KHẢO SÁT TỶ LỆ BẢO HỘ SAU TIÊM PHÒNG VACCIN LỞ MỒM LONG MÓNG TYPE O TRÊN HEO VÀ BÒ Ở MỘT SỐ QUẬN HUYỆN TẠI TP. HỒ CHÍ MINH Tháng 8

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HỒ CHÍ MINH KHOA CHĂN NI THÚ Y KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT TỶ LỆ BẢO HỘ SAU TIÊM PHỊNG VACCIN LỞ MỒM LONG MĨNG TYPE O TRÊN HEO VÀ BÒ Ở MỘT SỐ QUẬN HUYỆN TẠI TP HỒ CHÍ MINH Họ tên sinh viên: HÀN YẾN PHƯƠNG Ngành : Thú Y Lớp : DH04TY Niên khóa : 2004 – 2009 Tháng 8/2009 KHẢO SÁT TỶ LỆ BẢO HỘ SAU TIÊM PHỊNG VACCIN LỞ MỒM LONG MĨNG TYPE O TRÊN HEO VÀ BÒ Ở MỘT SỐ QUẬN HUYỆN TẠI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Tác giả HÀN YẾN PHƯƠNG Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp Bác Sỹ Ngành Thú Y Giáo viên hướng dẫn: TS LÊ ANH PHỤNG BSTY HUỲNH THỊ THU HƯƠNG Tháng 8/2009 i LỜI CẢM ƠN  Xin chân thành cảm ơn Tiến sĩ Lê Anh Phụng Đã tận tình hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình thực tập hồn thành luận văn  Chân thành cảm ơn Bác sĩ thú y Huỳnh Thị Thu Hương Bác sĩ thú y Đặng Thị Thu Hường Đã tận tình bảo giúp đỡ tơi suốt thời gian thực đề tài  Xin cảm ơn cô anh chị công tác trạm chẩn đoán xét nghiệm điều trị thuộc Chi Cục Thú Y Thành Phố Hồ Chí Minh hết lòng giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành tốt q trình thực tập  Thành kính ghi ơn cha mẹ nuôi nấng dạy dỗ  Cảm ơn bạn bè anh em bên động viên, chia sẻ với suốt thời gian học tập ii MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN .ii DANH MỤC CÁC HÌNH vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ viii DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ ix DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT x TÓM TẮT KHÓA LUẬN xi Chương 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Yêu cầu Chương 2: TỔNG QUAN 2.1 Đặc điểm chung lịch sử bệnh lở mồm long móng (LMLM) 2.1.1 Đặc điểm chung 2.1.2 Lịch sử nghiên cứu bệnh LMLM 2.2 Căn bệnh 2.2.1 Phân loại 2.2.2 Hình thái, cấu trúc, sức đề kháng 2.3 Tính sinh miễn dịch 2.4 Đặc điểm dịch tể học 2.4.1 Phân bố bệnh 2.4.1.1 Tình hình bệnh LMLM giới 2.4.1.2 Tình hình bệnh LMLM Châu Á 2.4.1.3 Tình hình bệnh LMLM Việt Nam 2.4.2 Tình hình bệnh LMLM TP.HCM 2.4.3 Động vật cảm thụ bệnh .10 2.4.4 Chất có mầm bệnh .10 iii 2.4.5 Đường xâm nhập lây lan 11 2.4.6 Cách sinh bệnh 11 2.5 Triệu chứng 12 2.6 Bệnh tích 14 2.6.1 Bệnh tích đại thể 14 2.6.2 Bệnh tích vi thể 14 2.7 Chẩn đoán .15 2.7.1 Chẩn đoán lâm sàng 15 2.7.2 Chẩn đốn phòng thí nghiệm 15 2.7.2.1 Cách lấy bệnh phẩm 15 2.7.2.2 Các phương pháp chẩn đoán 15 2.8 Phòng bệnh LMLM 16 2.8.1 Vệ sinh phòng bệnh 16 2.8.2 Phòng bệnh vaccin .16 2.8.3 Các biện pháp tổng hợp .16 2.9 Các cơng trình nghiên cứu bệnh LMLM Việt