BM.12.01 Phan loai NV

Luận văn tốt nghiệp GVHD : Cô Vũ Thị ThơCHƯƠNG III : TÌM HIỂU THỰC TRẠNG VIỆC DẠY VÀ HỌC MÔN HOÁ Ở MỘT SỐ TRƯỜNG THPTIII.1 – MỤC ĐÍCH ĐIỀU TRA :- Tìm hiểu động cơ, tinh thần, ý thức học tập môn hoá của học sinh.- Thái độ, kỹ năng giải bài tập hoá học của học sinh đặc biệt là đối với bài tập hóa hữu cơ chương trình lớp 11 : bài tập về hydrocacbon.- Sự yêu thích và sự đánh giá mức độ khó của học sinh đối với các dạng bài tập hoá hữu cơ.- Tìm hiểu về việc sử dụng các phương pháp giải bài toán hoá hữu cơ.- Phương pháp học tập và kết quả học tập môn hoá.III.2 – ĐỐI TƯỢNG ĐIỀU TRA VÀ PHƯƠNG PHÁP ĐIỀU TRA :- Điều tra thực trạng học tập môn hoá của học sinh khối 11 bằng cách phát phiếu thăm dò ý kiến ở một số trường THPT, cho các em trả lời thu lại liền hoặc mang về nhà đánh dấu sau đó nộp lại. Yêu cầu các em trả lời đúng với suy nghĩ của mình.III.3- NỘI DUNG VÀ KẾT QUẢ ĐIỀU TRA : Tiến hành phát phiếu điều tra ở các lớp thuộc các trường THPT sau :STT Trường Lớp Số phiếu phát ra Số phiếu thu về1 Hùng Vương 11A8 43 432 Gò Vấp 11A5 44 443 Nguyễn Du 11B3 48 474 Võ Thị Sáu 11A 11 47 45Tổng cộng182 179 Phiếu điều tra gồm 16 câu, được soạn dưới hình thức trắc nghiệm cho học sinh đánh dấu. Sau khi tập hợp thống kê ta thu được kết quả như sau : III.3.1 Cảm nhận chung của học sinh về môn hóa :Câu Nội dung Số ý kiến(A)Tỉ lệ (%)(B)1 Em có thích học môn hoá không?A. Rất thíchB. Thích C. Không thíchD. Không ý kiến2594204013,9652,5111,1722,342 Em thích học môn hoá vì lý do gì?A. Môn hoá là một trong những môn thi vào các trường ĐH, CĐ49 27,37SVTH : Phan Thị Thùy106 Luận văn tốt nghiệp GVHD : Cô Vũ Thị ThơB. Có nhiều ứng dụng trong thực tếC. Thầy cô dạy vui vẻ, dễ hiểu.D. Có nhiều thí nghiệm vui hấp dẫnE. Bài tập dễ, hayF. Lý do khác623256101734,6317,8731,285,59,193 Em không thích học môn hoá vì :A. Môn hoá rất khó hiểu, rắc rối, khó nhớ.B. Thầy cô dạy rất khó hiểu, giờ học nhàm chán.C. Môn hoá không giúp ích gì cho cuộc sống.D. Không có hứng thú học môn hoá.E. Bị mất căn bản môn Hóa5344241729,62,232,2313,409,494 Theo em môn hoá dễ hay khó?A. Rất khóB. KhóC. VừaD. Dễ255689913,9631,2849,725,02 Nhận xét : Nhìn vào kết quả ta thấy rằng : Đại đa số các em thích học môn hoá (66,47%) mặc dù trong trường phổ thông còn nhiều môn học khác nữa. Các em thích học môn hoá vì nhiều lý do khác nhau. Nhưng có lẽ lý do được các em chọn nhiều nhất là do môn hoá có nhiều ứng dụng trong thực tế (34,63%), kế đến là môn hoá có nhiều thí nghiệm vui hấp dẫn (31,28%). Và nhiều em thích học môn hoá vì nó là một môn học trong số những môn mà các em sẽ thi đại học (27,37%). Và trong số 9,19% lý do khác thì có một số em ghi thêm : thích học hóa vì nó là