CHẨN ĐOÁN BỆNH DẠI (RABIES VIRUS)

Trường ĐH Nông Lâm TP.HCM Bộ môn CNSH Bài báo cáo CHẨN ĐOÁN BỆNH DẠI (RABIES VIRUS) GVHD T.S Nguyễn Ngọc Hải SV Trương Thị Huyền Trang Lớp DH06SH Mssv 06126159 Nội dung I Đặt vấn đề I I Rabies virus I I I Cách gây bệnh rabies virus I V.Các phương pháp chẩn đoán V So sánh phương pháp VI Kết luận VI I Tài liệu tham khảo I Đặt vấn đề Bệnh dại bệnh virus dại (rabies virus) gây nên Là bệnh nhiễm virus cấp tính hệ thần kinh trung ương→tử vong chắn Có tính truyền nhiễm Bệnh xảy động vật có vú I I Rabies virus Thuộc •giống Lyssavirus •họ Rhabdoviridae Vật chất di truyền RNA Có dạng hình viên đạn quan sát kính hiển vi→dễ phân biệt với virus họ Kích thước xấp xỉ 180 x 75nm II Ra b i e s v i r u s Cấu tao •Lõi virus(ribonucleoprotein) •Chất protein •Lớp áo ngoài(envolop) •Các gai glycoprotein I I I Cách gây bệnh rabies virus IV Các phương pháp chẩn đoán Phương pháp mô bệnh học Phương pháp Taqman PCR Phương pháp chẩn đoán huyết IV Các phương pháp chẩn đoán Phương pháp mô bệnh học (histopathology) Mẫu Nghiền Mảnh mô nhỏ Kháng thể có nhuộm huỳnh quang Kính hiển vi huỳnh quang Thể Negri Tế bào nhiễm virus Thể Negri tế bào thần kinh nhiễm virus ( mũi tên chỉ) Phương pháp phát khoảng 70% trường hợp nhiễm virus IV Các phương pháp chẩn đoán Phương pháp dùng Taqman PCR Nguyên tắc phương pháp dựa phản ứng PCR có bổ sung tác nhân dò Taqman Phát mục tiêu thông qua cường độ phát huỳnh quang Taqman quy trình thực hiện( Taqman PCR) 2.1 Ly trích RNA tạo cDNA Ly trích RNA TRIzol, TRIzol LS với 1µl Glycoblue Reverse transcription toàn RNA tạo cDNA 0.5 µl random primer cho 1µl RNA Quy trình thực hiện( Taqman PCR) 2.2 Thiết kế mồi Taqman Đọan mồi thiết kế đặc hiệu cho vật chất di truyền virus Taqman thiết kế có vài trình tự bắt cặp với cDNA virus Taqman gắn huỳnh quang đầu 5’có hoạt tính, đầu 3’ gắn huỳnh quang không hoạt tính 2.3.Tiến hành phản ứng µl nucleotide tự 12.5µl Taqman 2.5µl primer 1µl cDNA PCR chu kì 500C phút 1chu kì 950C 10 phút 40 chu kì 95 0C 15s 40 chu kì 600C phút IV Các phương pháp chẩn đoán ưu điểm nhanh chóng độ nhạy cao độ đặc hiệu cao cần lượng mẫu tương đối dễ thực Phương pháp phát 95% trường hợp nhiễm virus IV Các phương pháp chẩn đoán Phương pháp chẩn đoán huyết Nguyên tắc phương pháp dựa phản ứng ELISA phát kháng thể huyết phương pháp phát gần 100% trường hợp nhiễm virus V So sánh phương pháp Trong phương pháp trình bày phương pháp chẩn đoán huyểt cho hiệu cao VI Kết luận Bệnh dại bênh truyền nhiễm có tốc độ lay lan nhanh chóng, có tỉ lệ tử vong cao Do cần có phương pháp phòng bệnh, chẩn đoán bênh điều trị bệnh cách có hhiệu VII Tài liệu tham khảo http://www.bing.com/search? q=detect+rabie&go=&form=QBRE3 • www.techmicrobio.net http://www.bing.com/search? q=detect+rabie&go=&form=QBRE3 • www.beforethebite.typepad.com • http://www.cdc.gov