Nuôi cá rô phi vùng Đồng Bằng sông Cửu Long: Sản lượng: 60.000 tấn (60% tổng sản lượng cá rô phi ở Việt Nam). Cá rô phi (Oreochromis niloticus) thường được nuôi trong ao đất trong khi cá rô phi đỏ (Oreochromis mossambicus x Oreochromis niloticus) thường được nuôi bè trên sông Hậu và Sông Tiền phổ biến ở các tỉnh: An Giang, Đồng Tháp, Vĩnh Long, Tiền Giang 25082015 Dias 3 Giới thiệu Cá rô phi chủ yếu tiêu thụ nội địa, khoảng 480 tấn được xuất khẩu sang Châu Âu và Mỹ năm 2010. Nhiều loại thuốc và hóa chất được sử dụng để phòng và trị bệnh trong nuôi cá tra và cá rô phi trong đó sulfamethoxazole (SMX) và trimethoprim (TMP) được sử dụng phổ biến (Rico et al., 2013; Thinh et al., 2014; Phu et al., 2015) Nghiên cứu về tồn lưu và dược động lực học của kháng sinh nhóm sulfonamide và TMP được thực hiện chủ yếu trên các loài cá như cá Hồi (Salmo salar), cá rô phi (Oreochromis niloticus), cá bơn (Paralichthys dentatus), cá chép walleyes (Sander vitreus) và cá nheo Mỹ sử dụng sản phẩm thương mại Romet30 (sulfadimethoxine and ormetoprim). IndNuôi cá rô phi vùng Đồng Bằng sông Cửu Long: Sản lượng: 60.000 tấn (60% tổng sản lượng cá rô phi ở Việt Nam). Cá rô phi (Oreochromis niloticus) thường được nuôi trong ao đất trong khi cá rô phi đỏ (Oreochromis mossambicus x Oreochromis niloticus) thường được nuôi bè trên sông Hậu và Sông Tiền phổ biến ở các tỉnh: An Giang, Đồng Tháp, Vĩnh Long, Tiền Giang 25082015 Dias 3 Giới thiệu Cá rô phi chủ yếu tiêu thụ nội địa, khoảng 480 tấn được xuất khẩu sang Châu Âu và Mỹ năm 2010. Nhiều loại thuốc và hóa chất được sử dụng để phòng và trị bệnh trong nuôi cá tra và cá rô phi trong đó sulfamethoxazole (SMX) và trimethoprim (TMP) được sử dụng phổ biến (Rico et al., 2013; Thinh et al., 2014; Phu et al., 2015) Nghiên cứu về tồn lưu và dược động lực học của kháng sinh nhóm sulfonamide và TMP được thực hiện chủ yếu trên các loài cá như cá Hồi (Salmo salar), cá rô phi (Oreochromis niloticus), cá bơn (Paralichthys dentatus), cá chép walleyes (Sander vitreus) và cá nheo Mỹ sử dụng sản phẩm thương mại Romet30 (sulfadimethoxine and ormetoprim). Ind
8/25/2015 Tồn lưu sulfamethoxazole trimethoprim cá tra cá rô phi đỏ Trần Minh Phú1,2, Marie-Louise Scippo3, Nguyễn Thanh Phương1 , Cao Thị Kiều Tiên 1, Cô Hồng Sơn and Anders Dalsgaard2 (tmphu@ctu.edu.vn) College of Aquaculture and Fisheries, Can Tho University, Viet Nam Faculty of Health and Medical Sciences, University of Copenhagen, Denmark Faculty of Veterinary Medicine, University of Liège, Belgium National Agro-Forestry-Fisheries Quality Assurance Department, Branches 6, Can Tho, Vietnam Giới thiệu Cá tra loài cá nuôi phổ biến vùng ĐBSCL từ năm 2000 Năm 2013 Diện tích: ~5400 Năng suất: 350-500 t/ha/vụ Sản lượng: ~1,2 triệu Sản lượng phi lê xuất khẩu: ~640000 Mật độ nuôi cao, thay nước nhiều dịch bệnh sử dụng thuốc hóa chất Tồn lưu cá, ao nuôi môi trường? 