môn học bắt buộc. Các lý do trên hoàn toàn chính đáng và rất hợp lý. So sánh giữa lý do làm cho các em thích học và không thích học môn hoá thì thấy vai trò của nguời giáo viên rất quan trọng, các em yêu thích môn học do những nét đặc trưng rất riêng của môn hoá : có nhiều ứng dụng và nhiều thí nghiệm vui hấp dẫn. Các em không thích học môn hoá cho rằng môn hoá khó hiểu rắc rối nhàm chán (29,6%) và các em không có hứng thú học môn hoá (13,4%). Như chúng ta biết nhờ tài năng của người giáo viên, những nét đặc trưng riêng của môn hoá so với môn khác, yếu tố quan trọng để các em học sinh yêu thích môn hóa sẽ được làm rõ, phát huy. Nhưng tài năng đó có được TIÊU CHÍ ĐÁNH GIÁ NHÂN VIÊN Mã số : BM.12.01 Lần ban hành : 02 Ngày hiệu lực:28/4/2017 BẢN TỰ ĐÁNH GIÁ, PHÂN LOẠI NHÂN VIÊN Họ và tên:………………………………………………………………………… Ngày, tháng, năm sinh:…………………………………………………………… Nghề nghiệp:……………………………………………………………………… Chức vụ tại:…………………………………………………………………… Ngày ký hợp đồng lao động với Công ty:………………………………………… Cá nhân tự đánh giá, phân loại nhân viên: Sau tham khảo quy chế lương năm 2017 Công ty và tiêu chuẩn phân loại nhân viên, đối chiếu với cá nhân, tự nhận mức nhân viên sau (tích dấu “X” vào ô phân loại nhân viên): - Nhân viên loại XÁC NHẬN CỦA CÁ NHÂN - Nhân viên loại (Ký, ghi rõ họ tên) Quản - Nhân viên loại lý - Nhân viên loại trực tiếp nhân viên đánh giá, xếp loại: Đối chiếu với tiêu chuẩn phân loại nhân viên và trình thực tế làm việc Ông (Bà)………………………………… Phòng ban (Đội)………………………… Đánh giá cá nhân Ông (Bà)…………………………………thuộc nhân viên loai… Người đánh giá, xêp loại Chức vụ Kýxác nhận Kết luận Hội đồng lương Công ty: Hội đồng lương đồng ý, thống phân loại Ông (Bà)…………………… hưởng mức lương theo theo tiêu chuẩn nhân viên loại………từ ngày 01/01/2016 đến ngày 30/6/2016 TM HỘI ĐỒNG LƯƠNG Chủ tịch Bài 12 Phân loại vi sinh bằng Sinh Học Phân Tử1. Khái quát về các phương pháp phân loại vi sinh vật truyền thống:Trước đây công tác phân loại vi sinh vật vẫn dựa căn bản trên các đặc tính hình thái, sinh lý và hóa vi sinh vật: nhuộm, hình dạng tế bào khuẩn lạc, khả năng di động, nhu cầu dinh dưỡng, khả năng sinh acid trong môi trường cũng như sắc tố tạo thành v.v Các đặc trưng này đôi khi cũng bộc lộ những hạn chế do các đặc tính được dùng cho nhóm vi sinh vật này (Enterobacteriaceae) nhưng lại không có ý nghĩa đối với nhóm khác (vi khuẩn gram âm - gram negative bacteria). Hạn chế của các phương pháp phân loại truyền thống dẫn đến nhiều trường hợp phải xác định lại tên phân loại của một số vi sinh vật. Từ trước đến nay, đơn vị cơ bản của định tên vi sinh vật là loài, bao gồm nhóm các cơ thể có mức độ tương đồng cao về các đặc điểm hình thái.Các phương pháp dựa trên các phản ứng sinh hóa: Từ những hạn chế của việc xác định các đặc tính hình thái dẫn đến nhiều nghiên cứu tập trung vào các phản ứng sinh hóa đặc trưng cho các vi sinh vật riêng biệt. Sự khác biệt của các phản ứng có ý nghĩa cho phân loại các vi sinh vật.