Nghiên cứu xác định một số thuốc giảm glucose máu trộn lẫn trong các chế phẩm thuốc đông dược bằng sắc ký mỏng hiệu năng cao

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ TÂM NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC GIẢM GLUCOSE MÁU TRỘN LẪN TRONG CÁC CHẾ PHẨM THUỐC ĐÔNG DƢỢC BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC HÀ NỘI - 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM THỊ TÂM NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC GIẢM GLUCOSE MÁU TRỘN LẪN TRONG CÁC CHẾ PHẨM THUỐC ĐÔNG DƢỢC BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG HIỆU NĂNG CAO CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 60720410 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh 2.Ths.NCS Đào Thị Cẩm Minh HÀ NỘI - 2017 LỜI CẢM ƠN Lời xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh, người thầy hướng dẫn bảo tận tình cho suốt trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn NCS.Ths Đào Thị Cẩm Minh – giảng viên khoa Dược trường Đại học Y-Dược Huế, người động viên, giúp đỡ nhiều trình thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn tới PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà - giảng viên trường Đại học Dược Hà Nội PGS.TS Lê Văn Vũ – trung tâm Khoa học vật liệu, khoa Vật lý trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội giúp hoàn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn tới Ban giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau Đại học, thầy cô giáo, kỹ thuật viên môn Hoá phân tích - Độc chất - trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho trình học tập nghiên cứu Cuối muốn gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè đồng nghiệp bên cạnh ủng hộ, khích lệ tạo động lực cho trình học tập nghiên cứu Hà Nôi, ngày tháng năm 2017 Học viên Phạm Thị Tâm MỤC LỤC Lời cảm ơn Mục lục Danh mục kí hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình ảnh Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan đối tượng nghiên cứu 1.1.1.Các thực phẩm bảo vệ sức khoẻ thuốc thảo dược hỗ trợ điều trị điều trị tiểu đường 1.1.2 Cấu trúc, tính chất lý hoá tác dụng metformin, glibenclamid 1.2 Tổng quan phương pháp nghiên cứu 1.2.1 Sắc ký lớp mỏng 1.2.2 Sắc ký lớp mỏng hiệu cao 1.2.3 Phương pháp quang phổ Raman 10 1.3 Một số nghiên cứu định tính, định lượng nhóm thuốc giảm glucose máu trộn chế phẩm từ dược liệu 14 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị đối tượng nghiên cứu 19 2.1.1 Nguyên vật liệu dùng nghiên cứu 19 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 19 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 20 2.2 Phương pháp nghiên cứu 20 2.2.1 Xây dựng quy trình định tính, định lượng metformin HCl glibenclamid trộn lẫn chế phẩm đông dược HPTLC 20 2.2.2 Thẩm định phương pháp 22 2.2.3 Ứng dụng phương pháp HPTLC để phân tích mẫu thực 23 2.2.4 Bước đầu khảo sát điều kiện phát glibenclamid TLCSERS 23 2.3 Phương pháp xử lý