các bài thực hành của môn dược liệu hệ cao đẳng giúp các bạn dễ học và bám sát thực tế để thi tốt nghiệp và các bài thực hành trong suốt quá trình học tại trường cũng như muốn ôn lại kiến thức đã quên một cách nhanh và hiệu quả nhất
Dược liệu CHIẾT XUẤT VÀ ĐỊNH TÍNH GLYCOSID CHIẾT XUẤT - Lấy 5g trúc đào ( xoay nhuyễn ) cho vào bình nón 100ml + 30ml ethanol ( C2H5OH ) 25% ngâm 24h - Rút dịch chiết ( giấy lọc ) phểu sau đem loại tạp - DC ( dịch chiết ) + 6ml ( ống đong ) Pb2+ lọc DL ( dịch lọc ) DC (1) - DC (1) + thêm giọt tủa lọc tiếp không dừng lại - Loại bỏ Pb2+ thừa + 6ml Na+ lọc DC (2) - Cho vào bình lắng gạn DC (2) + 10ml CHCl3 làm lần ( lấy lớp ) - Chia DL làm cho vào ống nghiệm đem đun cách thủy bay đến khô ( K 15p ) ĐỊNH TÍNH - PHẢN ỨNG Keller – Kiliani + Cho 1ml ( 20 giọt ) Keller vào ống nghiệm cô cắn khuấy kĩ cho tan + 1ml Kiliani dọc theo thành ống nghiệm ( cho vào nhẹ nhàng) Dương tính ( mặt ngăn cách lớp thuốc thử có màu đỏ màu xanh khếch tán dần lên trên) - PHẢN ỨNG Liebermann – Burchard + Cho vào ống nghiệm có chứa 1ml DL + 1ml anhydrid acetic ( lắc ) + Để ống nghiệm vào cốc + 1ml acid sulfuric đđ ( nhỏ nhẹ theo thành ống ) Dương tính ( mặt ngăn cách lớp thuốc thử phía có màu Hồng tím phía vòng có màu xanh tới xanh chàm ) Hình ảnh minh họa - PHẢN ỨNG Baljet (Baljet + Baljet ) + Cho 1ml Baljet (10 giọt Baljet + 10 giọt Baljet ) vào ống nghiệm cắn lắc kỹ Dương tính có màu đỏ cam đậm so với ống chứng + Ống chứng ống chứa (Baljet + Baljet ) - PHẢN ỨNG Legal + Cho 3-4 giọt cồn 950 vào hòa tan cắn + Thêm vào – giọt NaOH 10% + vài giọt DD natri nitroprussiat 0,5% Dương tính xuất màu Đỏ Cam - PHẢN ỨNG Raymond – Marthoud + Cho 0,5ml meta-dinitrobenzen 1% cồn tuyệt đối vào ống nghiệm lại + thêm – giọt NaOH 10% cồn Dương tính xuất màu tím không bền CHUẨN BỊ - Dụng cụ : ống đong , phiểu lọc, ống nghiệm (5), ống nhỏ giọt, bếp cách thủy, giá đựng ống nghiệm, giấy lọc, cân, giấy lót cân, bình nón, cốc - Hóa chất: cồn 25% - 95% , CHCl3 , Pb , Keller – Kiliani, anhydrid acetic, acid sulfuric đđ , Baljet, NaOH 10% , natri nitroprussiat 0,5% , metadinitrobenzen 1% CHIẾT XUẤT – ĐỊNH LƯỢNG TINH DẦU TRONG DƯỢC LIỆU CHIẾT XUẤT - Sả bâm nhuyễn 400g + 400ml ED cho vào bình nón 1000ml lắp vào hệ thống chưng cất đun 2h ( hứng lấy tinh dầu khoảng 0,2- 2% ) - Đối với tinh dầu nặng nước + 0,5ml xilen để tinh dầu lên - 100g DL tươi = 25g DL khô Tính khối lượng Nếu Tỉ trọng 1 X= (a / b) x 100 X= ( a-c / b ) x 100 a : thể tích tinh dầu xilen b : khối lượng dược liệu tươi c : thể tích xilen X : khối lượng tinh dầu tính theo % ( tt/kl) Độ ẩm 75% ĐỊNH TÍNH - Tìm nước + Cho CuSO4 vào ống nghiệm : ống thử ống trắng ống thử + 5-10 giọt tinh dầu so sánh đen khác màu có nước ( kết có không ) - Tìm dầu mỡ + Chấm giọt tinh dầu lên giấy lọc đem hơ bay hết dầu mỡ ( có ghi + , không ghi - , vào kết ) - Tìm Alcol + Cho 5-10 giọt tinh dầu trực tiếp không chạm thành đậy nút gòn ( gói vài tinh thể fuschin ) vào đun cách thủy lâu 10 phút nút gòn nhuộm màu đỏ tinh dầu có alcol ( kết có không ) CHIẾT XUẤT – ĐỊNH TÍNH DƯỢC LIỆU CHỨA ALKALOID CHIẾT XUẤT Phương pháp chiết dung môi hữu môi trường kiềm ( PP ) Bách Bộ ( cắt nhuyễn 5g ) Cho vào bình nón có nắp đậy Kiềm hóa NH4OHđđ( vừa đủ ) + Thêm 20ml CHCl3 Đun 10p sôi cạn thêm 20ml CHCl3 đun sôi lọc ( kẹp tờ giấy theo núp bình nón tránh bật nắp ) Dịch CHCl3 Cho vào bình lắng H2SO4 2% (5ml x lần ) Cho vào bình lắng – rút dịch chiết lấy lớp Dịch nước acid Xong đem định tính Chiết nước acid ( PP ) - Cho vào bình nón 5g dược liệu Vông nem + 20ml H2SO4 2% đem đun 15 phút lọc dịch chiết ( akl/m , T1 , T2 ) dùng đũa thử PH ( NH4OH PH=10 – akl/m > akl/B ) cho vào bình lắng + 10ml CHCl3 (làm lần) lấy lớp - Dịch lọc cho tiếp vào bình lắng + 5ml H2SO4 2% (làm lần ) lấy lớp Rồi đem định tính với thuốc thử chung Chiết cồn acid (PP3) - Cho 5g tâm sen + 20ml cồn / acid đun 10 phút lọc dịch ( akl/m – tạp ) đem dịch cô cắn ( mục đích để cồn/acid bay ) sau + ED nóng đem lọc dịch lọc tinh khiết đem định tính với thuốc thử chung ĐỊNH TÍNH Lấy ống nghiệm cho vào ống + 2ml dịch nước acid +3 giọt thuốc thử Bouchardat + Valse-Mayer +++ Dragendorff ++++ Bertrand ++ Tối thiểu có ống kết tủa Akl (-) Dung dịch (+) dung dịch đục mờ không lắng xuống ( coi giọt đầu) (++) Dung dịch đục, Có tủa lắng xuống sau vài phút (+++) Có tủa lắng xuống ngay, Dung dịch đục thêm giọt thứ (++++) Có tủa nhiều Hager - CHIẾT XUẤT – ĐỊNH TÍNH DƯỢC LIỆU CHỨA TANIN CHIẾT XUẤT - Cho 1g Ngũ bội tủ vào bình nón 50ml + 30ml ED đun cách thủy 10 phút đem lọc nóng dịch lọc ĐỊNH TÍNH Phản ứng với dung dịch protein - Cho vào ống nghiệm 1ml dịch lọc + giọt TT gelatin/m tủa trắng đục dương tính ( có Tanin ) Phản ứng với muối kim loại nặng - Cho vào ống nghiệm ống 2ml dịch chiết thêm : + ống : giọt TT FeCl3 1% tủa xanh đen + ống : 1ml TT chì acetat 1% tủa trắng đục + ống : giọt TT đồng acetat 1% tủa nâu đỏ Phân biệt loại Tanin - Cho vào ống nghiệm ống 2ml dịch chiết thêm : Thủy phân Pyrogallic Không thủy phân Pyrocatechic Tủa xanh đen Tủa xanh rêu ống : giọt TT FeCl3 1% Tủa đỏ gạch ống : 1ml TT Stiasny( đun cách thủy 10p) Không tủa Không tủa Tủa trắng ngà ống : giọt nước brom xác định loại tanin dược liệu cho vào ống nghiệm 5ml dịch chiết có chứa loại tanin + 1ml Stiasny đun 10 phút đem lọc ( làm hết tủa ) lọc lấy dịch - Thử dịch phải nằm PH từ 5-6 cho – giọt NaOH 10% giấy quỳ chuyển màu PH 5- ( chưa tới ) Đem thử - Đem dịch lọc PH 5-6 chia làm ống nghiệm + ống : thêm vài giọt TT gelatin/m tủa trắng đục + ống : thêm giọt TT FeCl3 tủa xanh đen Kết luận dược liệu có Tanin pyrogallic - Tìm catechin tự dược liệu - cho vào ống nghiệm 5ml dịch chiết có chứa Tanin catechic + gelatin/m đem lọc tủa chưa thêm gelatin/m đến dịch không tủa - Đem dịch lọc chia làm ống nghiệm + ống : thêm giọt TT Stiasny Tủa vón – đỏ gạch + ống : thêm giọt TT FeCl3 Tủa xanh rêu Dược liệu có catechin tự ... tiếp không chạm thành đậy nút gòn ( gói vài tinh thể fuschin ) vào đun cách thủy lâu 10 phút nút gòn nhuộm màu đỏ tinh dầu có alcol ( kết có không ) CHIẾT XUẤT – ĐỊNH TÍNH DƯỢC LIỆU CHỨA ALKALOID... tủa trắng đục + ống : thêm giọt TT FeCl3 tủa xanh đen Kết luận dược liệu có Tanin pyrogallic - Tìm catechin tự dược liệu - cho vào ống nghiệm 5ml dịch chiết có chứa Tanin catechic + gelatin/m... thứ (++++) Có tủa nhiều Hager - CHIẾT XUẤT – ĐỊNH TÍNH DƯỢC LIỆU CHỨA TANIN CHIẾT XUẤT - Cho 1g Ngũ bội tủ vào bình nón 50ml + 30ml ED đun cách thủy 10 phút đem lọc nóng dịch lọc ĐỊNH TÍNH