Nam .17 Chương 3: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 3.1 Thời gian địa điểm 19 3.2 Vật liệu 19 3.2.1 Mẫu xét nghiệm 19 3.2.2 Thiết bị dụng cụ thí nghiệm 19 3.2.3 Bộ kit dùng thí nghiệm 19 3.3 Nội dung nghiên cứu 19 3.4 Phương pháp nghiên cứu 19 3.4.1 Bố trí lấy mẫu 19 3.4.2 Phương pháp lấy mẫu .20 3.4.3 Phương pháp xét nghiệm 21 3.5 Các tiêu theo dõi .25 3.6.Xử lý thống kê 26 iv Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Tỷ lệ mẫu huyết đạt bảo hộ chống virus LMLM type O heo thịt tiêm phòng 27 4.1.1 Tỷ lệ mẫu huyết đạt bảo hộ chống virus LMLM heo thịt sau tiêm phòng quận huyện thuộc Tp HCM 27 4.1.2 Tỷ lệ mẫu huyết đạt bảo hộ chống virus LMLM heo thịt sau tiêm phòng theo khu vực .29 4.1.3 Tỷ lệ mẫu huyết có hiệu giá kháng thể đạt bảo hộ virus LMLM serotype O heo thịt sau tiêm phòng theo qui mơ chăn ni .30 4.1.4 Tỷ lệ mẫu huyết đủ bảo hộ chống virus LMLM heo thịt sau tiêm phòng theo lứa tuổi .32 4.2 Tỷ lệ mẫu huyết đạt bảo hộ chống virus LMLM type O bò sữa tiêm phòng 34 4.2.1 Tỷ lệ mẫu huyết đủ bảo hộ chống bệnh LMLM bò sữa sau tiêm phòng theo quận huyện .34 4.2.2 Tỷ lệ mẫu huyết đủ bảo hộ chống bệnh LMLM bò sữa sau tiêm phòng theo khu vực 35 4.2.3 Tỷ lệ mẫu huyết đủ bảo hộ chống bệnh LMLM bò sữa sau tiêm phòng theo hệ lai 36 4.2.4 Tỷ lệ mẫu huyết đủ bảo hộ chống bệnh LMLM bò sữa sau tiêm phòng theo qui mơ chăn nuôi .38 Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận 40 5.2 Đề nghị 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT 42 TÀI LIỆU TIẾNG ANH 42 v DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1: Hình thái virus LMLM Hình 2.2: Cấu trúc kháng nguyên bề mặt Hình 2.3: Phát 200 heo bệnh sở giết mổ Quận 12 .10 Hình 2.4: Lưỡi bị loét 13 Hình 2.5: Vú bị loét 13 Hình 2.6: Viêm loét nướu 13 Hình 2.7: Biến chứng chân .13 Hình 2.8: Vú bị cương mạch, căng đỏ 13 Hình 2.9: Mụn nước lưỡi, viền móng .14 Hình 2.10: Biến chứng tim 14 Hình 3.1: Xét nghiệm ELISA vỉ 96 giếng 22 Hình 3.2 Hình minh họa chế phản ứng ELISA 24 vi DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Mối liên hệ nhiệt độ với tồn virus mô bào Bảng 2.2: Mối liên hệ vật liệu bám thời gian tồn virus Bảng 3.1: Bố trí lấy mẫu huyết heo, bò 20 Bảng 3.2: Phân bố vị trí mẫu huyết đối chứng vỉ 96 giếng 25 Bảng 4.1: Tỷ lệ bảo hộ heo thịt quận huyện 27 Bảng 4.2 : Tỷ lệ bảo hộ heo thịt khu vực 29 Bảng 4.3 Tỷ lệ bảo hộ theo qui mô hộ chăn nuôi heo thịt 31 Bảng 4.4 Tỷ lệ bảo hộ heo thịt theo tháng tuổi 32 Bảng 4.5: Tỷ lệ bảo hộ bò sữa theo quận huyện .34 Bảng 4.6: Tỷ lệ bảo hộ bò sữa theo khu vực 35 Bảng 4.7: Tỷ lệ bảo hộ bò sữa theo hệ lai 37 Bảng 4.8: Tỷ lệ bảo hộ bò sữa qui mơ chăn ni 38 vii DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Trang