Thiết lập môi trường dinh dưỡng và điều kiện nuôi cấy sản xuất sinh khối vi khuẩn serratia marcescens SH1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP THIẾT LẬP MÔI TRƯỜNG DINH DƯỠNG VÀ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY SẢN XUẤT SINH KHỐI VI KHUẨN SERRATIA MARCESCENS SH1 Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : Ts Nguyễn Hoài Hương Sinh viên thực : Nguyễn Thị Tâm MSSV: 1051110142 Lớp: 10DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2014 Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan đồ án kết nghiên cứu em, tiến hành phòng thí nghiệm Cơng Nghệ Sinh Học thuộc khoa Công nghệ Sinh học - Thực phẩm - Môi trường, Đại học Cơng Nghệ Thành phố Hồ Chí Minh Các kết quả, số liệu đồ án hoàn tồn trung thực, chưa có cơng bố Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2014 Sinh viên thực Nguyễn Thị Tâm Đồ án tốt nghiệp Để hoàn thành luận văn tốt nghiệp em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý Thầy cô Trường Đại Học Công Nghệ TpHCM, đặc biệt Thầy cô Khoa Môi trường Công nghệ sinh học tận tình dạy bảo cho em bao năm qua, trang bị cho em kiến thức quý giá tạo dựng cho em nhiều kinh nghiệm suốt trình học tập Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Nguyễn Hồi Hương, Cơ bên cạnh giúp đỡ bảo, hướng dẫn cho em suốt trình triển khai nghiên cứu hoàn thành đề tài tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn đến Thầy phòng thí nghiệm tạo điều kiện cung cấp hóa chất để em thực thí nghiệm Và cuối em muốn gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè người thân ln bên em động viên, ủng hộ em suốt thời gian học tập nghiên cứu vừa qua Kiến thức nhiều hạn chế, chắn không tránh khỏi sai sót, em mong thơng cảm góp ý chân thành thầy bạn Xin chân thành cảm ơn! Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2014 Sinh viên thực Nguyễn Thị Tâm Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC Trang DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH vi CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 Đặt vấn đề Mục đích để tài Mục tiêu, nhiệm vụ đề tài Nội dung đề tài Phương pháp xử lí số liệu Các kết đạt đề tài CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN 2.1 Giới thiệu thuốc bảo vệ thực vật sinh học 2.1.1 Khái niệm phân loại 2.1.2 Ứng dụng tuyến trùng diệt sâu 2.1.3 Ứng dụng vi khuẩn diệt sâu 2.2 Mối quan hệ vi khuẩn tuyến trùng EPN 2.2.1 Vai trò vi khuẩn cộng sinh tổ hợp tuyến trùng vi khuẩn 10 2.2.2 Vi khuẩn cộng sinh tạo độc tố diệt côn trùng 11 2.3 Giới thiệu Serratia marcescens 12 2.3.1 Lịch sử phát Serratia marcescens 12 2.3.2 Phân loại Serratia marcescens 13 2.3.3 Đặc điểm sinh lí 13 2.3.4 Đặc điểm sinh hóa 14 2.3.5 Đặc điểm phân bố 17 2.3.6 Tình hình nghiên cứu Serratia marcescens 19 2.4 Một số hợp chất tổng hợp Serratia marcescens 20 2.4.1 Sắc tố 20 2.4.2 Enzyme 21 2.4.3 Biosurfactants 22 2.5 Khả diệt sâu Serratia marcescens 23 2.6 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình lên men thu sinh khối 25 2.6.1 Quá trình lên men 25 2.6.2 Ảnh hưởng môi trường điều kiện lên men 27 i 2.6.2.1 Ảnh hưởng môi trường dinh dưỡng 29 2.6.2.2 Ảnh hưởng điều kiện lên men 30 CHƯƠNG 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHÊN CỨU 3.