KYÕ THUAÄT LEÂN MEN ACETIC 1. Muïc ñích Tìm hieåu veà kyõ thuaät leân men acetic Naém vöõng caáu taïo vaø nguyeân lyù hoaït ñoäng cuûa thieát bò leân men beà saâu 2. Nguyeân lieäu, hoùa chaát vaø duïng cuï Nguyeân lieäu Ethanol Glucose Muoái (NH4)2SO4, K2HPO4 Dòch nha 100Pt Acid acetic Gioáng vi sinh vaät Hoùa chaát Dung dòch NaOH 0,1N Phenolphtalein 1% Duïng cuï chuaån bò moâi tröôøng vaø leân men Becher 5002000mL Erlen 500mL vaø nuùt boâng OÁng ñong 10002502510mL Ñuõa khuaáy Caân kyõ thuaät Thieát bò nuoâi caáy Biostate Thieát bò leân men Sartorius Duïng cuï phaân tích Erlen 100mL Pipette 10mL Buret chuaån ñoä 25mL Bình xòt nöôùc caát Maùy quang phoå ño ñoä ñuïc vaø cuvette 3. Caùch thöïc hieän 3.1. Chuaån bò moâi tröôøng leân men Moâi tröôøng (I) coù thaønh phaàn nhö sau (tính cho 1L moâi tröôøng): Ethanol: 3% vv Acid acetic: 6% Glucose: 0,15g (NH4)2SO4: 0,075g K2HPO4: 0,075g Dòch nha 10oPt: 1% vv Caùc hoïc vieân tham gia thí nghieäm ñöôïc chia thaønh 7 nhoùm: Ñoái vôùi 5 nhoùm ñaàu, moãi nhoùm söû duïng 1 erlen 500mL chöùa 200mL moâi tröôøng. Caû naêm nhoùm chuaån bò moâi tröôøng leân men coù thaønh phaàn töông töï nhö moâi tröôøng (I) nhöng ñöôïc hieäu chænh nhö sau: • Nhoùm 1: khoâng boå sung glucose • Nhoùm 2: khoâng boå sung (NH4)2SO4 • Nhoùm 3: khoâng boå sung K2HPO4 • Nhoùm 4: khoâng boå sung dòch nha • Nhoùm 5: khoâng boå sung glucose, (NH4)2SO4, K2HPO4 vaø dòch nha • Nhoùm 6: thaønh phaàn moâi tröôøng gioáng nhö moâi tröôøng (I). Nhoùm 7 seõ chuaån bò moâi tröôøng trong thieát bò leân men Biostate 5L, chöùa 3L moâi tröôøng coù thaønh phaàn gioáng nhö moâi tröôøng (I). 3.2. Leân men Caáy gioáng: Nhaân vieân phoøng thí nghieäm seõ chuaån bò gioáng saün treân moâi tröôøng loûng. Tæ leä gioáng caáy laø 5% vv. Sau khi caáy gioáng, caùc nhoùm tieán haønh laáy maãu ñeå xaùc ñònh ñoä ñuïc vaø ñoä chua. Ñieàu kieän leân men: Nhieät ñoä: 28oC, thôøi gian 28 giôø Caùc nhoùm söû duïng erlen: nuoâi caáy treân thieát bò Biostate, toác ñoä laéc laø 200 voøng phuùt. Nhoùm söû duïng thieát bò leân men Sartorius: choïn toác ñoä caùnh khuaáy laø 200 voøng phuùt, löu löôïng khí voâ truøng suïc vaøo bình laø 0,4 NI phuùt Khi quaù trình leân men keát thuùc, tieán haønh laáy maãu ñeå xaùc ñònh ñoä ñuïc vaø ñoä chua cuûa canh tröôøng.