NHIỄM SẮC THỂ NHƯỜI

Trình bày được các nguyên tắc kĩ thuật làm tiêu bản nhiễm sắc thể người 2.. Trình bày được các tiêu chuẩn cơ bản để xếp loại bộ nhiễm sắc thể người 3.. I- NHIỄM SẮC THỂ NGƯỜI 1.1 Nguyên

SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG

CHƯƠNG II Bài 7:Nhiễm sắc thể người

và bệnh học nhiễn sắc thể

Mục tiêu

1 Trình bày được các nguyên tắc kĩ thuật làm tiêu bản nhiễm sắc thể người

2 Trình bày được các tiêu chuẩn cơ bản để xếp

loại bộ nhiễm sắc thể người

3 Trình bày được nội dung của các loại bệnh lý

nhiễm sắc thể

• I Nhiễm sắc thể người

• II Bệnh lý nhiễm sắc thể(đột biến)

Ở người bình thường, mỗi tế bào lưỡng bội (2n)

(diploid) mang 46 nhiễm sắc thể (NST)

chia 23 cặp, trong đó có 22 cặp NST thường

(autosome) và 1 cặp NST giới tính (sex

chromosome)

Tinh trùng và trứng được hình thành qua quá trình

giảm phân (meiosis) mang bộ NST đơn bội (n) với 23 NST.

I- NHIỄM SẮC THỂ NGƯỜI

1.1 Nguyên tắc kỹ thuật để làm tiêu bản nhiễn sắc thể người 1.2 Xếp bộ nhiễn sắc thể người (lập Karyotyp)

BỘ NST Ở NGƯỜI 2n =46NST

Phương pháp trực tiếp Phương pháp gián tiếp

Dùng các mô gồm

nhiều tế bào đang

phân chia như tủy

sương, mô của bào

tha, mô của tinh

hoàn, các khối u ác

tính (đối với tế bào

thực vật dùng chóp

rễ, mầm cây) làm

tiêu bản

Phải trải qua một qua trình nuôi cấy để cho tế bào phân chia nhiều lần rồi mới đem làm tiêu bản Tế bào hay được dùng nhất trong phương pháp gián tiếp là bạch cầu lympho máu ngoại vi, vì mẫu vật dễ lấy

và phương pháp tương đối dơn giản Ngoài ra còn có thể cấy các mô bào thai, da, cân mạc, tế bào từ trong nước ối

1.1 NGUYÊN TẮC KỸ THUẬT ĐỂ LÀM TIÊU BẢN NHIỄM SẮC THỂ NGƯỜI

Có 2 loại phương pháp

Một số nguyên tắc chung

1 Những mô dùng để nguyên cứu NST phải đang phát triển mạnh gồm nhiều tế bào đang phân chia

Đối với những mô gồm tế bào ít phân chia hoặc không phân chia phải

nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng đầy đủ ở nhiệt độ 37 độ C để kích thích cho chúng phân chia rồi mới đem đi nghiên cứu

2 Làm cho tế bào đang phân chia dừng lại ở kỳ giữa vì NST ở kỳ này có dạng điển hình nhất

Hóa chất có tác động là Colchicin, một loại hoạt chất của cây Thu thủy tiên(Colchicum autumnale) hoặc một số chất tổng hợp như colcemid Đặc tính của những chất này là phá hủy thoi phân bào Do đó nhiễn sắc thể không thể di chuyển về hai cực tế bào; các đôi nhiễn sắc tử vẫn dính với nhau taaij phần tâm Những hóa chất này còn làm cho nhiễm sắc thể co ngắn lại., dầy lên,

dễ quan sát.

3 Dùng sốc nhược trương để làm

trương tế bào, phá vỡ tế bào

Màng tế bào vỡ làn cá nhiễm sắc thể

ở kỳ giữa phân tán, không xếp chồng

lên nhau nhờ đó có thể quan sát õ ừng chiếc Dung dịch nhược trương thường được dùng là KCL 0.075M hoặc natri citrat 1%

4 định hình bằng hỗn hợp Carnoy( 3

phần methaanol + 1 phần axit axetic)

hoặc hỗn hợp alcol-clorofoc-acid axetic

tỉ lệ 6:3:1

5 Nhuộm tiêu bản: nhuộn bằng các loại phẩm nhuộm nhân

Các chất thường dùng là gieemssa, hematoxylin, orcein acetic, carmine acetic .hoặc sử lý tiêu bản bằng phương pháp nhuộm băng

1.2 Xếp bộ nhiễn sắc thể

người(lập Karyotyp)

❧ - Quan sát tiêu bản NST ở dưới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 1000 lần Tìm các tế bào ở kỳ giữa có các NST dàn đều để đếm số lượng NST trong tế bào đó Trung bình cho mỗi mẫu phải đánh giá ít nhất 30 cụm kỳ giữa, trong trường hợp cần thiết phải phân tích 100 cụm kỳ giữa.

