vi sinh vật có cấu tạo đơn bào

27/09/2016 27/09/2016 VI KHUẨN GRAM ÂM 27/09/2016 KHÁI NIỆM • Giới nhân sơ – nhân nguyên thủy (prokaryotes) bao gồm thể đơn bào nhân chưa có màng bọc, có giới khác biệt vi sinh vật cổ (vi khuẩn cổ Archaeobacteria) vi khuẩn (Bacteria) • Điểm chung vi khuẩn thành tế bào có thành phần glucopeptit (murein) • Murein vi khuẩn Gram dương nhiều nhiều so với vi khuẩn Gram âm 27/09/2016 HÌNH DẠNG VI KHUẨN 27/09/2016 HÌNH DẠNG VI KHUẨN • Cầu khuẩn (coccus) – Khi phân chia theo phương dính gọi song cầu khuẩn (diplococcus) chuỗi cầu khuẩn (streptococcus) – Phân chia theo ba phương dính với ta có cầu khuẩn (tetracoccus) – Phân chia theo ba phương dính với ta có cầu khuẩn (sarcina) phân chia theo nhiều phương ta có tụ cầu khuẩn (Staphylococcus) 27/09/2016 HÌNH DẠNG VI KHUẨN 27/09/2016 27/09/2016 Streptococcus Staphylococcus (Liên cầu khuẩn) (Tụ cầu khuẩn) Dilococcus – Song cầu khuẩn 27/09/2016 Enterococcus faecalis Streptococcus pyrogenes Streptococcus epidermis 27/09/2016 10 Các kiểu xếp tiêm mao 27/09/2016 65 Pili giới tính • Có số lượng thay đổi từ 1-10 tế bào, phụ tương tư , khác với fimbriae, pili thường dầy fimbriae(khoản từ 9-10 nm) Nó xác định tính di truyền nhân tố phái tính cần thiết cho giao phối vi khuẩn Ở vài phage,trong đầu chu kì sinh sản ,chúng cố định pili sinh dục bơm acid nucleic vào tế bào chất vi khuẩn qua đường pili sinh dục 27/09/2016 66 27/09/2016 67 Bào tử vi khuẩn (spore) • Một vài loại vi khuẩn có cấu trúc đặc biệt gọi bào tử Đây trạng thái tiềm sinh vi khuẩn, phát triển tế bào dinh dưỡng vài giống vi khuẩn như: trực khuẩn Bacillus Clostridium, cầu khuẩn Sporosarcina loài khác Bào tử có tính đề kháng mạnh với điều kiện khắc nghiệt môi trường : sức nóng, xạ tử ngoại, hóa chất sát trùng khô hạn • Khả thành lập bào tử vi khuẩn đặc tính quan trọng vi sinh vật kỷ nghệ y học Do tính chất đề kháng bào tử mà vài loài vi khuẩn tạo bào tử trở thành tác nhân gây bịnh nguy hiểm chúng khó bị tiêu diệt Bào tử sống sót nước đun sôi hay Phải xử dụng autoclauve để khử trùng thiết bị nghiên cứu vi trùng Trong tự nhiên bào tử phương tiện gíúp tế bào tồn điều kiện thiếu nước chất dinh dưỡng 27/09/2016 68 • Các yếu tố sau giúp bào tử chống chịu với ngoại cảnh bất lợi: • * Phức hợp acid dipicolinic-calcium ổn định thành phần acid nucleic bào tử • * Nước bào tử trạng thái liên kết nên khả làm biến tính protein tăng nhiệt độ môi trường • * Các enzime chất họat động sinh học bào tử tồn trạng thái không hoạt động , hạn chế trao đổi chất bào tử môi trường • * Với cấu trúc có nhiều lớp màng bọc tính thấm lớp màng, làm cho hóa chất độc , chất sát trùng khó xâm nhập vào, gây tác động đến bào tử 27/09/2016 69 Bào tử vi khuẩn (spore) 27/09/2016 70 PHƢƠNG PHÁP VÀ KĨ THUẬT NGHIÊN CỨU 27/09/2016 71 5.1 Phương pháp quan sát tế bào Kinh hiển vi quang học có độ phóng đại 1500 đến 2500, đặc biệt nhờ kính hiển vi thường (TEM) kính hiển vi điện tử quét (SEM) thấy tế bào, cấu trúc siêu hiển vi vi khuẩn với đường kính khoảng 1µm 27/09/2016 72 27/09/2016 73 QUAN SÁT VI SINH VẬT TRÊN TIÊU BẢN CỐ ĐỊNH, NHUỘM MÀU: • Phương pháp nhuộm Gram cho biết nhận biết nhóm vi khuẩn Gram dương, Gram âm, hình dạng bào tử… 27/09/2016 74 Các khâu phƣơng pháp nhuộm Gram  Làm vệt mỏng huyền phù vi khuẩn Staphylococcus E.coli, cố định nóng, nhuộm màu đậm tinh thể tím  Củng cố màu đậm dung dịch chứa Iod (dd lugol)  Tẩy màu cồn nhẹ dung dịch cồn axeton tiêu không màu, sau rửa lại nước Nếu soi kính thấy cầu khuẩn Staphylococcus màu tím, trực khuẩn màu  Nhuộm bổ sung màu đậm tinh thể tím Safranin, đỏ Fuchsin, rửa nước, hong khô soi kính Cầu khuẩn vi khuẩn Gram dương (tím) trực khuẩn đường ruột vi khuẩn Gram âm (đỏ) 27/09/2016 75 PHƢƠNG PHÁP TÁCH LY CÁC THÀNH PHẦN CỦA TẾ BÀO Khi cần nghiên cứu thành phần riêng biệt té bào, người ta phải tách ly thành phần nhờ siêu âm, enzyme làm tan thành, kháng sinh tác động vào thành, dung áp suất thẩm thấu gây co nguyên sinh, dung sức ép học, siêu ly tâm hay ly tâm đường gradient 27/09/2016 76 Nguyên tắc áp suất thẩm thấu A: Tế bào dung dịch đẳng trương, nước không vào hay B: Tế bào dung dịch nhược trương, nước vào tế bào làm vỡ tế bào C: tế bào dung dịch ưu trương, nước tế bào gây co nguyên sinh 27/09/2016 77 Ly tâm tách thành phần 27/09/2016 78 Sắc kí giấy, sắc kí cột 27/09/2016 79 ...27/09/2016 VI KHUẨN GRAM ÂM 27/09/2016 KHÁI NIỆM • Giới nhân sơ – nhân nguyên thủy (prokaryotes) bao gồm thể đơn bào nhân chưa có màng bọc, có giới khác biệt vi sinh vật cổ (vi khuẩn cổ Archaeobacteria)... (Vibrio - từ chữ “Vibriae có nghĩa dao động), gồm vi khuẩn có có dạng que uốn cong nên có dạng dấu phẩy, có tiêm mao, điển hình giống Vibrio Vibrio cholera 27/09/2016 Vibrio parahaemoliticus 31... Clostridium 18 • * Clostridium: trực khuẩn, G+, sinh bào tử, bào tử thường to chiều ngang tế bào, làm tế bào có hình dùi trống ( bào tử nằm đầu) hay hình thoi ( bào tử nằm giửa), thường thuộc loại kị