Nghiên cứu đặc điểm mô bệnh học, hóa mô miễn dịch và tình trạng methyl hóa gen RASSF1A trong ung thư biểu mô tuyến tiền liệt (tt)

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y === *** === VI THUẬT THẮNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM MÔ BỆNH HỌC, HÓA MÔ MIỄN DỊCH VÀ TÌNH TRẠNG METHYL HÓA GEN RASSF1A TRONG UNG THƯ BIỂU MÔ TUYẾN TIỀN LIỆT Chuyên ngành: Khoa học y sinh Mã số: 9720101 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Hà Nội - 2018 Cơng trình hoàn thành tại: Học viện Quân y Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Đình Tảo TS Nguyễn Ngọc Hùng Phản biện 1: PGS TS Nguyễn Văn Hưng Phản biện 2: PGS.TS Quản Hoàng Lâm Phản biện 3: PGS.TS Trịnh Tuấn Dũng Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Trường Họp vào hồi ngày .tháng .năm 2018 Có thể tìm hiểu luận án thư viện: - Thư viện Quốc gia - Thư viện Học viện Quân y CÁC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Vi Thuật Thắng, Nguyễn Đình Tảo, Võ Thị Thương Lan cs (2014), “Nghiên cứu hiện tượng tăng methyl hóa gen RASSF1A ung thư tuyến tiền liệt Bệnh viện 103”, Tạp chí Y dược lâm sàng 108., (9): 77-81 Vi Thuat Thang, Nguyen Đinh Tao, Nguyen Ngoc Hung et al (2017), “ Study on some histopathological features and expression of some immunohistochemical markers in prostatic carcinoma”, Journal of Military Pharmaco - Medicine., (8): 222227 GIỚI THIỆU LUẬN ÁN Đặt vấn đề Ung thư tuyến tiền liệt (UTTTL) thường gặp người 65 tuổi, bệnh diễn biến thầm lặng Phần lớn trường hợp phát hiện tình cờ qua xét nghiệm (XN) mô bệnh học (MBH) Ở Việt Nam, tỷ lệ UTTTL phát hiện qua xét nghiệm MBH sau phẫu thuật tăng sản tuyến tiền liệt (TTL) khoảng 8%, tỷ lệ mắc chuẩn theo tuổi năm 2012 3,4/100.000 dân xếp hàng thứ 10 ung thư (UT) nam giới UTTTL điều trị hiệu quả bệnh phát hiện giai đoạn sớm Vì vậy, việc tìm phương pháp phát hiện chẩn đoán sớm, đồng thời đánh giá đúng mức độ tởn thương việc áp dụng tiêu chuẩn bảng phân loại thống cần thiết để đưa phương pháp điều trị thích hợp tiên lượng bệnh Trên giới, nhiều nghiên cứu (NC) chỉ sự methyl hóa gen Ras – association domain family isoform A (RASSF1A) xảy vào giai đoạn sớm trình hình thành tiến triển UTTTL, việc áp dụng dấu chuẩn methyl hóa gen RASSF1A UTTTL quan tâm Ở Việt Nam, NC methyl hóa ADN liên quan đến UT triển khai, NC MBH, hóa mơ miễn dịch (HMMD) chưa nhiều chưa có NC đầy đủ đặc điểm MBH ung thư biểu mô tuyến tiền liệt (UTBM TTL) theo phân loại Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) năm 