8/25/2015 Giới thiệu Nuôi cá rô phi vùng Đồng Bằng sông Cửu Long: Sản lượng: 60.000 (60% tổng sản lượng cá rô phi Việt Nam) Cá rô phi (Oreochromis niloticus) thường nuôi ao đất cá rô phi đỏ (Oreochromis mossambicus x Oreochromis niloticus) thường nuôi bè sông Hậu Sông Tiền phổ biến tỉnh: An Giang, Đồng Tháp, Vĩnh Long, Tiền Giang Cá rô phi chủ yếu tiêu thụ nội địa, khoảng 480 xuất sang Châu Âu Mỹ năm 2010 Nhiều loại thuốc hóa chất sử dụng để phòng trị bệnh nuôi cá tra cá rô phi sulfamethoxazole (SMX) trimethoprim (TMP) sử dụng phổ biến (Rico et al., 2013; Thinh et al., 2014; Phu et al., 2015) Indføj ”Sted og dato” Nghiên cứu tồn lưu dược động lực học kháng sinh nhóm sulfonamide TMP thực chủ yếu loài cá cá Hồi (Salmo salar), cá rô phi (Oreochromis niloticus), cá bơn (Paralichthys dentatus), cá chép walleyes (Sander vitreus) cá nheo Mỹ sử dụng sản phẩm thương mại Romet30 (sulfadimethoxine and ormetoprim) 25/08/2015 Dias Mục tiêu nội dung nghiên cứu • Chuẩn hóa phương pháp phân tích tồn lưu SMX TMP thịt cá sử dụng sắc ký lỏng khối phổ LC-MS/MS • Xác định thời gian tồn lưu hai loại kháng sinh cá tra cá rô phi đỏ Indføj ”Sted og dato” 8/25/2015 Phương pháp nghiên cứu • Cá tra (40,3 ± 7,2 g) cá rô phi đỏ (10,7 ± 4,5 g) bố trí vào bể 500 L với mật độ 50 con/m3 cho cá tra 100 con/m3 cho cá rô phi đỏ • Cá cho ăn thức ăn chứa kháng sinh SMX (1000 mg/kg thức ăn) TMP (200 mg/kg thức ăn) năm ngày theo dẫn sản phẩm • Thu mẫu cá tra, da cá tra mẫu hổn hợp thịt cá rô phi đỏ • Mẫu cá thu trước cho cá ăn kháng sinh, cho ăn kháng sinh (ngày ngày 5) sau ngưng cho cá ăn thức ăn có chứa kháng sinh 3, 7, 15 30 ngày Cho ăn thức ăn chứa Ngưng cho ăn thức ăn chứa kháng sinh SMX TMP Indføj ”Sted og dato” 15 30 Phương pháp nghiên cứu • Nhằm mục đích so sánh đào thải kháng sinh thí nghiệm bể nuôi thực địa, thí nghiệm tồn lưu kháng sinh SMX TMP thực bè cá rô phi đỏ Thốt Nốt, Cần Thơ • Cá rô phi đỏ (~117g) thả nuôi bè với mật độ 100 con/m3 Cá kiểm tra tồn lưu kháng sinh SMX TMP trước thí nghiệm • Thu mẫu thực tương tự thí nghiệm bể • Phân tích tồn lưu SMX TMP mẫu cá thực phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (Liquid Chromatography coupled to Mass Spectrometry, LC-MS/MS) (Zhao and Stevens, 2012) • Phương pháp phân tích tối ưu hóa theo tiêu chuẩn Châu Âu, Commission Decision No 2002/657/EC Indføj ”Sted og dato” • 25/08/2015 Dias 8/25/2015 Kết Chuẩn hóa phương pháp • Độ lặp lại (repeatability), độ ổn định (within-laboratory reproducibility) độ thu hồi (recovery) có hệ số biến động thấp Độ lặp lại Mean conc (µg/kg) CV (%) 23.1-44.9-70.5 4.8-3.8-5.0 48.1-95.3-140 3.1-3.2-3.3 Mức gây nhiễm (µg/kg) TMP 25-50-75 SMX 50-100-150 Độ ổn định Mean conc (µg/kg) CV (%) 23.2-46.7-70.7 4.1-3.8-4.2 47.5-96.4-144 4.3-2.8-2.4 Độ thu hồi Mean (%) CV (%) 92.6-93.3-94.2 4.1-3.8-4.2 95.0-96.4-96.2 4.3-2.4-2.4 CCα (µg/kg) 49.6 100.1 • Độ sai số (decision limit, CCα) thấp • Giới hạn phát (Limit of detection, LOD) cho TMP SMX mẫu cá µg/kg (signal-to-noise ratio lớn 100) • Giới hạn