số liệu 25 Chƣơng 3: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 26 3.1 Xây dựng thẩm định phương pháp HPTLC 26 3.1.1 Khảo sát lựa chọn điều kiện HPTLC 26 3.1.2 Khảo sát điều kiện xử lý mẫu HPTLC 27 3.1.3 Thẩm định phương pháp HPTLC 30 3.1.4 Ứng dụng phương pháp HPTLC để phân tích mẫu thực 36 3.2 Bước đầu xây dựng phương pháp phát glibenclamid TLCSERS 40 Chƣơng 4: BÀN LUẬN 49 4.1 Phương pháp HPTLC 49 4.1.1 Lựa chọn phương pháp phân tích 49 4.1.2 Lựa chọn xử lý mẫu 50 4.1.3 Thẩm định phương pháp 51 4.1.4 Ứng dụng phương pháp HPTLC để phân tích mẫu thực 52 4.2 Phương pháp TLC-SERS 53 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT AOAC Hiệp hội nhà hóa học phân tích thức (Association of Official Analytical Chemists) DMF N,N-dimethylformamid HPTLC Sắc kí lớp mỏng hiệu cao (High Performance Thin Layer Chromatography) HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) LOD Giới hạn phát (Limit of detection) LOQ Giới hạn định lượng (Limit of quantitation) RSD Độ lệch chuẩn tương đối (Relative Standard Deviation) SERS Tán xạ Raman tăng cường bề mặt (Surface- enhancedRamanspectroscopy) TFA Acid trifloracetic TLC Sắc ký lớp mỏng (Thin Layer Chromatography) TEM Kính hiển vi điện tử truyền qua (Transmission Electron Microscopy) TPBVSK Thực phẩm bảo vệ sức khoẻ WHO Tổ chức Y tế Thế giới (World Health Organization) DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Kết khảo sát dung môi chiết metformin HCl, glibenclamid 28 Bảng 3.2 Kết đánh giá độ thích hợp hệ thống phương pháp HPTLC 31 Bảng 3.3 Kết đánh giá độ tuyến tính metformin HCl, glibenclamid .32 Bảng 3.4 Kết đánh giá độ lặp lại độ metformin 33 Bảng 3.5 Kết đánh giá độ lặp lại độ glibenclamid 34 Bảng 3.6 Kết xác định LOD, LOQ metformin HCl glibenclamid 36 Bảng 3.7 Kết hàm lượng glibenclamid mẫu thử 39 Bảng 3.8 Cách pha nồng độ khác dung dịch keo M5 44 Bảng 3.9 Thể tích chấm khảo sát LOD phương pháp TLC-SERS .48 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Các thành phần tán xạ thu sau cho ánh sáng kích thích đến mẫu 11 Hình 1.2.Tán xạ Raman Stokes đối Stokes, m, n, r: mức lượng 12 Hình 3.1 Sắc ký đồ khảo sát hệ dung môi pha động 26 Hình 3.2 Kết quét phổ UV vị trí chất phân tích 27 Hình 3.3 Kết khảo sát dung môi chiết 28 Hình 3.4 Sơ đồ xử lý mẫu phân tích 29 Hình 3.5 Sắc ký đồ đánh giá độ chọn lọc HPTLC 30 Hình 3.6 Sắc ký đồ analog hỗn hợp hoạt chất xác định tính chọn lọc phương pháp 30 Hình 3.7 Sắc ký đồ 3D khoảng tuyến tính metformin HCl glibenclamid 32 Hình 3.8 Đường biểu diễn mối tương quan nồng độ diện tích pic metformin glibeclamid 32 Hình 3.9 Sắc ký đồ xác định LOD glibenclamid metformin HCl 35 Hình 3.10 Sắc ký đồ analog xác định LOD glibenclamid) 35 Hình 3.11 Sắc ký đồ analog xác định LOD metformin HCl 35 Hình 3.12 Sắc kí đồ phân tích mẫu chế phẩm đông dược thị trường HPTLC 37 Hình 3.13 Kết chồng phổ UV quét vị trí có Rf  0,77 (vết glibenclamid)của mẫu dương tính với glibenclamid 38 Hình 