2004 kết hợp với xác định sự bộc số dấu ấn miễn dịch tình trạng methyl hóa gen RASSF1A UTBM TTL Trên sở đó, chúng tơi thực hiện đề tài với mục tiêu: a Nghiên cứu số đặc điểm mô bệnh học ung thư biểu mô tuyến tiền liệt Bệnh viện Quân y 103 theo phân loại WHO (2004) b Xác định sự bộc lộ số dấu ấn miễn dịch, tình trạng methyl hóa gen RASSF1A đối chiếu với số đặc điểm mô bệnh học ung thư biểu mơ tuyến tiền liệt Những đóng góp luận án + Nghiên cứu tình trạng methyl hóa gen RASSF1A số trường hợp ung thư biểu mơ tuyến tiền liệt + Đối chiếu tình trạng methyl hóa gen RASSF1A với số đặc điểm mơ bệnh học ung thư biểu mô tuyến tiền liệt + Áp dụng đồng thời dấu ấn PSA, CK34beta12, p63, CK5/6, CK7 actin để hỗ trợ chẩn đoán, xác định típ, phân độ mô học ung thư biểu mô tuyến tiền liệt Cấu trúc luận án Luận án dài 135 trang gồm: Đặt vấn đề (2 trang); Chương 1- Tổng quan tài liệu: 40 trang; Chương 2- Đối tượng phương pháp nghiên cứu: 20 trang; Chương 3- Kết quả nghiên cứu: 31 trang; Chương 4Bàn luận: 40 trang; Kết luận: trang; Kiến nghị: trang; Danh sách báo: trang; Luận án có 27 bảng số liệu; sơ đồ; 13 hình; 25 ảnh; 148 tài liệu tham khảo (25 tiếng Việt, 123 tiếng Anh); Phụ lục mẫu phiếu nghiên cứu Danh sách bệnh nhân Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược mô học phân loại ung thư tuyến tiền liệt 1.1.1 Mô học Tuyến tiền liệt gồm nang tuyến, ống tuyến phân nhánh, ống dẫn chính niệu đạo TTL Các nang tuyến ống tuyến lót lớp tế bào (TB) chế tiết bên lớp TB đáy bên ngồi TTL khơng có lớp biểu mơ, nang/ống tuyến bao quanh TB trơn, nguyên bào sợi sợi collagen Lòng nang/ống tuyến chứa chất tiết thể amylacea Các ống dẫn chính lót biểu mơ (BM) chuyển tiếp 1.1.2 Phân loại mô bệnh học UTBM TTL theo WHO (2004) UTBM TTL gồm típ: UTBM tuyến, UTBM đường niệu, UTBM tế bào vảy, UTBM tế bào đáy UTBM tuyến gồm thể tuyến nang thể tuyến ống 1.2 Ung thư biểu mô tuyến tiền liệt, tân sản nội biểu mô phân độ Gleason 1.2.1 Ung thư biểu mô tuyến tiền liệt * Ung thư biểu mô tuyến: u gồm nang/ống tuyến xếp hỗn độn rời rạc, tuyến cấu trúc dạng mặt sàng, tuyến hòa nhập vào u gồm đám, dải TB Nhân TB lớn, tăng sắc, hạt nhân to, rải rác có hình nhân chia, thấy nhân đa hình thái Bào tương TB sáng TB tuyến lành tính Lòng tuyến nang chứa tinh thể, chất tiết màu hồng hoặc/chất dạng mucin màu xanh nhạt Có thể thấy u xâm lấn dây TK, u tăng sinh xơ- nhày, tuyến UT giống tiểu cầu thận * UTBM đường niệu nguyên phát: hầu hết UTBM đường niệu