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 32 3.2 Vật liệu – môi trường – thiết bị sử dụng nghiên cứu 32 3.2.1 Vật liệu nghiên cứu 32 3.2.2 Môi trường 32 3.2.3 Hóa chất 32 3.2.4 Dụng cụ 33 3.2.5 Thiết bị 33 3.3 Phương pháp luận 34 3.4 Bố trí thí nghiệm 34 3.5 Phương pháp khảo sát đặc điểm sinh lý, sinh hóa định danh chủng SH1 38 3.5.1 Phương pháp quan sát hình thái sinh lý 38 3.5.2 Thử nghiệm sinh hóa định danh chủng SH1 Kit API 20E 39 3.5.3 Thử nghiệm hoạt tính enzyme 42 3.6 Phương pháp khảo sát môi trường nuôi cấy chủng Serratia marcescens SH1 42 3.6.1 Xây dựng đường cong tăng trưởng môi trường Nutrient broth 43 3.6.2 Xác định nguồn Nitơ tốt cho phát triển Serratia marcescen SH1 44 3.6.3 Xác định nguồn Cacbon tốt phát triển Serratia marcescens SH1 45 3.7 Phương pháp khảo sát điều kiện nuôi cấy S marcescens SH1 46 3.7.1 Khảo sát ảnh hưởng pH lên phát triển S marcescensSH1 47 3.7.2 Khảo sát ảnh hưởng điều kiện oxy lên phát triển S marcescens SH1 47 3.7.3 Khảo sát ảnh hưởng mật độ cấy giống lên phát triển S marcescens SH1 47 ii 3.7.4 Khảo sát ảnh hưởng việc bổ sung đệm lên phát triển S marcescens SH1 48 3.7.5 Xây dựng đường cong tăng trưởng S marcescens SH1 môi trường mớivà điều kiện nuôi cấy 49 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ BỆNH LUẬN 4.1 Kết quan sát hình thái sinh lý thử nghiệm hóa sinh 50 4.1.1 Quan sát hình thái, sinh lý 50 4.1.2 Kết hóa sinh với Kit API 20E 51 4.1.3 Kết thử nghiệm enzyme 53 4.2 Kết khảo sát môi trường nuôi cấy S marcescens SH1 56 4.2.1 Đường cong tăng trưởng môi trường Nutrient broth 56 4.2.2 Ảnh hưởng nguồn Nito lên phát triển S marcescens SH1 57 4.2.3 Ảnh hưởng nguồn Cacbon lên phát triển S marcescens SH1 58 4.3 Kết khảo sát điều kiện nuôi cấy S marcescens SH1 59 4.3.1 Ảnh hưởng pH lên phát triển S marcescens SH1 59 4.3.2 Ảnh hưởng điều kiện Oxy phát triển S marcescens SH1 61 4.3.3 Ảnh hưởng mật độ cấy giống lên phát triển S marcescens SH1 62 4.3.4 Ảnh hưởng việc bổ sung đệm lên phát triển S marcescens SH1 63 4.3.5 Xây dựng đường cong tăng trưởng S marcescens SH1 môi trường điều kiện nuôi cấy 65 CHƯƠNG 5: KẾT QUẢ VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 5.2 Kết 69 Kiến nghị 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO 70 PHỤ LỤC A: THÀNH PHẦN MÔI TRƯỜNG PHỤ LỤC B: XỬ LÝ THỐNG KÊ DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Một số đặc điểm sinh hóa Serratia marcescens 15 Bảng 2.2 Đặc điểm loài thuộc chi Serratia 16 Bảng 2.3 Tỉ lệ lồi Serratia phân lập từ mơi trường khác 18 Bảng 2.4 Tỉ lệ chủng Serratia marcescens phân lập từ môi trường khác 18 Bảng 3.1 Các tiêu định danh S marcescens SH1 Kit API 20E 40 Bảng 3.2 Hàm lượng % nitơ tổng nguồn nitơ 44 Bảng 3.3 Thành phần môi trường nguồn nitơ khảo sát 44 Bảng 3.4 Thành phần môi trường nguồn cacbon khảo sát 45 Bảng 3.5 Tỉ lệ mật độ giống khảo sát 48 Bảng 4.1 Kết sinh hóa Kit API chủng S marcescens SH1 52 Bảng 4.2 Mật độ tế bào (cfu/ml) sử dụng nguồn nitơ 57 Bảng 4.3 Mật độ tế bào (cfu/ml) sử dụng nguồn Cacbon 59 Bảng 4.4 Mật độ tế bào (cfu/ml) với độ pH 60 Bảng 4.5 Mật độ tế bào (cfu/ml) với điều kiện lắc 61 Bảng 4.6 Mật độ tế bào (cfu/ml) với tỉ lệ cấy giống 63 