- Pha theo nồng độ ppm: ịnh dạngxácđ dạngcân pha Cppm là số mg chất tan trong một lít mct khối lượng mẫu cần cân pha, g.. Trong đó: C% nồng độ phần trăm của dung dịch cần pha.. Muốn cho
Trang 1- Höôùng daên cođng vieôc naøy ñöôïc thieât laôp, thöïc hieôn vaø duy trì nhaỉm höôùng daên pha cheâ hoaù chaât tái phoøng thí nghieôm khoa Cođng nghệ thực phẩm- Sinh học – Mođi trường
II NOÔI DUNG HÖÔÙNG DAÊN COĐNG VIEÔC:
1 Caùch pha cheâ dung dòch chuaơn:
Pha töø chaât goâc: cađn chính xaùc moôt löôïng hoaù chaât, cho vaøo bình ñònh möùc, hoaø tan baỉng
nöôùc caât, sau ñoù cho nöôùc caât ñeân vách, troôn laĩc ñeău
Pha töø hoaù chaât khođng phại laø chaẫt goâc: cađn vaø pha noăng ñoô dung dòch hôi cao hôn noăng
ñoô lyù thuyeât sau ñoù xaùc ñònh noăng ñoô cụa dung dòch môùi pha vaø hieôu chuaơn noăng ñoô
Pha töø oâng chuaơn: cho hoaù chaât trong oâng chuaơn vaøo bình ñònh möùc (caơn thaôn khođng
ñöôïc laøm hoaù chaât rôi vaõi ra ngoaøi) traùng sách oâng chuaơn vaø hoaø tan
baỉng nöôùc caât Sau ñoù ñònh möùc ñeân vách, troôn laĩc ñeău
2 Cođng thöùc tính pha dung dòch theo caùc noăng ñoô:
2.1 Ñoâi vôùi chaât raĩn:
- Pha theo noăng ñoô mol CM (mol/lit):
mct =
P
V M
1000
Trong ñoù:
mct khoâi löôïng maêu caăn cađn pha, g
CM noăng ñoô hoaù chaât caăn pha, mol/lít
MA phađn töû löôïng cụa chaât caăn pha,
VPha theơ tích maêu caăn pha, ml
P laø ñoô tinh khieât cụa hoaù chaât
- Pha theo noăng ñoô ñöông löôïng CN (N):
mct =
P
V Ñ
1000
Trong ñoù:
mct khoâi löôïng maêu caăn cađn pha, g
Trang 2Đ số đương lượng của hoá chất cần pha.
VPha thể tích mẫu cần pha, ml
P là độ tinh khiết của hoá chất
- Pha theo nồng độ ppm:
ịnh dạngxácđ
dạngcân pha
Cppm là số mg chất tan trong một lít
mct khối lượng mẫu cần cân pha, g
VPha thể tích mẫu cần pha, lít
P là độ tinh khiết của hoá chất.%
Mdạng can: phân tử lượng của dạng cân
Mdạng xác định : phân tử lượng của dạng cần xác định
- Pha nồng độ %:
mct = C V pha d P
100
%
Trong đó:
C% nồng độ phần trăm của dung dịch cần pha
d là tỉ trọng của dung dịch, với dung dịch loãng xem d≈ 1
Vpha thể tích dung dịch cần pha, ml
P độ tinh khiết của hoá chất
2.2 Đối với chất lỏng:
- Pha theo nồng độ mol CM (mol/lit)
Vđđ =
d C
V M
.10
%
Trang 3
Vđđ thể tích hoá chất đậm đặc cần hút để pha, ml.