kém biệt hóa kết hợp với UTBM đường niệu chỗ Trong đó, có hình ảnh đặc trưng, là: TB u giống TB Paget nằm lớp TB đáy TB chế tiết Khi TB u lan vào ống dẫn, ống dẫn lấp đầy TB u thường có hoại tử dạng trứng cá Khi TB u xâm lấn vào mơ đệm, phản ứng xơ hóa mơ đệm rõ * UTBM tế bào vảy: TB ung thư hình đa diện có cầu nối gian bào chất keratin Có thể thấy cấu trúc u gồm ống tuyến, số TB tuyến biệt hóa TB vảy (UTBM tuyến-TB vảy) * UTBM tế bào đáy: TB u có nhân hình tròn có góc, chất nhiễm sắc mịn, bào tương hẹp, xếp song song theo hình cọc rào, u hay bị hoại tử Có thể thấy TB u xâm nhập mô đệm dây TK 1.2.2 Tân sản nội biểu mô tuyến tiền liệt Tân sản nội biểu mô tuyến tiền liệt (prostatic intraepithelial neoplasia: PIN) tổn thương tăng sinh TB chế tiết, kèm với thay đổi nhân TB như: nhân lớn, chất nhiễm sắc đậm phân bố không đều, hạt nhân lớn, màng nhân dày còn lớp TB đáy Trong PIN độ cao, tính chất không nhân rõ rệt PIN độ thấp 1.2.3 Phân độ Gleason UTBM tuyến chia thành độ Gleason Điểm Gleason tổng độ Gleason mẫu chiếm diện tích nhiều (mẫu nguyên phát) mẫu chiếm diện tích nhiều thứ nhì (mẫu thứ phát) 1.3 Xâm lấn di Khối u vùng chuyển tiếp thường xâm lấn vùng trước TTL, u vùng ngoại vi thường xâm lấn vùng sau bên Giai đoạn muộn, u xâm lấn vào túi tinh, cổ bàng quang TB u xâm lấn vào mạch máu mạch mạch huyết di vào hạch limphô vùng, di vào xương chậu, xương cột sống tạng 1.4 Hố mơ miễn dịch ung thư biểu mơ tún tiền liệt HMMD kỹ thuật nhuộm đặc biệt, sử dụng kháng thể (KT) đặc hiệu để xác định sự hiện diện kháng nguyên (KN) tương ứng lát cắt mô loại TB có mơ Ngun tắc: cho KT đặc hiệu lên mơ, mơ có KN có phản ứng kết hợp KN - KT Ứng dụng HMMD UTBM TTL nhằm mục đích trợ giúp xác định: nguồn gốc khối u; xác định đặc điểm MBH; phân biệt tổn thương lành tính với ác tính; phân biệt UT xâm lấn di căn… Trong NC chúng nhuộm HMMD với KT kháng (PSA, CK34βE12, p63, CK5/6, CK7, actin) 1.5 Methyl hóa ADN ung thư tuyến tiền liệt 1.5.1 Methyl hóa ADN: methyl hóa ADN hiện tượng gắn thêm gốc methyl vào nucleotide phân tử ADN Ở người, methyl hóa ADN xảy cytosine đứng trước guanine phức hợp CpG tạo thành 5-methylcytosine Trong UTTTL gen ức chế khối u RASSF1A hay bị methyl hóa Methyl specific PCR (MSP) phương pháp dùng để phát hiện methyl hóa Trong NC này, chúng tơi lựa chọn gen RASSF1A để phân tích dấu chuẩn methyl hóa UTBM tuyến TTL 1.5.2 Phương pháp MSP phát methyl hóa ADN Đặc điểm phương pháp: ADN sau xử lý bisulfite bao gồm ADN bị methyl hóa có CpG