Thongbao Bienban Nghi Quy bo nhiem Pham Hoang Viet(2) tài liệu, giáo án, bài giảng , luận văn, luận án, đồ án, bài tập l...
ii MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Chương 1: TỔNG QUAN 3 1.1. KHÁI QUÁT VỀ BỆNH LAO 3 1.4. VI KHUẨN LAO 6 1.4.1. Đặc điểm phân loại 6 1.4.2. Đặc điểm hình thái 7 1.4.3. Cấu trúc thành tế bào 8 1.4.4. Đặc điểm nuôi cấy 10 1.4.4.1. Môi trường và dạng khuẩn lạc 10 1.4.4.2. Chu kì tế bào 11 1.4.5. Khả năng gây bệnh 11 1.4.6. Đặc điểm hệ gen vi khuẩn lao 12 1.4.6.1. Đặc điểm hệ gen Mycobacteria tuberculosis 12 1.4.6.2. Đặc điểm di truyền của vùng gene biệt hóa RD1. 12 1.5. PROTEIN ESAT6/CFP10 14 1.5.1. Cấu trúc phân tử của phức hệ protein ESAT6/CFP10. 14 1.5.2. Kháng nguyên tái tổ hợp ESAT6-CFP10 và tiềm năng ứng dụng. 15 Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 17 2.3. SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU 21 2.4. PHƯƠNG PHÁP VÀ KỸ THUẬT NGHIÊN CỨU 22 2.4.1. Thiết kế nghiên cứu 22 2.4.2. Các kỹ thuật sinh học phân tử 22 2.4.2.1. Tách chiết ADN 22 2.4.2.2. PCR khuếch đại gen mã hóa protein ESAT6-CFP10 22 iii 2.4.2.3. Tách dòng gen mã hóa protein ESAT6-CFP10. 23 2.4.2.4. Giải trình tự ADN 24 2.4.2.5. Thiết kế vector tách dòng pGEMT chứa đoạn gen mã hóa protein CFP10/ESAT6 27 2.4.2.6. Thiết kế vector biểu hiện pET21a chứa đoạn gen mã hóa protein CFP10/ESAT6 28 2.4.2.7. Biểu hiện protein ESAT6-CFP10 trong tế bào vi khuẩn Escherichia coli chủng BL21(DE3) 30 2.4.2.8. Tinh sạch protein ESAT6/CFP10 32 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 33 3.1. THIẾT KẾ VECTOR BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA CHO KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP ESAT6/CFP10 33 3.1.1. Xác định tính ổn định của gen mã hóa protein ESAT6/CFP10 33 3.1.1.1. Kết quả khuếch đại trình tự gen mã hóa protein ESAT6/CFP10 của M.tuberculosis 33 3.1.1.2. Xác định tính ổn định của gen mã hóa protein ESAT6/CFP10 33 3.1.2. Kết quả tách dòng 35 3.1.2.1. Kết quả khuếch đại, nối 2 gen mã hóa protein ESAT6-CFP10 của M.tuberculosis 35 3.1.2.2. Kết quả tách dòng 35 3.1.2.3. Kết quả thiết kế vector biểu hiện pET21a+ mang gen ESAT6-CFP10 37 3.1.2.3.1. Xử lý enzym hạn chế tạo đầu cắt so le trên gen pET21a+ 37 3.1.2.3.2. Gắn đoạn gen đích vào vector biểu hiện pET21a+ 40 3.1.2.3.3. Chọn lọc dòng tế bào chứa vector tái tổ hợp bằng phản ứng PCR- colonies 40 3.2. KẾT QUẢ BIỂU HIỆN VÀ TINH SẠCH PROTEIN ESAT6/CFP10 41 iv 3.2.1. Biến nạp vector tái tổ hợp pET21a+/ESAT6-CFP10 vào E.coli chủng BL21(DE3) 41 3.2.2. Kiểm tra sự biểu hiện gen CFP10/ESAT6 43 3.2.3. Tối ưu điều kiện biểu hiện protein tái tổ hợp CFP10-ESAT6 44 3.2.3.1. Kết quả tối ưu nhiệt độ cảm ứng 44 3.2.3.2. Kết quả tối ưu nồng độ chất cảm ứng IPTG và thời gian cảm ứng trên gen CFP10/ESAT6 46 3.2.4. Tinh sạch protein ESAT6/CFP10 47 3.2.5. Kiểm tra độ tinh sạch của sản phẩm 48 3.2.6. Kết quả kiểm tra protein tái tổ hợp bằng kháng thể đặc hiệu 49 3.2.7. Xác định hoạt tính kháng nguyên 49 KẾT LUẬN 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 v DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1. Các sinh phẩm hóa chất