- API20E KIT, nguyên tắc: dựa vào 20 phản ứng khác nhau. Nói chung hiện nay có nhiều nơi vẫn dùng kỹ thuật này nhưng nhìn chung kết quả cũng còn nhiều sai số do nhiều nguyên nhân khác nhau: cụ thể trong các trường hợp gene quyết định phản ứng sinh hóa nằm trong plasmid lại bị mất do nhiều nguyên nhân khác nhau như tuổi tế bào, lượng giống cấy hay thay đổi trong quá trình nuôi cấy dẫn đến sai khác và làm sai kết quả.- Phân biệt bằng thực khuẩn thể: Các vi khuẩn có độ mẫn cảm với thực khuẩn thể khác nhau. Có thực khuẩn thể xâm nhiễm làm tan tế bào ngay lập tức để sau đó thực khuẩn thể nhân lên thành các hạt trong tế bào chủ, trong khi đó với một số vi khuẩn thì thực khuẩn thể xâm nhiễm nhưng lại không làm tan tế bào vi khuẩn và chúng cùng tồn tại với tế bào vật chủ. Dựa vào sự khác biệt này mà người ta dùng các thực khuẩn thể khác nhau để phân biệt các đối tượng vi khuẩn nghiên cứu.Tuy nhiên, phương pháp này cũng bộc lộ một số nhược điểm khó giải quyết là các đặc tính mẫn cảm của vi khuẩn với thực khuẩn thể lại thay đổi do điều kiện ngoại cảnh hoặc là vi khuẩn lại có mức độ mẫn cảm khác nhau đối với các thực khuẩn thể khác nhau. Mặt khác nữa, thực khuẩn thể rất dễ thay đổi các đặc tính do đó cũng làm thay đổi cơ chế xâm nhiễm vào vi khuẩn chủ. - Phân biệt theo Typ huyết thanh:Đây là phương pháp được dùng khá lâu nhưng rất hiệu quả và hiện vẫn đang được sử dụng (ví dụ nhóm vi khuẩn Bt). Nguyên tắc là dựa vào nhóm quyết định kháng nguyên trên tế bào vi sinh vật (bề mặt tế bào tiên mao hoặc protein vỏ). Ưu thế của phương pháp này là các kháng huyết thanh được dùng để biệt hóa nhiều chi khác nhau, trong nhiều trường hợp đặc trưng cho loài. Nói chung đây là phương pháp khá ổn định nhưng hạn chế chủ yếu của phương pháp này ở chỗ: yêu cầu kỹ thuật sản xuất kháng huyết thanh và tiêu chuẩn hóa phản ứng kháng huyết thanh không đồng nhất tại các phòng thí nghiệm và tính ổn định giữa các lần lặp lại. - Phân biệt bằng loại hoạt chất kháng khuẩn SỞ GD&ĐT NINH THUẬN TRƯỜNG THPT NGUYỄN TRÃI ĐỀ THI HỌC KÌ II- MÔN HÓA 12 CƠ BẢN Thời gian làm bài: 45 phút; (25 câu trắc nghiệm) Lớp: Mã đề thi 209 (Thí sinh không được sử dụng tài liệu) Họ, tên thí sinh: Số báo danh: Câu 1: Cho dãy các kim loại: Fe, Na, K, Ca, Be. Số kim loại trong dãy tác dụng được với nước ở nhiệt độ thường là : A. 2. B. 1. C. 3. D. 4. Câu 2: Cho sơ đồ phản ứng sau: Cu + HNO 3 → muối + NO + nước. Số nguyên tử đồng bị