Hoàn thiện một số giai đoạn trong quy trình nhân giống in vitro hai giống Cẩm chướng Đỏ chùm, Hồng cánh sen (Dianthus caryophyllus)

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ****** LÝ THỊ HƢƠNG HOÀN THIỆN MỘT SỐ GIAI ĐOẠN TRONG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO HAI GIỐNG CẨM CHƢỚNG ĐỎ CHÙM, HỒNG CÁNH SEN (Dianthus caryophyllus L) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS TS NGUYỄN VĂN ĐÍNH HÀ NỘI - 2018 LỜI CẢM ƠN Trƣớc hết xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến PGS TS Nguyễn Văn Đính tận tình bảo, giúp đỡ hƣớng dẫn tơi suốt q trình thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu trƣờng Đại học Sƣ Phạm Hà Nội 2, Ban Chủ nhiệm khoa Sinh - KTNN, Phòng thí nghiệm sinh lý học thực vật, khoa Sinh - KTNN, Trƣờng Đại học Sƣ Phạm Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài Trong trình thực đề tài nhận đƣợc giúp đỡ tận tình thầy La Việt Hồng Mai Thị Hồng - Phòng thí nghiệm Sinh lý học thực vật giúp đỡ, bảo đóng góp ý kiến để tơi hồn thành khóa luận Cuối tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè động viên, khích lệ tạo điều kiện giúp đỡ suốt thời gian học tập nhƣ hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng năm 2018 Sinh viên thực Lý Thị Hƣơng LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu đề tài: “Hoàn thiện số giai đoạn quy trình nhân giống in vitro hai giống hoa Cẩm chƣớng Đỏ chùm, Hồng cánh sen (Dianthus caryophylluss L) kết nghiên cứu riêng chúng tơi PGS TS Nguyễn Văn Đính hƣớng dẫn Các số liệu, kết nghiên cứu trung thực không trùng lặp với kết nghiên cứu ngƣời khác Hà Nội, tháng năm 2018 Sinh viên thực Lý Thị Hƣơng DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Kết tạo vật liệu khởi đầu đốt thân Cẩm chƣớng 22 Đỏ chùm sau 14 ngày nuôi cấy 22 Bảng 3.2 Kết tạo vật liệu khởi đầu đốt thân Cẩm chƣớng Hồng cánh sen sau 14 ngày nuôi cấy 23 Bảng 3.3 Ảnh hƣởng BAP đến tái sinh nhân nhanh chồi giống Cẩm chƣớng Đỏ chùm sau tuần nuôi cấy 25 Bẳng 3.4 Ảnh hƣởng BAP đến tái sinh nhân nhanh chồi giống Cẩm chƣớng Hồng cánh sen sau tuần nuôi cấy 27 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng NAA đến rễ giống Cẩm chƣớng Đỏ chùm 30 sau 20 ngày nuôi cấy 30 Bảng 3.6 Ảnh hƣởng NAA đến tạo rễ chồi Cẩm chƣớng Hồng cánh sen sau 20 ngày nuôi cấy 32 Bảng 3.7 Ảnh hƣởng độ che sáng tới tỷ lệ sống Cẩm chƣớng sau 20 ngày ƣơm 34 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1 Cẩm chƣớng Đỏ chùm 23 Hình 3.2 Cẩm chƣớng Hồng cánh sen 24 Hình 3.3 Cẩm chƣớng Đỏ chùm in vitro sau tuần ni cấy 26 Hình 3.4 Chồi Cẩm chƣớng Hồng cánh sen sau tuần nuôi cấy 29 Hình 3.5 Rễ Cẩm chƣớng Đỏ chùm sau 20 ngày ni cấy 31 Hình 3.6 Rễ Cẩm chƣớng