CÁC KIẾN THỨC cơ bản về VI KHUẨN

CÁC KIẾN THỨC CƠ BẢN VỀ VI KHUẨN Mục lục Chương 1: Màng tế bào Chương 2: Sản xuất protein Chương 3: Sinh sản Chương 4: Xác định độ nhạy cảm vi khuẩn với kháng sinh 12 Phụ lục Trả lời câu hỏi chương ……………………………………18 Chương 1: Màng tế bào Dịch: DS Nguyễn Quang Việt, Cựu sinh viên dược ĐH Dược HN Hiệu đính: DS Võ Thị Hà Màng tế bào lớp áo giáp bảo vệ bao quanh vi khuẩn cho phép chúng tồn môi trƣờng đa dạng khắc nghiệt Màng tế bào số vi khuẩn bao gồm màng sinh chất hay màng tế bào chất (cytoplasmic membrane) bao quanh lƣới bền không linh động gọi vách tế bào (cell wall) hay thành tế bào (Hình 1-1.); vi khuẩn gọi vi khuẩn gram dương Ngƣợc lại, màng tế bào vi khuẩn gram âm bao gồm màng tế bào chất bao quanh vách tế bào mỏng đƣợc bao quanh lớp màng lipid thứ hai gọi màng (outer membrane) Màng gồm nhiều phân tử lipopolysaccharid (LPS), phân tử độc hại ngƣời Khoảng trống màng màng tế bào chất có thành tế bào gọi không gian periplasmic periplasm Dù vi khuẩn gram dƣơng hay gram âm thƣờng xác định đƣợc theo kỹ thuật nhuộm gram, vi khuẩn gram dƣơng bắt màu xanh tím vi khuẩn gram âm bắt màu hồng Nhuộm gram thƣờng bƣớc phòng thí nghiệm vi sinh bệnh viện sử dụng để xác định loại vi khuẩn chƣa đƣợc biết từ mẫu lâm sàng Giống nhƣ tế bào ngƣời, màng tế bào chất ngăn ion vào khỏi tế bào đó, giữ cho tế bào chất thành phần vi khuẩn với định dạng xác định Vách tế bào lớp bền giúp cho vi khuẩn có hình dạng đặc trƣng bảo vệ vi khuẩn khỏi tác động học thẩm thấu Ở vi khuẩn gram âm, màng đóng vai trò nhƣ hàng rào bảo vệ bổ sung ngăn ngừa nhiều chất xâm nhập vào vi khuẩn.Tuy nhiên, lớp chứa kênh, gọi porin cho phép số hợp chất nhƣ phân tử đƣợc sử dụng trình chuyển hóa vi khuẩn qua Do tế bào ngƣời thành tế bào, cấu trúc mục tiêu lý tƣởng cho tác nhân kháng khuẩn Để đánh giá cách tác nhân làm việc, phải hiểu đƣợc cấu trúc thành tế bào Phức hợp phức tạp chất gọi peptidoglycan tạo thành, thân chất gồm polyme đƣờng mạch dài Các polyme lặp lại hai chất đƣờng: TVAcetylglucosamin AT-acetyl-muramic acid (Hình 1-2.) Nếu thành tế bào bao gồm riêng polyme yếu Tuy nhiên, chuỗi bên peptid mở rộng từ loại đƣờng polyme tạo thành liên kết chéo, peptid với peptid khác Những liên kết chéo tăng độ bền vững đáng kể thành tế bào, nhƣ liên kết ngang vòng kim loại tăng độ bền áo giáp sắt đƣợc hiệp sĩ thời trung cổ sử dụng Các liên kết ngang peptidoglycan đƣợc điều hòa enzym vi khuẩn, gọi protein gắn penicilin (Penicillin-Binding Protein-PBP) làm trung gian (Lý dùng thuật ngữ đƣợc làm rõ chƣơng sau) Những enzym nhận hai acid amin cuối chuỗi peptid bên, thƣờng D-alanin-D-alanin trực tiếp liên kết chéo acid amin với chuỗi peptid thứ hai gián tiếp qua hình thành cầu dƣ glycin