Khảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăngKhảo sát sơ bộ thành phần hóa học và chiết phân đoạn rễ cây Đinh lăng
TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH DƯỢC HỌC MÃ SỐ: 52720401 PHÂN TÍCH SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ CHIẾT PHÂN ĐOẠN RỄ CÂY ĐINH LĂNG (Polyscias fruticosa (L.) Harms) TRỒNG TẠI AN GIANG Cán hướng dẫn: PGS.TS TRẦN CÔNG LUẬN ThS ĐỖ VĂN MÃI Cần Thơ, năm 2017 Sinh viên thực hiện: TRẦN THỊ KIM TUYỀN MSSV: 12D720401259 LỚP: ĐH DƯỢC 7C i LỜI CẢM ƠN Trong thời gian nghiên cứu để hồn thành khố luận mơn dược liệu trường Đại học Tây Đô, em nhận nhiều quan tâm, hướng dẫn thầy cô, bạn bè gia đình Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành gửi lời cảm ơn tới PGS.TS Trần Công Luận, ThS Đỗ Văn Mãi người thầy tận tuỵ, nhiệt tình dìu dắt, giúp đỡ em suốt thời gian thực khoá luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn sâu sắc tới toàn thể thầy cô môn dược liệu trường Đại học Tây Đô tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ em tồn thời gian thực khố luận Em xin chân thành cảm ơn toàn thể thầy giáo trường Đại học Tây Đơ tận tình dạy bảo em suốt năm học vừa qua Cuối cùng, em xin tỏ lòng cảm ơn chân thành, sâu sắc tới Cha mẹ, gia đình, bạn bè, người thân bên cạnh, động viên, ủng hộ em suốt thời gian học tập hoàn thành khoá luận Cần Thơ, ngày tháng năm 2017 Sinh viên TRẦN THỊ KIM TUYỀN ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết khóa luận trung thực chưa công bố cơng trình khác Sinh viên TRẦN THỊ KIM TUYỀN iii TĨM TẮT Khóa luận tốt nghiệp đại học - Khóa học: 2012 – 2017 Chuyên ngành Dược học - Mã số: 52720401 Phân tích sơ thành phần hóa học chiết phân đoạn rễ Đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) trồng An Giang Sinh viên: Trần Thị Kim Tuyền Giáo viên hướng dẫn: PGS.TS Trần Công Luận ThS Đỗ Văn Mãi Mở đầu Trong y học cổ truyền, Đinh lăng từ lâu sử dụng vị thuốc thông huyết mạch Những nghiên cứu trước Đinh lăng có tác dụng dược lý tương tự Nhân sâm giá thành lại rẻ dễ trồng Nhân sâm nên chúng quan tâm nghiên cứu Ở Việt Nam, nguồn dược liệu Đinh lăng dồi dào, hứa hẹn nguồn khai thác thành phần hóa học chúng đầy tiềm Đề tài hướng tới việc khảo sát thành phần hóa học Đinh lăng để cung cấp nguồn tài liệu tham khảo cho nghiên cứu Đối tượng phương pháp nghiên cứu Nguyên liệu Đinh lăng, thu hái Tri Tôn – An Giang Sau qua trình sơ chế ban đầu đối tượng khảo sát đặc điểm vi học, thử độ tinh khiết, nghiên cứu thành phần hóa học rễ Đinh lăng với phương pháp chiết lỏng – lỏng Sau phơi khô 9,3 kg rễ Đinh lăng, ngấm kiệt với cồn 96 % Tiến hành cô thu hồi cồn, thu 1,75 kg cao rễ tiến hành lắc phân bố với dung mơi có độ phân cực tăng dần Cơ thu hồi dung môi, thu cao tương ứng Kết bàn luận Từ 9,3 kg rễ Đinh lăng, kỹ thuật ngấm kiệt với cồn 96 %, sau lắc phân bố với diethyl ether, ethyl acetat, n-butanol, thu 300 g cao Et2O, 30 g cao EtOAc, 405 g cao n-BuOH 800 g cao nước cuối Song song đó, thu kết đặc điểm vi học, thử độ tinh khiết khảo sát sơ thành phần hóa học Đinh lăng Kết luận: Bằng kỹ thuật đơn giản khảo sát đặc điểm vi học, độ tinh khiết Với phương pháp ngấm kiệt lắc phân bố thu cao phân đoạn Để làm tài liệu cho nghiên cứu sau iv MỤC LỤC Trang DANH MỤC HÌNH VII DANH MỤC BẢNG IX DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT X CHƯƠNG MỞ ĐẦU .