Hồng cánh sen sau 20 ngày nuôi cấy 33 Hình 3.7 Kết ảnh hƣởng độ che sáng đến Cẩm chƣớng in vitro sau 20 ngày ƣơm 35 Hình 3.8 Cẩm chƣớng sau tháng đƣợc trồng lên đất phù sa, bón lót phân chuồng hoại mục 36 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BAP : 6-Benzyl amino purine NAA : α - Napthalene acetic acid CT : Công thức Agar : Thạch NXB : Nhà xuất MS : Murasashige Skoog, 1962 ĐC : Đối chứng MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa lý luận thực tiễn NỘI DUNG CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm sinh học phân loại hoa Cẩm chƣớng 1.1.1 Nguồn gốc phân loại 1.1.2 Đặc điểm sinh học 1.1.3 Điều kiện sinh thái 1.2 Tình hình sản xuất hoa Cẩm chƣớng giới 1.3 Tình hình sản xuất hoa Cẩm chƣớng nƣớc 1.4 Tính thẩm mỹ giá trị kinh tế 11 1.5 Tình hình nghiên cứu nhân giống hoa Cẩm chƣớng kĩ thuật nuôi cấy in vitro 11 1.5.1 Tình hình nghiên cứu giới 11 1.5.2.Tình hình nghiên cứu nƣớc 14 CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Vật liệu ngiên cứu 17 2.2 Dụng cụ thiết bị thí nghiệm 17 2.2.1 Dụng cụ 17 2.2.2 Thiết bị 17 2.2.3 Môi trƣờng nuôi cấy 17 2.3 Điều kiện nuôi cấy 18 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 18 2.5 Phƣơng pháp thống kê, xử lý số liệu 21 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Tạo vật liệu khởi đầu hai giống Cẩm chƣớng 22 3.2 Tái sinh nhân nhanh chồi Cẩm chƣớng in vitro 24 3.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng NAA đến rễ hai giống Cẩm chƣớng Đỏ chùm Hồng cánh sen 29 3.4 Rèn luyện in vitro: Nghiên cứu ảnh hƣởng độ che sáng đến tỷ lệ sống sót cẩm chƣớng cấy mơ giai đoạn rèn luyện 33 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Ngày ngành sản xuất hoa cắt cành phát triển mạnh mẽ trở thành lĩnh vực thu hút đƣợc đầu tƣ ngành ngành thƣơng mại mang lại lợi ích kinh tế cao Trong có hoa Cẩm chƣớng (Dianthus caryophyllus) số loài hoa cắt cành phổ biến giới đứng sau hoa Hồng hoa Cúc, mạng lại suất giá trị kinh tế cao, chiếm khoảng 17% tổng sản lƣợng hoa cắt cành [5] Đa số loài hoa Cẩm chƣớng đƣợc trồng nƣớc chủ yếu nhập từ Trung Quốc, Hà Lan, phí sản xuất cao, khơng chủ động đƣợc sản xuất, xuất nhƣ chất lƣợng chƣa đáp ứng đƣợc thị trƣờng nƣớc giới Mặt khác giống chƣa thích ứng đƣợc với điều kiện sinh thái nƣớc ta Ở vùng đồng Bắc Bộ, Cẩm chƣớng đƣợc trồng vụ năm Do việc nhân giống giữ giống cho vụ sau qua hè với điều kiện khí hậu khơng thuận lợi khó khăn Mặt kỹ thuật nhân giống hoa Cẩm chƣớng chủ yếu phƣơng pháp gieo hạt giâm cành qua nhiều hệ nên nhanh chóng bị thối hóa, hệ số nhân thấp, thiếu giống, dần đồng chất lƣợng Đến nƣớc ta có loài hoa (Hồng, Cúc, Lay ơn, Cẩm chƣớng, Địa lan, Cát tƣờng) Trong có hoa Cẩm chƣớng (Dianthus