3.14 Phổ Raman bột glibenclamid chuẩn, phổ SERS glibenclamid sau nhỏ hỗn dịch keo bạc M5 F4 42 Hình 3.15 Hình ảnh đo TEM hỗn dịch keo bạc nước (M5) keo bạc DMF (F4) độ phóng đại khác 43 Hình 3.16 Phổ hấp thụ UV-vis hỗn dịch keo bạc M5 F4 44 Hình 3.17 Mối quan hệ nồng độ keo bạc M5 với mức độ tương đối đỉnh cao 1244 cm-1 glibenclamid 45 Hình 3.18 Phổ Raman glibenclamid bột chuẩn, vết glibenclamid không nhỏ keo bạc vết glibenclamid có nhỏ keo bạc 46 Hình 3.19 Hình ảnh thể tính chọn lọc phương pháp 47 Hình 3.20 Kết khảo sát LOD phổ SERS glibenclamid 48 ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, người có xu hướng quay thiên nhiên việc phòng bệnh, cải thiện sức khỏe điều trị bệnh mãn tính Các thuốc đông dược, thực phẩm bảo vệ sức khoẻ (TPBVSK) có nguồn gốc tự nhiên mục tiêu mà nhà sản xuất người tiêu dùng nước giới hướng tới Tuy nhiên, tình trạng tân dược trộn trái phép đông dược, TPBVSK từ dược liệu diễn (thành phần có hoạt chất tân dược không công bố nhãn) Đái tháo đường bệnh mạn tính gây tổn hại nghiêm trọng cho nhiều hệ thống thể thời gian dài Theo ước tính Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), có khoảng 422 triệu bệnh nhân đái tháo đường toàn giới khoảng 90% số đái tháo đường typ II (không phụ thuộc insulin) [31] Hơn nữa, thị trường dược phẩm, bốn loại thuốc tổng hợp bao gồm: sulfonylure, biguanid, thiazolidin thuốc khác sulfonylure, sử dụng phổ biến để điều trị tiểu đường typ II Tuy nhiên, thuốc giảm glucose máu thường bị phát trộn lẫn trái phép chế phẩm đông dược metformin, glibenclamid, gliclazid [23], [28]; Nếu sử dụng chế phẩm thời gian dài mà rõ thành phần, người sử dụng xuất tình trạng nhiễm toan lactic, rối loạn tiêu hóa, tổn thương gan thận…[33], [35] Do đó, nhu cầu cấp thiết nhằm phát triển phương pháp nhanh chóng để sàng lọc chế phẩm đông dược bị trộn lẫn thuốc tổng hợp hoá học Do metformin glibenclamid hai thuốc tân dược thường trộn nhiều vào chế phẩm đông dược, nên đề tài chọn dược chất để nghiên cứu Hiện có số nghiên cứu phát thuốc tân dược trộn lẫn thuốc đông dược, TPBVSK triển khai sắc ký lớp mỏng KIẾN NGHỊ Tiếp tục sử dụng phương pháp HPTLC mà đề tài xây dựng kiểm nghiệm chế phẩm đông dược điều trị hỗ trợ điều trị tiểu đường lưu hành thị trường để phát metformin glibenclamid (nếu có) phục vụ công tác chăm sóc sức khỏe cộng đồng Tiếp tục hoàn thiện phương pháp TLC-SERS phát glibenclamid (nếu có) chế phẩm đông dược 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ Y tế (2016), "Thông tư số 01/2016/TT-BYT, Quy định kê đơn thuốc y học cổ truyền, kê đơn thuốc y học cổ truyền kết hợp với thuốc tân dược sở khám bệnh, chữa bệnh" Bộ Y tế (2014), "Thông tư số 43/2014/TT-BYT, Quy định quản lý thực phẩm chức năng" Bộ Y tế (2010), Dược điển Việt Nam IV, Nhà xuất Y học, Hà Nội Bộ Y tế (2007), Dược lý học tập 2, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 296304 Bộ Y tế (2007), Dược thư quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội Bộ Y tế (2007), Hóa Dược tập 2, NXB Y học, Hà Nội, tr 70-79 Trần Tử An (2012), Hoá phân tích tập 2, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 205-212 Đặng Thị Ngọc Lan, Nguyễn Thị Thuỳ Linh, Thái Nguyễn Hùng Thu (2016), "Bước đầu nghiên cứu ứng dụng phổ Raman việc phát nhanh thuốc chống lao giả", Tạp chí Dược học, 477(56), tr 6-11 Đoàn Cao Sơn, Thái Nguyễn Hùng Thu, Trần Việt Hùng, Đặng Thị Ngọc Lan (2016), Ứng dụng phương pháp quang phổ Raman cận hồng ngoại kiểm nghiệm thuốc (Tài liệu chuyên khảo cho chuyên ngành Kiểm nghiệm), Viện kiểm nghiệm thuốc Trung Ương, Hà Nội, tr 37-89 10 Lê Thị Thiên Hương, Đoàn Cao Sơn, Trần Việt Hùng, Bei Ma, Young Liu, Magdy M Ali (2015), "Phát nhanh thuốc giả (ethambutol hydroclorid cefuroxim axetil) kỹ thuật quang phổ Raman cầm tay, cận hồng ngoại cầm tay hồng ngoại chuyển dạng Fourier xách tay", tạp chí Dược học, 472(55), tr 23-27 11 Nguyễn Đình Triệu (2001), Các phương pháp phân tích vật lý hoá lý, tập 1, Nhà xuất Khoa học Kỹ Thuật, Hà Nội, tr 149-168 12 Viện kiểm nghiệm thuốc TW (2013), Báo cáo tổng kết công tác kiểm tra, giám sát chất lượng thuốc mỹ phẩm năm 2013 kế hoạch công tác năm 2014, Hà Nội Tiếng Anh 13 EUROPEAN PHARMACOPOEIA 5.0, pp 1659, 2003 14 Andol HC, Purohit Vijay Kant (2010), "High performance thin layer chromatography (HPTLC): A modern analytical tool for biological analysis", Nature and Science, 8(10), pp 58-61 15 Bogusz Maciej J, Hassan Huda, Al-Enazi Eid, Ibrahim Zuhour, Al-Tufail Mohammed (2006), "Application of LC–ESI–MS–MS for detection of synthetic adulterants in herbal remedies", Journal of pharmaceutical and biomedical analysis, 41(2), pp 554-564 16 Cui Mei, Li Ning, Qin Feng, Li Famei, Xiong Zhili (2010), "Simultaneous determination of 14 illegal adulterants in Chinese proprietary medicines using reversed-phase ion-pair LC", Chromatographia, 72(11-12), pp 1189-1194 17 Fang Fang, Qi Yunpeng, Lu Feng, Yang Liangbao (2016), "Highly sensitive on-site detection of drugs adulterated in botanical dietary supplements using thin layer chromatography combined with dynamic surface enhanced Raman spectroscopy", Talanta, 146, pp 351-357 18 Haneef Jamshed, Shaharyar Mohammad, Husain Asif, Rashid Mohd, Mishra Ravinesh, Siddique Nadeem A, Pal Manoj (2013), "Analytical methods for the detection of undeclared synthetic drugs in traditional herbal medicines as adulterants", Drug testing and analysis, 5(8), pp 607613 19 Huang Chia-Chi (2016), "Applications of Raman spectroscopy in herbal medicine", Applied Spectroscopy Reviews, 51(1), pp 1-11 20 INTERNATIONAL AOAC (2016), Appendix F: Guidelines for Standard Method Performance Requirements 21 Kumasaka Kenichi, Kojima Takashi, Honda Hideo, Doi Kayo (2005), "Screening and quantitative analysis for sulfonylurea-type antidiabetic agents in adulterated health food oral using thin-layer chromatography and high-performance liquid chromatography", Journal