chính 18 Bảng 2.2. Các máy và thiết bị chính 19 Bảng 2.3. Các cặp mồi dùng trong nghiên cứu 20 Bảng 3.1. Mức độ tương đồng của gen mã hóa protein ESAT6/CFP10 từ các chủng vi khuẩn lao Việt Nam so sánh với chủng chuẩn H37Rv 34 Bảng 3.2. Mức độ biểu hiện CFP10/ESAT6 tại các điều kiện khác nhau. 47 Bảng 3.3. Nồng độ độc tố trong sản phẩm. 48 Bảng 3.4. Đáp ứng với các nồng độ kháng nguyên khác nhau 50 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1. Vi khuẩn lao M. tuberculosis trên kính hiển vi điện tử [57]. 7 Hình 1.2. Trực khuẩn M. tuberculosis sau khi nhuộm Ziehl – Nielsen [57]. 8 Hình 1.3. Cấu trúc thành tế bào của vi khuẩn lao [72]. 8 Hình 1.4. Khuẩn lạc M. tuberculosis trên môi trường Lowenstein - Jensen 10 Hình 1.5. Vùng gen RD [31]. 13 Hình 1.6 . Mô phỏng cấu trúc của phức hệ protein ESAT6/CFP10 [49]. 14 Hình 3.1. Kết quả khuếch đại gen mã hóa protein ESAT6/CFP10 33 Hình 3.2. Kết quả khuếch đại gene mã hóa protein CFP10 và ESAT6 35 Hình 3.3. Khuẩn lạc sau khi biến nạp plasmid. 36 Hình 3.4. Sản phẩm PCR được khuếch đại trên các plasmid tái tổ hợp, sử dụng cặp mồi P1, P4. 37 Hình 3.5. Kết quả mở vòng Signature Not Verified Được ký ĐOÀN VIỆT KHƯƠNG Ngày ký: 17.12.2012 15:20 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - HÀ THỊ HIÊN NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP ESAT6/CFP10 PHỤC VỤ VIỆC CHẾ TẠO BỘ SINH PHẨM CHẨN ĐOÁN NHIỄM LAO LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – Năm 2014 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - HÀ THỊ HIÊN NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP ESAT6/CFP10 PHỤC VỤ VIỆC CHẾ TẠO BỘ SINH PHẨM CHẨN ĐOÁN NHIỄM LAO Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã số: 60420107 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYỄN THÁI SƠN PGS.TS NGÔ TỰ THÀNH Hà Nội – Năm 2014 LỜI CẢM ƠN Trƣớc tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thái Sơnngƣời thầy tận tình hƣớng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho hoàn thành luận văn Tôi xin cảm ơn PGS.TS Ngô Tự Thành giúp đỡ thông qua cho luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn thầy giáo, cô giáo khoa Sinh học, đặc biệt thầy, cô môn Vi sinh vật học, trƣờng Đại học Khoa học Tự Nhiên-Đại học Quốc Gia Hà Nội tận tình giảng dạy, truyền đạt cho kiến thức bổ ích suốt trình học tập trƣờng Tôi xin đƣợc gửi lời cảm ơn sâu sắc tới tập thể phòng Sinh học phân tử-Khoa Miễn dịch sinh học phân tử- Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung Ƣơng tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ ủng hộ suốt trình thực đề tài Tôi xin đƣợc cảm ơn gia đình, bạn bè quan tâm, động viên tạo điều kiện tốt để hoàn thành khóa học Hà Nội, ngày 12 tháng năm 2014 Học viên Hà Thị Hiên i MỤC LỤC MỞ ĐẦU Chƣơng 1: TỔNG QUAN Error! Bookmark not defined 1.1 KHÁI QUÁT VỀ BỆNH LAO Error! Bookmark not defined 1.4 VI KHUẨN LAO Error! Bookmark not defined 1.4.1 Đặc điểm phân loại Error! Bookmark not defined 1.4.2 Đặc điểm hình thái Error! Bookmark not defined 1.4.3 Cấu trúc thành tế bào Error! Bookmark not defined 1.4.4 Đặc điểm nuôi cấy Error! Bookmark not defined 1.4.4.1 