caryophyllus) đƣợc cấp nhãn hiệu độc quyền hoa Đà Lạt [37] Đây lợi Tuy nhiên xuất hoa thị trƣờng giới giống ngày đòi hỏi khắt khe màu sắc, chủng loại lẫn chất lƣợng Do để cung cấp giống trì giống bệnh cho thị trƣờng đòi hỏi phải ứng dụng tiến khoa học kỹ thuật Trong có phƣơng pháp ni cấy mơ tế bào thực vật Đây phƣơng pháp nhân giống in vitro đem lại số lƣợng giống lớn, b Giống Cẩm chướng Hồng cánh sen Bẳng 3.4 Ảnh hưởng BAP đến tái sinh nhân nhanh chồi giống Cẩm chướng Hồng cánh sen sau tuần nuôi cấy Công thức Số chồi Số nghiên cứu Chiều cao Tỷ lệ thủy tinh (cm) hóa % CT1(ĐC) 1,66a 5,33b 5,33a 4,5 CT2 (B 0,1) 4,03a 4,00a 11,30b 9,7 CT3 (B 0,2) 4,00a 3,66a 9,6ab 14,0 CT4 (B 0,3) 3,00a 3,33a 6,00a 28,4 LSD0,05 2,40 0,94 4,70 Với thí nghiệm, cột, kí tự theo sau khác a, b,…thể sai khác có ý nghĩa thống kê với α=0,05 Từ bảng cho thấy BAP ảnh hƣởng đến nhân nhanh chồi Cẩm chƣớng Hồng cánh sen in vitro Ở CT môi trƣờng có bổ sung BAP thấy số chồi cao so với CT1 (B 0,0) không bổ sung BAP Ở mơi trƣờng MS có bổ sung 0,1 - 0,3 mg/l BAP cho số lƣợng chồi cao gần tƣơng đƣơng dao động từ - 4,03 chồi/mẫu, chồi mập, xanh, đồng Đặc biệt CT2 (B0,1) CT3 (B 0,2) chồi Cẩm chƣớng cho nhiều đạt 4,00 4,03 chồi/mẫu Nhƣng tăng 0,3 mg/l BAP thấy số chồi giảm xuống 3,00 chồi/mẫu Đối với chiều cao công thức BAP 0,1 mg/l cho chiều cao tốt nhất, cho chiều cao chồi đạt 11,30 cm Khi tăng nông độ BAP lên 0,2 - 0,3 mg/l thấy số chồi có xu hƣớng giảm xuống lần lƣợt 9,6 - 6,00 cm Kết cho thấy tăng nồng độ BAP tỷ lệ thủy tinh hóa cao Ở cơng thức BAP 0,3 mg/l cho tỷ lệ thủy tinh hóa cao 27 chiếm 28,4% so với công thức ĐC (B 0,0) 4,5% Nồng độ BAP ảnh hƣởng đến số nhƣng khơng có khác biệt nhiều làm giảm số chồi so với ĐC dao động từ 3,33 - Nhƣ kết luận môi trƣờng phù hợp để nhân nhanh chồi Cẩm chƣớng Hồng cánh sen in vtro môi trƣờng MS có bổ sung 0,1 mg/l BAP cho số chồi chiều cao tốt đạt lần lƣợt 4,03 chồi/mẫu, chiều cao 11,30 cm Kết nghiên cứu khác với kết Mahdiyeh Kharrazi, Hossein Nemati, Ali Tehranifar, Abdolreza Bagheri & Ahmad Sharifi với BAP mg/l cho 6,17 chồi/mẫu giống Innove Orange Bogr giống Innove Orange Bogr 0,2 mg/l BAP số chồi đạt 3,83 tốt [20] Sở dĩ có khác giống khác b a 28 c d Hình 3.4 Chồi Cẩm chƣớng Hồng cánh sen sau tuần nuôi cấy a, BAP 0,0 mg/l b, BAP 0,1 mg/l c, BAP 0,2 mg/l d, BAP 0,3 3.