Bài thực phân tích môi trường

BÁO CÁO THỰC HÀNH MƠN PHÂN TÍCH MƠ TRƯỜNG Nhóm (Lớp Quản lí TN&MT k2)  Thành viên nhóm Nguyễn Thị Hải Bình Hồng Trung Kiên Phoutthasone Phouangvanh Sonephanh Sainouphin Khounphiw Anna I BÀI THỰC HÀNH SỐ 1: Xác định hàm lượng đường tổng đường khử phương phương pháp trắc quang Chuẩn bị lí thuyết Phương pháp dựa sở phản ứng tạo màu đường tổng đường khử với thuốc thử acid dinitrosalisylic (DNS) Cường độ màu hỗn hợp phản ứng tỉ lệ thuận với nồng độ đường khử acid dinitrosasylic tính đường khử mẫu nghiên cứu Dụng cụ thiết bị Ống nghiệm có nắp: Becker 250ml: Micropipet 20-200μl: Đũa thủy tinh: Micropipet 100-1000μl: Chén cân: Bình định mức 100ml: Cuvet: Cân phân tích: Máy đo quang Đầu Hóa chất Thuốc thử acid ditrosalisylic(DNS):Cân 1g DNS pha 20ml NaOH 2N, thêm vào 50ml nước cất 30g muối Sodium potaaium tartrate, đun cách thủy cho tan định mức tới 100ml Dung dịch glucose mẫu (5mg/ml): cân 0,5g D-glucose cho vào bình đinh mức, thêm nước cất, định mức 100ml Thực hành Cách tiến hành: Nếu hàm lượng đường mẫu định mức lần Lập đường chuẩn với dung dịch glucose chuẩn có nồng độ 5mg/ml tiến hành tạo phức màu cho mẫu theo bảng sau: Ống nghiệm Dung dịch gốc (ml) Nước cất (ml) Nồng độ C (mg/ml) 1,0 0,04 0,96 0,2 0,08 0,92 0,4 0,12 0,88 0,6 0,16 0,84 0,8 0,2 0,8 DNS (ml) OD540nm 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 Đun cách thủy đến dung dịch chuyển màu nâu đỏ 0,487 1,055 1,585 2,087 2,693 II BÀI THỰC HÀNH SỐ 2: Xác định số vi sinh vật nước Chuẩn bị môi trường Môi trường PDA (nuôi cấy nấm mốc) - Thành phần: + Dịch chiết khoai tây: 100g + Dextrose: 10g + Agar: 10g - Tiến hành: + Cân 10g dextrose 10g bột agar cho vào bình tam giác 1000ml + Cân 100g khoai tây, đêm luộc khoai tây từ tiếng trở lên, sau lọc lấy phần nước bỏ phần bã khoai tây Đổ phần dịch chiết khoai tây vào bình tam giác, lắc tan hết + Định mức lên 500ml + pH môi trường + Đem môi trường trùng điều kiện 1150C, 20 phút Đổ môi trường - Đổ môi trường tủ nuôi cấy vi sinh - Mở nắp đĩa petri khoảng 300 (Tránh không cho vi sinh vật bên ngồi vào), đổ mơi trường vào đĩa petri (khoảng 1/3-1/2 đĩa petri), đậy nắp, xoay nhẹ cho môi trường dàn Chuẩn bị cần phân tích (làm tủ ni cấy vi sinh) - Pha lỗng mẫu: + Chuẩn bị ống nghiệm có nắp chưa 9ml nước muốn sinh lý + Lắc mẫu, dùng micropipet lấy 1ml nước mẫu cho vào ống nghiệm thứ (Độ pha loãng 1/10) + Lắc ống nghiệm 01, dùng micropipet lấy 1ml dung dịch ống nghiệm 01 cho vào ống nghiệm 02 (Độ pha loãng 1/100) + Lắc ống nghiệm 02, dùng micropipet lấy 1ml dung dịch ống nghiệm 02 cho vào ống nghiệm 03 (Độ pha loãng 1/1000) + Lắc ống nghiệm 03, dùng micropipet lấy 1ml dung dịch ống nghiệm 03 cho vào ống nghiệm 04 (Độ pha loãng 1/10000) + Lắc ống nghiệm 04, dùng micropipet lấy 1ml dung dịch ống nghiệm 04 cho vào ống nghiệm 05 (Độ pha loãng 1/100000) + Lắc ống nghiệm 05, dùng micropipet lấy 1ml dung dịch ống nghiệm 05 cho vào ống nghiệm 06 (Độ pha loãng 1/1000000) - Cho mẫu vào petri: lấy 50μl cho vào đĩa petri có sẵn mơi trường chuẩn bị - Trang: Dùng que trang để trải mẫu nước chứa vi sinh vật mặt thạch đĩa petri Lưu ý: que trang cần phải khử trùng cách nhúng cồn đốt cháy hết cồn trước sau lần trang *Lưu ý: Tất dụng cụ sử dụng phải khử trùng Ủ vi sinh: Cho đĩa petri chuẩn bị xong cho vào tủ ủ ấm vi sinh 37 C 48 tiếng Đếm khuẩn lạc - Nếu khuẩn lạc mọc thưa, dễ đếm đếm tồn số khuẩn lạc mọc hộp thạch Nếu khuẩn lạc mọc dầy, khó đếm chia mặt hộp làm nhiều ơ, sau đếm số tiêu biểu tính kết trung bình - Tính số VSV có mẫu ban đầu: lấy số khuẩn lạc đếm nhân với hệ số pha loãng  ... môi trường + Đem môi trường trùng điều kiện 1150C, 20 phút Đổ môi trường - Đổ môi trường tủ nuôi cấy vi sinh - Mở nắp đĩa petri khoảng 300 (Tránh không cho vi sinh vật bên ngồi vào), đổ mơi trường. .. dung dịch chuyển màu nâu đỏ 0,487 1,055 1,585 2,087 2,693 II BÀI THỰC HÀNH SỐ 2: Xác định số vi sinh vật nước Chuẩn bị môi trường Môi trường PDA (nuôi cấy nấm mốc) - Thành phần: + Dịch chiết khoai... vào), đổ mơi trường vào đĩa petri (khoảng 1/3-1/2 đĩa petri), đậy nắp, xoay nhẹ cho môi trường dàn Chuẩn bị cần phân tích (làm tủ ni cấy vi sinh) - Pha lỗng mẫu: + Chuẩn bị ống nghiệm có nắp chưa