Môi trƣờng dạng khuẩn lạc Error! Bookmark not defined 1.4.4.2 Chu kì tế bào Error! Bookmark not defined 1.4.5 Khả gây bệnh Error! Bookmark not defined 1.4.6 Đặc điểm hệ gen vi khuẩn lao Error! Bookmark not defined 1.4.6.1 Đặc điểm hệ gen Mycobacteria tuberculosisError! Bookmark not defined 1.4.6.2 Đặc điểm di truyền vùng gene biệt hóa RD1.Error! Bookmark not defined 1.5 PROTEIN ESAT6/CFP10 Error! Bookmark not defined 1.5.1 Cấu trúc phân tử phức hệ protein ESAT6/CFP10 Error! Bookmark not defined 1.5.2 Kháng nguyên tái tổ hợp ESAT6-CFP10 tiềm ứng dụng.Error! Bookmark not defined Chƣơng 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Error! Bookmark not defined 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU Error! Bookmark not defined 2.3 SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU Error! Bookmark not defined ii 2.4 PHƢƠNG PHÁP VÀ KỸ THUẬT NGHIÊN CỨUError! Bookmark not defined 2.4.1 Thiết kế nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.4.2 Các kỹ thuật sinh học phân tử Error! Bookmark not defined 2.4.2.1 Tách chiết ADN Error! Bookmark not defined 2.4.2.2 PCR khuếch đại gen mã hóa protein ESAT6-CFP10 Error! Bookmark not defined 2.4.2.3 Tách dòng gen mã hóa protein ESAT6-CFP10.Error! Bookmark not defined 2.4.2.4 Giải trình tự ADN Error! Bookmark not defined 2.4.2.5 Thiết kế vector tách dòng pGEMT chứa đoạn gen mã hóa protein CFP10/ESAT6 Error! Bookmark not defined 2.4.2.6 Thiết kế vector biểu pET21a chứa đoạn gen mã hóa protein CFP10/ESAT6 Error! Bookmark not defined 2.4.2.7 Biểu protein ESAT6-CFP10 tế bào vi khuẩn Escherichia coli chủng BL21(DE3) Error! Bookmark not defined 2.4.2.8 Tinh protein ESAT6/CFP10 Error! Bookmark not defined Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Error! Bookmark not defined 3.1 THIẾT KẾ VECTOR BIỂU HIỆN GEN MÃ HÓA CHO KHÁNG NGUYÊN TÁI TỔ HỢP ESAT6/CFP10 Error! Bookmark not defined 3.1.1 Xác định tính ổn định gen mã 5 bí quyết lựa chọn thành viên lý tưởng cho nhóm Một trong những nhiệm vụ quan trọng của người quản lý là lựa chọn những thành viên phù hợp để thực hiện một dự án nào đó. Sau đây là 5 lời khuyên giúp các sếp dễ xác định đúng người cho một nhóm lý tưởng: Vạch rõ những kĩ năng cần thiết Với cương vị của một nhà quản lý dự án, bạn cần phải xác định rõ những yêu cầu của dự án một cách đơn giản, rõ ràng và xúc tích. Một khi xác định được những mục tiêu và kết quả của dự án, bạn cần xem xét đến những kĩ năng bạn cần để thực hiện nó tốt nhất. Tiếp theo, bạn nên đánh giá những kĩ năng nào bạn đã có trong nội bộ tổ chức cũng như liệu bạn có cần phải thuê nhân sự bên ngoài (những người làm việc tự do, tư vấn…) hay không. Dự phòng nhân sự với những kĩ năng cần thiết Nếu có kĩ năng bạn thấy vô cùng cần thiết cho sự thành công của dự án, hãy đảm bảo rằng những thành viên khác trong nhóm cũng cần phải có kĩ năng này phòng khi có những vấn đề nảy sinh. Ví dụ, kết quả của dự án là cần trang bị kĩ năng thuyết trình cho một dự án quan trọng, bạn cần đảm bảo có một thuyết trình viên dự phòng trong nhóm trong trường hợp người thuyết trình thứ nhất ốm. Đồng thời cũng không được phớt lời