Bảng 4.7 Mật độ tế bào (cfu/ml) với nồng độ đệm môi trường nuôi cấy 64 Bảng 4.8 Các thông số động học nuôi cấy S marcescens SH1 môi trường 66 Bảng 4.9 Tính tốn giá thành mơi trường 67 Bảng 4.10 Chi phí sản xuất sinh khối mơi trường 67 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1 Serratia marcescens kính hiển vi 13 Hình 2.2 Khuẩn lạc S.marcescens mơi trường XLD 17 Hình 2.3 Khuẩn lạc S marcescens NA 17 Hình 2.4 Quy trình cơng nghệ lên men thu sinh khối 24 Hình 3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm khảo sát đặc điểm sinh lý, sinh hóa S marcescens SH1 35 Hình 3.2 Sơ đồ bố trí thí nghiệm khảo sát, chọn thành phần cho môi trường tốt cho phát triển S marcescen SH1 36 Hình 3.3 Sơ đồ bố trí thí nghiệm, khảo sát điều kiện nuôi cấy 37 Hình 4.1 Khuẩn lạc S marcescens SH1 mơi trường NA 50 Hình 4.2 Kết nhuộm Gram 51 Hình 4.3 Kết sinh hóa Kit API 20E 52 Hình 4.4 Thử nghiệm hoạt tính lipase SH1 Tween 20 54 Hình 4.5 Thử nghiệm hoạt tính protease 54 Hình 4.6 Khả phân giải chitin 55 Hình 4.7 Đường cong tăng trưởng S marcesces SH1 môi trường NB 56 Hình 4.8 Ảnh hưởng nguồn Nitơ lên phát triển S marcescens SH1 57 Hình 4.9 Ảnh hưởng nguồn Cacbon lên phát triển S marcescens SH1 58 Hình 4.10 Ảnh hưởng pH lên phát triển S marcescens SH1 60 Hình 4.11 Ảnh hưởng Oxy lên phát triển S marcescens SH1 61 Hình 4.12 Ảnh hưởng tỉ lệ cấy giống lên phát triển S marcescens SH1 62 Hình 4.13 Ảnh hưởng việc bổ sung đệm lên trình lên men phát triển S marcescens SH1 64 Hình 4.14 Đường cong tăng trưởng S marcescens SH1 môi trường NB môi trường 65 CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Từ xa xưa người biết sử dụng vi sinh vật đời sống ngày Các trình làm rượu, làm giấm, làm tương, muối chua… ứng dụng đặc tính sinh học nhóm vi sinh vật Khi khoa học phát triển, biết rõ vai trò vi sinh vật việc ứng dụng sản xuất đời sống ngày rộng rãi có hiệu Ví dụ việc chế vắc xin phòng bệnh, sản xuất kháng sinh Sử dụng vi sinh vật việc tạo phân bón sinh học, thuốc bảo vệ thực vật không gây hại môi trường, làm cân sinh thái Trong tự nhiên, vi sinh vật có lợi có vi sinh vật gây hại, ví dụ nhóm vi sinh vật gây bệnh cho người, động vật thực vật, lồi gây nhiễm nước, thực phẩm Nhưng ta nắm vững mặt lợi hay hại nó, ta đưa biện pháp khoa học để phát huy mặt lợi hạn chế mặt hại chúng gây Serratia marcescens biết đến loài vi khuẩn hội, bên cạnh biết đến với nhiều khả ứng dụng công nghệ sinh học khả diệt sâu, khả kháng khuẩn kháng nấm hợp chất thứ cấp sinh ra… Ngày để tăng suất sản lượng trồng trọt người dân thường sử dụng loại thuốc bảo vệ thực vật có nguồn gốc hóa học Tuy nhiên, việc sử dụng đem lại lợi ích trước mắt mà khơng đảm bảo thâm canh bền vững, bên cạnh đó, sản phẩm làm cho đất đai ngày bị ô nhiễm, diệt trừ nhiều lồi thiên địch có lợi cho trồng, cân sinh thái đất số vi sinh vật đất bị tiêu diệt Các thuốc trừ sâu hóa học tồn dư lâu, chúng không dễ dàng bị phân hủy dẫn đến tình trạng tồn dư tích đọng lại, ngấm sâu vào lòng đất nước gây hại khơng cho động vật, trồng mà người sống sống gần Nếu người hoăc lồi động vật ăn loại Ramina M Samira Y.Y (2009) The role of red pigment produced by Serratia marcescens as antibacterial and plasmid curing agent, University