BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT ---***--- NGUYỄN THỊ MINH THANH NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC CÁC LOÀI VI TẢO BIỂN QUANG TỰ DƯỠNG
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM
VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT
-*** -
NGUYỄN THỊ MINH THANH
NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC CÁC LOÀI VI TẢO BIỂN QUANG TỰ DƯỠNG CÓ HÀM LƯỢNG LIPID CAO, THÀNH PHẦN ACID BÉO PHÙ HỢP
SỬ DỤNG LÀM NGUYÊN LIỆU SẢN XUẤT
DIESEL SINH HỌC
Chuyên ngành: Hoá sinh Thực nghiệm
Mã số: 60 42 30
LUẬN VĂN THẠC SỸ SINH HỌC
NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC
PGS TS Đặng Diễm Hồng
Hà Nội, tháng 12 năm 2010
1Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trang 2TFA Total fatty acid (acid béo tổng số)
Trang 35
Luận văn Thạc sĩ năm 2010 Nguyễn Thị Minh Thanh
DANH MỤC CÁC BẢNG
Trang
Bảng 1 Năng suất dầu của một số nguồn nguyên liệu dùng cho sản xuất biodiesel 17
Bảng 2 Hàm lượng dầu ở một số loài vi tảo 20
Bảng 3 Địa điểm phân lập 7 loài vi tảo biển được sử dụng cho sàng lọc 43
Bảng 4 Tác dụng kết tủa sinh khối tảo bằng hóa chất ở các nồng độ khác nhau 67
Bảng 5 Thành phần hóa học có chứa trong sinh khối của 7 loài VTB nghiên cứu 71
Bảng 6 Lipid tổng số và thành phần acid béo có trong sinh khối của 7 loài vi tảo biển nghiên cứu 74
Bảng 7 Một số đặc điểm của sản phẩm biodiesel 81
Bảng 8 Thành phần FAME của sản phẩm biodiesel 82
3Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trang 4DANH MỤC CÁC HÌNH
Trang
Hình 1 Cây cải dầu (canola) 11
Hình 2 Phản ứng chuyển vị ester tạo methyl-ester (biodiesel) 15
Hình 3 Tảo lớn (a) và vi tảo (b) 18
Hình 4 Cấu trúc phân tử triglycerol 19
Hình 5 Hệ thống bể hở (A) và Photobioreactor (B) 27
Hình 6 Sản phẩm biodiesel của Công ty Minh Tú 34
Hình 7 Cây Jatropha curcas 35
Hình 8 Tháp chưng cất cồn tinh khiết từ cồn công nghiệp tại Trung tâm Nghiên cứu công nghệ lọc hóa dầu Đại học Bách khoa TP.HCM 36
Hình 9 Một số điểm bán xăng E5: A-tại Hà Nội và B-tại Thành phố Hồ Chí Minh 36 Hình 10 Sơ đồ quy trình chuyển hóa tạo biodiesel từ sinh khối tảo 51
Hình 11 Sinh trưởng của tảo N oculata trong các thể tích bình khác nhau 54
Hình 12 Sinh trưởng của tảo Tetraselmis sp trong các thể tích bình khác nhau 55
Hình 13 Sinh trưởng của tảo Chlorella sp trong các thể tích bình khác nhau 56
Hình 14 Sinh trưởng của tảo I galbana trong các thể tích bình khác nhau 57
Hình 15 Sinh trưởng của tảo C.muelleri trong các thể tích bình khác nhau 58
Hình 16 Sinh trưởng của tảo C salina trong các thể tích bình khác nhau 59
Hình 17 Sinh trưởng của tảo D tertiolecta trong các thể tích bình khác nhau 60
Hình 18 7 loài vi tảo biển nghiên cứu 61
Hình 19 Đồ thị tương quan giữa mật độ tế bào và OD của 7 loài vi tảo biển 64
Trang 57
Luận văn Thạc sĩ năm 2010 Nguyễn Thị Minh Thanh
Hình 20 Hệ thống nuôi trồng các loài vi tảo biển quang tự dưỡng ở các quy mô
bình từ 250 mL đến bình 10 lít 65
Hình 21 Kết tủa sinh khối tảo bằng phương pháp hóa học 68
Hình 22 Nhân nuôi sinh khối Chlorella sp ở quy mô pilot 76 Hình 23 A-Thu sinh khối Chlorella sp bằng phương pháp kết tủa ở quy mô 10 lít
B- Sinh khối Chlorella sp sau khi đã loại muối 77
Hình 24 Các bước thu hồi sản phẩm biodiesel 79 Hình 25 Sắc ký đồ thành phần FAME của sản phẩm biodiesel 83
5Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trang 6MỤC LỤC
