QC ungthu khoaitay 181 tài liệu, giáo án, bài giảng , luận văn, luận án, đồ án, bài tập lớn về tất cả các lĩnh vực kinh...
CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ QUY TRÌNH GIÁM ĐỊNH BỆNH UNG THƯ KHOAI TÂY Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival LÀ DỊCH HẠI KIỂM DỊCH THỰC VẬT CỦA VIỆT NAM National technical regulation on Procedure for identification of Potato wart disease (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival)- Plant quarantine pest of Vietnam HÀ NỘI - 2014 QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Lời nói đầu QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Trung tâm Giám định Kiểm dịch thực vật biên soạn, Cục Bảo vệ thực vật trình duyệt, Bộ Nông nghiệp & PTNT ban hành Thông tư số 16/TT-BNNPTNT ngày 05 tháng năm 2014 QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ QUY TRÌNH GIÁM ĐỊNH BỆNH UNG THƯ KHOAI TÂY (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival ) LÀ DỊCH HẠI KIỂM DỊCH THỰC VẬT CỦA VIỆT NAM National technical regulation on Procedure for identification of Potato wart disease (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival) Plant quarantine pest of Vietnam I QUY ĐỊNH CHUNG 1.1 Phạm vi điều chỉnh Quy chuẩn quy định quy trình giám định bệnh ung thư khoai tây (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival) dịch hại kiểm dịch thực vật nhóm I Việt Nam 1.2 Đối tượng áp dụng Quy chuẩn áp dụng tổ chức, cá nhân Việt Nam nước ngồi có hoạt động liên quan đến lĩnh vực bảo vệ kiểm dịch thực vật thực giám định bệnh ung thư khoai tây (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival- dịch hại kiểm dịch thực vật (KDTV) nhóm I thuộc Danh mục dịch hại KDTV Việt Nam ban hành kèm theo Quyết định số 73/2005/QĐ-BNN ngày 14/11/2005 Bộ trưởng Bộ Nơng nghiệp PTNT 1.3 Giải thích từ ngữ Trong quy chuẩn này, từ ngữ hiểu sau: 1.3.1 Dịch hại kiểm dịch thực vật (plant quarantine pest) Là lồi dịch hại có nguy gây hại nghiêm trọng tài nguyên thực vật vùng mà lồi sinh vật chưa xuất xuất có phân bố hẹp phải kiểm sốt thức 1.3.2 Thực vật (plant) Là phận sống, kể hạt giống sinh chất có khả làm giống 1.3.3 Mẫu (sample) Là khối lượng thực vật, sản phẩm thực vật tàn dư sản phẩm thực vật lấy theo qui tắc định 1.3.8 Tiêu (specimen) Là mẫu vật điển hình tiêu biểu dịch hại xử lý để dùng cho việc định loại, nghiên cứu, giảng dạy, phổ biến kỹ thuật trưng bày thành sưu tập II QUY ĐỊNH KỸ THUẬT 2.1 Phương pháp thu thập bảo quản mẫu 2.1.1 Thu thập mẫu QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Đối với hàng xuất, nhập khẩu, cảnh vận chuyển, bảo quản nước: Tiến hành lấy mẫu theo tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 4731:891 “Kiểm dịch thực vật - phương pháp lấy mẫu”, quy chuẩn kỹ thuật quốc gia QCVN 01-21:2010/BNNPTNT1 “Phương pháp kiểm tra củ, xuất nhập cảnh” Đối với trồng đồng ruộng: Lấy mẫu theo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia QCVN 01-38/2010/BNNPTNT1 “Phương pháp điều tra phát dịch hại trồng” Riêng mẫu đất, phải lấy độ sâu tối thiểu 50cm 2.1.2 Bảo quản mẫu Các phận tươi nghi có triệu chứng bệnh (lá, thân, rễ, củ ) để túi ni-lơng có lỗ thơng khí có đính nhãn bảo quản tủ lạnh nhiệt độ – 5°C Mẫu đất cho vào túi ni-lơng, có lỗ thơng khí, có đính nhãn để nơi thống mát nhiệt độ phòng Các tiêu lam nấm dán nhãn, để hộp chuyên dụng đựng tiêu lam bảo quản nhiệt độ phòng 2.1.3 Thiết bị dụng cụ, hố chất Kính lúp soi có độ phóng đại 10 – 40 lần (10-40x), kính hiển vi có độ phóng đại 40 – 1000 lần Máy ly tâm, máy lắc, tủ sấy, tủ định ôn, cân điện Bộ dao, kim giải phẫu, panh, kéo, dao lam, rây lọc đất Đèn cồn, đĩa petri, ống hút, lam, lamen, bình tam giác, cốc đong, giấy lọc Axit lactic 98%, chloroform, CaCl2, lactoglycerol 2.3 Phương pháp phát giám định bệnh 2.3.1 Phát thu thập mẫu bệnh Trên phần gốc thân: U có màu trắng xanh (nếu lộ sáng) tới màu nâu, thành thục u chuyển thành màu đen sau bị thối (hình 1, phụ lục 1) Trên lá: cuống phình to tạo dạng “cánh” (hình 2, phụ lục 1) Trên củ: Các u sưng lúc đầu có màu trắng tới nâu chuyển sang màu đen bị thối rời khỏi củ (hình 3, 4, phụ lục 1) Các u sưng có nhiều hình dạng khác nhau, hình cầu hay dạng hoa súp lơ, kích thước u sưng từ 1-8cm đơi to nắm tay Bệnh gây hại mắt củ bị nặng toàn củ trở thành khối u sưng Nếu bệnh nhiễm sớm giai đoạn củ phát triển củ bị biến dạng trở nên xốp Vào cuối giai đoạn sinh trưởng củ, u sưng bị khơ thối hay rời khỏi củ đơi triệu chứng củ thu hoạch khó nhận biết Trong q trình bảo quản kho vết bệnh lại phát triển thành u sưng u sưng có màu tương tự vỏ củ khoai tây Trên rễ củ: Triệu chứng tương tự củ Trường hợp văn viện dẫn quy chuẩn sửa đổi, bổ sung thay thực theo quy định văn QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Trên rễ tơ: Nấm không gây hại rễ tơ khoai tây có gây hại rễ tơ số kí chủ phụ khác cà chua 2.3.2 Phương pháp giám định 2.3.2.1 Đối với củ, thân, rễ Dùng dao lam cắt lát phần nghi ngờ, độ dày lát cắt nên nhỏ 1mm có độ dài 3mm Đặt lát cắt thu lên lam kính, nhỏ giọt axit lactic lên lát cắt đậy lamen Quan sát đo đếm đặc điểm hình thái bào tử kính hiển vi độ phóng đại 40 lần So sánh với đặc điểm hình thái bào tử đơng nấm Synchytrium endobioticum (hình 5,6 phụ lục 1) Chú ý: Nếu lát cắt dày khó quan sát cấu trúc bào tử Có thể dàn mỏng lát cắt kim khêu nấm trước đậy lamen hơ lam kính lên đèn cồn để loại bỏ bóng khí tiêu 2.3.2.2 Đối với mẫu đất Mẫu đất để khơ tự nhiên Hồ tan 100 g đất khô vào 900ml nước, ngâm 24 để đất rã hoàn toàn Đổ hỗn hợp thu qua sàng rây (kích thước lỗ rây 500, 250, 125, 71, 40 25µm) Các hỗn hợp thu phía rây 40 25µm rửa giấy lọc Sau rửa để khô, phần thu giấy lọc cho vào ống ly tâm 50ml Thêm vào ống ly tâm 15ml dịch Chloroform CaCl2 khuấy đều, ly tâm 3000 vòng/phút 15 phút Thu phần dung dịch lọc qua giấy lọc.Hòa phần thu giấy lọc vào 1ml lactoglycerol Dùng ống hút lấy dung dịch thu nhỏ lên lam kiểm tra kính hiển vi Quan sát đo đếm đặc điểm hình thái bào tử kính hiển vi so sánh với đặc điểm hình thái bào tử đông nấm Synchytrium endobioticum (phụ lục 1) III THẨM ĐỊNH K T QU GIÁM ĐỊNH VÀ BÁ CÁ Sau khẳng định kết giám định bệnh ung thư khoai tây (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival) thuộc danh mục dịch