of Duhok, vol 12: 268-274 Rosenberg, M., Y Blumberger, H Judes, R Barness, E Rubinstein, and Y Mazor (1986) Cell surface hydrophobicity of pigmented and nonpigmented clinical Serratia marcescensstains Infect Immun.51: 932-935 Rokem, J S and P Weitzman (1987) Prodigiosin formation by Serratia marcescensin a chemostat Enzyme Microb Technol 9: 53-155 Raisainen, R., Nousiainen, P and Hynninen, P H (2002) Dermorubin and 5-chlorodermorubin natural anthraquinone carboxylic acids as dyes for wool Textile Research Journal 72: 973-976 R G Benedict, H J Koepsell, 2H M Tsuchiya, R W Jackson.,1957 Studies on the Aerobic Propagation of Serratia marcesce 308-312 Sole, M., A Francia, N Rius, and J G Loren (1997) The role of pH in the glucose effect on prodigiosin production by non-proliferating cells of Serratia marcescens Lett Appl Microbiol 25: 81-84 Silverman, M P and Elaine, F M (1973) Effect of iron and salt on prodigiosin synthesis in Serratia marcescens Journal of Bacteriology 114: 9991006 Suzuki T., Nakayama T., Kurihara T., Nishino T., Esaki N (2002) Cold active lipolytic activity of psychrotrophic Acinetobacter sp strain No 6, J Biosci Bioeng, 92: 144-148 Sole, M., Francia, A., Rius, N and Loren, J.G (1997).The role of pH in the ‘glucose effect’ on prodigiosin production by non-proliferating cells of Serratia marcescens Letters in Applied Microbiology 25: 81–84 Sundaramoorthy, N., Yogesh, P and Dhandapani, R (2009) Production of prodigiosin from Serratia marcescens isolated from soil Indian Journal of Science and Technology 2: 32-34 The genus Serratia.Boca Raton, CRC Press.Dauenhauer, S.A., Hull, R.A., Williams, R.P.1984.Cloning and expression in Escherichia coliof Serratia marcescens genesencoding prodigiosin biosynthesis.Journal of Bacteriology 158:1128–1132 Tariq A.L and John J.P (2010) Molecular Characterization of Psychrotrophic Serratia marcescens TS1 Isolate form Apple Garden at Badran Kashmir, Journal of Agriculture and Biological Sciences, 6(3): 364-369 Tambong, J.T.; Xu, R.; Sadiku, A.; Chen, Q.; Badiss, A.; Yu, Q, 2014; Molecular detection and analysis of a novel metalloprotease gene of entomopathogenic Serratia marcescens strains in infected Galleria mellonella Trias, J., M Vinas, J Guinea, and G Loren (1988) Induction of yellow pigmentation in Serratia marcescens Appl Environ Microbiol 54: 3138-3141 Vinas, M., A El-Ebiary, J Guinea, and J G Loren (1987) Effect of gramicidin A and Valinomycin on prodigiosin production by non-proliferating Serratia marcescens J Antibiot.150: 113-115 Wang QR, Li JY, Li ZS (1998) Dynamics and prospect on study of high acquisition of soil unavailable phosphorus by plant Plant Nutr Fertil Sci 4: 107109 Weiss, C M (1949) Spectrophotometric and chromatographic analyses of the pigment produced by members of the genus Serratia Journal of Cellular and Comparative Physiology 34: 467-492 Williams R.P and Qadri S.M.H (1980) Induction of Prodigiosin Biosynthesis after Shift-Down in Temperature of Nonproliferating Cells of Serratia marcescens, Appl Microbiol, 23: 704-709 Williams, R P., Green J A and Rappoport, D A (1956) Studies on pigmentation of Serratia marcescens I Spectral and paper