CM nồng độ hoá chất cần pha, mol/lít
VPha thể tích mẫu cần pha, ml
C% độ tinh khiết của hoá chất cần pha, %
d là khối lượng riêng của dung dịch cần pha
- Pha theo nồng độ đương lượng CN (N):
Vđđ =
d C
V Đ
.10
%
Trong đó:
Vđđ thể tích hoá chất đậm đặc cần hút để pha, ml
CN nồng độ đương lượng hoá chất cần pha, N
VPha thể tích mẫu cần pha, ml
C% độ tinh khiết của hoá chất cần pha, %
d là khối lượng riêng của dung dịch cần pha
- Pha theo nồng độ %
Vđđ = V pha
d C
d C
1 1
2 2
Trong đó:
C1 : nồng độ phần trăm của dung dịch có nồng độ cao ban đầu
C2 : nồng độ phần trăm của dung dịch cần pha
Vđđ: thể tích dung dịch có nồng độ cao ban đầu ml
Vpha thể tích dung dịch cần pha, ml
Với các dung dịch có nồng độ xấp xỉ nhau, có thể xem d1≈ d2
3 Hiệu chuẩn dung dịch:
Trang 40â.05ml thì lấy số trung bình cộng của những kết quả thu được Nếu kết quả giữa những lần chuẩn mẫu chênh lệch cao hơn 0.05ml cần phải tiến hành chuẩn độ lại cho dến kết quả như ý Muốn cho sự chuẩn độ không sai quá ± 0.1% cần phảiû lấy mỗi lần chuẩn độ ít nhất 20-30ml dung dịch.
- Phép tính hệ số hiệu chuẩn đối với các dung dịch chuẩn:
K =
lt
tt C C
Trong đó:
Ctt là nồng độ chuẩn được
Clt là nồng độ lí thuyết tính pha
Cách hiệu chuẩn dung dịch:
- Cách 1:Theo quy tắc đường chéo:
C1 nồng độ của chất cần hiệu chuẩn
Muốn hiệu chuẩn một dung dịch có nồng độ là 0.12N thành dung dịch 0.1N thì cần thêm bao nhiêu bao nhiêu ml nước
Ta có:
0.12 0.1-0 0.1 10
0.1 = =
0 0.12-0.1 0.02 2
Trang 5dịch có nồng độ 0.1N.
.0
CÔNG DỤNG CÁCH PHA MÔN
THỰC HÀNH
GHI CHÚ
1
1 Hồ tinh bột 1% Chỉ thị xác định iod Hòa tan 5g trong 100ml nước cất Khuấy đều,đổ vào becker
có 100ml nước cất đang sôi
Đun tiếp đến khi dd trong suốt (khoảng 2') Để nguội, nhỏ vài giọt fomandehyt
KNTP, ATVSTP, HHTP
2
2 Phenolphtalein 0,1% C20H14O4 Chỉ thị axít - baz
Khoảng đổi màu
3 Metyl da cam C10H14O3 Chỉ thị axít Hòa tan 0,5 MO trong 100 ml KNTP, Bảo quản
Trang 6CÔNG DỤNG CÁCH PHA MÔN
THỰC HÀNH
GHI CHÚ
trong chai màu tối
Khoảng đổi màu 4,2 – 6,2
Cho chỉ thị vào cốc cồn 60, khuấy đều cho tan hoàn toàn
KNTP, ATVSTP, HHTP, MT
Bảo quản trong chai màu tối
KNTP, ATVSTP, HHTP, MT
Bảo quản trong chai màu tối có nút đậy kín
KNTP, ATVSTP
Khoảng đổi màu Nấc 1:
3,7- 5,2Nấc 2 : 10 - 12
Cho 0,1g chỉ thị vào cốc chứa 100ml nước, khuấy đều cho tan hoàn toàn
ĐC, PTCS
Cho 0,1g chỉ thị vào 100g nước, khuấy đều cho tan hoàn toàn
PTCS, PTCN
Trang 7CÔNG DỤNG CÁCH PHA MÔN
THỰC HÀNH
GHI CHÚ