hai chuỗi peptid bên Hình 1-1 Cấu trúc màng tế bào vi khuẩn Hình 1-2 Cấu trúc peptidoglycan Tổng hợp peptidoglycan cần liên kết chéo yme pol Sự hình thành vách tế bào có liên kết chéo bền vững giúp vi khuẩn có hình dạng đặc trƣng Ví dụ, số vi khuẩn hình que có hình dạng gọi trực khuẩn (bacilli), hình cầu cầu khuẩn (cocci), hình thái trung gian trực khuẩn cầu khuẩn có (coccobacilli), cuối cùng, xoắn khuẩn (spirochete) có hình dạng xoắn ốc di -saccharid protein gắn penicilin (PBP), NAMA (N-Acetylmuramic acidNAM), NAGA (N-Acetylglucosamin-NAG), GGG cầu nối glycin CÂU HỎI (lời giải xem Phụ lục 9) Thành tế bào vi khuẩn gồm enzym giúp hình thành liên kết chéo polyme peptidoglycan vi khuẩn hình que Chương 2: Sản xuất protein Dịch: DS Nguyễn Quang Việt, Cựu sinh viên dƣợc ĐH Dƣợc HN Hiệu đính: DS Võ Thị Hà Giống nhƣ tất đội quân xâm lƣợc, vi khuẩn gây bệnh cần phải đƣợc tiếp tế Chúng cần nguồn lực thích hợp để thay phần bị mòn cũ không sử dụng đƣợc tạo vi khuẩn Vi khuẩn yêu cầu nguồn lực từ ―quốc gia‖ mà chúng xâm chiếm, trƣờng hợp thể ngƣời Trong lƣợng lớn phần cần tổng hợp để thay protein Quá trình tổng hợp protein đạt đƣợc nhờ sử dụng trình chung tƣơng tự nhƣ tế bào ngƣời sử dụng (Hình 2-1) Đầu tiên, nguyên liệu, khối vật liệu tái tạo (building block) nhƣ RNA, acid amin phân tử giàu lƣợng có chứa triphosphate nucleoside, phải giành đƣợc có sẵn vi khuẩn Nếu điều kiện đáp ứng, gen mẫu vi khuẩn phiên mã thành RNA enzym đặc biệt vi khuẩn Sau RNA đƣợc dịch mã thành protein Do số thành phần mà vi khuẩn cần cho trình khác đáng kể so với trình tƣơng tự tế bào ngƣời, trình sản xuất protein vi khuẩn bị thuốc kháng sinh ức chế NGUYÊN LIỆU THÔ Hình 2-1 Tổng quan trình sản xuất protein vi khuẩn Hình 2-2 Cấu trúc ribosome vi khuẩn Quá trình tổng hợp protein đòi hỏi lƣợng dồi khối vật liệu tái tạo nhƣ lƣợng Ví dụ, ngƣời ta ƣớc tính lƣợng ba bốn triphosphat nucleoside (ví dụ, adenosin triphosphat-ATP hay guanosin triphosphat-GTP) cần thiết để gắn thêm acid amin đơn vào chuỗi protein hình thành Vi khuẩn tạo vật liệu thô lƣợng nhờ lấy nguồn nhiên liệu glucose từ môi trƣờng xử lý chúng thông qua đƣờng chuyển hóa để sản sinh ranăng lƣợng tạo hợp chất trung gian Những đƣờng chuyển hóa phức tạp có khác biệt đáng kể tế bào vi khuẩn tế bào ngƣời Chúng đƣợc sử dụng cách hiệu để phân chia vi khuẩn thành hai loại: hiếu khí kỵ khí Vi khuẩn hiếu khí sử dụng oxy từ môi trƣờng trình chuyển hóa, vi khuẩn kỵ khí không sử dụng Trong thực tế, vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt bị oxy giết chết chúng thiếu enzym giải độc số sản phẩm phụ có hại oxy, nhƣ hydrogen peroxid gốc super-oxid Mycobacterium tuberculosis ví dụ vi khuẩn hiếu khí nghiêm ngặt; vi khuẩn kỵ khí nghiêm