of health science, 51(4), pp 453-460 22 Leong Kee Chee, Adulteration and Authentication of Herbal Medicines 27 Nov 2014, Forum for the Harmonization of Herbal Medicines (FHH) Symposium: National University of Singapore 23 Li Ning, Cui Mei, Lu Xiumei, Qin Feng, Jiang Kun, Li Famei (2010), "A rapid and reliable UPLC‐MS/MS method for the identification and quantification of fourteen synthetic anti‐diabetic drugs in adulterated Chinese proprietary medicines and dietary supplements", Biomedical Chromatography, 24(11), pp 1255-1261 24 Lv Diya, Cao Yan, Lou Ziyang, Li Shujin, Chen Xiaofei, Chai Yifeng, Lu Feng (2015), "Rapid on-site detection of ephedrine and its analogues used as adulterants in slimming dietary supplements by TLC-SERS", Analytical and bioanalytical chemistry, 407(5), pp 1313-1325 25 Mathon Caroline, Ankli Anita, Reich Eike, Bieri Stefan, Christen Philippe (2014), "Screening and determination of sibutramine in adulterated herbal slimming supplements by HPTLC-UV densitometry", Food Additives & Contaminants: Part A, 31(1), pp 15-20 26 Meng Wei, Hu Fang, Jiang Xiaohong, Lu Lude (2015), "Preparation of silver colloids with improved uniformity and stable surface-enhanced Raman scattering", Nanoscale research letters, 10(1), pp 1-8 27 Mr Sanjay S Malgundkar Dr Saira Mulla (2014), "Validated Hptlc method for simultaneous determination of Metformin hydrochloride and glibenclamide in combined dosage form ", Journal of Pharmacy and Biological Sciences, 9(2), pp 54-59 28 Pang Wensheng, Yang Huiwan, Wu Zhisheng, Huang Meixia, Hu Juan (2009), "LC-MS–MS in MRM mode for detection and structural identification of synthetic hypoglycemic drugs added illegally to „natural‟anti-diabetic herbal products", Chromatographia, 70(9-10), pp 1353-1359 29 Regina Andayani Fifi Pitasari, Rusdi (2015), "Development and validation of TLC densitometry method for simultaneous determination of metformin HCl and glibenclamide in tablets dosage form", Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 7(9S), pp 159-164 30 V Gillard S Balayssac, A Tinaugus, N Martins, R Martino and M MaletMartino (2015), " Detection, Identification and Quantification by 1H NMR of Adulterants in 150 Herbal Dietary Supplements Marketed for Improving Sexual Performance", J Pharm Biomed Anal, 102, pp 476493 31 WHO (2016), "World Health Day 2016: WHO calls for global action to halt rise in and improve care for people with diabetes" 32 Zhang Yan, Huang Xiaoyan, Liu Wenfang, Cheng Zeneng, Chen Chuanpin, Yin Lihui (2013), "Analysis of drugs illegally added into Chinese traditional patent medicine using surface-enhanced Raman scattering", Analytical Sciences, 29(10), pp 985-990 33 Zhang Zhe, Gao Qing, Yu Qian, Che BQ, Guo HZ (2007), "Detection of anti-diabetic agents in traditional Chinese medicines and health care products by HPLC-MS/MS", Chinese Journal of Pharmaceuticals, 38(1), p 39 34 Zheng Lei, Mao Hui, Zhang