Biểu đồ 4.1: Tỷ lệ bảo hộ heo thịt quận huyện 29 Biểu đồ 4.2: Tỷ lệ bảo hộ heo thịt theo khu vực 30 Biểu đồ 4.3: Tỷ lệ bảo hộ heo thịt theo qui mô chăn nuôi 32 Biểu đồ 4.4: Tỷ lệ bảo hộ heo thịt theo tháng tuổi .33 Biểu đồ 4.5: Tỷ lệ bảo hộ bò sữa quận huyện .35 Biểu đồ 4.6: Tỷ lệ bảo hộ bò sữa theo khu vực 36 Biểu đồ 4.7: Tỷ lệ bảo hộ bò sữa theo hệ lai 38 Biểu đồ 4.8: Tỷ lệ bảo hộ bò sữa theo qui mơ chăn ni .39 viii DANH MỤC SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1: Cơ chế sinh bệnh 12 Sơ đồ 3.1: Qui trình phát kháng thể kháng virus LMLM serotype O 23 ix 5.2 Đề nghị Qua trình phân tích thu thập ý kiến, chúng tơi có đề nghị đến Chi Cục Thú Y TP.HCM sau • Tăng cường cơng tác tiêm phòng khu vực ngoại thành đàn heo, khu vực nội thành đàn bò để nâng cao chất lượng tiêm phòng • Tăng cường cơng tác tiêm phòng giám sát việc tiêm phòng hộ chăn ni có qui mơ lớn • Có sách khen thưởng, khuyến khích hộ chăn ni tốt, cán thú y thực tốt cơng tác tiêm phòng địa bàn 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Chi Cục Thú Y Thành phố Hồ Chí Minh, 1998 – 2009 Báo cáo dịch bệnh LMLM Lê Minh Chí, 1994 Bệnh lở mồm long móng Ban chương trình khống chế bệnh LMLM, Cục thú y Đào Trọng Đạt, 2000 Để góp phần vào việc đấu tranh phòng chống bệnh lở mồm long móng Tạp chí Khoa học kỹ thuật Hội thú y Việt Nam, tập VII Donaldson A.I, 2000 Bệnh lý học dịch tể học bệnh LMLM (Tô Long Thành dịch, 2000) Tạp chí Khoa học kỹ thuật Hội thú y Việt Nam, tập VII Nguyễn Tiến Dũng, 2000 Bệnh lở mồm long móng Tạp chí khoa học kỹ thuật Hội thú y Việt Nam, tập VII Vũ Thị Diệu Hương, 2006 Khảo sát tỷ lệ mẫu huyết có hiệu giá kháng thể đạt bảo hộ virus LMLM type O heo quận huyện thuộc TP.HCM Nguyễn Văn Lộc, 2005 Khảo sát tình hình bệnh LMLM khả bảo hộ sau tiêm phòng đàn heo sinh sản vùng an toàn dịch sở an toàn dịch Tp.HCM Luận văn tốt nghiệp bác sĩ thú y Khoa chăn nuôi - thú y Trường Đại học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh Nguyễn Lương, 1997 Dịch tể học thú y tập II phần chuyên biệt Tủ sách trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh Trần Thanh Phong, 1996 Bệnh truyền nhiễm virus heo Tủ sách trường Đại học Nơng Lâm Thành phố Hồ Chí Minh 10 Lê Anh Phụng, 2002 Bệnh truyền nhiễm trâu bò Tủ sách trường Đại học Nông Lâm Thành phố Hồ Chí Minh 11 Thái Thị Thủy Phượng, 2000 Bước đầu khảo sát số đặc điểm dịch tể học biện pháp khống chế bệnh LMLM heo tỉnh Tiền Giang, Cần Thơ, Đồng Tháp, Vĩnh Long Luận án thạc sĩ Khoa học nông nghiệp Đại học Nông lâm Tp Hồ Chí Minh 42 12 Thái Thị Thủy Phượng, 2005 Vaccin lở mồm long móng Chuyên đề tiến sĩ Đại học Nơng lâm Tp Hồ Chí Minh 13 Ngô Nhựt Tân, 2008 Khảo sát tỷ lệ bảo hộ sau tiêm phòng