ngặt bao gồm Clostridium difficile Bacteroides fragilis Nhiều vi khuẩn có trình chuyển hóa cho phép chúng sử dụng oxy có diện oxy nhƣng vận hành nhƣ vi khuẩn kỵ khí oxy Những vi khuẩn đƣợc gọi tùy nghi (falcutative) liên quan đến sử dụng oxy dĩ nhiên chúng tồn tốt có hay oxy Ví dụ vi khuẩn tuỳ nghi nhƣ có Escherichia coli Staphylococcus aureus Các vi khuẩn khác phát triển tốt có lƣợng nhỏ khí oxy, lƣợng oxy tìm thấy không khí Những vi khuẩn đƣợc cho vi hiếu khí (microaerophilic) Campylobacter jejuni ví dụ loại vi khuẩn vi hiếu khí Năng lƣợng có sẵn để tiêu thụ vi khuẩn đƣợc sản sinh lƣu trữ dƣới dạng triphosphate nucleoside, số trƣờng hợp dƣới dạng chệnh lệch gradient proton tế bào Các dạng lƣợng tiềm lƣu trữ dƣới dạng gradient đƣợc gọi động lực proton Do proton di chuyển từ gradient cao xuống thấp (từ bên vi khuẩn vào bên vi khuẩn) xuyên qua màng tế bào chất, dạng lƣợng đƣợc sử dụng để cung cấp lƣợng cho trình quan trọng nhƣ vận chuyển tích cực chất dinh dƣỡng vào tế bào tạo ATP PHIÊN MÃ Phiên mã trình thông tin chứa DNA gen vi khuẩn đƣợc sử dụng để tổng hợp phân tử RNA gọi RNA thông tin (mRNA) Cũng giống nhƣ tế bào ngƣời, phức hợp enzym RNA polymerase đƣợc vi khuẩn sử dụng để thực điều RNA polymerase gắn vào DNA sử dụng nhƣ khuôn mẫu để liên tục gắn thêm acid ribonucleic vào phân tử mRNA tƣơng ứng Quá trình hiệu quả; điều kiện lý tƣởng, RNA polymerase vi khuẩn tạo mRNA với tốc độ 55 nucleotide giây Mặc dù hai phân tử thực chức tƣơng tự, RNA polymerase vi khuẩn khác biệt với RNA polymerase TB có nhân điển hình (nhƣ tế bào ngƣời) (các TB có nhân điển hình không giống nhƣ vi khuẩn, sinh vật có chứa hạt nhân bào quan có màng riêng tế bào Ví dụ nhƣ tế bào loài động vật, thực vật, nấm động vật nguyên sinh.) Về mặt cấu trúc, RNA polymerase vi khuẩn bao gồm năm đơn vị nhỏ có kích thƣớc tổng thể khoảng 90 x 90 x 160 angstrom, RNA polymerase nấm men có nhiều tiểu đơn vị có kích thƣớc 140 x 136 x 110 angstrom Khác biệt chức tồn Ví dụ, RNA polymerase vi khuẩn đủ để bắt đầu chép, RNA polymerase TB có nhân điển hình đòi hỏi có tác động yếu tố phiên mã bổ sung Tầm quan trọng phiên mã sức khỏe vi khuẩn khác biệt RNA polymerase vi khuẩn RNA polymerase TB có nhân điển hình làm cho phức hợp enzym mục tiêu lý tƣởng cho hợp chất kháng khuẩn DỊCH MÃ Cả TB có nhân điển hình vi khuẩn, cấu trúc đại phân tử ribosome thực công việc tổng hợp protein từ thông tin chứa mRNA thông qua trình gọi dịch mã Những phức hợp lớn gồm ribosome RNA (rRNA) protein Tuy nhiên ribosome vi khuẩn có khác biệt đáng kể so với ribosome TB có nhân điển hình Ribosome 70S vi khuẩn đƣợc tạo từ tiểu đơn vị 50S 30S (Hình 2-2) (―S‖ viết tắt đơn vị Svedberg, đơn vị đo tốc độ lắng đo máy siêu li tâm