hại KDTV Việt Nam, đơn vị giám định phải gửi báo cáo Cục Bảo vệ thực vật kèm theo phiếu kết giám định (phụ lục 2) Tất đơn vị thuộc hệ thống Bảo vệ KDTV phải lưu giữ, quản lý khai thác liệu kết điều tra, báo cáo giám định bệnh ung thư khoai tây (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival) Đối với đơn vị lần giám định phát bệnh ung thư khoai tây (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival) phải gửi mẫu tiêu Trung tâm Giám định kiểm dịch thực vật để thẩm định báo cáo Cục Bảo vệ thực vật trước công bố xử lý dịch theo quy định pháp luật hành Đơn vị giám định phải lưu mẫu theo Quy chuẩn kỹ thuật hành thời gian để giải khiếu nại kết giám định (nếu có) QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT IV TỔ CHỨC THỰC HIỆN Cục Bảo vệ thực vật có trách nhiệm phổ biến; tổ chức, hướng dẫn kiểm tra việc thực Quy chuẩn hệ thống tổ chức chuyên ngành Bảo vệ Kiểm dịch thực vật tổ chức, cá nhân khác có liên quan; Các tổ chức, cá nhân có hoạt động liên quan đến điều tra, thu thập mẫu, xử lý bảo quản mẫu bệnh ung thư khoai tây (Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival) Việt Nam phải tuân theo quy định quy chuẩn quy định pháp luật có liên quan hành QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Phụ lục Thông tin dịch hại Phân bố ký chủ 1.1.Phân bố Trong nước: Bệnh chưa có Việt Nam Trên giới: Châu Á (Armenia, Bhutan; Trung Quốc, Nepal, Ấn Độ, Thổ Nhĩ Kì), Châu Phi (Tunisia, Algeria; Nam Phi), Châu Mỹ (Canada, Bolivia; Ecuador, Falkland Islands, Peru), Châu Âu (Liên bang Nga; Ba Lan; Thuỵ Sỹ; Cộng hoà Séc; Siberia, Áo; Belarus; Bulgaria; Phần Lan; Đức; Ireland; Italy; Latvia; Luxembourg; Montenegro; Hà Lan; NaUy; Romania; Slovakia; Slovenia; Thuỵ Điển; Ukraine; Vương Quốc Anh) Châu Đại Dương (New Zealand) 1.2 Ký chủ Khoai tây Solanum tuberosum, lu lu đực (nightshade), cà chua Ngoài ra, lây nhiễm nhân tạo nấm kí sinh số loại Schizanthus sp., Capsicastrum nanum, Physalis franchetii, Datura sp Solanum dulcamara Tên khoa học vị trí phân loại Tên tiếng Việt : Bệnh ung thư khoai tây Tên khoa học: Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival Tên khác: Chrysophlyctis endobiotica Schilb Synchytrium solani Massee Vị trí phân loại: Lớp: Chytridiomycetes Bộ: Chytridiales Họ: Synchytriaceae Triệu chứng bệnh ung thư khoai tây Hình 1: Triệu chứng bệnh ung thư khoai tây S endobioticum đồng ruộng Hình 2: Triệu chứng bệnh ung thư khoai tây S endobioticum (Nguồn: Hans Stachewicz) (Nguồn: Hans Stachewicz) QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Hình 3: U sưng nấm S endobioticum mặt đất giai đoạn chưa thành thục Hình 4: U sưng nấm S endobioticum củ thành thục (Nguồn: Defra) (Nguồn: Plant Health & Environment Lab) Đặc điểm hình thái bào tử nấm Synchytrium endobioticum Bào tử đơng có vách dày màu vàng nâu mô Bào tử gần chiếm hết tế bào kí chủ Bào tử có lớp vách , vách dày bên bào tử có dạng nhăn (nếu nhìn bề mặt), có độ dày khơng đồng có đỉnh góc cạnh rõ ràng Bào tử đơng có đường kính từ 25-75µm (trung bình 50µm) Các góc cạnh rõ ràng vách ngồi đặc điểm để giám định nấm Synchytrium