Fe(II)
10 Acid
Fusinsulfuro 1%
Thuốc thử tạo phứùc – xác định
NO2
-Cho 1g chỉ thị vào cốc chứa cồn, khuấy đều cho tan hoàn toàn
PTCN, MT
PTCN, MT
12 Acid Rubeanic
0,1%
Thuốc thử định tính
Hoà tan 0,1g acid Rubeanic trong cốc chứa 100ml cồn
PTCS
13 Acid Piric 0,1% Chỉ thị axít
bazơKhoảng đổi màu 0,0 – 1.3
Hoà tan 0,1g acid Piric trong10ml nước cất PTCS
Nghiền 0,25g chỉ thị với 10gNaCl hoặc KCl đã sấy khô hoặc khan trong cối sứ thành bột mịn
PTCS, PTCN
Bảo quản trong chai màu tối
16 Ferroin Chỉ thị oxi hóa
khử- xác định Fe(II)
Hoà tan 10,phenaltrolin 0,695g FeSO4.7H2 O trong nước,thêm nước cất thành1 00ml
1,485g1-ĐC, PTCN, PTCS
17 Metylen xanh Thuốc thử tạo
phức- xác định CHĐBM
Hoà tan 0,1g MB và 50g NaH2PO4 với 41ml H2SO4 6N, thêm nước thành 1 lít
PTCN
Trang 8CÔNG DỤNG CÁCH PHA MÔN
THỰC HÀNH
GHI CHÚ
18 Hổn hợp bảo vệ
Zymmerman Dùng làm dung dịch bảo vệ
trong xác định Fe(II) bằng phương pháp chuẩn độ oxy hoá khử
Hòa tan 67g MnSO4 khan trong 500ml nước cất, thêm 125ml
H3PO4 đđ và 125ml H2SO4 đđ vào, thêm nước thành 1 lít
PTCS, PTCN
27 Thuốc thử
Kaufmann Cho 0,5 lít metanol và 75g NaBr vào beaker khuấy đến
khi bão hòa Lọc, thêm vào 2,75ml Brôm lỏng
trong chai màu
dư (thấy có kết tủa màu đỏ)
Thêm vào hỗn hợp 200ml NaOH 5N và pha loãng thành
1 lít Để lắng dd, lấy phần nước lọc trong để sử dụng
NO3
-Ngâm lọ phenol trong nước nóng khoảng 700 C cho chảy lỏng Cân 12g Phenol cho vào becher Thêm vào cốc 144g
H2SO4 đđ Đậy bằng mặt kính đồng hồ và đun trên bếp cách thủy 2 giờ trong tủ hút
PTCN, MT
Pha dùng ngay hoặc giữ
ở nhiệt độ thấp
Trang 9CÔNG DỤNG CÁCH PHA MÔN
THỰC HÀNH
GHI CHÚ
31 Dung dịch
Feling A Xác định đường tổng theo
phương pháp Bertrand
- Hòa tan 34,66g CuSO4.5H2O trong nước và pha loãng đến 500ml
PTCN
32 Dung dịch
Feling B Xác định đường Xác định đường
tổng theo phương pháp Bertrand
- Hòa tan 173g natri tartrac (muối Rochelle
KNaC6H4O6.4H2O) và 50g NaOH trong nước cất rồi pha loãng đến 500ml trong điều kiện lạnh
trong chai nhựa
Cách pha hố chất mơn Kiểm nghiệm thực phẩm
STT TÊN HOÁ CHẤT
THỂ TÍCH PHA
THÔNG
SỐ KỶ THUẬT
CÁCH PHA CHÚ GHI
1
K (NH4)2C2O4 40% 100ml P =99 Cân 40.40 g (NH4)2C2O4 hồtan trong nước cất
2 1.10 phenanthrolin 0.1 % 100ml
hồ tan 100mg 1.10 phenanthrolin trong 100ml nước cất Gia nhiệt đến 80 0C
Khơng đun sơi
3 AgNO 3 0.1N 1lít 99.5 Hịa tan 17.0723 g trong 1 lít
nước cất
trong nước và 3 ml CH3COOH / thêm nước cất