oxi hóa và số phân tử HNO 3 bị khử lần lượt là: A. 3 và 2 B. 3 và 6 C. 3 và 3 D. 3 và 8. Câu 3: Để điều chế được cả 3 kim loại Na, Ca, Al người ta dùng phương pháp nào sau đây? A. Điện phân nóng chảy B. Thủy luyện C. Điện phân dung dịch D. Nhiệt luyện Câu 4: Hai kim loại đều thuộc nhóm II A trong bảng tuần hoàn là A. Na, Ba. B. Be, Al. C. Ca, Ba. D. Sr, K. Câu 5: Không khí trong phòng thí nghiệm bị nhiễm bẩn khí Cl 2 .Để khử độc có thể xịt vào không khí dung dịch nào sau đây? A. dd NH 3 B. dd HCl C. dd NaCl D. dd H 2 SO 4 loãng Câu 6: Cho phản ứng: aAl + bHNO 3 → cAl(NO? 3 ) 3 + dNO + eH 2 O. Hệ số a, b, c, d, e là các số nguyên, tối giản. Tổng (a + b) bằng : A. 5. B. 4. C. 7. D. 6. Câu 7: Cho 4,05 gam Al tan hết trong dung dịch HNO 3 thu V lít N 2 O (đkc) duy nhất. Giá trị V là : A. 4,48 lít. B. 3,36 lít. C. 2,62 lít. D. 1,26 lít. Câu 8: Thổi V ml (đktc) khí CO 2 vào 300 ml dung dịch Ca(OH) 2 0,02 M thì thu được 0,2 gam kết tủa. Giá trị của V là: A. 224 ml B. 44,8 ml hoặc 224 ml C. 44,8 ml D. 44,8 ml hoặc 89,6 ml Câu 9: Cho từ từ đến dư dung dịch NaOH vào dung dịch chứa hỗn hợp gồm FeCl 2 , AlCl 3 , CuCl 2 thì thu được kết tủa A. Cho từ từ dung dịch NH 3 đến dư vào kết tủa A thì thu được kết tủa B. Nung B trong không khí đến khối lượng không đổi thì được chất rắn C. Chất rắn C chứa: A. CuO, Fe 2 O 3 . B.FeO C.CuO, Fe 2 O 3 , Al 2 O 3 D. Fe 2 O 3 Câu 10: Cho khí CO dư đi qua hỗn hợp gồm CuO, Al 2 O 3 , MgO (nung nóng). Khi phản ứng xảy ra hoàn toàn thu được chất rắn gồm : A. Cu, Al 2 O 3 , Mg. B. Cu, Al, Mg. C. Cu, Al 2 O 3 , MgO. D. Cu, Al, MgO. Câu 11: Hiện tượng xảy ra khi cho từ từ đến dư dung dịch NaOH vào dung dịch AlCl 3 là: A. Kết tủa keo trắng xuất hiện và tăng dần sau đó tan dần và tan hết B. Kết tủa keo trắng xuất hiện rồi tan ngay C. Thấy có kết tủa đỏ nâu xuất hiện D. Kết tủa xuất hiện và tăng dần Câu 12: Tách Ag ra khỏi hỗn hợp bột gồm Ag, Al, Cu, Fe với khối lượng Ag không đổi, có thể dùng chất nào sau đây ? A. Dung dịch CuCl 2 dư B. Dung dịch muối sắt (III) dư C. Dung dịch muối sắt (II) dư D. Dung dịch AgNO 3 dư Trang 1/2 - Mã đề thi 209 Câu 13: Để nhận biết ion NO 3 - người ta thường dùng Cu và dung dịch H 2 SO 4 loãng và đun nóng, bởi vì: A. tạo ra khí có màu nâu. B. tạo ra khí không màu hóa nâu trong không khí. C. tạo ra dung dịch có màu vàng. D. tạo ra kết tủa có màu vàng. Câu 14: Cho 200 ml dung dịch AlCl 3 1,5M tác dụng với V lít dung dịch NaOH 0,5M. Lượng kết tủa thu được là 15,6 gam. Giá trị lớn nhất của V là: A. 1,2 B. 2,4 C. 1,8 D. 2 Câu 15: Cho 50 ml dung dịch FeCl 2 1M vào dung dịch AgNO 3 dư, khối lượng chất rắn thu được sau phản ứng là: A. 14,35g. B. 19,75g. C. 18,15g. D. 15,75g. Câu 16: Thuốc