vaccin lở mồm long móng type O đàn bò sữa thuộc số quận huyện TP.HCM 14 Tô Long Thành, 2000 Cơ sở phân loại virus LMLM Tạp chí Khoa học kỹ thuật Hội thú y Việt Nam, tập VII 15 Tô Long Thành, 2000 Những tiến sản xuất vaccin chống bệnh LMLM Tạp chí Khoa học kỹ thuật Hội thú y Việt Nam, tập VII 16 Huỳnh Thị Thanh Thủy, 2003 Vài đặc điểm dịch tể bệnh LMLM trâu bò, heo Tp Hồ Chí Minh Luận án thạc sĩ Khoa học nông nghiệp Đại học Nông lâm Tp Hồ Chí Minh 17 Nguyễn Thị Ánh Tuyết, 2005 Tình hình bệnh LMLM trâu bò, heo giết mổ ni Tp Hồ Chí Minh đánh giá khả bảo hộ qui trình tiêm phòng Chi Cục Thú Y áp dụng Luận án thạc sĩ Khoa học nơng nghiệp Đại học Nơng lâm Tp Hồ Chí Minh 18 Lê Xuân Vinh, 2007 Khảo sát tỷ lệ huyết có kháng thể đủ bảo hộ virus lở mồm long móng type O đàn heo sau tiêm phòng số quận huyện thuộc TP.HCM 19 http://www.cucthuy.gov.vn: hình ảnh tư liệu tham khảo CCTY TP.HCM TÀI LIỆU TIẾNG ANH Donaldson A.I., 1998 Food and mouth disease in swine Selezione Veteriaria, pp 189 - 195 Ferris, N.P., 2005 Elisa kit for serology of FMD (type), Institute for animal health, Pirbright, UK Gleeson L.J, 2000 A review of status of food and mouth disease in South East Asia and approach to control and eradication Rev.sci.tech Off Int Epiz; 21(3): Pp 465 - 475 Grubman J.M., Baxt B., 2004 Food and mouth disease Clinical Microbiology Reviews Pp 465 - 495 43 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Các bước tiến hành xét nghiệm với kit ELISA – FMDV type O Thành phần kit - Kháng nguyên virus LMLM type O - Huyết đối chứng: C2+ (đối chứng dương mạnh), C+ (đối chứng dương yếu), C- (đối chứng âm ) - Kháng thể virus LMLM chế từ thỏ ( kháng thể bắt giữ) - Kháng thể virus LMLM chế từ chuột lang (kháng thể phát hiện) - Kháng kháng thể chuột lang có gắn enzyme (conjugate) - Dung dịch tạo màu phản ứng: H2O2 + OPD - Dung dịch dừng phản ứng : H2SO4 1,25M Tiến hành xét nghiệm Giai đoạn 1: Phủ đĩa phản ứng ủ huyết Phủ kháng thể bắt giữ virus LMLM vào đĩa phản ứng - Pha loãng kháng thể tỷ lệ 1/1000 (6 μl kháng thể + 6ml dung dịch Coating Buffer) - Phân phối 50 μl kháng thể pha loãng vào tất giếng đĩa phản ứng - Dán film mỏng ủ đĩa qua đêm nhiệt độ – 80C Ủ huyết kiểm tra huyết đối chứng - Huyết kiểm tra pha loãng nồng độ 1/25 dung dịch Buffer A - Phân phối 50 μl huyết pha lỗng vào vị trí xác định đĩa ủ mẫu (mỗi mẫu huyết bố trí vào giếng) - Mỗi mẫu huyết đối chứng ( C2+, C+, C-) kháng nguyên đối chứng pha loãng nồng độ 1/16 với dung dịch buffer A, phân phối 50 μl huyết đối chứng pha lỗng vào vị trí xác định đĩa ủ mẫu (mỗi mẫu phân phối vào giếng) 44 - Pha loãng kháng nguyên virus LMLM type O với tỷ lệ 1/100 dung dịch buffer A, phân phối 50 μl kháng nguyên pha loãng