Liying, Jin Yang, Zhou Yujie, Peng Yan, Du Shuhu (2014), "Aminopyrine Raman spectral features characterised by experimental and theoretical methods: toward rapid SERS detection of synthetic antipyretic–analgesic drug in traditional Chinese medicine", Analytical Methods, 6(15), pp 5925-5933 35 Zhu Qingxia, Cao Yongbing, Cao Yingying, Chai Yifeng, Lu Feng (2014), "Rapid on-site TLC–SERS detection of four antidiabetes drugs used as adulterants in botanical dietary supplements", Analytical and bioanalytical chemistry, 406(7), pp 1877-1884 36 Zhu Qingxia, Li Hao, Lu Feng, Chai Yifeng, Yuan Yongfang (2016), "A Widely Applicable Silver Sol for TLC Detection with Rich and Stable SERS Features", Nanoscale research letters, 11(1), p 220 PHỤ LỤC Phụ lục Danh mục mẫu chế phẩm đông dƣợc hỗ trợ điều trị tiểu đƣờng thị trƣờng Stt Mã SP Tên thuốc Số lô, hạn dùng, nơi sản xuất VND01 Hộ tạng đường Số lô: 010115 (viên nén) HD:14/01/2018 Liều dùng 2-3 viên/ lần lần / ngày SĐK: 17534/2013/ATTP-XNCB Công ty TNHH Đầu tư phát triển Đông Tây VND02 Diabetna (viên nang) Số lô: 0065 viên/lần HD: 14/03/18 lần/ngày SĐK: 4581/2013/ATTP-XNCB Công ty TNHH Nam Dược VND03 Thanh đường Số lô: 25/2015 3-4 viên/lần an HD: 07/2018 2-3 lần/ngày (viên nang) SĐK: 2286/2014/ATTP-XNCB Công ty TNHH Giai Cảnh VND04 Bitabet (viên nén) Số lô: 090515 2-3 viên/lần HD: 16/05/18 lần/ngày SĐK: 716/2013/ATTP-XNCB Công ty CPDP Hà Tây VND05 Viên tiểu NSX: 26/05/15 2-3 viên/lần đường Đông HD: 26/05/17 lần/ngày Bắc SĐK: 23256/2014/ATTP-XNCB (viên nang) Công ty TNHH nuôi trồng sản xuất chế biến dược liệu Đông Bắc HCD06 Viên tiểu NSX: 12/05/2016 30-60 đường gia HD: 12 tháng viên/ngày truyền 12B-Lý Nam Đế (hoàn cứng) HCD07 Viên tiểu 49 – Huỳnh Thúc Kháng 20-80 đường gia viên/lần truyền lần/ngày (hoàn cứng) HCD08 Đông y gia truyền-Thuốc NSX: 26/03/2016 30-45 HD:25/03/2017 viên/lần trị tiểu đường P516-CT7B, Vĩnh An, Văn (hoàn cứng) HCD09 Tiểu đường Quán, Hà Đông NSX: 21/04/2016 2-6 viên/lần hoàn HD:21/04/2018 2-3 lần/ngày (hoàn cứng) Công ty cổ phần DIFOCO 10 HMD10 Thuốc gia Mẫu mua trôi truyền (hoàn mềm) 11 BD11 1-3 lần/ngày Thuốc gia Mẫu mua trôi truyền (thuốc bột) 12 HCD12 Thuốc gia Mẫu mua trôi truyền trị bệnh NSX:10/2015 tiểu đường HD: 10/2017 Chánh Đức Mẫu A (hoàn cứng) 13 HCD13 Thuốc gia Mẫu mua trôi truyền trị bệnh NSX:10/2015 tiểu đường HD: 10/2017 Chánh Đức Mẫu D (hoàn cứng) 14 TD14 Trà tiểu đường Số lô: 210615 2-3 túi/lần Traly HD: 03/07/18 2-4 lần/ngày (trà túi lọc) SĐK: 22184/2014/ATTP-XNCB Công ty TNHH TM Dược phẩm Trang Ly 15 HCD15 Thận đường NSX: 21/04/2016 2-6 viên/lần hoàn HD:21/04/2018 2-3 lần/ngày (hoàn cứng) Công ty cổ phần DIFOCO 16 HCD16 Thuốc gia NSX: 28/5/2016 50-60 truyền HD: 12 tháng viên/lần (hoàn cứng) Đại Tư Long Gia Truyền Ông lần/ngày Bà Đại (14A Kỳ Đồng, Hồng Bàng, Hải Phòng) 17 HCD17 Thuốc gia Mẫu mua trôi Liều dùng: truyền thìa cà phê (hoàn cứng) 2-3 lần/ngày 18 HCD18 Thuốc gia Mẫu N truyền trị bệnh