chromatographic properties of prodigiosin Journal of Bacteriology 71: 115-120 Williams, R P (1973) Biosynthesis of Prodigiosin, a secondary metabolite of Serratia marcescens Applied Microbiology 25: 396-402 Witney, F R., Failia, M L and Weinberg, E D (1977).Phosphate inhibition of secondary metabolism in Serratia marcescens Applied and Environmental Microbiology 33: 1042-1046 Wasserman H.H., Rodgers G.C., Keith D.D (1969) Metacycloprodigiosin, a tripyrrole pigment from Streptomyces longisporus ruber, J Am Chem Soc, 91: 12631264 Yamashita, M., Nakagawa, Y., Li, H and Matsuyama, T (2001).Silica geldependent production of prodigiosin and serrawettins by Serratia marcescens in a liquid culture Environmental Microbiology 16: 250-254 Yutaka Kida, Hiroyoshi Inoue, Koichi Kuwano, 2007; Serratia marcescens Serralysin Indues Inflammatory responses through protease Zhang J., Shen Y., Liu J and Wei D (2005) Antimetastatic effect of prodigiosin through inhibition of tumor invasion, Biochem Pharmacol., 69: 407414 Zeinat, Kamel M, Nagwa, M Atef; El-Sayed, S.A, 2010 Optimization of microbial biomass production as biocontrol agent against root knot nematode on faba plants, 1122-1129 PHỤ LỤC A: THÀNH PHẦN MƠI TRƯỜNG Thành phần mơi trường: - Mơi trường Nutrient broth [NB] (gam/lít) Meat extract Peptone - Mơi trường Peptone glycerol [PG] (gam/lít) Glycerol 10ml Peptone - Môi trường thử nghiệm hoạt tính lipase (Gram/Lít) G 1,0 l 03,6 Y eT 30, w 5,0 00 N H 0,1 K 2M 00,0 gC 10,4 a 44 - C M G 10, e 15, 00 A - g 00 M C 10, a 15, 00 A - g 00 M D 10 ịA 01,5 g 0g PHỤ LỤC B: SỐ LIỆU THỐNG KÊ  Đường chuẩn tế bào SH1  Đường cong tăng trưởng S marcescens môi trường NB Summary Statistics for log mật độ tế bào môi trường NB T St C H C A an oe M M R O o 3ve6da 0ff.0 in 6ax6an0 0 6 0 7 .0 7 0 7 10 0 7 12 0 7 14 0 7 16 0 .7 18 0 7 20 .0 7 22 0 7 24 0 .7 26 0 7 2 0 7 38 0 7 .0 03 0 7 23 0 7 34 0 7 T6 .0 .7 o ANOVA Table for Log mật độ tế bào môi trường NB by thời gian S S D M F- Po u f ea R V B 10.1 et W 42 0.083 it 29 T 10.85 ot 456 Multiple Range Tests for log mật độ tế bào by thời gian Method: 95.0 percent LSD T H O C M H o3 ea6X o X X 3 X .7 103 123 143 183 XX XX 163 XX 303 323 XX 263 X X 363 X 283 223 7.X 203 7.X 7X 343 7X 243  Thí nghiệm khảo sát nguồn Nitơ Summary Statistics for log mật độ tế bào NC S C MM R Go A t o i a a U Cu ve a ef n xi n a s 0 7 eP 0 7 e 7 T r Y 37 77 0 ea T 77 0 ot ANOVA Table for log mật độ tế bào by nguồn nito S S D M F- P oB u f3 ea0R9 et W 06 it 001 T ot 061 Multiple Range Tests for log mật độ tế bào by nguồn Nito Method: 95.0 percent LSD N C G as ei Tr y P ep Y ea C o 3 3 M H ea o X 7.X 78 X X C oC as C C as as ei P ep P ep Tr y Si D +/ g.* iff- - 02 - 0 02 * - 0.18 * 0.1102 02 * 02 * 0.