vào tất giếng đĩa ủ mẫu Ủ đĩa qua đem nhiệt độ – 80C Giai đoạn 2: Chuyển huyết từ đĩa ủ mẫu sang đĩa phản ứng - Lấy đĩa để nhiệt độ phòng - Rửa đĩa phản ứng lần với dung dịch rửa - Chuyển 50 μl hỗn hợp huyết – kháng nguyên từ đĩa ủ sang đĩa phản ứng theo vị trí thích hợp - Ủ lắc liên tục 370C 60 phút Giai đoạn 3: Cho kháng thể phát vào đĩa phản ứng - Kết thúc thời gian ủ tiến hành rửa - Pha loãng kháng thể chế từ chuột lang với nồng độ 1/100 dung dịch buffer B - Phân phối 50 μl kháng thể pha loãng vào tất giếng - Tiếp tục ủ lắc sau tiến hành rửa đĩa giống Giai đoạn 4: Cho Conjugate vào đĩa phản ứng - Pha loãng Conjugate dung dịch buffer B nồng độ 1/200 - Phân phối 50 μl Conjugate pha loãng vào tất giếng đĩa phản ứng - Tiến hành ủ rửa giống Giai đoạn 5: Tạo màu phản ứng Phân phối 50 μl dung dịch OPD vào tất giếng, ủ đĩa nhiệt độ phòng 15 phút Giai đoạn 6: Cho dung dịch dừng phản ứng Phân phối 50 μl dung dịch dừng phản ứng vào tất giếng Giai đoạn 7: Đọc xử lý kết - Đo OD bước sóng 492nm - Tính tốn kết quả: OD trung bình mẫu xét nghiệm * 100 PI% (% ức chế) = 100 - _ Trung vị OD đối chứng kháng nguyên 45 Mẫu huyết xem đủ bảo hộ có giá trị PI% > 50% hiệu giá kháng thể >= 112 Phụ lục 2:Giới thiệu vê vaccin Aftopor Vaccin Aftopor vaccin vơ hoạt có nhủ dầu làm chất bổ trợ, chống bệnh LMLM heo thú nhai lại (trâu, bò, dê, cừu) công ty Merial, Pháp sản xuất Qui trình tiêm phòng cho heo theo đề nghị nhà sản xuất Bảng 2.1: Quy trình tiêm phòng vaccin Aftopor Vùng nguy LMLM thấp Lần tiêm Vùng nguy LMLM cao Thú mẹ không Thú mẹ chủng Thú mẹ không Thú mẹ chủng chủng ngừa ngừa chủng ngừa ngừa Toàn đàn từ Toàn đàn từ Toàn đàn từ Toàn đàn từ 14 ngày tuổi 2,5 tháng tuổi 14 ngày tuổi tháng tuổi Lần – tuần sau – tuần sau – tuần sau – tuần sau Tái chủng Mỗi tháng Mỗi tháng Mỗi tháng Mỗi tháng Lần Phụ lục 3: Phần thống kê Trên heo Tỷ lệ bảo hộ heo thịt quận huyện Expected counts are printed below observed counts duong tinh am tinh Total 32 40 32.30 7.70 18 16.15 20 3.85 34 32.30 40 7.70 27 13 40 46 32.30 7.70 30 32.30 10 7.70 17 16.15 20 3.85 64 16 64.60 15.40 89 11 100 80.76 19.24 18 16.15 3.85 20 10 18 16.15 3.85 20 11 37 32.30 7.70 40 12 24 32.30 16 7.70 40 13 41 15 45.22 10.78 56 Total 449 107 40 80 556 Chi-Sq = 0.003 + 0.012 + 0.212 + 0.888 + 0.089 + 0.374 + 0.870 + 3.652 + 0.164 + 0.688 + 0.045 + 0.187 + 0.006 + 0.024 + 0.842 + 3.532 + 0.212 + 0.888 + 0.212 + 0.888 + 0.683 + 2.867 + 2.134 + 8.954 + 0.394 + 1.655 = 30.475 47 DF = 12, P-Value = 0.002 cells with expected counts less than 5.0 Tỷ lệ bảo hộ heo thịt theo khu vực duong tinh am tinh Total 275 81 356 287,49 68,51 174 26 200 161,51 38,49 Total 449 107 556 Chi-Sq = 0,543 + 2,277 + 0,966 + 4,053 = 