Trang 10Cồn amoniac 250ml 28.5ml cồn + 7.5 ml amoniac/ nước cất vừa đủ 250 ml
9
Đệm amoni acetat 1lít
Hòa tan 250g aminiacetat trong 150 ml nước cất thêm 700ml acid acetic Định mức bằng nước cất đến 1lít
10 dung dịch dự trữ sắt
Cho từ từ 20ml H2SO 4 vào 50
ml nước cất Thêm 1.404 g Fe(NH4)2(SO 4)2
11
Dung dịch Fe (III) 1lít
50 g Fe2(SO4)3 + 20 ml H2SO 4 đậm đặc , định mức bằng nươc cất đến 1 lít
cho 280 ml H2SO 4 vào 600ml nước , để lạnh đến nhiệt độ phòng Cho thêm 25 g Na 2MoO 4 rồi định mức đến vạch 13
Dung dịch chuẩn PO43- 250ml Hoà tan 1.0967g KH2PO4 đã
sấy khô trong 250 ml nước cất
đủ 1 lít
Trang 11346 g kalinatri tartrat trong 400ml nước cất.Hòa tan 100 g NaOH vào 300ml nước cất
Trộn 2 dung dịch vào nhau thêm nước cất đủ 1lít
18
Lấy 55,5 ml Formol , cho vài giọt pp và thêm từng giọt NaOH loãng đến khi dung dịch vừa chuyển sang
cất pha thành 100ml20
H2SO4 0.02N 1lít 95 % Lấy 0.56 ml H2SO4 cho vào nước cất và định mức tới 1 lít
Lấy 4.3ml HCl cho vào nước cất và định mức tới 1 lít
nước cất
28 K2CrO 4 10 % 100ml 99.5 Cân 10 g K2CrO 4 hoà tan
trong 50 ml nước cất, thêm
Trang 12từng giọt AgNO 3 đến khi xuâấ hiện màu đỏ Để yên 12 giơ, lọc, pha loãng dung dịch qua lọc thành 100ml với nước cất.
29 Kali fero cianua 15% 100ml 100 Cân 15 g Kali fero cianua pha
34 KMnO 4 0.1N 1 lít 99.5 Hoà tan 3.1764 g KMnO 4 trong nước cất và định mức
đến 1 lít bằng nước cất
35 KSCN 0.1N 1 lít 99.5 Hoà tan 9.7668g KSCN trong nước cất và định mức đến 1 lít
bằng nước cất36
Hoà tan 5 g MgO trong nước cất và định mức đến 100 ml bằng nước cất
37
Hoà tan 1g MO trong cồn 70
và định mức đến 100ml bằng cồn 70
38 Na2HPO4 0.1N 100ml 99 Hoà tan 5 g MgO trong nước cất và định mức đến 100 ml
Trang 13nước cất và định mức đến 1 lít bằng nước cất
41 NaF 3 % 100ml 98 Hoà tan 3 g NaF trong nước cất và định mức đến 100 ml
Hoà tan 5.02g K2CrO4 băng nước cất sau đó định mức đến 100ml
45
Hoà tan 0.85g AgNO3 bằng nứơc cất sau đó định mức đến 100ml
46 NaOH 0.1N 1 lít 96 Hoà tan 4.2g NaOH trong nước cất và định mức đến 1 lít
bằng nước cất47
Hoà tan 8.4 g NaOH trong nước cất và định mức đến 1 lít bằng nước cất
và định mức đến 100 ml bằng nước cất
Trang 1451 NaOH 30% 100ml 96 Hoà tan 31.5g NaOH bằng nước cất sau đó định mức đến
100ml
52 Na2B4O7 5% 100ml 99.5 Hoà tan 5.02gNa2B4O7bằng nước cất và định mức đến
100ml53
Hoà tan 35.71g NH4OH bằng nước cất và định mức đến 100ml
54
Hoà tan 4.02g (NH4)C2O4 bằng nước cất sau đó định mức đến 100ml