định lượng (Limits of quantification, LOQ) cho TMP SMX 12.5 25 µg/kg Indføj ”Sted og dato” Độ tuyến tính (Linearity) 600 300 (a) y1 = 5.23x - 10.6 R² = 0.9995 y2 = 3.49x + 14.4 R² = 0.9994 400 Response Response 500 300 200 Fish muscle Solvent 100 y1 = 1.32x + 0.874 R² = 0.9992 (b) 250 y2 = 1.12x + 3.11 R² = 0.9997 200 150 100 Fish muscle Solvent 50 0 20 40 60 80 100 120 50 100 150 200 250 TMP concentration (µg/kg) SMX concentration (µg/kg) Đường chuẩn xây dựng cho phân tích trimethoprim (a) and sulfamethoxazole (b) dung môi (methanol) mẫu thịt cá tra • Tỷ lệ hệ số góc đường chuẩn cho thấy có ảnh hưởng thấp mẫu • Hệ số hồi quy tương quan (R2) > 0.99 Indføj ”Sted og dato” • Kết từ sắc ký đồ cho thấy nhiễu mẫu 25/08/2015 Dias 8/25/2015 Tồn lưu SMX TMP thịt (a) da (b) cá tra µg/kg 1000 SMX TMP thức ăn TMP (a) 800 SMX mg/kg TMP-EU-MRL (50 µg/kg) SMX-EU-MRL (100 µg/kg) 600 400 SMX 674±10,1 TMP 113±11,0 200 D0 D1 D5 D3 µg/kg 1000 D7 D15 TMP Sau 15 ngày ngưng cho ăn thức ăn chứa kháng sinh, tồn lưu SMX TMP da cá tra thấp giới hạn cho phép (MRL) Cộng Đồng Châu Âu SMX 800 (b) TMP-EU-MRL (50 µg/kg) SMX-EU-MRL (100 µg/kg) 600 400 Indføj ”Sted og dato” 200 D0 D1 D5 D3 D7 D15 Tồn lưu SMX TMP cá rô phi đỏ µg/kg TMP 1000 SMX 800 TMP-EU-MRL (50 µg/kg) SMX-EU-MRL (100 µg/kg) 600 400 200 D0 D1 D5 D3 D7 D15 Sau ngày ngày ngưng cho ăn thức ăn có chứa kháng sinh, tồn lưu SMX TMP cá rô phi đỏ thấp giới hạn cho phép theo tiêu chuẩn Châu Âu Thí nghiệm bè cho kết tương tự Indføj ”Sted og dato” Năm 2013, hệ thống cảnh báo tồn lưu thuốc hóa chất vi sinh thực phẩm nhập vào Châu Âu cho biết có trường hợp phát nhiễm kháng sinh trimethoprim (76 323 µg/kg) sulfadiazine (199 µg/kg) cá rô phi nhập từ Việt Nam (RASFF, 2014) 8/25/2015 Kết luận Phương pháp phân tích sắc ký lỏng khối phổ LC-MS/MS chuẩn hóa dùng cho phân tích sulfamethoxazole trimethoprim thịt cá Thời gian tồn lưu SMX TMP cá tra xác định 15 ngày Thời gian tồn lưu SMX TMP cá rô phi đỏ xác định ngày Indføj ”Sted og dato” Cảm tạ Đề tài tài trợ dự án Nuôi trồng thủy sản theo tiêu chuẩn thương mại, SEAT “Sustaining Ethical Aquaculture Trade” (FP7, 222889; www.seatglobal.eu) tài trợ cộng đồng Châu Âu Giáo viên hướng dẫn: Anders Dalsgaard: adal@sund.ku.dk Nguyễn Thanh Phương: ntphuong@ctu.edu.vn Marie-Louise Scippo: mlscippo@ulg.ac.be Indføj ”Sted og dato” Chân thành cảm ơn!! ... định thời gian tồn lưu hai loại kháng sinh cá tra cá rô phi đỏ Indføj ”Sted og dato” 8/25/2015 Phương pháp nghiên cứu • Cá tra (40,3 ± 7,2 g) cá rô phi đỏ (10,7 ± 4,5 g) bố trí vào bể 500 L với... Giới thiệu Nuôi cá rô phi vùng Đồng Bằng sông Cửu Long: Sản lượng: 60.000 (60% tổng sản lượng cá rô phi Việt Nam) Cá rô phi (Oreochromis niloticus) thường nuôi ao đất cá rô phi đỏ (Oreochromis... nuôi thực địa, thí nghiệm tồn lưu kháng sinh SMX TMP thực bè cá rô phi đỏ Thốt Nốt, Cần Thơ • Cá rô phi đỏ (~117g) thả nuôi bè với mật độ 100 con/m3 Cá kiểm tra tồn lưu kháng sinh SMX TMP trước