thử nào sau đây được dùng để nhận biết các dung dịch muối NH 4 Cl, FeCl 2 , FeCl 3 , MgCl 2 , AlCl 3 . A. dd H 2 SO 4 B. dd NaOH. C. dd HCl D. dd NaCl Câu 17: Trong công nghiệp, kim loại được điều chế bằng phương pháp điện phân hợp chất nóng chảy của kim loại đó là : A. Ag. B. Fe. C. Na. D. Cu. Câu 18: Khi điện phân NaCl nóng chảy (điện cực trơ), tại catôt xảy ra A. sự khử ion Na + . B. sự oxi hoá ion Na + . C. sự khử ion Cl - . D. sự oxi hoá ion Cl - . Câu 19: Hòa tan hoàn toàn 15,9g hỗn hợp gồm 3 kim loại Al, Mg và Cu bằng dung dịch HNO 3 thu được 6,72 lít khí NO và dung dịch X. Sau phản ứng thì thu được bao nhiêu gam muối khan? A. 53,1g B. 77,1g C. 17,7g D. 71,7g Câu 20: Để khử hoàn toàn 45 gam hỗn hợp gồm CuO, FeO, Fe 3 O 4 , Fe và MgO cần dùng vừa đủ 8,4lít CO ở (đktc). Khối lượng chất rắn thu được sau phản ứng là : A. 38g B. 39g C. 24g VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGUYỄN THỊ THẢO NGHIÊN CỨU VAI TRÒ CỦA MỘT SỐ GỐC AXIT AMIN ĐỐI VỚI TÍNH CHẤT CỦA -GALACTOSIDASE TỪ Bacillus subtilis VTCC-DVN-12-01 PHÂN LẬP Ở VIỆT NAM BẰNG KỸ THUẬT ep-RCA VÀ ĐỘT BIẾN ĐIỂM ĐỊNH HƯỚNG LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC HÀ NỘI - 2017 VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC Nguyễn Thị Thảo NGHIÊN CỨU VAI TRÒ CỦA MỘT SỐ GỐC AXIT AMIN ĐỐI VỚI TÍNH CHẤT CỦA -GALACTOSIDASE TỪ Bacillus subtilis VTCC-DVN12-01 PHÂN LẬP Ở VIỆT NAM BẰNG KỸ THUẬT ep-RCA VÀ ĐỘT BIẾN ĐIỂM ĐỊNH HƯỚNG Chuyên ngành: Hóa sinh học Mã số: 62 42 01 16 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Quyền Đình Thi Viện Công nghệ sinh học Hà Nội, 2017 LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới cố PGS TS Quyền Đình Thi, nguyên Trưởng phòng Công nghệ sinh học Enzyme, nguyên Phó Viện trưởng Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, định hướng nghiên cứu, tận tình hướng dẫn, biên tập thảo báo tạo điều kiện hóa chất, thiết bị kinh phí để hoàn thành Luận án Tôi xin chân thành cảm ơn TS Vũ Văn Hạnh, Trưởng phòng Các chất chức sinh học, Viện Công nghệ sinh học sửa thảo báo cho sử dụng số liệu khuôn khổ đề tài “Nâng cao hoạt tính xúc tác enzyme tái tổ hợp β-galactosidase kỹ thuật chép lỗi DNA vòng đột biến điểm trực tiếp” thuộc đề tài Nghiên cứu 2011-2012 Quỹ phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia TS làm chủ nhiệm Tôi xin cảm ơn GS TS Trương Nam Hải, nguyên Trưởng phòng Kỹ thuật di truyền, nguyên Viện trưởng Viện Công nghệ sinh học giúp đỡ hướng dẫn phân tích cấu trúc enzyme Tôi xin cảm ơn TS Đỗ Thị Tuyên, phụ trách phòng Công nghệ sinh học Enzyme, Viện Công nghệ sinh học giúp hoàn thành thủ tục để bảo vệ Luận án cấp Tôi xin cảm ơn tập thể Phòng CNSH Enzyme, tạo điều kiện thời