Ấp Thới Tân A, Xã Trường tiểu đường Chánh Đức (hoàn cứng) Thắng, Thới Lai, Cần Thơ viên/lần lần/ngày 19 HCD19 Thuốc gia Mẫu L truyền trị bệnh Ấp Thới Tân A, Xã Trường tiểu đường viên/lần lần/ngày Thắng, Thới Lai, Cần Thơ Chánh Đức (hoàn cứng) 20 HCD20 Thuốc gia Mẫu T truyền trị bệnh Ấp Thới Tân A, Xã Trường tiểu đường viên/lần lần/ngày Thắng, Thới Lai, Cần Thơ Chánh Đức (hoàn cứng) 21 BD21 Thuốc gia Mẫu mua trôi truyền (thuốc bột) 22 HCD22 Thuốc gia truyền Gia đình bệnh nhân cung cấp- 5-10viên/lần Mua từ miền Nam 2-3 lần/ngày Số: 001 2-3 viên/lần (hoàn cứng) 23 VND23 Diabet (viên nang) NSX: 16/04/15 HD: 15/04/18 lần/ngày SĐK: 1540/2015/ATTP-XNCB Công ty CP Dược liệu vật tư y tế Hải Phòng 24 VND24 T.Đ Kingphar Số lô: 050616 (viên nén) HD: 14/06/2019 SĐK: 6346/2016/ATTP-XNCB Nhà máy Nội Bài- Công ty TNHH Công nghệ Herbitech viên/lần 2-3 lần/ngày 25 VND25 TĐ Care (viên nang) Lô SX: 002/16 2-3 viên/lần HD: 15/02/19 2-3 lần/ngày SĐK: 22238/2013/ATTP-XNCB Công ty CP Dược phẩm Gia Nguyễn 26 VND26 Nadia (viên nang) Số lô: 14020315 viên/lần HD: 30/03/18 lần/ngày SĐK: 846/2009/YT-CNTC Công ty CP Dược phẩm Hoàng Giang 27 VND27 Ích tiểu đường Số lô: 010116 (viên nang) HD: 04/01/19 viên/lần lần/ngày SĐK: 14751/2014/ATTP-XNCB Công ty CP Dược phẩm Quốc tế Abipha 28 VND28 Abet (viên nang) Số lô: 5801 viên/lần HD: 18/01/2018 lần/ngày SĐK: 23235/2014/ATTP-XNCB Công ty TNHH Công nghệ Dược phẩm Zorro 29 VND29 GYGURMAR Số lô: 220315 (viên nang) HD: 110318 SĐK: 7846/2012/ATTP-XNCB Công ty CP Dược thiết bị y tế Hà Tây viên/lần lần/ngày 30 VND30 Diab Kontrol (viên nén) Số lô: 07/2018/144 Ngày 2-3 HD: 30/07/2018 viên Nhà sx: Juva Pharma kft NK&PP: Công ty TNHH Phân phối Huvita Việt Nam 1-2 viên sáng, viên tối 31 VND31 Dây thìa canh SĐK: 10385/2016/ATTP-XNCB viên/lần Gia Huy (viên nang) 32 VND32 Dibetcare (viên nang) Công ty TNHH Dược phẩm Hải lần/ngày Linh Số lô: 010916 viên/lần HD: 26/09/19 lần/ngày SĐK: 12604/2016/ATTP-XNCB Công ty CP Hoá dược Việt Nam 33 HCD33 Thuốc gia 44 Lãn Ông- Hà Nội truyền 10 viên/lần lần/ngày (hoàn cứng) 34 TD34 Giảo cổ lam Số lô: 02/06/16 Tuệ Linh HD: 08/06/18 (trà túi lọc) SĐK: 14101/2013/ATTP-XNCB 2-4 gói/ngày Công ty TNHH Tuệ Linh 35 VND35 Tiểu đường Số lô: 010816 viên/lần OB HD: 29/08/19 lần/ngày (viên nang) SĐK: 19535/2016/ATTP-XNCB Công ty TNHH Dược phẩm USAPHA 36 VND36 Mokemla (viên nang) Số lô: 4070910 viên/lần HD: 09/01/2018 lần/ngày SĐK: 5619/2015/ATTP-XNCB Công ty TNHH Dược phẩm T&T 37 VND37 Anti diabetic Số lô: 010815 viên/lần (Tiểu đường HD: 26/08/18 lần/ngày tiêu khát) SĐK: 20899/2013/ATTP-XNCB (viên nang) Công ty CP Dược vật tư y tế Hải Dương 38 VND38 Tiducap (viên nang) Số lô: 161016 2-3 viên/lần HD: 16/10/19 lần/ngày SĐK: 25658/2013/ATTP-XNCB Công ty CP Dược Viko 8-Pháp 39 VND39 DK-betics (viên nang) Số lô: 0020716 Ngày 2-4 HD: 120719 viên SĐK: 270/2015/ATTP-XNCB Công ty TNHH MTV Dược khoa- trường ĐH Dược Hà Nội 40 HCD40 Tiêu khát hoàn Mua tại: 28 