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng NAA đến rễ hai giống Cẩm chƣớng Đỏ chùm Hồng cánh sen Sau giai đoạn nhân nhanh chồi Cẩm chƣớng in vitro tiến hành tạo rẽ cho chồi để tạo hồn chỉnh với mục đích tạo có sức sống cao, đạt tiêu chuẩn, sống độc lập chuyển vƣờn ƣơm Để tăng khả rễ Cẩm chƣớng tiến hành tách riêng lẻ chồi thu đƣợc từ giai đoạn trƣớc cấy lên mơi trƣờng MS có bổ sung NAA (0,1; 0,2; 0,3 mg/l) để khảo sát khả tạo rễ in vitro 29 a Giống Cẩm chướng Đỏ chùm Bảng 3.5 Ảnh hưởng NAA đến rễ giống Cẩm chướng Đỏ chùm sau 20 ngày nuôi cấy Công thức nghiên cứu Tỷ lệ Số rễ rễ Chiều dài rễ (cm) CT1 (ĐC) 100% 2,66b 2,66a CT2 (N 0,1) 100% 4,66a 2,66a CT3 (N 0,2) 100% 3,33ab 4,00a CT4 (N 0,3) 100% 4,33a 3,66a 1,43 1,63 LSD0,05 Với thí nghiệm, cột, kí tự theo sau khác a, b,… thể sai khác có ý nghĩa thống kê với α=0,05 Từ bảng cho thấy NAA có ảnh hƣởng đến khả tạo rễ chồi cẩm chƣớng in vitro Ở CT1 (ĐC) số rễ đạt 2,66 rễ/chồi Khi bổ sung NAA thấy CT2 CT4 cho nhiều rễ, số rễ dao động từ 4,33 - 4,66 Đối với chiều dài rễ CT có bổ sung BAP khác biệt nhiều dao động từ 2,66 - 4,00 cm Qua nghiên cứu kết luận môi trƣờng tốt cho rễ chồi cẩm chƣớng Đỏ chùm in vitro rễ mơi trƣờng có bổ sung 0,1 mg/l NAA 0,3 mg/l NAA Còn mơi trƣờng N 0,0 không phù hợp nuôi cấy tạo rễ, rễ ít, nhỏ mảnh 30 a b d c Hình 3.5 Rễ Cẩm chƣớng Đỏ chùm sau 20 ngày nuôi cấy a, NAA 0,0 mg/l b, NAA 0,1 mg/l c, NAA 0,2 mg/l 31 d, NAA 0,3 mg/l b, Giống Cẩm chướng Hồng cánh sen Bảng 3.6 Ảnh hưởng NAA đến tạo rễ chồi Cẩm chướng Hồng cánh sen sau 20 ngày nuôi cấy Công thức nghiên cứu Tỷ lệ rễ Số rễ Chiều dài rễ CT1(N 0,0) 100% 2,66a 2,33a CT2 (N 0,1) 100% 4,66b 4,33a CT3 (N 0,2) 100% 3,66ab 4,00a CT4 (N 0,3) 100% 3,33a 3,33a 1,08 2,10 LSD0,05 Với thí nghiệm, cột, kí tự theo sau khác a, b,…thể sai khác có ý nghĩa thống kê với α=0,05 Từ bảng cho thấy: Ở công thức N 0,0 cho số rễ/chồi 2,66 Khi cấy sang mơi trƣờng có bổ sung NAA làm số rễ chồi tăng Đặc biệt N 0,1 tốt cho tạo rễ chồi cây, số rễ cao 4,66 rễ chiều dài rễ đạt 4,33 cm Khi tăng NAA lên 0,3 mg/l thấy số rễ chiều dài rễ giảm xuống 3,33 rễ/ chồi Qua nghiên cứu chúng tơi kết luận: Ở mơi trƣờng có bổ sung 0,1 mg/l NAA tốt cho tạo rễ cẩm chƣớng in vitro đạt 4,66 chồi/mẫu chiều dài 4,33 cm Kết tƣơng tự nhƣ kết nghiên cứu Nguyễn Thị Thu Hằng, môi trƣờng có bổ sung 0,1 mg/l thích hợp cho rễ Cẩm chƣớng [6] 32 b a d c Hình 3.6 Rễ Cẩm chƣớng Hồng cánh sen sau 20 ngày nuôi cấy a, NAA 0,0 mg/l b, NAA 0,1 mg/l c, NAA 0,2 mg/l d, NAA 0,3 mg/l 3.4 Rèn luyện in vitro: Nghiên cứu ảnh hƣởng độ che sáng đến tỷ lệ sống sót cẩm chƣớng cấy mô giai đoạn rèn luyện Cây Cẩm chƣớng in vitro đƣợc ni cấy phòng thí nghiệm với điều kiện chiếu sáng nhân tạo từ 1200 - 1300 lux, nhiệt độ từ 25 - 280C, không chịu chi phối điều kiện khí hậu bên ngồi Do đó, chuyển 33 in vitro từ phòng thí nghiệm ngồi vƣờn ƣơm khơng tránh khỏi gặp khó khăn Khi ánh sáng mặt trời trực tiếp chiếu vào toàn phận với cƣờng độ từ 26 - 360C rẽ làm cho bị tổn thƣơng, nƣớc dần chết héo Do tiến hành nghiên cứu ảnh hƣởng độ che