Trang
CÁC CHỮ VIẾT TẮT 1
DANH MỤC CÁC BẢNG 5
DANH MỤC CÁC HÌNH 6
MỞ ĐẦU 8
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 10
1.1 Khái quát chung về nhiên liệu sinh học, hiện trạng và xu thế phát triển 10
1.2 Diesel sinh học - Bản chất hóa học và cơ chế phản ứng 13
1.3 Diesel sinh học từ tảo - NLSH thế hệ thứ ba 16
1.3.1 Khái quát về các loại nguyên liệu truyền thống dùng để sản xuất biodiesel 16
1.3.2 Vai trò và tiềm năng của vi tảo trong lĩnh vực NLSH 18
1.3.3 Sản xuất biodiesel từ sinh khối vi tảo 23
1.4 Sản xuất sinh khối vi tảo làm nguyên liệu cho NLSH 25
1.5 Tình hình sản xuất và sử dụng NLSH trên thế giới 28
1.5.1.Tình hình sản xuất và sử dụng NLSH nói chung 28
1.5.2 Tình hình sản xuất và sử dụng NLSH từ tảo 30
1.6 Tình hình nghiên cứu và ứng dụng NLSH ở Việt Nam 32
1.6.1 Tiềm năng sản xuất NLSH ở Việt Nam 32
1.6.2 Những nghiên cứu và thử nghiệm về NLSH ở Việt Nam 34
1.6.3 Chính sách phát triển NLSH ở Việt Nam 38
1.6.4 Tình hình nghiên cứu, nuôi trồng và ứng dụng vi tảo biển ở Việt Nam 39
Trang 73
Luận văn Thạc sĩ năm 2010 Nguyễn Thị Minh Thanh
CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 43
2.1 VẬT LIỆU, HÓA CHẤT VÀ THIẾT BỊ 43
2.1.1 Các chủng vi tảo biển được sử dụng cho quá trình nghiên cứu sàng lọc 43
2.1.2 Môi trường nuôi cấy 43
2.1.3 Hóa chất và thiết bị 44
2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 45
2.2.1 Phương pháp nuôi trồng vi tảo biển quang tự dưỡng 45
2.2.2 Phương pháp xác định sinh trưởng của tảo 46
2.2.2.1 Phương pháp xác định mật độ tế bào bằng buồng đếm Burker – Turk 46
2.2.2.2 Phương pháp đo mật độ quang học (OD) 46
2.2.3 Phương pháp thu hoạch sinh khối tảo bằng hóa chất tạo kết tủa 47
2.2.4 Phương pháp phân tích thành phần hóa học của sinh khối tảo 48
2.2.5 Phương pháp phân tích lipid tổng số và thành phần acid béo 48
2.2.5.1 Phân tích lipid tổng số 48
2.2.5.2 Phân tích thành phần acid béo 49
2.2.6 Phương pháp chuyển hóa tạo biodiesel từ sinh khối tảo 49
2.2.6.1 Chuẩn bị nguyên liệu 49
2.2.6.2 Tạo biodiesel bằng phương pháp chuyển hóa trực tiếp (in situ transesterification) 50
2.2.7 Xác định hiệu suất của quá trình chuyển hóa và thành phần FAME của sản phẩm biodiesel 51
2.2.8 Phương pháp xác định chỉ số iod 52
2.2.9 Phương pháp xác định trọng lượng riêng bằng tỷ trọng kế 53
7Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trang 8CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 54
3.1 Nghiên cứu sinh trưởng của vi tảo biển quang tự dưỡng 54
3.2 Xác định mối tương quan giữa MĐTB và OD 62
3.3 Kết tủa sinh khối tảo bằng phương pháp hóa học 66
3.4 Thành phần hóa học của sinh khối vi tảo 69
3.5 Hàm lượng lipid tổng số và thành phần acid béo 72
3.6 Nuôi thu sinh khối tảo làm nguyên liệu sản xuất biodiesel 76
3.7 Chuyển hóa sinh khối tảo thành biodiesel bằng phương pháp trực tiếp 77
3.8 Đánh giá hiệu suất của quá trình chuyển hóa và chất lượng của sản phẩm biodiesel 79
3.8.1 Hiệu suất của quá trình chuyển hóa 79
3.8.2 Chất lượng của sản phẩm biodiesel 80
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 84
KẾT LUẬN 84
KIẾN NGHỊ 85
CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ 87
TÀI LIỆU THAM KHẢO 89
PHỤ LỤC 101
Trang 98
Luận văn Thạc sĩ năm 2010 Nguyễn Thị Minh Thanh
MỞ ĐẦU
Hầu hết mọi hoạt động của xã hội chúng ta ngày nay - trực tiếp hay gián tiếp