7,838 DF = 1, P-Value = 0,005 Tỷ lệ bảo hộ heo thịt theo qui mô chăn nuôi duong tinh am tinh Total 78 84 67,83 16,17 183 31 214 172,82 41,18 188 70 258 208,35 49,65 Total 449 107 556 Chi-Sq = 1,523 + 6,392 + 0,600 + 2,518 + 1,987 + 8,340 = 21,361 DF = 2, P-Value = 0,000 So sánh qui mô chăn nuôi < 20 20 – 50 duong tinh am tinh Total 78 84 73,57 10,43 183 31 214 187,43 26,57 48 Total 261 37 298 Chi-Sq = 0,267 + 1,881 + 0,105 + 0,738 = 2,991 DF = 1, P-Value = 0,084 So sánh qui mô chăn nuôi 20 – 50 > 50 duong tinh am tinh Total 183 31 214 168,21 45,79 188 70 258 202,79 55,21 Total 371 101 472 Chi-Sq = 1,301 + 4,778 + 1,079 + 3,963 = 11,122 DF = 1, P-Value = 0,001 So sánh qui mô chăn nuôi < 20 > 50 duong tinh am tinh Total 78 84 65,33 18,67 188 70 258 200,67 57,33 Total 266 76 342 Chi-Sq = 2,456 + 8,595 + 0,800 + 2,798 = 14,649 DF = 1, P-Value = 0,000 Tỷ lệ bảo hộ theo độ tuổi duong tinh am tinh Total 129 14 143 115,48 27,52 198 61 259 209,16 49,84 122 32 154 124,36 29,64 49 Total 449 107 556 Chi-Sq = 1,583 + 6,642 + 0,595 + 2,497 + 0,045 + 0,188 = 11,550 DF = 2, P-Value = 0,003 So sánh nhóm tuổi < tháng tuổi – tháng duong tinh am tinh Total 129 14 143 116,32 26,68 198 61 259 210,68 48,32 Total 327 75 402 Chi-Sq = 1,382 + 6,026 + 0,763 + 3,327 = 11,498 DF = 1, P-Value = 0,001 So sánh nhóm tuổi < tháng tuổi > tháng tuổi duong tinh am tinh Total 129 14 143 120,85 22,15 122 32 154 130,15 23,85 Total 251 46 297 Chi-Sq = 0,549 + 2,998 + 0,510 + 2,784 = 6,841 DF = 1, P-Value = 0,009 So sánh nhóm tuổi – tháng tuổi nhóm > tháng duong tinh am tinh Total 198 61 259 200,68 58,32 122 32 154 119,32 34,68 50 Total 320 93 413 Chi-Sq = 0,036 + 0,123 + 0,060 + 0,207 = 0,426 DF = 1, P-Value = 0,514 Trên bò So sánh khu vực nội thành ngoại thành duong ti am tinh Total 141 150 136,93 13,07 58 62,07 Total 199 10 5,93 19 68 218 Chi-Sq = 0,121 + 1,269 + 0,267 + 2,800 = 4,457 DF = 1, P-Value = 0,035 Tỷ lệ bảo hộ hệ lai Expected counts are printed below observed counts duong ti am tinh Total 27 28 25.56 2.44 107 10 117 106.80 10.20 65 66.64 Total 199 73 6.36 19 218 Chi-Sq = 0.081 + 0.850 + 0.000 + 0.004 + 0.040 + 0.422 = 1.397 DF = 2, P-Value = 0.497 cells with expected counts less than 5.0 So sánh qui mô chăn nuôi 51 duong ti am tinh Total 78 79 72,11 6,89 86 92,20 15 101 8,80 35 34,69 38 3,31 Total 199 19 218 Chi-Sq = 0,480 + 5,031 + 0,417 + 4,363 + 0,003 + 0,029 = 10,323 DF = 2, P-Value = 0,006 cells with expected counts less than 5,0 So sánh qui mô chăn nuôi < 10 10 – 20 duong ti am tinh Total 78 79 71,98 7,02 Total 86 92,02 164 15 101 8,98 16 180 Chi-Sq = 0,504 + 5,165 + 0,394 + 4,040 = 10,102 DF = 1, P-Value = 0,001 So sánh qui mô chăn nuôi < 10 > 20 duong ti am tinh