giữ ngun, ADN khơng bị methyl hóa có CpG bị biến đởi thành thymine Kỹ thuật MSP sử dụng cặp mồi đặc hiệu thiết kế dựa vào vùng giàu CpG cho phép phân biệt ADN bị methyl hóa với ADN khơng bị methyl hóa Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng 2.1.1 Nhóm bệnh nhân nghiên cứu đặc điểm mơ bệnh học 84 mẫu mô UTBM TTL (84 bệnh nhân) phẫu thuật nội soi qua niệu đạo Bệnh viện Quân y 103 (6/2008 - 7/2017) chẩn đoán MBH UTBM TTL nguyên phát Các bệnh nhân (BN) có bệnh án, phiếu yêu cầu XN MBH, khối paraffin lưu giữ mẫu mô đủ để nghiên cứu Tiêu chuẩn loại trừ: UTTTL thứ phát, UTTTL xạ trị, dùng hóa chất, BN có nhiều UT cùng lúc, BN không phải người Việt Nam, UTTTL phẫu thuật tồn tuyến trường hợp khơng đủ tiêu chuẩn 2.1.2 Nhóm bệnh nhân nghiên cứu HMMD Sau loại 51 trường hợp không đủ tiêu chuẩn (mẫu mô hết dần ưu tiên cắt nhuộm H.E…), còn lại gồm: + 31 mẫu mô UTBM tuyến nguyên phát TTL + mẫu mô UTBM đường niệu nguyên phát TTL Nhuộm HMMD với KT kháng (PSA, CK34βE12, p63, CK5/6, CK7, actin) 2.1.3 Nhóm bệnh nhân nghiên cứu methyl hóa gen RASSF1A - 20 mẫu mơ UTBM tuyến đủ tiêu chuẩn xét nghiệm methyl hóa Do ưu tiên cắt nhuộm H.E HMMD, mẫu UT hết dần nên không đảm bảo chất lượng ADN cho MSP, đó, loại 64 trường hợp khơng đủ tiêu chuẩn - Chọn 10 mẫu mô tăng sản TTL (10 BN) chẩn đoán xác định bằng MBH để so sánh tỷ lệ methyl hóa gen RASSF1A tăng sản TTL với UTBM tuyến TTL 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu - Nghiên cứu tiến cứu, mô tả cắt ngang - Phương pháp lấy mẫu: lấy mẫu tồn có chủ định - Cỡ mẫu: tính tốn theo cơng thức điều tra tỷ lệ: Với α = 5%; Z1-/2 = 1,96; d = 0,1; p = 78% Lắp vào công thức trên, cỡ mẫu NC 66 mẫu Thực tế mảnh bệnh phẩm TTL chứa 10 ổ UT phẫu thuật nội soi thường nhỏ, khó đủ lượng để thực hiện nhiều kỹ thuật Chúng thu thập 84 mẫu 2.2.2 Vật liệu, hóa chất, thiết bị nghiên cứu 2.2.2.1 Vật liệu thu thập thông tin Bệnh án biên bản hội chẩn tiêu bản kèm theo phiếu trả lời kết quả MBH khoa Giải phẫu bệnh - Bệnh viện Quân y 103 Hội chẩn tiêu bản để thu thập thông tin bao gồm: típ MBH, thể, biến thể UTBM TTL Mức độ biệt hóa khối u tính theo hệ thống Gleason: gồm độ 1, 2, 3, 4, Điểm Gleason tổng độ Gleason thuộc vùng có diện tích nhiều vùng có diện tích nhiều thứ nhì Các đặc điểm đặc trưng ác tính, chất chứa tuyến nang UT UTBM tuyến phối hợp với PIN độ cao đánh giá: có khơng Mức độ bộc lộ dấu ấn MD gồm: khơng bộc lộ (-), có bộc lộ (+), bộc lộ yếu (1+), trung bình (2+), mạnh (3+), mạnh (4+) Methyl