sáng đến Cẩm chƣớng in vitro để tìm cơng thức che sáng phù hợp cho Cẩm chƣớng để đạt đƣợc tỷ lệ sống cao đạt chất lƣợng tốt Qua công thức nghiên cứu thu đƣợc kêt nhƣ bảng sau: Bảng 3.7 Ảnh hưởng độ che sáng tới tỷ lệ sống Cẩm chướng sau 20 ngày ươm Chỉ tiêu so Công thức nghiên cứu Đỏ chùm Hồng cánh sen (%) (%) CT1 (che sáng 0%) 24,5 22,0 Tỷ lệ sống CT2 (che sáng 25%) 56,4 44,5 (%) CT3 (che sáng 50%) 63,3 60,1 CT4 (che sáng 75%) 72,3 66,2 CT5 (che sáng 100%) 16,8 10,2 CT1 (che sáng 0%) 6,66a 6,00b CT2 (che sáng 25%) 6,66a 7,33a Chiều cao CT3(che sáng 50%) 7,33a 8,33a (cm) CT4 (che sáng 75%) 8,00a 8,00a CT5 (che sáng 100%) 8,33a 8,33a LSD0,05 1,69 1,15 sánh Với tiêu, cột, kí tự theo sau khác a, b, c…thể sai khác có ý nghĩa thống kê với α=0,05 Kết thu đƣợc từ bảng cho thấy: Tỷ lệ sống sót công thức ĐC (che sáng 0%) cho tỷ lệ sống thấp hai giống Đỏ chùm 24,5%, 34 Hồng cánh sen 22,0%, chƣa thích nghi với điều kiện chiếu sáng toàn phần, dễ nƣớc chết hai giống Cẩm chƣớng Đỏ chùm Hồng cánh sen Khi tiến hành che sáng thấy tỷ lệ chết công thức giảm đáng kể so với công thức ĐC Khi che sáng 75% thấy hai giống cho tỷ lệ sống sót cao cụ thể giống Đỏ chùm chiếm 72,3%, giống Hồng cánh sen 66,2% Về chiều cao cây: Ta thấy cƣờng độ che sáng ảnh hƣởng đến sinh trƣởng kéo dài đốt thân Các công thức che sáng 25 100% có chiều dài gần tƣơng đƣơng nhau, dao động từ 6,66 - 8,33 cm Ở công thức che sáng 100% có chiều dài cao nhƣng nhỏ, xanh nhạt, ít, đốt thân dài nhạt Vậy qua kết nghiên cứu từ công thức che sáng kết luận Cẩm chƣớng in vitro thích hợp với cƣờng độ che sáng 75% cho tỷ lệ sống chiều dài tốt a b Hình 3.7 Kết ảnh hƣởng độ che sáng đến Cẩm chƣớng in vitro sau 20 ngày ƣơm a, Đỏ chùm che sáng 75% b, Hồng cánh sen che sáng 75% 35 a b Hình 3.8 Cẩm chƣớng sau tháng đƣợc trồng lên đất phù sa, bón lót phân chuồng hoại mục a, Đỏ chùm b, Hồng cánh sen 36 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Dựa vào kết thu đƣợc từ thí nghiệm tơi rút số kết luận sau:  Sử dụng Javen 10% 15 phút để khử trùng đốt thân non Cẩm chƣớng để tạo vật liệu in vitro khởi đầu cho trình nhân giống Cẩm chƣớng tốt cụ thể giống Đỏ chùm đạt 81,53%, Hồng cánh sen 81,13%  Môi trƣờng MS + 30 g/l saccarozơ + g/l agar + BAP (0,1 0,2 mg/l BAP) giống Cẩm chƣớng Đỏ chùm mơi trƣờng có bổ sung 0,1 mg/l BAP giống Cẩm chƣớng Hồng cánh sen  Môi trƣờng + 30 g/l saccarozo + g/l agar + NAA bổ sung 0,1 0,3 mg/l NAA phù hợp cho tạo rễ giống Đỏ chùm 0,1 mg/l NAA Hồng cánh sen đạt 4,66 rễ/chồi, chiều dài rễ 4,33 cm  Công thức che sáng tốt cho hai giống Đỏ chùm Hồng cánh sen công thức che sáng 75%, có tỷ lệ sống cao đạt 72,3% giông Đỏ chùm, 66,2% giống Hồng cánh sen Kiến nghị Tiếp tục thử