những kĩ năng ít quan trọng hơn để các thành viên trong nhóm có thể giúp đỡ nếu một phần nào đó của dự án bị chững lại. Tóm lại, cần phải có một sự linh hoạt giữa các thành viên trong nhóm: Họ cần phải thích nghi nhanh chóng với việc thay đổi hạn định, luân chuyên nhiệm vụ trong trường hợp có thành viên bị ốm hoặc cần hỗ trợ lẫn nhau để hoàn thành công việc. Lựa chọn đủ số người Lựa chọn thừa hoặc thiếu người cho dự án đều có thể gây ra những vấn đề nghiệm trọng. Lựa chọn thừa người có thể dẫn đến những áp lực về mặt tài chính, những thắc mắc về việc phân chia công việc, lãng phí thời gian hay thông tin chậm trễ. Tương tự, thiếu người lại khiến mọi người cảm thấy bị áp lực về thời gian, làm việc quá sức, thiếu hụt những kĩ năng và làm hẹp phạm vi hoàn thành mục tiêu của dự án. Vì vậy, quản lý dự án cần tuyển đủ người cần thiết và trong mức ngân sách cho phép. Trong hầu hết các trường hợp, việc đạt được sự cần bằng về nhân lực trong nhóm là vô cùng khó. Tuy nhiên, với những nhà quản lý kinh nghiệm, chắc chắn họ sẽ biết cân bằng giữa những yêu cầu về kĩ năng, số người và phân bổ nhân lực một cách hợp lý. Lựa chọn những người quan tâm Một dự án sẽ chạy không tốt nếu những người làm việc cho dự án lại không có những hứng thú với nó. Những nhà quản lý dự án cần phải đảm bảo chọn đúng các thành viên trong nhóm – người thành thạo về lĩnh vực dự án sẽ làm, hứng thú với những kết quả của nó và có thể đem lại những đóng góp ý nghĩa. Thực tế cho thấy, nhiều dự án bị thất bại hay bị trì hoãn là do các thành viên trong nhóm dành ưu tiên của họ cho những việc khác. Xem xét đến cá tính của các thành viên trong nhóm Người quản lý dự án cần biết rõ các thành viên – tính cách, phong cách làm việc của họ… trong nhóm của mình để từ đó có cách quản lý họ hiệu quả. Sẽ tốt hơn nếu loại bỏ những cá nhân thích tranh cãi và thách thức người khác vì mục đích của dự án và tâm trạng của những thành viên khác. Bĩnh tĩnh và kiềm chế cảm xúc là những tính cách cần thiết đối với người quản lý dự án vì bạn là người có ảnh hưởng trực tiếp để thái độ và tâm trạng của cả nhóm. Bạn cần chú ý tới tính cách của từng cá nhân, và giao trách nhiệm cho đúng người, đảm bảo mỗi thành viên thấy được tầm quan trọng và những đóng góp của họ đều đáng quý như nhau trong dự án. Nguồn DT CQNG HOA CONG TY CO PHAN THU"ONG M~l vA DAU TU'VI se A 4- !NQ-VNTB XA H(}c l~p - T1;1· - H~nh phuc NA TA BA Tp Hf> Chi Minh, 21 thang 11 ndm 2016 NGIDQUYET V/v bA nhiern T VN T u nm 1965, cu vón nguy c sp ca ch Si Gũn v s phỏ sn ca chin lc chin tranh c bit, quc M ó o t a quõn M v quõn cỏc nc tr hu vo Nam, tin hnh cuc chin tranh cc b vi quy mụ ln , M dựng khụng quõn, hi quõn tin hnh cuc chin tranh phỏ hoi i vi Bc Tuy nhiờn, Nam nhng khú khn nhng nm 1961 1962 ó c gii quyt, sau nm 1963 cuc chin u ca nhõn dõn ta ó cú bc phỏt trin mi Trc hnh ng gõy chin tranh cc b nam, tin hnh chin tranh phỏ hai Bc ca quc M, ng ta ó hp hi ngh Trung ng ln th 11( Thỏng 1965) v ln th 12 ( thỏng 12 1965) ó trung ỏnh giỏ tỡnh hỡnh v ng li khỏng chin chng M cu nc trờn phm vi c nc, thụng qua hai ngh quyt quan trng th hin quyt tõm ỏnh M v thng M