hóa gen RASSF1A đánh giá: khơng bị methyl hóa (-), bị methyl hóa (+) - Tất cả tiêu bản nhuộm H.E (84 BN) nhuộm HMMD (33 BN) hội chẩn kính hiển vi quang học cùng với Nguyễn Mạnh Hùng Trần Ngọc Dũng (Bộ môn - khoa GPB, Bệnh viện Quân y 103) Chụp ảnh minh họa từng trường hợp - Các mẫu mơ TTL xét nghiệm methyl hóa, gồm: 20 mẫu UT 10 mẫu tăng sản TTL phân tích, đánh giá KQ cùng với Võ Thị Thương Lan (Phòng thí nghiệm Sinh Y- Đại học Khoa học Tự nhiên – ĐHQG Hà Nội) 2.2.2.2 Bệnh phẩm u TTL phẫu thuật nội soi qua niệu đạo Lấy 12 gam/trường hợp, bệnh phẩm ít lấy toàn Các mảnh bệnh phẩm đưa vào nghiên cứu cách ngẫu nhiên 2.2.2.3 Bệnh phẩm nghiên cứu kỹ thuật H.E, hóa mơ miễn dịch 14 U xâm nhập dây TK U tăng sinh xơ-nhày Tuyến ung thư giống tiểu cầu thận U có - đặc điểm đặc trưng ác tính U khơng có đặc điểm đặc trưng ác tính 32 10 25 39% 11% 12,2% 7,3% 30,5% 15 Bảng 3.10 Phân bố tỷ lệ u có đặc điểm đặc trưng ác tính u khơng có đặc điểm ác tính theo nhóm điểm Gleason Điểm Gleason Gleason 2-4 Gleason 5-7 Gleason 8-10 Tổng số Đặc điểm n=14 (%) đặc trưng n=58 (%) n=10 (%) (%) ác tính Có 1/14 (7,2%) 47/58 (81%) 9/10 (90%) 57 (69,5%) Khơng có 13/14 (92,8%) 11/58 (19%) 1/10 (10%) 25 (30,5%) Tổng số 14 (100%) Hệ số tương quan Spearman 58 (100%) 10 (100%) 82 (100%) rho=0,523; p< 0.001 Có sự liên quan điểm Gleason với đặc điểm đặc trưng ác tính Điểm Gleason cao tỷ lệ u có đặc điểm đặc trưng ác tính nhiều, với p < 0.001 3.2.9 Phân bố tỷ lệ chất chứa tuyến nang ác tính Bảng 3.11 Tỷ lệ các chất chứa tuyến nang ác tính Chất chứa tuyến nang Tinh thể Chất tiết kết đặc màu hồng Tinh thể/chất tiết kết đặc màu hồng Không chứa tinh thể/chất tiết kết đặc màu hồng Số lượng (n=82) 44 18 12 Tỷ lệ (%) 9,7 53,7 22 14,6 16 Bảng 3.13 Phân bố tỷ lệ u chứa tinh thể/chất tiết kết đặc màu hồng u không chứa tinh thể/chất tiết kết đặc màu hồng theo nhóm điểm Gleason Điểm Gleason Gleason 2-4 n=14 (%) Tinh thể & chất kết đặc màu hồng Chứa Gleason 5-7 Gleason 8-10 Tổng (%) n=58 (%) n=10 (%) 14/14 (100%) 55/58 (94,83%) 1/10 (10%) 70 (85,4%) Không chứa 0/14 (0%) 3/58 (5,17%) Tổng 14 (100%) 58 (100%) Spearman 9/10 (90%) 12 (14,6%) 10 (100%) 82 (100%) rho=-0,681; p< 0,001 Có sự liên quan điểm Gleason u chứa tinh thể/chất tiết kết đặc màu hồng Điểm Gleason cao tỷ lệ u chứa tinh thê ̉/chất tiết kết đặc màu hồng giảm (p < 0.001) 3.3 Kết nghiên cứu hóa mơ miễn dịch 3.3.1 Kết quả nḥm hóa mơ miễn dịch UTBM TTL Có 94% UTBM TTL bộc lộ PSA, 6% UTBM TTL không bộc lộ PSA (2 trường hợp