Total 78 79 76,30 2,70 Total 35 36,70 113 38 1,30 117 Chi-Sq = 0,038 + 1,071 + 0,079 + 2,227 = 3,415 52 DF = 1, P-Value = 0,065 cells with expected counts less than 5,0 So sánh qui mô chăn nuôi 10 – 20 > 20 duong ti am tinh Total 86 15 101 87,92 13,08 Total 35 33,08 38 4,92 121 18 139 Chi-Sq = 0,042 + 0,282 + 0,112 + 0,750 = 1,185 DF = 1, P-Value = 0,276 cells with expected counts less than 5,0 Phụ lục 4: Tiêm vắc xin phòng bệnh (Bộ NN&PTNT ban hành) Vùng tiêm phòng Vùng tiêm vắc xin phòng bệnh bao gồm: vùng khống chế, vùng đệm, vùng có dịch xảy thời gian năm gần đây, vùng có nguy cao Đối tượng tiêm phòng Đối tượng tiêm phòng bao gồm: a) Trâu, bò, dê, cừu, hươu, nai, lợn nái, lợn đực giống địa bàn vùng tiêm phòng; b) Tất động vật cảm nhiễm đưa khỏi tỉnh phải tiêm phòng kể động vật nằm ngồi vùng tiêm phòng qui định (phải sau tiêm 14 ngày tiêm phòng miễn dịch) Thời gian tiêm phòng a) Tiêm phòng hai lần năm, lần thứ cách lần thứ hai sáu tháng; lần thứ tiêm vào tháng 3-4, lần thứ hai tiêm vào tháng 9-10 b) Liều lượng, đường tiêm, quy trình sử dụng vaccin theo hướng dẫn Cục Thú y nhà sản xuất Kinh phí tiêm phòng Kinh phí tiêm phòng vaccin phòng bệnh theo quy định Chính phủ Phụ lục 5: 53 PHIẾU XN KHÁNG THỂ KHÁNG VIRUS FMD BẰNG PP ELISA Ngày phủ đĩa: Ngày đọc kết quả: Nơi gởi mẫu: MSNM: Số mẫu XN Người thực hiện: Type: Đĩa XN: 10 11 12 A B C D 54 E F G H Đĩa XN: 10 11 A B C D E F G H Tên kit: Lô Date: Hộp số: Phương pháp rửa: rửa tay rửa máy Phương pháp ủ: Pha loãng Rabbit (tỷ lệ 1/1000)… μl kháng thể Rabbit + ….ml Coating Buffer Pha loãng mẫu bước (1/5): μl Diluent + μl huyết Pha loãng mẫu bước (1/50): μl Diluent + μl mẫu bước Pha loãng đối chứng C2+: μl đối chứng C2+ + … μl Buffer A Pha loãng đối chứng C+: μl đối chứng C+ + … μl Buffer A Pha loãng đối chứng C- μl đối chứng C- + … μl Buffer A Pha loãng kháng nguyên (tỷ lệ 1/100): μl kháng nguyên + μl Buffer A Pha loãng Guinea Pig ( tỷ lệ 1/100): ml Buffer B + μl Guinea Pig Pha loãng Conjugate (tỷ lệ 1/200): ml Buffer B + μl Conjugate Pha loãng OPD (tỷ lệ 1/200): …… ml OPD + μl H2O2 Thời gian ủ Subtrate: 55 12 ... vaccin khoảng tháng Thú tái nhiễm nhanh chóng ổ dịch sau – 10 ngày nặng sức đề kháng kém, điều quan trọng virus nhân lên cao độ ổ dịch biến đổi thành virus (Phan Đình Đỗ Trịnh Văn Thịnh, 1957;... xuất phenol cồn có tác dụng Formol, thuốc tím acid lactic chất sát trùng tốt Virus bị phá hủy nhanh chóng dung dịch kiềm (dung dịch NaOH – % diệt virus vòng – phút) (Nguyễn Thị Anh Tuyết, 2005)... (heo có thời gian miễn dịch ngắn bò, bê miễn dịch ngắn bò) (Kihn, 1993; Kitching, 2000; Huỳnh Thị Thanh Thủy, 2003) Miễn dịch hình thành sau mắc bệnh heo kéo dài tháng độ mẫn cảm với bệnh tăng theo