- đều dựa vào nguồn năng lượng dầu mỏ Việc phụ thuộc hoàn toàn vào nguồn năng lượng này có thể dẫn đến sự khủng hoảng về năng lượng và kéo theo nó là các vấn
đề về kinh tế, chính trị, xã hội … khác, đặc biệt là tình trạng ô nhiễm môi trường
Để giảm thiểu những tác động tiêu cực của việc lệ thuộc vào các nguồn năng lượng truyền thống vốn đã bắt đầu cạn kiệt và không có khả năng tái sinh, con người đã và đang bắt tay vào tìm kiếm các nguồn nhiên liệu thay thế Việc tìm kiếm đủ nguồn năng lượng sạch cho tương lai là một trong những thách thức lớn nhất đối với xã hội loài người và nó liên quan mật thiết tới sự ổn định của các quốc gia, sự phát triển kinh tế và chất lượng cuộc sống của con người trên phạm vi toàn thế giới
Để giải quyết vấn đề này, nhiều quốc gia đã khai thác các nguồn năng lượng
từ thủy điện, điện hạt nhân, năng lượng gió, năng lượng mặt trời… Tuy nhiên, các nguồn năng lượng này không thể đáp ứng đủ nhu cầu của thế giới Một nguồn năng lượng khác đang được đặc biệt quan tâm, đó là nhiên liệu sinh học (NLSH) Trong
số các loại NLSH thì diesel sinh học (biodiesel) được nghiên cứu nhiều hơn cả vì nó được cho là nguồn nhiên liệu chính và duy nhất có thể thay thế hoàn toàn diesel có nguồn gốc từ dầu mỏ Trong số các nguồn nguyên liệu được sử dụng để sản xuất NLSH nói chung và biodiesel nói riêng thì tảo được coi là đối tượng tiềm năng nhất
vì tảo có rất nhiều lợi thế mà các nguồn nguyên liệu khác không có được Tảo nói chung và vi tảo nói riêng đã được biết đến là nguồn nguyên liệu tốt để sản xuất biodiesel vì chứa hàm lượng dầu cao và sức sản xuất sinh khối lớn Việc sản xuất đủ sinh khối tảo giàu lipid làm nguyên liệu cho sản xuất biodiesel là vấn đề mấu chốt trong hướng nghiên cứu sử dụng tảo để sản xuất NLSH
Tuy nhiên, không phải tất cả các loài tảo đều có thể nuôi trồng thu sinh khối sản xuất biodiesel cho hiệu quả cao Vì vậy, để góp phần sàng lọc các loài tảo của Việt Nam có tiềm năng làm nguyên liệu cho sản xuất NLSH, chúng tôi đã tiến hành
thực hiện đề tài “Nghiên cứu sàng lọc các loài vi tảo biển quang tự dưỡng có hàm
9Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trang 10lượng lipid cao, thành phần acid béo phù hợp sử dụng làm nguyên liệu sản xuất diesel sinh học” với hy vọng những kết quả thu được sẽ là nền tảng, cơ sở để ứng
dụng nuôi trồng tảo ở quy mô lớn hơn phục vụ mục tiêu nuôi tảo thu sinh khối sản xuất biodiesel
Công việc được thực hiện tại phòng Công nghệ tảo, Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học và công nghệ Việt Nam với các nội dung nghiên cứu như sau:
1 Nuôi trồng 7 loài vi tảo biển (VTB) quang tự dưỡng của Việt Nam ở quy
mô phòng thí nghiệm, so sánh sinh trưởng của các loài này để chọn ra một
số loài có khả năng sinh trưởng tốt nhất và có tiềm năng nuôi trồng trên qui
Trang 11data error !!! can't not
read
Trang 12data error !!! can't not
read
Trang 13data error !!! can't not
read
Trang 14data error !!! can't not
read
Trang 15data error !!! can't not
read
Trang 17data error !!! can't not
read
Trang 18data error !!! can't not
read
Trang 19data error !!! can't not
read
Trang 20data error !!! can't not
read
Trang 21data error !!! can't not
read
Trang 22data error !!! can't not
read
data error !!! can't not
read
Trang 23data error !!! can't not
read
data error !!! can't not
read
Trang 24data error !!! can't not
read
data error !!! can't not
read
Trang 26read
Trang 27data error !!! can't not
read