UTBM đường niệu) Có 6% u bộc lộ CK34βE12, 6% u bộc lộ p63 Khơng có trường hợp u bộc lộ CK7, CK5/6, actin 3.3.3 Mức độ bộc lộ PSA của tế bào u Bảng 3.16 Mức độ bộc lộ PSA của tế bào u Mô bệnh học UTBM tuyến nang Mức độ UTBM tuyến ống (n=29) (n=2) (-) (0%) 0/2 (1+) (24,2%) 0/2 (2+) 13 (44,8%) 2/2 17 (3+) (31%) 0/2 (4+) (0%) 0/2 3.3.4 Phân bố mức độ bộc lộ PSA của tế bào u theo độ Gleason Bảng 3.17 Mức độ bộc lộ PSA theo độ Gleason (n=31) Độ Gleason Mức độ Độ Độ Độ Độ (1+) (2+) (3+) Tổng (%) (22.6%) 15 Spearman 15 (48.4%) rho=-0,996 9 (29%) (4+) p< 0,001 (0%) Có sự liên quan nghịch mức độ bộc lộ PSA độ Gleason Độ Gleason cao, bộc lộ PSA yếu (p < 0,001) 3.3.5 Mức độ bộc lộ PSA của tế bào u xâm nhập dây thần kinh - Bộc lộ PSA mức độ trung bình chiếm tỷ lệ 53,85% - Bộc lộ PSA mức độ yếu chiếm tỷ lệ 46,15% 3.3.6 Tình trạng bợc lợ CK34βE12 p63 của tế bào đáy Bảng 3.19 Tình trạng bộc lộ 34βE12 p63 của tế bào đáy Mô bệnh học Dấu ấn (n=33) 34βE12 UTBM tuyến Vùng tuyến lành tính Vùng tuyến ung thư UT đường niệu 31 Vùng tuyến lành tính Vùng ung thư (+) (-) (+) (+) p63 31 (+) (-) (+) (+) - UTBM tuyến: vùng tuyến lành bộc lộ CK34βE12 p63, ngược lại vùng tuyến UT không bộc lộ CK34βE12 p63 - UTBM đường niệu: vùng tuyến lành vùng UT bộc lộ CK34βE12 18 p63 3.3.8 Tình trạng mức độ bộc lộ CK7 CK5/6 của biểu mô đường niệu lành tính ác tính Bảng 3.21 Tình trạng mức độ bộc lộ CK7 CK5/6 của biểu mơ đường niệu lành tính ác tính Dấu ấn (n=33) CK7 CK5/6 UTBM tuyến Vùng tuyến lành tính (4+) (-) 31 31 Vùng tuyến ung thư (-) (-) UT đường niệu Vùng tuyến lành tính (4+) (-) 2 Vùng ung thư (-) (-) - UTBM tuyến: BM đường niệu vùng tuyến lành bộc lộ CK7, Mô bệnh học không bộc lộ CK5/6 Vùng tuyến UT không bộc lộ CK7 CK5/6 - UTBM đường niệu: BM vùng tuyến lành bộc lộ CK7, không bộc lộ CK5/6 Vùng UT khơng bộc lộ CK7 CK5/6 3.3.9 Tình trạng mức độ bộc lộ actin của loại tế bào mơ đệm - Tồn TB trơn mơ đệm TTL trơn thành mạch bộc lộ actin - Tồn TB xơ, TB đáy, TB nội mơ khơng bộc lộ actin 3.4 Kết nghiên cứu tình trạng methyl hóa gen RASSF1A 3.4.2 Kết quả đánh giá hiệu quả của trình xử lý bisulfite PCR với cặp mồi GL-F/GL-R nhằm khuếch đại gen β-globin từ ADN tổng số trước sau xử lý với bisulfite trình bày hình 3.2 19 Hình 3.2 Sản phẩm PCR nhân bản gen β-globin từ khuôn ADN trước (băng đỏ) sau xử lý (băng vàng) với bisulfite của số mẫu mô ung thư (từ p1-p7) Trước xử lý với bisulfite, mẫu lên băng với kích thước 250 bp Sau xử lý với bisulfite, chúng không thu sản phẩm Điều