- 0 02  Thí nghiệm khảo sát nguồn cacbon Summary Statistics for log mật độ tế bào N St C M GCo A a oe in M R un ve ax an U G n0 ff.0 i8 l 0 .7 G l K 0 7 h ôM 0 aM 0 aS .0 8 u 0 ot ANOVA Table for log mật độ tế bào by nguồn cacbon SoS D M F Pf5 ea0 - V B uru 0.0 etW 0.1 i T 00 0.21 o 077 Multiple Range Tests for log mật độ tế bào by nguồn cacbon Method: 95.0 percent LSD N G K hG ly M al M an G lu S uc C M H o3 ea7oX X 3 X X 3 X X C ogl uc gl uc gl uc gl uc gl uc gl yc gl yc gl yc gl yc k hk hk hm al m al m an S D +/ i*iff0 - * 0 * 0 * 0 - .0 * 0 * - * -0 * -0 * 0- * -0 * -0 0 * - * 0- 0  Thí nghiệm khảo sát pH Summary Statistics for log mật độ tế bào S C DC A t o M M R O o ve a ef in ax an p 0 pH 00 8 H p 0 8 H p 0 8 HT o ANOVA Table for log mật độ tế bào by độ pH So S DM F P u f3 e - -0 Burc eW 00 iT 001 o 001 Multiple Range Tests for log mật độ tế bào by độ pH Method: 95.0 percent LSD D C MH O p o3 8e oX H p X pH X pH XX H C po H p pH pH H p H p H  S D+/ i i -0 * - 0 - 0- 0 Khảo sát điều kiện Oxy Summary Statistics for log mật độ tế bào S C O S o VC A t e M M R O o ve 0.a f0 in ax8an 21 08 00 .0 8 15 00 8 28 0 8 K1 H 0 70 O T .0 o 50 ANOVA Table for log mật độ tế bào by số vòng lắc Sou S D M F P rce B u f4 e -1 eW 661 iT 00 0.610 o Multiple Range Tests for log mật độ tế bào by số vòng lắc Method: 95.0 percent LSD S C MH O o e7X o K H X 21 08 X 25 308 X X C 1o 21 21 12 12 51 51 15 18 82  SD +/ i iff- - * -0 0- * 0 * - 0- * 0 * 0 * 0 * 0 Khảo sát mật độ cấy giống Summary Statistics for log mật độ tế bào T I L0 ,1 1, 3, ,7 , T o C A o 3ve 8 8 8 S t 0.a 00 00 00 00 C o e M M R f0 in 8ax8an 0 .8 0 .8 0 8 .0 8 8 ANOVA Table for log mật độ tế bào by tỉ lệ cấy giống Sou S D M F P u 0.f4 e - -0 Brce eW 09 0.1 iT 0210 o 114 Multiple Range Tests for log mật độ tế bào by tỉ lệ cấy giống Method: 95.0 percent LSD T C MH I o e oX 28 X 38 X X X 48 X ConS trasti 0, 50, 50, 50, 51, 01, 01, 01 ,1, 93, D -i 0-0 0000 - 00 + /0 0 .0 0 0 0  Khảo sát nông độ đệm cổ sung vào môi trường Summary Statistics for log mật độ tế bào C N S o C A M M R O t e o ve in ax an N a f u ra8 0 i 8i 8ge ,0 0 8 ,0 0 8 ,0 0 8 K, H 0 8 O T 00 .0 8 o ANOVA Table for log mật độ tế bào by nồng độ đệm So S DM F P B uru f4 ea0 - -0 etW 00 i T 0110 o 014 Multiple Range Tests for log mật độ tế bào by nồng độ đệm Method: 95.0 percent LSD N O K H 00, 0, 10, C o 3 3 M ea 28 28 28 H o m X X X X X 10 C o 0, 00, 00, 0, 0, 00, 00, 0, 0, 00,  S D + i iff0 /0 0 0 0 .- 0- 0 - 0 .0 Đường cong tăng trưởng S.marcescens SH1 môi trường Summary Statistics for log mật độ tế bào C T S o M M R H C A ta e in ax a O o ve n u 3ra f0 i 6i n 0 7 0 7 0 7 0 .7 0 8 10 0 8 12 8 41 8 61 8 28 8 20 0 8 .0 .0 8 42 26 0 8 38 8 03 0 8 23 0 8 34 T6 o 11 ANOVA Table for log mật độ tế bào by thời gian S S D M F- Po u f ea R V B et 11.1 w 1238 W 0.2 it 43 T 11.85 ot 376 Multiple Range Tests for log mật độ tế bào by thời gian Method: 95.0 percent LSD T H O C o3 3 3 103 123 283 263 183 203 163 223 303 343 363 143 323 243 M H ea o X X X X X XX .8 .8 .1 18 .8 8 12 ... chủng Serratia marcescens sản phẩm trao đổi chất Serratia marcescens mà em chọn đề tài: Thiết lập môi trường dinh dưỡng điều kiện nuôi cấy sản xuất sinh khối vi khuẩn Serratia marcescens SH1 ... đạt đề tài - Chọn môi trường tốt cho phát triển Serratia marcescens SH1 - Khảo sát điều kiện nuôi cấy (pH, điều kiện Oxy, mật độ cấy giống) tốt cho phát triển Serratia marcescens SH1 1.6 Kết cấu... học nuôi cấy S marcescens SH1 mơi trường 66 Bảng 4.9 Tính tốn giá thành môi trường 67 Bảng 4.10 Chi phí sản xuất sinh khối môi trường 67 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1 Serratia marcescens