endobioticum phân biệt bào tử nấm với cấu trúc vi sinh vật khác nằm u sưng đất Bào tử mùa hè có kích thước tương tự bào tử đông suốt có vách ngăn mỏng Các bào tử thường không xuất u trưởng thành Chúng đỉnh góc cạnh đặc trưng bào tử đông loại bào tử không sử dụng để giám định hình thái Hình 5: Bào tử đơng S.endobioticum (Nguồn: EPPO, 2012) Hình 6: Bào tử đơng S.endobioticum bất hoạt (Nguồn: EPPO, 2012) QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Phân biệt nấm Synchytrium endobioticum số loại nấm giống Synchytrium nấm khác có biểu triệu chứng bệnh tương tự Một số loại Synchytrium kí sinh cỏ có mặt đất trồng khoai tây xuất u sưng Những loài cấu tạo bào tử khơng có đỉnh góc cạnh bào tử đơng Synchytrium endobioticum Bệnh ghẻ bột khoai tây (Spongospora subterranea) gây triệu chứng vết ghẻ khơng có hình dạng định củ khoai tây (hình 7) Kiểm tra kính hiển vi khối bào tử (spore balls) nấm S subterranea có dạng trứng, bất định thn dài, có dạng xốp Khối bào tử có chứa bào tử riêng lẻ co cụm sát vào (hình 8) Hình 7: Vết bệnh ghẻ bột khoai tây (Nguồn: USDA,2012) Hình 8: Bào tử S subterranea (40X) (Nguồn: Lucid, 2010) Bệnh than đen khoai tây (Thecaphora solani): bệnh gây khối u sùi củ u sưng chứa bào tử màu đen (hình 9, 10) Hình 9: Triệu chứng bệnh than đen khoai tây (T solani) (Nguồn: USDA, 2012) Hình 10: Bào tử nấm bệnh than đen khoai tây (T solani) (Nguồn: USDA, 2012) QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Phụ lục (qui định) Mẫu phiếu kết giám định Cơ quan Bảo vệ Kiểm dịch thực vật CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc *** ngày tháng năm 20… PHI U K T QU GIÁM ĐỊNH Bệnh ung thư khoai tây Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival dịch hại kiểm dịch thực vật Việt Nam Tên hàng hoá : Nước xuất : Xuất xứ : Phương tiện vận chuyển : Khối lượng: Địa điểm lấy mẫu : Ngày lấy mẫu : Người lấy mẫu : Tình trạng mẫu : Ký hiệu mẫu : 10 Số mẫu lưu : 11 Người giám định : 12 Phương pháp giám định: Theo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia QCVN 01 -181 : 2014/BNNPTNT “Quy trình giám định bệnh ung thư khoai tây Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival - dịch hại kiểm dịch thực vật Việt Nam” 13 Kết giám định : Tên khoa học: Synchytrium endobioticum (Schilb) Percival Lớp: Chytridiomycetes Bộ: Chytridiales Họ: Synchytriaceae Là dịch hại kiểm dịch thực vật thuộc danh mục dịch hại kiểm dịch thực vật Việt Nam TRƯỞNG PHÒNG KỸ THUẬT (hoặc người giám định) (ký, ghi rõ họ tên) THỦ TRƯỞNG ĐƠN VỊ (ký, ghi rõ họ tên, đóng dấu) 10 ...QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Lời nói đầu QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Trung tâm Giám định Kiểm dịch thực vật biên soạn, Cục... trình duyệt, Bộ Nơng nghiệp & PTNT ban hành Thông tư số 16/TT-BNNPTNT ngày 05 tháng năm 2014 QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ QUY TRÌNH GIÁM ĐỊNH BỆNH UNG THƯ KHOAI TÂY... thành sưu tập II QUY ĐỊNH KỸ THUẬT 2.1 Phương pháp thu thập bảo quản mẫu 2.1.1 Thu thập mẫu QCVN 01 - 181 : 2014/BNNPTNT Đối với hàng xuất, nhập khẩu, cảnh vận chuyển, bảo quản nước: Tiến hành