ca tũan ng, tũan quõn v tũan dõn ta hiu rừ hn v hai Ngh quyt quan trng ny, nhúm em xin c lm rừ ti: Gii thiu Ngh quyt 11 v 12 Ban chp hnh Trung ng ng GII QUYT VN A Ngh Quyt 11 Ban Chp Hnh Trung ng ng Khúa III Hũan Cnh: T trc Ngh quyt 11 Ban chp hnh Trung ng ng khúa III nm 1965 i, nc ta tri qua nhiu bin ng ln Cuc u tranh yờu nc, cỏch mng ca ng bo Nam gt hỏi c nhiu thnh qu to ln, bờn cnh ú, cuc "chin tranh c bit" quc M tin hnh ngy cng b khng hong v tht bi nng n khin cho "ba ch da ch yu ca quc m cuc chin tranh xõm lc Min nam l quõn i ỏnh thuờ v chớnh quyn tay sai, h thng p chin lc v cỏc ụ th b sp hoc lung lay mnh v ang tr thnh nhng mi lo ngi ln nht ca chỳng hin Trc tỡnh hỡnh ú, u nm 1965, M chuyn sang chin lc "chin tranh cc b" a quõn chin u M vo Nam v nộm bom Bc vi mc tiờu l tiờu dit ch lc quõn gii phúng, bỡnh nh Nam, buc nc ta phi ngi vo bn m phỏn theo iu kin ca M, hoc gim thiu thit hi chin tranh chỳng tht bi hon ton Tuy nhiờn, thc hin õm mu núi trờn, M vp phi nhng khú khn, bt li rt ln nh ang gp tht bi liờn tip, "b ng nghiờm trng c v mt chớnh tr v chin lc, v ang b cụ lp n mc cao , c nc v trờn th gii Trc yờu cu mi ca cỏch mng, t ngy 25 n 27-3-1965, ti H Ni, Ban Chp hnh Trung ng ng hp Hi ngh ln th 11 v Ngh quyt V tỡnh hỡnh v nhim v cp bỏch trc mt Nhim V ca Ngh Quyt 11 Ban Chp Hnh Trung ng Khúa III 2.1 Nhim v chung Nhn nh tỡnh hỡnh mi, ng ta xỏc nh, tỡnh hỡnh nc, so sỏnh v lc lng gia ta v ch thay i theo hng cú li cho cỏch mng í chin thng ca ch ngy cng tan ró Trờn mt trn th gii chin tranh xõm lc ca quc M ngy cng b nhõn dõn th gii lờn ỏn Mõu thun gia cỏc gii cm quyn M vi v gia quc M vi cỏc quc khỏc ngy cng phỏt trin T tỡnh hỡnh thc tin ca c nc lỳc by gi ng ta ó nh hng nhim v c bn ca cỏch mng l tích cực kiềm chế thắng địch chiến tranh đặc biệt mức cao miền Nam, sức tranh thủ thời cơ, tập trung lực lợng nớc giành thắng lợi định miền Nam thời gian tơng đối ngắn, đồng thời chuẩn bị sẵn sàng đối phó thắng chiến tranh cục miền Nam địch gây ra; tiếp tục xây dựng miền Bắc, kết hợp chặt chẽ xây dựng kinh tế tăng cờng quốc phòng, kiên bảo vệ miền Bắc đánh thắng chiến tranh phá hoại phong toả không quân hải quân địch, chuẩn bị sẵn sàng để đánh bại địch trờng hợp chúng đa chiến tranh phá hoại đến trình độ ác liệt gấp bội, chuyển thành chiến tranh cục miền Nam lẫn miền Bắc, sức động viên lực lợng miền Bắc chi viện cho miền Nam; sức giúp đỡ cách mạng Lào T ú cú th thy cỏch mng hai cuc khỏng chin chng M l cuc khỏng chin tũan din, ú nam l tin tuyn ln, Bc l hu phng vng chc 2.2 Xỏc nh nhng nhim v c th: cuc khỏnh chin ca nc ta i n thng li tũan din, chu ớt nht tn tht v mi mt, di s d dt ỳng n ca ng v s n lc ca cỏch mng hai Hi ngh ln th 11 ca ban chp hnh Trung ng ng Khúa III ó nhng nhim v c th nh sau: Min Bc: Kp thi chuyn hng nn kinh t v tng cng lc lng quc phũng cho kp vi s phỏt trin ca tỡnh hỡnh V kinh t, y mnh phỏt trin nụng nghip trờn ton b Bc, c bit l vựng trung du v nỳi; chỳ trng phỏt trin th cụng nghip a phng v th cụng nghip, xõy dng hn na cỏc xớ nghip cụng nghip va v nh V mt quc phũng, cn tng cng hn na lc lng nc v tranh th s giỳp v quõn s ca cỏc nc xó hi ch ngha Ra sc