chứng tỏ mẫu ADN tởng số xử lý hoàn toàn với bisulfite 3.4.3 Kết quả xác định methyl hóa gen RASSF1A mẫu ung thư Băng ADN đặc hiệu gen RASSF1A bị methyl hóa có kích thước 170 bp (ký hiệu m) phát hiện 11/20 mẫu UT Băng ADN đặc hiệu cho RASSF1A khơng bị methyl hóa có kích thước 137 bp (ký hiệu u) cũng phát hiện 20 mẫu UT Đây sản phẩm đặc trưng cho TB lành lẫn mẫu UT Hình 3.3 Sản phẩm MSP nhân bản gen RASSF1A từ khuôn ADN bị xử lý bằng bisulfite 20 mẫu ung thư (từ P1 đến P20) với cặp mồi methyl RASSF1A-M210-F/RASSF1AM211-R cặp mồi không methyl RASSF1A-Un-F2/ RASSF1A-Un-R2 20 3.4.4 Kết xác định methyl hóa gen RASSF1A mẫu tăng sản TTL Hình 3.4 Sản phẩm MSP nhân bản gen RASSF1A từ khuôn ADN bị xử lý với bisulfite của 10 mẫu tăng sản TTL (từ B1 đến B10) Ghi chú: (m): ký hiệu băng ADN bị methyl hóa, (u): ký hiệu băng ADN khơng bị methyl hóa (-): đối chứng âm (nước thay cho ADN khuôn) Tất cả mẫu mơ tăng sản TTL có băng ADN đặc hiệu cho RASSF1A khơng bị methyl hóa (ký hiệu u) với kích thước 137 bp Băng ADN đặc hiệu cho RASSF1A bị methyl hóa có kích thước 170 bp phát hiện 2/10 mẫu tăng sản TTL 3.4.5 Đối chiếu tình trạng methyl hóa gen RASSF1A với mợt số đặc điểm MBH ung thư biểu mô tuyến 3.4.5.1 Methyl hóa gen RASSF1A ung thư biểu mơ tún tăng sản lành tính TTL Bảng 3.23 Tỷ lệ methyl hóa ung thư tăng sản TTL Mơ bệnh học Số lượng (n=30) Tỷ lệ methyl hóa (%) Ung thư TTL 20 11/20 (55%) Tăng sản TTL 10 2/10 (20%) Tỷ lệ methyl hóa gen RASSF1A UTBM tuyến 55%, tăng sản TTL 20% 21 3.4.5.3 Methyl hóa gen RASSF1A điểm Gleason/độ biệt hóa Bảng 3.25 Tỷ lệ methyl hóa theo điểm Gleason/đợ biệt hóa Số lượng Tỷ lệ methyl hóa (n=20) (n %) Cao (28,6%) 5-7 Vừa (50%) 8-10 Thấp 5 (100%) Điểm Gleason Đợ biệt hóa 2-4 Spearman rho=0,530; p=0,016 Tỷ lệ methyl hóa tăng cao theo điểm Gleason/độ biệt hóa khối u 3.4.5.4 Methyl hóa gen RASSF1A tình trạng u xâm lấn dây TK Bảng 3.26 Tỷ lệ methyl hóa theo tình trạng u xâm lấn dây TK Xâm lấn dây TK Số mẫu Tỷ lệ methyl hóa (n=20) (n%) Có 6/7 (85,7%) Không 13 5/13 (38,5%) Spearman rho=0,453; p=0,045 Tỷ lệ methyl hóa nhóm khối u xâm lấn dây TK chiếm tỷ lệ cao (85,7%) 3.4.5.5 Methyl hóa gen RASSF1A tình trạng PIN tăng sản TTL Bảng 3.27 Tỷ lệ methyl hóa gen RASSF1A tình trạng PIN độ thấp tăng sản TTL Số mẫu Tỷ lệ methyl hóa (n=10) (n%) Tăng sản TTL phối hợp PIN độ thấp 2/5 (40%) Tăng sản TTL không phối hợp PIN 0/5 (0%) Mô bệnh học 22 Tỷ lệ methyl hóa nhóm tăng sản TTL phối hợp với PIN độ thấp 40% Không phát hiện methyl hóa