gian, chia sẻ chuyên môn giúp đỡ tận tình suốt trình thực Luận án Tôi xin cảm ơn Phòng quản lý tổng hợp, Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ gen, cán sở đào tạo Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi sở vật chất, máy móc giúp đỡ hoàn thành thủ tục cần thiết trình làm nghiên cứu Cuối xin cảm ơn người thân gia đình bạn bè giúp đỡ, tạo điều kiện động viên suốt thời gian học tập Hà Nội, ngày 20 tháng 08 năm 2017 Tác giả Nguyễn Thị Thảo i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây công trình nghiên cứu số kết cộng tác với cộng khác; Các số liệu kết trình bày luận văn án trung thực, phần công bố tạp chí khoa học chuyên ngành với đồng ý cho phép đồng tác giả; Phần lại chưa công bố công trình khác Hà Nội, ngày 20 tháng 08 năm 2017 Tác giả Nguyễn Thị Thảo ii CÁC TỪ VIẾT TẮT bp BOD BSA cfu COD CS DNA ep-RCA Gal Glc GHF GOS IPTG kb kDa M PCR oNP oNPG pNPG/pNP-gal pNP-fuc rpm SDS-PAGE SOC TIM TLC TE TBE TEMED v/v w/v WT Base pair (cặp bazơ) Biochemical oxygen demand (Nhu cầu oxy sinh hóa) Bovine serum albumin (Albumin huyết bò) Colony forming unit (Đơn vị xác định số lượng tế bào riêng rẽ vi khuẩn nấm) Chemical oxygen demand (Nhu cầu oxy hóa học) Cộng Deoxyribonucleic acid (Axit deoxyribonucleic) Error prone rolling circle amplification (Sao chép vòng tạo lỗi) Galactose (đường galactozơ) Glucose (đường glucozơ) Glycoside hydrolase family (Họ enzym thủy phân liên kết glycozit) Galactose-oligossacharide Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside Kilo base (Đơn vị đo kích thước phân tử ADN) Kilo Dalton (Đơn vị đo khối lượng phân tử protein) Marker (Thang chuẩn) Polymerase chain reaction (Phản ứng chuỗi trùng hợp) Ortho-Nitrophenyl Ortho-Nitrophenyl--D-galactopyranoside para-Nitrophenyl--D-galactopyranoside para-Nitrophenyl--D-fucopyranoside Round per minute (Vòng/phút) Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (Điện di gel polyacrylamit có bổ sung sodium dodecyl sulfate) Super optimal broth (Môi trường giàu dinh dưỡng cho vi khuẩn) Triose-phosphate isomerase Thin-layer chromatography (Sắc ký mỏng) Tris EDTA Tris boric acid EDTA N,N,N’,N’-Tetramethylethylendiamine Volume/volume (Thể tích/thể tích) Weight/volume VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGUYỄN THỊ THẢO NGHIÊN CỨU VAI TRÒ CỦA MỘT SỐ GỐC AXIT AMIN ĐỐI VỚI TÍNH CHẤT CỦA β-GALACTOSIDASE TỪ Bacillus subtilis VTCC-DVN-12-01 PHÂN LẬP Ở VIỆT NAM BẰNG KỸ THUẬT ep-RCA VÀ ĐỘT BIẾN ĐIỂM ĐỊNH HƯỚNG Chuyên ngành: Hóa sinh học Mã số: 62 42 01 16 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội - 2017 Công trình hoàn thành tại: Viện Công nghệ sinh học - Viện Hàn lâm KH&CN Việt Nam Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Quyền