Ultracentrifuge Đơn vị Svedberg, đó, phản ánh kích thƣớc phức hợp đơn phép cộng) Những tiểu đơn vị có cấu trúc phức tạp Ví dụ tiểu đơn vị 50S tạo từ phân tử rRNA 34 protein, tiểu đơn vị 30S bao gồm phân tử rRNA 21 protein Ngƣợc lại, ribosome TB có nhân điển hình 80S kích thƣớc bao gồm tiểu đơn vị 60S tiểu đơn vị 40S Mỗi tiểu đơn vị lại gồm nhiều phân tử rRNA protein Các ribosome hoàn chỉnh vận hành với loại RNA khác gọi RNA vận chuyển (tRNA) để sản xuất protein Ribosome gắn vào đọc thông tin khuôn mẫu mRNA kết hợp acid amin phù hợp đƣợc tRNA vận chuyển gắn vào protein hình thành dựa thông tin mẫu mRNA Tầm quan trọng dịch mã đƣợc thể thực tế nửa trình tổng hợp RNA vi khuẩn phát triển nhanh chóng tổng hợp rRNA tRNA Việc tổng hợp protein vi khuẩn đóng vai trò quan trọng để vi khuẩn phát triển tính chất không giống giữ ribosom ngƣời vi khuẩn khiến cho ribosome vi khuẩn mục tiêu hấp dẫn cho kháng sinh tác động Thật vậy, nhiều nhóm tác nhân kháng khuẩn hoạt động theo chế gắn vào ức chế ribosome vi khuẩn CÂU HỎI 1.Vi khuẩn vi khuẩn lớn lên môi trƣởng thiếu oxy phức hợp enzym tạo mRNA từ khuôn mẫu DNA Ribosome 70S vi khuẩn gồm tiểu đơn vị , tiểu đơn vị lại cấu tạo gồm -và Chương 3: Sinh sản Dịch: DS Nguyễn Quang Việt, Cựu sinh viên dƣợc ĐH Dƣợc HN Hiệu đính: DS Võ Thị Hà Trong chiến vi khuẩn đáp ứng miễn dịch ngƣời, số lƣợng quan trọng Vi khuẩn liên tục nhân lên để nỗ lực áp đảo khả phòng thủ vật chủ yếu tố miễn dịch không ngừng cố gắng để tiêu diệt kẻ xâm lăng Cân thƣờng nghiêng đáp ứng miễn dịch ngƣời nhờ thuốc kháng sinh Một ví dụ minh họa nói lên tầm quan trọng nhân lên vi khuẩn lây nhiễm bệnh lỵ trực khuẩn Bệnh tiêu chảy lây nhiễm trực khuẩn lỵ Shigella gây xảy sau uống phải khoảng 200 cá thể trực khuẩn Tuy nhiên thời gian ngắn, 200 vi sinh vật gây tiêu chảy, hàng tỷ vi khuẩn bị tống phân ngày Rõ ràng vi khuẩn nhân lên nhanh chóng điều quan trọng bệnh Vi khuẩn nhân lên xảy sinh sản nhị phân, trình vi khuẩn mẹ phân chia thành hai tế bào giống hệt Điều đòi hỏi tổng hợp nhiều phân tử sinh học cần thiết để xây dựng tế bào Gần nhƣ tất vi khuẩn có nhiễm sắc thể tròn đơn Quá trình nhân đôi nhiễm sắc thể (replication) phần thiếu phân chia tế bào Tình trạng chép xảy enzym vi khuẩn sử dụng nhiễm sắc thể có nhƣ khuôn mẫu để tổng hợp nhiễm sắc thể thứ hai giống hệt Muốn thực điều phải có sẵn nguồn cung cấp deoxynucleotid để kết hợp với phân tử DNA sinh Quá trình phức tạp ngƣời ta nghĩ enzym khác phải điều chỉnh thích ứng với DNA phép tái tạo tối ƣu nhiễm sắc thể Các trình phức tạp đƣa vài hội cho tác nhân kháng sinh tác động lên để ức chế vi khuẩn phát triển TỔNG HỢP DEOXYNUCL EOTID Hình 3-1 Tổng hợp tetrahydrofolate vi khuẩn Nguồn cung cấp dồi phân tử giàu lƣợng nhƣ: deoxyadenosin triphosphat (dATP), deoxyguanosin triphosphat (dGTP), deoxycytidin triphosphat (dCTP) deoxythymidin triphosphat (dTTP) điều cần thiết để sản xuất phân tử DNA trình nhân đôi DNA Vi khuẩn sử dụng số đƣờng tổng hợp để sản xuất khối vật liệu tái tạo DNA Tetrahydrofolat (THF) đồng yếu tố cần thiết cho số đƣờng đƣợc tổng hợp nhƣ sau (Hình 3-1.): Enzym dihydro-pteroat synthase sử dụng dihydropterin pyrophosphat paraaminobenzoat (PABA) để tạo thành dihydropteroat, sau đƣợc chuyển đổi thành dihydrofolat Dihydrofolat reductase sau chuyển đổi dihydrofolat thành THF THF cần thiết cho tổng hợp cuối vài nucleotid Mặc dù ngƣời dễ dàng hấp thụ folat tiền chất THF từ chế độ ăn, nhiên hầu hết chủng vi khuẩn làm nhƣ phải tổng hợp đồng yếu tố Cho nên đƣờng tổng hợp mục tiêu hấp dẫn cho hợp chất kháng khuẩn CÁC ENZYM TỔNG HỢP DNA Enzym DNA polymerase chịu trách nhiệm cho trình nhân đôi nhiễm sắc thể vi khuẩn, nhƣng trình cần enzym khác tham gia Một ví dụ topoisomerase kiểm soát trình siêu xoắn vặn xoắn phân tử DNA Để hiểu trình siêu xoắn phải đánh giá đƣợc hệ việc tạo nhiễm sắc thể DNA xoắn ốc Các cấu trúc xoắn kép DNA trạng dãn xoắn, chứa 10 cặp nucleotide lƣợt xoắn ốc Tuy nhiên, cách vặn xoắn đầu DNA giữ đầu cố định, tăng giảm số lƣợng cặp nucleotit lƣợt xoắn ốc, với 11 cặp (Hình 3-2) Điều dẫn đến kéo căng phân tử DNA, đƣợc điều chỉnh hình thành trình siêu xoắn Khi gia tăng số lƣợng cặp nucleotit với lƣợt xoắn ốc, trình siêu xoắn đƣợc cho thuận Khi giảm trình siêu xoắn bị cho nghịch Một trình tƣơng tự xảy vi khuẩn Bởi phận nhiễm sắc thể đƣợc ―cố định‖ liên quan tới phức hợp protein lớn, trình vặn xoắn xảy phần dễ tiêu tan mà tạo thêm dạng siêu xoắn Vì trình vặn xoắn từ đâu? RNA polymerase phân tử lớn quay tự di chuyển dọc theo nhiễm sắc thể vi khuẩn trình phiên mã Vì vậy, RNA polymerase vƣợt lên theo cách dọc theo nhiễm sắc thể, tách sợi DNA nhƣ xảy ra, trình siêu xoắn thuận xảy phía trƣớc enzym, trình siêu xoắn nghịch tích tụ phía sau Về lý thuyết, trình siêu xoắn mức gây khó khăn cho tái tạo DNA phiên mã Hình 3-2 Quá trình siêu xoắn cấu trúc xoắn kép DNA A Vặn xoắn sợi DNA dẫn đến hình thành sợi xoắn kép B Trong trình phiên mã, chuyển động RNA polymerase dọc theo nhiễm sắc thể dẫn tới tích lũy siêu xoắn thuậntrƣớc enzym siêu xoắn nghịch đằng sau (Trích dẫn đƣợc phép Alberts B, Johnson A, Lewis J, et al Sinh học phân tử tế bào New York, NY: Garland Khoa học; 2002: 314) Hình 3-3 Tái tạo nhiễm sắc thểvi khuẩn Một hệ chu kỳ tự nhiên nhiễm sắc thể Để hình dung siêu xoắn (búi sợi xoắn bị rối) làm nhƣ sau, tay trái giữ chặt giây xoắn tai nghe điện thoại bàn điểm cách ống nghe khoảng 30 cm, tay phải cầm sợi giây xoắn điểm vuốt ―căng‖ sợi giây xoắn vể phía ống nghe