nhóm tăng sản TTL khơng phối hợp với PIN Chương BÀN LUẬN 4.1 Tỷ lệ bệnh nhân ung thư biểu mơ tún tiền liệt theo nhóm tuổi Tỷ lệ BN mắc UTBM TTL tăng theo nhóm t̉i: nhóm 70-79 chiếm tỷ lệ cao (42,86%), nhóm 40-49 chiếm tỷ lệ thấp (1,19%) Kết quả (KQ) phù hợp với KQ Nguyễn Việt Hải (2013), Ngô Văn Trung (2004) Gronberg H (2003) 4.2 Một số đặc điểm mô bệnh học ung thư biểu mô tuyến tiền liệt 4.2.1 Xác định típ MBH, thể biến thể + Xác định 2/4 típ mô bệnh học UTBM TTL nguyên phát: UTBM tuyến UTBM đường niệu Không gặp UTBM tế bào vảy UTBM tế bào đáy + Xác định UTBM tuyến nguyên phát chiếm 97,6% KQ chúng cao Nguyễn Văn Hưng (2004), tương đương với KQ Nguyễn Việt Hải (2013) Xác định UTBM đường niệu nguyên phát (2,4%), phù hợp với công bố Eble J.N (2004) Mostofi (1992) + Xác định UTBM tuyến thể tuyến nang chiếm tỷ lệ 97,6% KQ cao Nguyễn Văn Hưng (2004), phù hợp với thông báo trước UTBM tuyến ống chiếm 2,4%, thể gặp, KQ phù hợp với công bố y văn + Trong UTBM tuyến thể tuyến nang: biến thể tuyến nang thông thường hay gặp (87,5%), ít gặp biến thể teo đét (5%) biến thể giả tăng sản (7,5%), không gặp biến thể tuyến bọt, TB nhẫn, dạng chất keo/nhày, TB hạt ưa eosin, giống limphô-biểu mô dạng sacôm KQ phù hợp với thông báo Eble J N (2004) 23 4.2.2 UTBM tuyến phối hợp với PIN độ cao Tỷ lệ UTBM tuyến phối hợp với PIN độ cao 73,2%, không phối hợp với PIN độ cao 26,8%, phù hợp với Nguyễn Văn Hưng (2005) Alexander E E (1996) UTBM tuyến phối hợp với PIN độ cao chiếm tỷ lệ cao nhóm u điểm Gleason 5-7 (biệt hóa vừa) 66,7%, chiếm tỷ lệ thấp nhóm biệt hóa cao kém biệt hóa KQ phù hợp phần với tác giả nước như: Eptain JL (1995), Erbersdobler A (1996), Hagman M J (1997), Montoroni R (1999), Paradis V (1999) 4.2.3 Độ mô học ung thư biểu mô tuyến tiền liệt + Độ Gleason hay gặp mẫu thứ (46,3%), độ Gleason hay gặp mẫu thứ (43,9%), độ Gleason còn lại chiếm tỷ lệ thấp Phù hợp với Nguyễn Văn Hưng (2005) Samaratunga H (2014) Eble J N (2004) thơng báo UTBM TTL thường có nhiều mẫu mơ học cùng u + Nhóm điểm Gleason 5-7 chiếm tỷ lệ cao (70,7%), phù hợp với Sgrignoli A (1994), Samaratunga H (2014) Nhóm điểm Gleason 2-4 (17,1%) cao Nguyễn Văn Hưng (2005) Oesterling (1987), nhóm Gleason 8-10 (12,2%) thấp so với Nguyễn Việt Hải (2013) Nguyễn Văn Hưng (2005) Theo chúng tôi, sự khác lựa chọn đối tượng nghiên cứu 4.2.4 Các đặc điểm đặc trưng ác tính UTBM tuyến + U có đặc điểm đặc trưng ác tính chiếm tỷ lệ 69,5%, u khơng có đặc điểm đặc trưng ác tính chiếm tỷ lệ 30,5% (p