tng cng cụng tỏc phũng th, tr an bo v Bc Cụng tỏc phũng thi, tr an bo v Bc hin ti l rt cn thit vỡ thi im hin ti vic bo v tin tuyn Bc l rt cn thit, nhõn t quan trng CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAMĐộc lập – Tự do – Hạnh phúc---------Mẫu số 1(ban hành theo TT số 14/2010/TT-BNN ngày 19 tháng 03 năm 2010)BIÊN BẢN KIỂM TRA ĐỊA BÀN VÙNG DỰ ÁNĐối với hình thức bố trí, ổn định dân cư ngoài tỉnh Hôm nay, ngày .tháng . năm 20 ., Tại địa bàn “ Dự án .”Chúng tôi gồm:1. Đại diện nơi đưa dân đi (nơi đi) gồm có: (Tuỳ theo hình thức bố trí, ổn định dân cư cụ thể, ghi tên, chức vụ của những người (cơ quan) có liên quan trực tiếp và đại diện hộ bố trí, ổn định dân cư nơi đi):- Đại diện chính quyền địa phương (huyện, tỉnh) .- Đại diện cơ quan quản lý và thực hiện bố trí, ổn định dân cư: - Đại diện hộ bố trí, ổn định dân cư: - - 2. Đại diện nơi tiếp nhận dân (nơi đến) gồm có: (Tuỳ theo hình thức bố trí, ổn định dân cư cụ thể, ghi tên, chức vụ của những người (cơ quan) có liên quan trực tiếp)- Đại diện chính quyền địa phương (huyện, tỉnh) - Đại diện cơ quan quản lý và thực hiện bố trí, ổn định dân cư: .- .- .3. Chủ dự án đã đến kiểm tra địa bàn dự án bố trí, ổn định dân cư.Qua kiểm tra địa bàn dự án, cùng xác nhận:a. Cơ sở vật chất hạ tầng đã có (hoặc đang xây dựng) trong vùng dự án:Danh mục Mức độ hoàn thành công trình (%)- Đường giao thông: .- Công trình thuỷ lợi: .- Trạm xá: .- Điện: - Nước sinh hoạt: .- Trường học .- .b. Đất đai:- Diện tích đất chưa sử dụng (trong vùng dự án):+ Khai hoang tập trung ha+ Diện tích đất sản xuất giao cho hộ bố trí, ổn định dân cư tự khai hoang (nếu có - Tổng diện tích đất đưa vào sử dụng: ha+ Diện tích đất nông nghiệp: . ha + Diện tích đất lâm nghiệp: . ha+ Diện tích mặt nước bãi bồi ha+ Diện tích đất khác: .ha+ Diện tích đất dự kiến giao/hộ: Đất ở: ha; Đất sản xuất: hac. Mục tiêu sản xuất: (Nêu phương hướng sản xuất, cây, con được duyệt trong dự án, khuyến nông, khuyến lâm, môi trường)- - - - d. Quy mô tiếp nhận dân vào vùng dự án:- Số dân hiện có trong vùng dự án (nếu có) .hộ . khẩu- Quy mô tiếp nhận: . hộ khẩuTrong đó:+ Ngoài tỉnh: hộ .khẩu+ Trong tỉnh: hộ khẩu- Dự kiến tiến độ tiếp nhận:+ Đợt I: Thời gian: Số lượng . hộĐến điểm dân cư: .+ Đợt II: Thời gian: Số lượng . hộ (nếu có)Đến điểm dân cư: Kết luận:Trên cơ sở những nội dung đã kiểm tra, chúng tôi cùng thống nhất kết luận:1. Về cơ sở vật chất hạ tầng cần thiết phục vụ sản xuất và đời sống trong vùng dự án--2. Về đất đai: (mức giao cho 1 hộ . ha, trong đó: đất ở . đất sản xuất )--3. Nhà ở (nếu có): .4. Các điều kiện khác: .Những vấn đề tồn tại và kiến nghị:a. Tồn tại --b. Kiến nghị:--Dự án có đủ (chưa đủ) điều kiện đưa dân đến vùng dự án.Biên bản được lập thành bản có giá trị như nhau, mỗi bên giữ . bản./.2 ĐẠI DIỆN NƠI c0Nc ry co pnAN O r0 rMT ceNG HoA xA ngl cu0 EQc lflp 36:)91 /TB-TMT-HDQT Hd cONc ro N|| - Trp NcHi,q vrET NAM - Hpnh phric ngdy 02 thdng ndm 2016 IUONG rrN Kinh gfri: - Uy ban Chfng kho6n Nhir nu6c - SO Giao dich Chring kho6n Tp H6 Chi Minh T€n giao dich COng ty ni6m ytlt: C6ng ry C6 phAn t6 Md chimg kho6n: TMT TMT Trg sd chfnh: 1998 Minh