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1.TỔNG QUAN VỀ ĐINH LĂNG 2.1.1.Vị trí, phân loại Đinh lăng 2.1.2.Tên Việt Nam, tên khoa học, tên gọi khác 2.1.2.1.Tên Việt Nam 2.1.2.2.Tên khoa học 2.1.2.3.Tên gọi khác 2.1.3.Một số loài Đinh lăng khác 2.1.3.1.Đinh lăng tròn 2.1.3.2.Đinh lăng ráng 2.1.3.3.Polyscias sambucifolia (Sieber) Harms 2.1.3.4.Đinh lăng trổ 2.1.3.5.Đinh lăng 2.1.3.6.Polyscias grandifolia Volkens 2.1.3.7.Đinh lăng đĩa 2.1.4.Đặc điểm thực vật Đinh lăng 2.1.4.1.Mô tả 2.1.4.2.Sinh thái 2.1.5.Thu hái chế biến 2.1.6.Phân bố thu hái 2.1.7.Trồng trọt 2.1.8.Thành phần hóa học 2.1.9.Tác dụng dược lý 20 v 2.1.10.Công dụng liều dùng 23 2.1.10.1.Công dụng 23 2.1.10.2.Liều dùng 23 2.1.11.Sản phẩm Đinh lăng có mặt thị trường 25 2.2.TỔNG QUAN VỀ THÀNH PHẦN HÓA THỰC VẬT 27 2.3.MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP CHIẾT TÁCH 30 2.3.1.Kỹ thuật chiết lỏng - lỏng 31 2.3.2 Kỹ thuật chiết rắn - lỏng 33 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 3.1.ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 38 3.1.1.Nguyên liệu 38 3.1.2.Hóa chất dung mơi 38 3.1.3.Trang thiết bị 38 3.2.PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 39 3.2.1.Thu hái xử lý bảo quản Đinh lăng 39 3.2.1.1.Thu hái 39 3.2.1.2.Xử lý bảo quản 39 3.2.2.Nghiên cứu đặc điểm vi học 39 3.2.2.1.Khảo sát hình thái 39 3.2.2.2.Khảo sát vi phẫu 39 3.2.2.3.Khảo sát bột dược liệu 40 3.2.3.Thử tinh khiết 40 3.2.3.1.Xác định độ ẩm 40 3.2.3.2.Xác định tro toàn phần 41 3.2.3.3.Xác định chất chiết dược liệu 41 3.2.4.Nghiên cứu hóa học 41 3.2.4.1.Định tính 41 3.2.4.2.Định tính sơ nhóm thân rễ Đinh lăng 43 3.2.4.3.Chiết xuất tách phân đoạn 49 3.2.4.4.Thăm dò hệ sắc ký cao phân đoạn 52 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 53 4.1.THỰC VẬT HỌC 53 vi 4.1.1.Đặc điểm hình thái 53 4.1.2.Đặc điểm vi phẫu 59 4.1.3.Đặc điểm bột dược liệu 65 4.2.THỬ TINH KHIẾT 70 4.2.1.Độ ẩm 70 4.2.2.Xác định độ tro 71 4.2.3 Chất chiết dược liệu 70 4.3.NGHIÊN CỨU HÓA HỌC VÀ TÁCH PHÂN ĐOẠN 71 4.3.1.Định tính 71 4.3.2.Định tính sơ nhóm chất thân rễ Đinh lăng 76 4.3.3.Chiết xuất 78 4.3.4.Tách phân đoạn kỹ thuật chiết lỏng - lỏng 79 4.4.THĂM DỊ HỆ DUNG MƠI 80 4.4.1.Sắc ký lớp mỏng cao diethyl ether 80 4.4.2.Sắc ký lớp mỏng cao ethyl acetat 82 4.4.3.Sắc ký lớp mỏng cao n-butanol 84 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 87 5.1 KẾT LUẬN 87 5.1.1 Nghiên cứu đặc điểm vi học 87 5.1.2 Thử tinh khiết 87 5.1.3 Nghiên cứu hóa học 87 5.2 ĐỀ XUẤT 88 TÀI LIỆU THAM KHẢO 89 vii DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1 Sơ đồ vị trí phân loại lồi Polyscias fruticosa (L.) Harms Hình 2.2 Tồn Đinh lăng Hình 2.3 Tồn hoa Đinh lăng Hình 2.4 Một số acid amin có Đinh lăng Hình 2.5 Một số vitamin có Đinh lăng Hình 2.6 Một số hợp chất có tinh dầu 16 Hình 2.7 Một số flavonoid từ Đinh lăng 16 Hình 2.8 Cơng thức falcarindiol Đinh lăng 18 Hình 2.9 