SLIDE BÀI GIẢNG HÓA SINH Streptococcus pneumoniae

TỔNG QUAN BÀI HỌCĐẠI CƯƠNG TÍNH CHẤT VI SINH HỌC KHẢ NĂNG GÂY BỆNH CHẨN ĐOÁN VI SINH DỊCH TỄ PHÒNG, TRỊ BỆNH • Phân loại khoa học... TÍNH CHẤT VI SINH HỌC Hình thái họcTrong bệnh phẩm h

Streptococcus pneumoniae

PGs Ts TRẦN ĐỖ HÙNG

TỔNG QUAN BÀI HỌC

ĐẠI CƯƠNG TÍNH CHẤT VI SINH HỌC

KHẢ NĂNG GÂY BỆNH

CHẨN ĐOÁN VI SINH

DỊCH TỄ PHÒNG, TRỊ BỆNH

• Phân loại khoa học

ĐẠI CƯƠNG

Phân loại khoa học

Ngành (phylum) Firmicutes

Họ (familia) Streptococcaceae

Loài (species) Streptococcus

pneumoniae

ĐẠI CƯƠNG

Lịch sử

1880, Louis Pasteur phân lập lần đầu tiên

từ ổ áp xe

1883, Talamon tìm được phế cầu trong đờm,

máu, khối viêm phổi gan hóa

1909, Netter tìm ra vai trò gây bệnh của

phế cầu trong bệnh viêm màng não cấp

(nhiễm trùng thần kinh trung ương ở một số bệnh nhân viêm phổi nặng)

Louis Pasteur (1822 – 1895)

 Nhà hóa học, vi sinh học người Pháp

 Được xem là 1 trong 3 người thiết lập nền

tảng của Vi sinh học (cùng với Ferdinand

Cohn và Robert Koch)

 Tác giả của nguyên tắc sử dụng Vaccin,

lên men vi sinh

 Ông là giám đốc viện Pasteur cho đến khi

qua đời

 Các công trình nghiên cứu lớn

 Tinh thể học

 Quá trình lên men

 Nghiên cứu về bia và rượu vang

 Từ 1878 đến 1880 ông phát hiện ra 3 chủng

vi khuẩn tụ cầu, liên cầu, phế cầu

TÍNH CHẤT VI SINH HỌC

Hình thái học

 Cầu khuẩn Gram dương

 Hình thái điển hình: song cầu hình

ngọn nến , hai đầu to giáp vào

nhau, 2 đầu nhọn quay ra ngoài

 Biến thành Gram âm

tiêu bản nhuộm Gram

TÍNH CHẤT VI SINH HỌC Hình thái học

Trong bệnh phẩm hoặc môi trường nuôi cấy có nhiều albumin thì có vỏ

Không có lông, không

di động

Không sinh nha bào

Phản ứng phồng nang phát hiện vỏ polysaccharide của phế cầu

So sánh với Streptococci khác

TÍNH CHẤT VI SINH HỌC

Nuôi cấy

 Pneumococci khó mọc ở

môi trường thông thường

như thạch dinh dưỡng (NA)

 Phải dùng môi trường giàu

dinh dưỡng như tim óc hầm

Pneumococci trên thạch máu

TÍNH CHẤT VI SINH HỌC

Nuôi cấy

Phế cầu phân biệt 2 loại khúm

Dạng S: tròn, 1 mm, mặt bóng hơi lõm Đó là những VK có nang và có khả năng gây bệnh

Dạng R: bờ không đều, mặt gồ ghề Đó là

những VK không nang và không có khả năng gây bệnh

Pneumococci dạng S có thể biến thành dạng

R, mất nang và mất khả năng gây bệnh

Ngược lại dạng R có thể biến thành dạng S

khi cho vào canh cấy chất DNA của dạng S

Trên môi trường thạch máu

người có vòng tan máu dễ

nhầm với liên cầu tiêu huyết

TÍNH CHẤT VI SINH HỌC

Tính chất vi sinh vật hóa học

Phế cầu không có men catalase

Hai thử nghiệm để phân biệt với liên cầu

 Bị ly giải bởi muối mật hoặc mật (Neufeld dương tính)

 Không phát triển đc trong môi trường có ethylhydrocuprein (thử nghiệm optochin dương) – Taxo P

Resistant: đề kháng Susceptible: nhạy

Phế cầu tan trong

muối mật

TÍNH CHẤT VI SINH HỌC

Hệ thống kháng nguyên

Kháng nguyên nang

 Cấu tạo bởi polysaccharide

 Căn cứ vào thành phấn polysaccharide mà

người ta phân biệt 80 type

 Phản ứng phồng nang (Quellung reaction):

 Trộn VK với kháng huyết thanh đặc hiệu type trên một phiến kính

 Khi gặp kháng HT tương ứng VK sẽ bị phồng nang

 Quan sát hiện tượng qua kính hiển vi

TÍNH CHẤT VI SINH HỌC

Hệ thống kháng nguyên

Kháng nguyên thân, gồm

 Kháng nguyên M: đặc hiệu cho mỗi type

 Cacbonhydrat C: chung cho tất cả

pneumococci Đặc biệt loại kết tủa với

C-reactive protein (CRP) là loại globulin thấy ở huyết thanh 1 số bệnh nhân

KHẢ NĂNG GÂY BỆNH

Cơ chế bệnh sinh

Khả năng gây bệnh là do sự lan tràn của

pneumococci vào các mô

Vi khuẩn không sinh độc tố Độc tính một

phần do nang của VK quyết định (nang ngăn chặn thực bào)

40 – 70% người khỏe mạnh có mang phế cầu độc lực, nhưng k bị bệnh do màng nhầy của đường hô hấp đề kháng cao với VK (những

yếu tố làm giảm sức đề kháng này sẽ tạo điều kiện cho VK gây bệnh)

KHẢ NĂNG GÂY BỆNH

Cơ chế bệnh sinh

Các điều kiện tổn thương màng nhầy

 Có những bất thường ở đường hô hấp: nhiễm virus hay vi khuẩn khác làm tổn hại TB niêm mạc.