nghiệm sản xuất Cẩm chƣớng Đỏ chùm Hồng cánh sen quy trình 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tài liệu nƣớc Nguyễn Thị Lý Anh, Lê Hải Hà, Vũ Hồng Hiệp (2009), “Nhân giống vơ tính in vitro hoa Cẩm chướng (Dianthus Sinensic)”, tạp chí Khoa học Phát triển, 7( 2); 130-136 Nguyễn Tiến Bân (chủ biên ) (2005), “Danh mục loài thực vật Việt Nam”, tập III, NXB Nông nghiệp Hà Nội Võ Văn Chi (2002), “Từ điển thực vật thông dụng”, tập 1, NXB Khoa học kỹ thuật Lê Sỹ Dũng, Nguyễn Xuân Linh, Phùng Thanh Thủy (2001), “Hồn thiện quy trình nhân giống in vitro hoa Cẩm chướng”, Viện Di truyền Nông nghiệp, NXB Nông nghiệp Hà Nội Đặng Văn Đông, Đinh Thế Lộc (2005), “Công nghệ trồng hoa cho thu nhập cao”, Quyển 5, NXB Lao động - Xã hội, Hà Nội Nguyễn Thị Thu Hằng (2013), “Nghiên cứu nhân giống hoa Cẩm chướng kỹ thuật ni cấy in vitro” Tạp chí Khoa học Công nghệ Lâm nghiệp số Nguyễn Nhƣ Khanh, Cao Phi Bằng (2012), “Sinh lý học Thực vật”, NXB Giáo dục Việt Nam Nguyễn Xuân Linh (1998), “Kỹ thuật trồng hoa”, NXB Nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Thị Kim Lý, Nguyễn Xuân Linh (2005), “ Ứng dụng công nghệ sản xuất hoa”, NXB Lao động, Hà Nội 10 Nguyễn Thị Kim Lý , Lê Đức Thảo , Nguyễn Xuân Linh (2012), “Kỹ thuật trồng chăm sóc hoa Cẩm chướng”, NXB Nơng nghiệp 38 11 Nguyễn Thanh Phƣơng, Nguyễn Thị Lý Anh, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Hồng Thắm (2014), “Ảnh hưởng số loại đèn chiếu sáng bình ni cấy đến sinh trưởng, phát triển giống Cẩm chướng Hồng Hạc cấy mô”.J sci & Devel.2014, Vol.12.7: 1015-1022 12 Hoàng Thị Sản (2003), “Phân loại thực vật”, NXB Giáo dục 13 Phạm Xuân Tùng, Tƣởng Thị Lý, Cao Đình Dung, Chu Thị Phƣơng Loan, Đào Trung Đức cs (2011), “Kết chọn tạo khảo nghiệm Giống hoa Cẩm chướng D06.9”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt nam số năm 2011 trang 48-53 14 Đào Thanh Vân, Đặng Thị Tố Nga (2007), “Giáo trình hoa”, NXB Nơng nghiệp Hà Nội 15 Viện Di truyền Nông nghiệp (2005), Báo cáo kết Dự án Phát triển số giống hoa có chất lượng cao giai đoạn 2001 - 2005 B Tài liệu nƣớc 16 Dhanasekera.,D M U B (1998), “Cut flower production in Sri lanka, FAO, Bangkok, Thailand” 17 Basavaraj Dalawai & B Hemla Naik (2017), “Correlation studies in Carnation (Dianthus caryophyllus L.) as influenced by organic and inorganic nutrients”, Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry; 6(5): 2100-2102 18 Ghosh (1986), “Indian journal of experimental biology”, 703 - 704, ref 19 Lim Heng Jong & Mohd Ridzuan, M (1998), “Cut flower production in Malaysia, FAO, Bangkok, Thailand” 20 Mahdiyeh Kharrazi, Hossein Nemati, Ali Tehranifar, Abdolreza Bagheri and Ahmad Sharifi (2011), “In vitro culture