Đình Thi Viện Công nghệ sinh học Phản biện 1: ……………………………………… Phản biện 2: ……………………………………… Phản biện 3: ……………………………………… Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án phiên thức Họp tại: Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm KH&CN Việt Nam 18 Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội Vào hồi , ngày tháng năm 201 Có thể tìm hiểu luận án tại: - Thư viện Quốc gia - Thư viện Viện Công nghệ sinh học - Webside: http://luanvan.moet.gov.vn MỞ ĐẦU Đặt vấn đề β-Galactosidase (hay gọi lactase), thuộc nhóm enzyme chuyển hóa saccharide, cắt gốc β-D-galactose từ đầu không khử β-galactoside galactoside poly- oligosaccharide sản phẩm chuyển hóa bậc hai Enzyme phổ biến tự nhiên tìm thấy vi sinh vật, thực vật, động vật người Trong đó, β-galactosidase sinh tổng hợp chủ yếu từ vi sinh vật nấm men, nấm mốc vi khuẩn nguồn enzyme có giá trị thương mại so với từ thực vật động vật dễ thao tác, tốc độ sinh trưởng nhanh suất tổng hợp cao β-Galactosidase ứng dụng nhiều y dược, môi trường, công nghệ sinh học đặc biệt công nghiệp chế biến sữa Với 75% dân số giới thiếu hụt enzyme lactase để phân giải lactose sữa, nên xem ứng dụng quan trọng β-galactosidase ngành công nghiệp Ngoài βgalactosidase bổ sung vào trình lên men bơ sữa để tránh kết tinh lactose nhiệt độ thấp tăng độ cho sản phẩm Đặc biệt gần đây, β-galactosidase khai thác mạnh vào việc sản xuất thực phẩm chức tổng hợp galacto-oligosaccharide (GOS) nhờ hoạt tính chuyển gốc glycosyl trình thủy phân lactose sữa để tạo thành oligosaccharide GOS sử dụng nguồn thức ăn không tiêu hóa (prebiotic) để kích thích hệ vi khuẩn hữu ích diện đường ruột Để đáp ứng nhu cầu ngành công nghiệp này, β-galactosidase từ nhiều nguồn vi sinh vật nghiên cứu khai thác Trong số β-galactosidase từ B subtilis ý khả hoạt động tối ưu khoảng pH 6-7, bền nhiệt độ 30-40°C thích hợp cho ứng dụng thủy phân lactose sữa sản phẩm chế biến khác từ sữa Đây enzyme có tiềm để ứng dụng số lĩnh vực khác B subtilis biết chủng an toàn sử dụng rộng rãi công nghiệp thực phẩm Bên cạnh đó, để chủ động việc ứng dụng lĩnh vực ứng dụng, bên cạnh việc sàng lọc tuyển chọn vi sinh vật sinh tổng hợp enzyme có hiệu suất xúc tác cao tính chất mong đợi, phát triển công nghệ DNA cho phép chủ động việc cải biến protein/enzyme để nâng cao hiệu suất xúc tác phát triển tính chất enzyme Phương pháp tạo đột biến ngẫu nhiên in vitro in vivo với việc lựa chọn di truyền với phương pháp sàng lọc nhanh, công cụ mạnh để phát triển enzyme với đặc tính so với ban đầu Từ lí trên, tiến hành nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu vai trò số gốc axit amin tính chất β-galactosidase từ Bacillus