Cơng thức chung saponin triterpenoid Đinh lăng 18 Hình 2.10 Sản phẩm Đinh lăng 27 Hình 3.1 Sơ đồ chuẩn bị dịch chiết 43 Hình 3.2 Sơ đồ tách chất dịch chiết ether 44 Hình 3.3 Sơ đồ phân tích nhóm hợp chất dịch chiết cồn 45 Hình 3.4 Sơ đồ phân tích nhóm hợp chất dịch chiết cồn thủy phân 46 Hình 3.5 Sơ đồ phân tích nhóm hợp chất trực tiếp từ dịch chiết nước 47 Hình 3.6 Sơ đồ phân tích nhóm hợp chất dịch chiết nước thủy phân 48 Hình 3.7 Sơ đồ tách chiết phân đoạn 50 Hình 4.1 Tồn Đinh lăng 52 Hình 4.2 Hình thái bên ngồi Đinh lăng 53 Hình 4.3 Cụm hoa Đinh lăng 54 Hình 4.4 Hình thái bên hoa Đinh lăng 55 Hình 4.5 Hình tồn thân Đinh lăng 56 Hình 4.6 Hình đường kính thân Đinh lăng 56 Hình 4.7 Hình hình thái bên ngồi rễ Đinh lăng 57 Hình 4.8 Hình thái bên ngồi rễ rễ Đinh lăng 58 Hình 4.9 Vi phẫu Đinh lăng vật kính 10X 59 viii Hình 4.10 Vi phẫu Đinh lăng vật kính 40X 59 Hình 4.11 Vi phẫu cuống Đinh lăng vật kính 10X 60 Hình 4.12 Vi phẫu cuống Đinh lăng vật kính 40X 61 Hình 4.13 Vi phẫu thân Đinh lăng vật kính 10X 62 Hình 4.14 Hình vi phẫu rễ Đinh lăng vật kính 10X 63 Hình 4.15 Vi phẫu rễ Đinh lăng vật kính 40X 64 Hình 4.16 Bột Đinh lăng soi vi phẫu 65 Hình 4.17 Soi bột Đinh lăng vật kính 40X 66 Hình 4.18 Bột thân Đinh lăng soi bột 66 Hình 4.19 Soi bột thân Đinh lăng vật kính 40X 67 Hình 4.20 Bột rễ Đinh lăng 67 Hình 4.21 Soi bột rễ Đinh lăng vật kính 40X 68 Hình 4.22 Định tính cao rễ hệ n-butanol - acid acetic - nước (4 : : 5) 72 Hình 4.23 Định tính cao rễ hệ Toluen - ethyl acetat (7 : 3) 73 Hình 4.24 Định tính saponin sắc kí lớp mỏng 74 Hình 4.25 Định tính saponin thân Đinh lăng SKLM 75 Hình 4.26.Sơ đồ chiết xuất rễ Đinh lăng 77 Hình 4.27 Sơ đồ tách phân đoạn 79 Hình 4.28 Sắc kí lớp mỏng cao diethyl ether hệ S1 80 Hình 4.29 Sắc kí lớp mỏng cao diethyl ether hệ S2 80 Hình 4.30 Sắc kí lớp mỏng cao diethyl ether hệ S3 81 Hình 4.31 Sắc kí lớp mỏng cao ethyl acetat hệ S1 82 Hình 4.32 Sắc kí lớp mỏng cao ethyl acetat hệ S2 83 Hình 4.33 Sắc kí lớp mỏng cao ethyl acetat hệ S3 83 Hình 4.34 Sắc kí lớp mỏng cao n-butanol hệ S1 84 Hình 4.35 Sắc kí lớp mỏng cao n-butanol hệ S2 84 Hình 4.36 Sắc kí lớp mỏng cao n-butanol hệ S3 85 ix DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Tóm tắt saponin triterpen Đinh lăng 19 Bảng 4.1 Độ ẩm bột dược liệu Đinh lăng 69 Bảng 4.2 Độ ẩm cao toàn phần Đinh lăng 69 Bảng 4.3 Tiêu chuẩn độ tro dược liệu 70 Bảng 4.4 Chất chiết dược liệu 70 Bảng 4.5 Định tính sơ nhóm chất thân rễ Đinh lăng 76 Bảng 4.6 Khối lượng độ ẩm cao phân đoạn cao rễ 78 ... góp phần khảo sát sơ thành phần hóa học rễ phân đoạn chiết tách rễ Đinh lăng Polyscias fruticosa (L.) Harms thuộc họ Nhân sâm (Araliaceae), so sánh thành phần hóa học thân rễ Đinh lăng, cung cấp... bệnh Đinh lăng từ kinh nghiệm dân gian Những kinh nghiệm chưa chứng minh rõ ràng nghiên cứu Chính mà đề tài Khảo sát sơ thành phần hóa học chiết phân đoạn rễ Đinh lăng thực nhằm đóng góp phần khảo. .. vi học, thử độ tinh khiết khảo sát sơ thành phần hóa học Đinh lăng Kết luận: Bằng kỹ thuật đơn giản khảo sát đặc điểm vi học, độ tinh khiết Với phương pháp ngấm kiệt lắc phân bố thu cao phân đoạn