of carnation (Dianthus 39 caryophyllus L.) focusing on the problem of vitrification”, J Biol Eviron Scl., (13): - 21 Kazemi, M.; GHolami, M Bahmanipour, F (2012), “Effect of Silicon and Acetylsalicylic Acid on Antioxidant Activity, Membrane Stability and ACC-oxidase Activity in Relation to Vase Life of Carnation Cut Flowers”, tập 11(2): 87 - 90 22 Pizaro, M (1987), “Carnation culture in Colombia: state of the art” Acta - Horticulturae, No.216, pp.29-34 23 Susumi Maekawa Naohiki Nakamura (1977), “Studies on the coloration of carnation Flowers”, J Japan Soc Hort Sci, 45(4): 375 382 24 Mohd Ridzuan, M.& Lim Heng Jong (1998), “Cut flower production in Malaysia, FAO, Bangkok, Thailand.”, 211 25 Harbaugh, D T.; Nepokroeff, M.; Rabeler, R K.; Mc Neill, J.; Zimmer, E A.; & Wagner, W L.; (2009) A new lineage-based tribal classification of the family Caryophyllaceae Int J Plant Sci 171(2):185–198 26 Murashige, T & Skoog, F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures Physiol Plant, 15: 473-497 27 Aabrandt, Z & Andersen, H (1989), “Artificial lighting for Dianthus cv, Fancy” Gartner Tidende, pp 941 - 934 C Tài liệu internet 28 http://baolamdong.vn/kinhte/201308/nang-cao-gia-tri-hoa-cam-chuong2267344/ 29 http://baolamdong.vn/kinhte/201701/khi-hoa-nhan-hieu-xuat-vuon2770762/ 40 30 https://hoatuoiquan7.com/tinh-hinh-san-xuat-va-tieu-thu-hoa-tuoi-vietnam/ 31 http://luanvan.net.vn/luan-van/tieu-luan-mot-so-giai-phap-phat-triensan-xuat-hoa-cua-nong-ho-tren-dia-ban-thanh-pho-da-lat-60380/ 32 https://pss.uvm.edu/ppp/articles/carn.html 33 https://tailieu.vn/doc/ky-thuat-trong-hoa-cam-chuong-1424331.html 34 https://thanhnien.vn/kinh-doanh/lien-ket-lam-giau-hoa-cat-canh-xuatngoai-603293.html 35 https://vnexpress.net/tin-tuc/thoi-su/nong-nghiep-sach/trong-hoa-camchuong-cong-nghe-cao-tai-da-lat-3530226.html 36 http://www.zbook.vn/ebook/nghien-cuu-ung-dung-ky-thuat-khi-canhtrong-nhan-giong-va-trong-hoa-cam-truong-45794/ 37 https://www.dulichvietnam.com.vn/cap-chung-nhan-doc-quyen-chothuong-hieu-hoa-da-lat.htm 41 ... tài: Hoàn thiện số giai đoạn quy trình nhân giống in vitro hai giống Cẩm chƣớng Đỏ chùm, Hồng cánh sen (Dianthus caryophyllus) Mục đích nghiên cứu Góp phần hồn thiện quy trình nhân giống in vitro. .. HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ****** LÝ THỊ HƢƠNG HOÀN THIỆN MỘT SỐ GIAI ĐOẠN TRONG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO HAI GIỐNG CẨM CHƢỚNG ĐỎ CHÙM, HỒNG CÁNH SEN (Dianthus caryophyllus... Thị Hƣơng LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu đề tài: Hoàn thiện số giai đoạn quy trình nhân giống in vitro hai giống hoa Cẩm chƣớng Đỏ chùm, Hồng cánh sen (Dianthus caryophylluss L)