấy đột biến CD41/42, CD17, CD71/72 kiểu gen phối hợp đột biến với đột biến khác liên quan nhiều đến thể bệnh nặng, đưa kiến nghị định đình thai cho chẩn đốn trước sinh BỐ CỤC LUẬN ÁN Luận án trình bày 112 trang, bao gồm : Đặt vấn đề trang, tổng quan tài liệu 36 trang, đối tượng phương pháp nghiên cứu 12 trang, kết nghiên cứu 28 trang, bàn luận 29 trang, kết luận trang, kiến nghị trang Luận án có 47 bảng, 15 hình, sơ đồ Tài liệu tham khảo có 143, có 24 tài liệu tiếng Việt, 119 tài liệu tiếng Anh CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Dịch tễ học Phân bố beta-thalassemia giới Beta-thalassemia bệnh di truyền liên quan chặt chẽ với nguồn gốc dân tộc, phân bố khắp toàn cầu, song mang tính chất địa dư rõ rệt Theo Liên đồn Thalassemia quốc tế (2005) ước tính có 1,5% dân số giới, 8090 triệu người mang gen β-thalassemia, năm có thêm 60.000 trường hợp sinh mang gen bệnh Riêng khu vực Đông Nam Châu Á, số người mang gen β-thalassemia tới 50% người mang gen toàn cầu, khoảng 40 triệu người Beta-thalassemia Việt Nam Bệnh hemoglobin phổ biến α-thalasemia, β-thalassemia HbE Bệnh có tất tỉnh thành, nhiều dân tộc khác Bệnh phổ biến dân tộc người miền núi cao nguyên Beta-thalassemia phổ biến người dân tộc người miền Bắc Hemoglobin E phổ biến miền Trung miền Nam Ở Việt Nam, β0-thalassemia phổ biến β+thalassemia 1.2 Cơ sở di truyền β-thalassemia Hemoglobin bình thường Hemoglobin (Hb) gồm hai thành phần hem globin Globin gồm mạch polypeptid, mạch loại α, mạch loại β Ở người có loại Hb bình thường Hb thời kỳ phôi thai Hb Gower 1, Hb Gower Hb Portland Hb thời kỳ thai nhi đến trưởng thành HbA1, HbA2 HbF Cấu trúc globin HbA1 α2β2 HbA2 α2δ2 HbF α2γ1 Các gen mã hóa tổng hợp globin hemoglobin Các gen mã hóa cho tổng hợp globin Hb người xếp thành cụm Các gen loại α nhiễm sắc thể 16, gen-loại β thấy nhiễm sắc thể 11 Cụm gen globin α gồm gen chức năng, ba gen gen ξ2 mã hóa cho mạch ξ, thành phần Hb phơi thai Gower 1, hai gen lại gen đơi α1 α2 mã hóa cho mạch globin α Cụm gen loại globin β gồm gen chức năng, gen ε mã hóa cho globin ε có Hb Gower Hb Gower 2, gen γ mã hóa cho globin γ HbF, hai gen lại gen δ cho globin δ gen β cho globin β Đột biến gen HBB gây beta-thalasemia Đột biến gây β-thalassemia thay đổi đặc hiệu không đồng DNA Đột biến thay đổi base đơn thuần; hay nhiều nucleotid; đảo đoạn hay tái xếp chuỗi DNA Đột biến gen HBB ảnh hưởng tới nhiều giai đoạn biểu gen, phiên mã, hoàn thiện RNA dịch mã RNA, ảnh hưởng đến tổng hợp globin, làm thay đổi tỷ lệ tổng hợp mạch globin, thay đổi thành phần hemoglobin bệnh cảnh lâm sàng khác Kiểu hình bệnh betathalassemia phụ thuộc vào thay đổi đột biến gen Hiện phát 200 đột biến β-thalassemia, phân bố loại đột biến khác tùy khu vực, quốc gia dân tộc.Trong có khoảng 150 đột biến điểm, lại đoạn ngắn số loại gặp khác.Phần lớn đột biến mơ tả, có khoảng 20 đột biến hay gặp, chiếm 80% đột biến gen β Thalassemia giới Mỗi vùng có tần suất β Thalassemia cao thường có – đột biến phổ biến Các đột biến gen beta-thalassemia phân thành lớp, nhiều vị trí khác (1) Đột biến phiên mã, vùng khởi động 5’-UTR (5’-không phiên mã) (2) Đột biến hoàn thiện RNA vị trí nối, nối đồng thuận, intron, exon 3’-UTR (vùng 3’–không phiên mã) (3) Đột biến dịch mã RNA , vị trí codon khởi đầu, codon vơ nghĩa dịch khung (frameshift) Ngồi có đột biến đoạn đột biến trội Đột biến phiên mã ảnh hưởng đến trình tự khởi động phiên mã, làm giảm tổng hợp mạch β-globin tạo β+-thalasemia Đột biến dịch mã RNA làm chấm dứt chuỗi gián đoạn β-globin RNA, nên không tổng hợp mạch β-globin, tạo β0-thalassemia Những đột biến hoàn thiện RNA ảnh hưởng đến trình thơng tin mRNA gây biến đổi nucleotide, dẫn đến β +-thalassemia hay β0thalassemia Đột biến vị trí nối, intron hay exon gây β 0-thalassemia, vị trí 3’-UTR gây β+-thalasemia Tần số đột biến gen beta-thalassemia Việt Nam Nghiên cứu đột biến gen beta-globin gây beta-thalassemia người Việt Nam chưa đầy đủ Kết cơng bố cho thấy có loại đột biến phổ biến gây 95% trường hợp beta-thalassemia, gồm CD17 (AAGTAG), CD 41/42 (-TCTT), -28 (A>G), CD 71/72 (+A), IVSI-1 (G>T), IVSI-5 (G>C), IVSI2-654 (C>T) CD 26 (GAG>AAG) gây bệnh HbE 1.3 Liên quan kiểu hình với kiểu gen beta-thalassemia Beta-thalassemia phân thành thể lâm sàng : thể mang gen ẩn, thể nhẹ, thể trung gian thể nặng Kiểu hình lâm sàng, huyết học phụ thuộc vào kiểu gen đột biến, vào phối hợp đột biến β0 hay β+ CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu 104 bệnh nhi, 55 bệnh nhi β-thalassemia 49 bệnh nhi βthalassemia/HbE vào Bệnh viện Nhi trung ương nghiên cứu, 50 tuổi, 39 từ 1-