 Ngộ độc rượu hay thuốc: làm giảm hoạt động thực bào, giảm phản xạ ho => dễ hít vào các vật lạ

 Suy dinh dưỡng, thể trạng suy sụp

 Những bất thường về động tuần hoàn: phổi ứ nước, suy tim,…

KHẢ NĂNG GÂY BỆNH

Bệnh lý

Nhiễm pneumococci gây tràn dịch có sợi tơ huyết vào các phế nang

Tiếp theo là hồng cầu và bạch cầu

=> tạo nên một phần phổi bị cứng

VK có thể theo đường bạch huyết ở phổi để vào máu

Vách phế nang vẫn còn nguyên vẹn trong quá trình nhiễm khuẩn

KHẢ NĂNG GÂY BỆNH

Bệnh lý

Các tế bào đơn nhân sẽ tích cực thực bào

chất thải và chất dịch sẽ dần dần được tái hấp thu

Pneumococci sẽ bị thực bào hết và đc tiêu

hóa bên trong TB

KHẢ NĂNG GÂY BỆNH

Biểu hiện lâm sàng

Khi chưa có kháng sinh thì bệnh bắt đầu hồi phục 15 – 20 ngày khi cơ thể đã có miễn dịch cao

Tỷ lệ tử vong ~30% tùy thuộc tuổi và tình

trạng bệnh lý

Nhiễm khuẩn huyết có tỷ lệ tử vong cao

Với KS liệu pháp kháng sinh bệnh thường đc chữa khỏi

Từ đường hô hấp VK có thể lan đến các vị trí khác của cơ thể

KHẢ NĂNG GÂY BỆNH

Biểu hiện lâm sàng

Nhiễm khuẩn huyết do pneumococci thường

có 3 biến chứng nguy hiểm

VI SINH LÂM SÀNG

Bệnh phẩm: bệnh phẩm có thể là đàm, mủ

máu, dịch não tủy, dịch khớp, Tùy tình trạng bệnh lý

VI SINH LÂM SÀNG

Nuôi cấy phân lập

Bệnh phẩm có nhiễm nhiều các vi khuẩn như đờm, chất ngoáy họng được cấy vào môi

trường thạch máu có gentamycin 5 mcg/1ml môi trường

Tủ ấm 37oC, khí trường 5 – 10% CO2 trong bình nến

Phế cầu có vỏ (gây bệnh) khuẩn lạc sẽ có

đỉnh, sau 24h khuẩn lạc lõm ở giữa (phân

biệt với S viridans cũng thường trú ở đường

hô hấp và tiêu huyết )

 

VI SINH LÂM SÀNG

Nuôi cấy phân lập

Đồng thời cũng cấy vào thạch máu, thạch nước báng

Sau 24h nhận xét hình thái khuẩn lạc => nhuộm soi nếu là son cầu gram dương => tiếp tục các thử nghiệm để xác định

VI SINH LÂM SÀNG

Nuôi cấy phân lập

Bệnh phẩm là máu, dịch não tủy

 Cấy vào canh thang máu hoặc canh thang nước báng, ủ ấm 37 o C, 5 – 10% CO2 , theo dõi phân lập tương tự liên cầu

VI SINH LÂM SÀNG

Các thử nghiệm xác định phế cầu

Thử nghiệm Neufeld (tan trong muối mật)

 Lấy 2 ống nghiệm cho vào mỗi ống 0.25 ml

nước muối sinh lý vô khuẩn

 Trộn khuẩn lạc phế cầu vào để có độ đục bằng

VI SINH LÂM SÀNG

Các thử nghiệm xác định phế cầu

Thử nghiệm Neufeld (tan trong muối mật)

 Nếu là phế cầu thì nhuộm soi ống thứ 1 còn vi khuẩn, ống thứ 2 không còn VK nào do phế cầu

đã bị ly giải

Hiện nay người ta thường dùng khoanh giấy Optochin thay thử nghiệm neufeld

Optochin test

VI SINH LÂM SÀNG

Các thử nghiệm xác định phế cầu

Thử nghiệm Optochin

 Dàn đều dd vi khuẩn trên môi trường thạch

máu, để cho khô rồi đặt khoanh giấy optochin

có ethyl hydrocuprein, để 37 o C, sau 24h nếu có vòng vô khuẩn từ 14mm trở lên là phế cầu

VI SINH LÂM SÀNG

Phân biệt chủng gây bệnh

Gây bệnh thực nghiệm để phân biệt chủng ký sinh với chủng gây bệnh

VI SINH LÂM SÀNG

Chẩn đoán gián tiếp

Không có ý nghĩa nên không được dùng chẩn đoán trong PTN

cầu nặng như: nhiễm khuẩn huyết, viêm màng não mủ

 Bệnh lây theo đường hô hấp, phòng bệnh không đặc

hiệu chủ yếu bằng về sinh đường hô hấp

 ĐIỀU TRỊ

 Phế cầu nhạy cảm với nhiều loại kháng sinh, nếu điều trị sớm, khả năng phục hồi rất nhanh

 Thuốc lựa chọn là Penicillin nhưng hiện nay đã xuất

hiện sự kháng thuốc Cần điều trị theo KS đồ