Trong ví dụ dây xoắn tai nghe giống nhƣ sợi xoắn nhiễm sắc thể DNA, tay phải RNA polymerase di chuyển dọc theo sợi nhiễm sắc thể Lƣu ý cách búi siêu xoắn tạo thêm dây xoắn phía trƣớc bàn tay Bây giờ, để thả ống nghe không khí Trọng lực ống nghe kéo dãn làm búi siêu xoắn khỏi sợi giây xoắn tai nghe, kéo sợi dây xoắn để định hình vặn xoắn Nhƣng ống nghe không cố định, quay tự để làm giảm căng sợi giây xoắn vi khuẩn nhiễm sắc thể đƣợc tái tạo liên kết với nhau, đòi hỏi topoisomerase để phân chia thích hợp Một hệ chu kỳ tự nhiên nhiễm sắc thể vi khuẩn sau hoàn thành tái tạo, hai nhiễm sắc thể tế bào sinh sản đƣợc thƣờng xuyên liên kết với (Hình 3-3) Điều diện rõ ràng trở ngại với vi khuẩn phân chia vi khuẩn cố gắng để phân biệt nhiễm sắc thể cho tế bào sinh sản đƣợc Các vi khuẩn vƣợt qua vấn đề nhờ tạo topoisomerases, enzym loại bỏ thêm búi sợi xoắn bị rối vào DNA Chúng thực điều nhờ gắn vào DNA, cắt hai sợi DNA, qua dải đơn DNA tạo hai sợi DNA qua chỗ bị cắt sau loại bỏ DNA Việc thông qua hai sợi DNA qua chỗ bị cắt thực chất loại bỏ thêm hai búi sợi xoắn bị rối vào nhiễm sắc thể Nhiễm sắc thể bỏ liên kết hai nhiễm sắc thể liên kết với trình tái tạo Bằng cách này, vi khuẩn điều chỉnh mức độ siêu xoắn nhiễm sắc thể họ cho phép tách nhiễm sắc thể sau chép DNA CÂU HỎI Tetrahydrofolate cần cho số đƣờng liên quan đến trình tổng hợp - Các nhiễm sắc thể hầu hết vi khuẩn enzym điều hòa trình búi sợi xoắn DNA bị rối Chương 4: Xác định độ nhạy cảm vi khuẩn với kháng sinh Dịch|: DS Nguyễn Quang Việt, Cựu sinh viên dược ĐH Dược HN Hiệu đính: DS Võ Thị Hà Chúng ta thảo luận ba trình vi khuẩn cần thiết cho sống chúng khác biệt tƣơng ứng chúng với trình tế bào ngƣời: hình thành vách tế bào, sản xuất protein vi khuẩn nhân lên nhiễm sắc thể vi khuẩn Mỗi trình cung cấp mục tiêu khác để thuốc kháng sinh ức chế vi khuẩn Kháng sinh có chia thành hai nhóm: Kháng sinh diệt đƣợc vi khuẩn đƣợc gọi kháng sinh diệt khuẩn (bactericidal) kháng sinh đơn ngăn chặn tăng trƣởng vi khuẩn đƣợc gọi kháng sinh kìm khuẩn (bacteriostatic) Các kháng sinh kìm khuẩn dựa vào hệ thống miễn dịch để loại bỏ vi khuẩn cách không cho vi khuẩn nhân lên thể ngƣời bệnh Nồng độ ức chế tối thiểu (Minimum Inhibitory Concentration-MIC) nồng độ diệt khuẩn tối thiểu (Minimum Bactericidal Concentration-MBC) đại lƣợng định lƣợng tính nhạy cảm vi khuẩn phân lập kháng sinh định Nhƣ tên gọi thể hiện, MIC nồng độ tối thiểu thuốc kháng sinh ngăn chặn phát triển chủng vi khuẩn phân lập Tƣơng tự nhƣ vậy, MBC nồng độ tối thiểu thuốc kháng sinh dẫn tới giết chết vi khuẩn phân lập Trong thực tế số thử nghiệm đƣợc triển khai để xác định chủng vi khuẩn định có nhạy cảm kháng với kháng sinh cụ thể không Theo Phương pháp Kirby-Bauer (kỹ thuật khoanh giấy kháng sinh khuếch tán thạch), khoang giấy tẩm kháng sinh đƣợc bỏ vào đĩa thạch láng loại vi khuẩn Kháng sinh khuếch tán từ khoang giấy, trình xác lập gradient có nồng độ thấp dần xa khoang giấy tẩm kháng sinh Sự tăng trƣởng vi khuẩn bị ức chế diện tích xung quanh khoang giấy tẩm kháng sinh Đo đƣờng kính sử dụng để xác định đƣợc xem chủng vi khuẩn nhạy cảm hay đề kháng với thuốc kháng sinh Phương pháp Etests (Epsilometer test Epsilon) hoạt động nguyên tắc tƣơng tự, ngoại trừ sử dụng dải dài thay cho khoang giấy tẩm kháng sinh Các dải đƣợc ngâm tẩm gradient giảm dần nồng độ kháng sinh dọc theo chiều dài Khi thả dải dài vào đĩa thạch láng loại vi khuẩn, vi khuẩn phát triển cuối dải dài nơi nồng độ kháng sinh thấp nhƣng không phát triển đầu dải dài có nồng độ kháng sinh cao Vết có mảng vi khuẩn chạm vào dải dài đƣợc sử dụng để tính MIC, có thang đánh số nồng độ dải để hỗ trợ xác định MIC Phương pháp canh pha loãng Broth vận hành theo nguyên tắc tƣơng tự, ngoại trừ kháng sinh đƣợc pha loãng tốt môi trƣờng chất lỏng môi trƣờng thạch Trong thử nghiệm này, môi trƣờng với độ pha loãng lớn kháng sinh mà vi khuẩn không phát triển MIC Hiện phòng xét nghiệm vi sinh hầu hết bệnh viện lớn sử dụng máy dựa nguyên tắc để tự động kiểm tra hàng trăm chủng vi khuẩn phân lập LỜI KHUYÊN QUAN TRỌNG Hệ thống miễn dịch dƣờng nhƣ tƣơng đối hiệu việc loại trừ vi khuẩn số loại bệnh nhiễm khuẩn nhƣ viêm màng não viêm màng tim Trong bệnh nhiễm khuẩn này, nên sử dụng kháng sinh diệt khuẩn (bactericidal) thay kháng sinh kìm khuẩn (bacteriostatic) CÂU HỎI Kháng sinh diệt vi khuẩn thay ức chế tăng trƣởng vi khuẩn Phƣơng pháp đo lƣờng nhạy cảm kháng sinh sử dụng khoang giấy tẩm kháng sinh bỏ vào đĩa thạch láng loại vi khuẩn gọi phƣơng pháp Các phƣơng phápđo lƣờng nhạy cảm kháng sinh cách pha loãng kháng sinh môi trƣờng lỏng đƣợc gọi phƣơng pháp Phụ lục Trả lời câu hỏi chương Chƣơng 1 peptidoglycan penicillin-binding proteins or PBPs bacilli Chƣơng anaerobic RNA polymerase 50S, 30S, rRNA, proteins Chƣơng deoxynucleotides circular topoisomerases Chƣơng bactericidal Kirby-Bauer broth dilution ... kể tế bào vi khuẩn tế bào ngƣời Chúng đƣợc sử dụng cách hiệu để phân chia vi khuẩn thành hai loại: hiếu khí kỵ khí Vi khuẩn hiếu khí sử dụng oxy từ môi trƣờng trình chuyển hóa, vi khuẩn kỵ khí... tổng hợp RNA vi khuẩn phát triển nhanh chóng tổng hợp rRNA tRNA Vi c tổng hợp protein vi khuẩn đóng vai trò quan trọng để vi khuẩn phát triển tính chất không giống giữ ribosom ngƣời vi khuẩn khiến... ribosome vi khuẩn mục tiêu hấp dẫn cho kháng sinh tác động Thật vậy, nhiều nhóm tác nhân kháng khuẩn hoạt động theo chế gắn vào ức chế ribosome vi khuẩn CÂU HỎI 1 .Vi khuẩn vi khuẩn