CHẨN ĐOÁN BỆNH DẠI (RABIES VIRUS)

Đặt vấn đề Bệnh dại là bệnh do virus dại rabies virus gây nên Là bệnh nhiễm virus cấp tính của hệ thần kinh trung ương → tử vong chắc chắn.. Các phương pháp chẩn đoán Phương pháp mô b

Trường ĐH Nông Lâm TP.HCM

I Đặt vấn đề

Bệnh dại là bệnh do virus dại (rabies

virus) gây nên

Là bệnh nhiễm virus cấp tính của hệ thần kinh trung ương → tử vong chắc chắn.

Có tính truyền nhiễm

Bệnh chỉ xảy ra trên động vật có vú

I I Rabies virus

Thuộc •giống Lyssavirus

•họ Rhabdoviridae

Vật chất di truyền là RNA

Có dạng hình viên đạn khi quan sát dưới

kính hiển vi→dễ phân biệt với các virus cùng họ

Kích thước xấp xỉ 180 x 75nm

I I I Cách gây bệnh của rabies

virus

IV Các phương pháp chẩn đoán

Phương pháp mô bệnh học

Phương pháp Taqman PCR

Phương pháp chẩn đoán huyết thanh

IV Các phương pháp chẩn

đoán

1 Phương pháp mô bệnh học (histopathology)

Mẫu Nghiền Mảnh mô nhỏ Kháng thể có nhuộm huỳnh quang

Thể Negri

Kính hiển vi huỳnh quang

Tế bào nhiễm

virus

Thể Negri trong tế bào thần kinh nhiễm virus ( mũi tên chỉ)

Phương pháp này chỉ phát hiện được khoảng 70% trường hợp nhiễm virus

IV Các phương pháp chẩn đoán

2 Phương pháp dùng Taqman PCR

Nguyên tắc của phương pháp này là dựa

trên phản ứng PCR có bổ sung tác nhân dò

Taqman Phát hiện mục tiêu thông qua cường

độ phát huỳnh quang của Taqman

quy trình thực hiện( Taqman PCR)

2.1 Ly trích RNA và tạo cDNA

Ly trích RNA bằng TRIzol, TRIzol LS với

1µl Glycoblue

Reverse transcription toàn bộ RNA tạo cDNA 0.5 µl random primer cho 1µl RNA

2.2 Thiết kế mồi và Taqman

Đọan mồi được thiết kế đặc hiệu cho vật chất

di truyền của virus

Taqman được thiết kế có vài trình tự bắt cặp với cDNA virus

Taqman được gắn huỳnh quang ở đầu 5’có

hoạt tính, đầu 3’ gắn huỳnh quang không hoạt tính

Quy trình thực hiện( Taqman PCR)

1 chu kì 500C trong 2 phút1chu kì 950C trong 10 phút

40 chu kì 95 0C trong 15s

40 chu kì 600C trong 1 phút

IV Các phương pháp chẩn đoán

Phương pháp này phát hiện được trên 95% trường hợp nhiễm virus

IV Các phương pháp chẩn đoán

3 Phương pháp chẩn đoán huyết thanh

Nguyên tắc của phương pháp này là dựa trên phản ứng ELISA phát hiện kháng thể trong huyết thanh

phương pháp này phát hiện gần 100% trường hợp nhiễm virus

V So sánh giữa các phương pháp

Trong 3 phương pháp đã trình bày thì phương pháp chẩn đoán huyểt thanh là cho hiệu quả cao nhất

VI Kết luận

Bệnh dại là một bênh truyền nhiễm có tốc độ lay lan rất nhanh chóng, có tỉ lệ tử vong cao

Do đó cần có phương pháp phòng bệnh, chẩn đoán bênh và điều trị bệnh một cách có hhiệu quả

VII Tài liệu tham khảo