Lãn Ông- Hà Nội (hoàn cứng) 41 VND41 (viên nang) 5-10 viên/lần 2-3 lần/ngày Do bệnh nhân cung cấp Phụ lục 2: Quy trình phân tích metformin, glibenclamid chế phẩm đông dƣợc (nếu có) HPTLC Chất chuẩn - Metformin hydroclorid - Glibenclamid Hoá chất - N-butyl acetat (TT) - Methanol (TT) - Acid formic (TT) Thiết bị - Hệ thống sắc ký lớp mỏng hiệu cao HPTLC Phần mềm điều khiển phần mềm video Scan - Bản mỏng TLC Silicagel 60 F254 Merck (Đức) - Cân phân tích (d=0.1 mg) - Máy lắc xoáy Labinco BV L46 - Máy siêu âm D-78224 Singen/Htw (Đức) - Máy ly tâm Kubota 6500 (NhậtBản) - Tủ sấy Wise Ven WOF-105 (HànQuốc) - Các dụng cụ thủy tinh: bình định mức, bình chiết, pipet Tiến hành:Tiến hành theo phương pháp sắc ký lớp mỏng - Dược điển Việt Nam IV, Phụ lục 5.4 - Bản mỏng: Silica gel hoạt hóa 110oC - Dung môi khai triển: n-butyl acetat: methanol: acid formic (11: 2,5: 1,5) Dung dịch thử: Mẫu làm đồng Cân xác lượng bột mẫu tương ứng với ½-1 liều dùng chế phẩm cho vào ống falcon 50 ml, thêm 25 ml methanol, lắc xoáy phút, siêu âm 20 phút, ly tâm 6000 vòng/phút 20 phút, lọc qua giấy lọc Lấy xác 20 ml dịch đem cô cách thuỷ lấy cắn Hoà cắn thể tích xác methanol, lọc qua màng lọc 0,45 µm tiến hành sắc ký Dãy dung dịch chuẩn (1): Pha dãy dung dịch metformin chuẩn methanol (TT) có nồng độ 100, 250, 500, 800 µl Dãy dung dịch chuẩn (2): Pha dãy dung dịch glibenclamid chuẩn methanol (TT) có nồng độ 250, 500, 1000, 1500 µl Chấm riêng biệt lên mỏng µl dung dịch thuộc dãy dung dịch chuẩn (1), chuẩn (2) dung dịch thử Triển khai sắc ký dung môi khoảng 80 cm Làm khô mỏng không khí Phát vết chất đèn UV 254, so sánh vị trí, màu sắc vết tương ứng sắc ký đồ mẫu thử chuẩn để xác định có mặt metformin glibenclamid Quét phổ UV vết sắc ký thu phần mềm video Scan máy HPTLC bước sóng 230 nm Xây dựng phương trình hồi quy tuyến tính thể mối tương quan diện tích pic sắc ký nồng độ metformin glibenclamid từ dãy dung dịch chuẩn Tính kết quả: Dựa vào đường chuẩn xây dựng được, tính nồng độ chất phân tích mẫu thử Tính hàm lượng chất phân tích mẫu dương tính (mg/đơn vị mẫu) theo công thức: ị ử Trong đó: Cthử: nồng độ chất phân tích mẫu thử tính theo đường chuẩn (µg/ml) mTBđơnvị: khối lượng trung bình đơn vị mẫu (g) mthử: khối lượng bột mẫu thử cân (g) Vthử: thể tích MeOH dùng để pha loãng mẫu thử (ml) ... THỊ TÂM NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THUỐC GIẢM GLUCOSE MÁU TRỘN LẪN TRONG CÁC CHẾ PHẨM THUỐC ĐÔNG DƢỢC BẰNG SẮC KÝ LỚP MỎNG HIỆU NĂNG CAO CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 60720410... Nghiên cứu xác định số thuốc giảm glucose máu trộn lẫn chế phẩm thuốc đông dược sắc ký lớp mỏng hiệu cao Với mục tiêu: Xây dựng thẩm định phương pháp định tính, định lượng metformin glibenclamid trộn. .. lọc chế phẩm đông dược bị trộn lẫn thuốc tổng hợp hoá học Do metformin glibenclamid hai thuốc tân dược thường trộn nhiều vào chế phẩm đông dược, nên đề tài chọn dược chất để nghiên cứu Hiện có số