❧ Phương pháp đánh giá tiêu bản NST là chung cho mọi phương pháp nuôi cấy Để đánh giá NST có các bước cơ bản sau đây:

❧ - Phát hiện và phân tích các rối loạn cấu trúc NST trong khi đếm số lượng NST.

❧ - Lập karyotyp.

❧ + Chụp ảnh một số cụm kỳ giữa, in phóng ảnh, cắt rời từng chiếc NST, sau đó xếp từng cặp NST theo quy định quốc tế Phương pháp xếp bộ NST như trên được gọi là phương

pháp lập karyotyp.

❧ + Phân tích karyotyp ở kính hiển vi với phần mềm đặc hiệu của máy vi tính.

❧ - Tổng hợp các đánh giá ở kính hiển vi và các phân tích

karyotyp kết hợp với các thăm khám lâm sàng, người phụ trách xét nghiệm cho kết luận về bộ NST người được xét nghiệm.

Tiêu chuẩn để xắp xếp bộ nhiễm sắc thể người

❧Chiều dài tương đối của nhiễm sắc thể

Đó là tỉ lệ giữa chiều dài của một NST nào đó so với chiều dài tổng cộng của bộ NST đơn bội có chứa NST X, tính theo phần

nghìn trên cùng một tế bào(kí hiệu là Lr)

❧ Vị trí của phần tâm động

Căn cứ vào vị trí của phần tâm mà phân ra các loại NST tâm

giữa, nhiễm sắc thể tâm gần giữa, nhiễm sắc thể tâm gần đầu

và nhiễm sắc thể tâm đầu

r =p/q p:chiều dài nhánh ngắn

q:chiều dài nhánh dài

Phân loại nhiễm sắc thể theo vị trí phần tâm

Vị trí tâm động r Nhóm NST Kí hiệu

Chính giữa

Vùng giữa

Tâm gần giữa

Gần mút (cận)

Tâm cận

1 1,1-1,7 1,8-3,0 3,0-7,0

>7,0

Rất cân tâm Cân tâm Tâm lệch giữa Tâm cận mút Tâm mút

M M Sm Standards

t

❧ Ngoài ra còn có thể căn cứ vào vị trí của eo thứ hai, có vệ tinh hay không và gần đây căn cứ vào các bảng đặc trưng của từng nhiễm sắc thể

Các quy định quốc tế về xếp bộ nhiễm sắc thể người

Tại hội nghị tổ chức ở

Denver (1960), ở London

(1963) và ở Chicago

(1966), các nhà di truyền

tế bào học đã thống nhất

với nhau:

46 NST người được xếp

thành 7 nhóm, ký hiệu là

A, B, C, D, E, F và G, theo

3 tiêu chuẩn đã nêu ở phần

trên.

❧ Nhóm A có 3 cặp NST có kích thước lớn nhất, gọi tên

từ số 1 đến số 3 Cặp số 1: tâm giữa, cặp số 2: tâm lệch, cặp số 3: tâm giữa

nhóm này có kích thước lớn và không phân biệt được về chiều dài Chúng đều có tâm lệch

các NST có chiều dài trung bình NST X cũng được xếp vào nhóm này Tất cả các NST thuộc nhóm C đều tâm lệch, khó phân biệt giữa chúng với nhau

❧ Nhóm D có 3 cặp NST số 13, 14 và 15 Tất cả các NST thuộc nhóm này có kích thước trung bình và đều là NST tâm đầu, có vệ tinh gắn vào nhánh ngắn Khó phân biệt giữa chúng với nhau

tương đối ngắn NST số 16 có tâm giữa, còn cặp số 17

và 18 có tâm lệch

có kích thước ngắn và đều có tâm giữa

thước ngắn, đều có tâm đầu và có vệ tinh NST Y cũng được xếp vào nhóm này Hai chromatid của NST Y xếp song song hơn so với NST của nhóm G NST Y không

có vệ tinh

THÂN ÁI CHÀO TẠM BIỆT CHÚC CÁC BẠN HỌC TỐT thanhnamthptka@gmail.com