55 Pb(NO3)2 10 % 100 ml 98 Hoà tan 10.2 g Pb(NO3)2 trong nước cất và định mức
đến 100 ml bằng nước cất
100ml metanol57
Hoà tan 10.05g NH4Cl trong nước cất và định mức đến 100ml bằng nước cất 58
Phenolphtalein 0.5% 100 ml
500 mg pp trong 50 ml methanol Thêm nước cất cho
đủ 100ml
59 Thuốc thử Wijs 1000ml Cho vào 1 bình cầu khô nút
nhám :KIO3 7.10 g
KI 11.06 gNước cất 50 ml HCl đậm đặc 50 ml Lắc cho đến khi tan hết Chuy6ẻn sang bình gạn và lắc với 10 ml CHCl 3 Nếu lớp CHCl 3 có màu tím thì thêm từng giọt KIO3 1% vừa thêm vừa lắc mạnh cho khi CHCl 3
Trang 15mất màu Nếu lớp CHCl 3
khơng màu thì thêm từng giọt
KI 1% vừa thêm vừa lắc mạnh cho khi cĩ màu hồng nhạt Để yên gạn lớp nước vào bình định mức cĩ dung tích 1 lít và thêm nước đến 1 lít.Dung dịch phải cĩ màu xanh
Cách pha hố chất mơn An tồn vệ sinh thực phẩmSTT TÊN HOÁ CHẤT
THỂ TÍCH PHA
THÔNG
SỐ KỶ THUẬT
CÁCH PHA CHÚ GHI
3
Hút 10.1 ml CH3COOH cho vào nước cất và định mức đến 100ml
4
Đệm acetat
Hồ tan 250 g CH3COONH4 trong 150 ml nước cất , thêm 700ml CH3COOH đậm đặc Lắc đều và định mức đến 1 lít
tan trong H2SO4 đậm đặc Rĩt dung dịch vừa hồ tan sang một becher chứa sẵn nước Sau
Trang 16H2SO4 0.1N
Hút 5.6ml H2SO4 cho bình định mức 1lít cĩ chứa khoảng 100ml nước cất Định mức đến vạch bằng nước cất
8
H2SO4 10 %
Hút 10.2ml H2SO4 cốc cĩ chứa khoảng 100ml nước cất
Định mức đến vạch bằng nước cất
Hút 15.4ml HNO3 đđ sau đó pha loãng dung dịch này bằng 1lít nước cất
dd ,thêm vài giọt HCHO và thêm nước vào cho đến 1lít 11
Iod 0.05N
Dùng một lượng KI 10% hồ tan 6.4 g iod sau đĩ định mức bằng nước cất đến 1 lít
12
K2Cr2O7 0.002N
M= 294.8P= 99.8
Hồ tan 0.0983 g K2Cr2O7 ( đã sấy khơ ) bằng nước cất sau đĩ định mức đến 1 lít13
K2Cr2O7 0.05N
M= 294.8P= 99.8
Hồ tan 0.2457 g K2Cr2O7 ( đã sấy khơ ) bằng nước cất sau đĩ định mức đến 1 lít
Trang 17Hoà tan 0.1 g KNO 3 bằng nước cất sau đó định mức đến 100ml
19
NaOH 10%
M= 40P= 96%
Hoà tan 10.5 g NaOH bằng nước cất sau đó định mức đến
NaOH 0.02N
Hoà tan 0.82 g NaOH bằng nước cất sau đó định mức đến 1lít
22
NaOH 0.1N
Hoà tan 0.82 g NaOH bằng nước cất sau đó định mức đến 1lít
23
NH2OH.HCl 10g/l
Hoà tan 10 g NH2OH.HCl bằng nước cất sau đó định mức đến 1lít
24
Pb(CH3COO)2 16%
Hoà tan 10 g NH2OH.HCl bằng nước cất sau đó định mức đến 100ml
Trang 18Phenanthrolin 0.1%
Cho 0,1 g 1-10 phenaltrolein vào breaker chứa nước cất, đun nóng (800C) khuấy cho tan hoặc cho vào breaker vài giọt HCl đặc, thêm nước đủ 100ml
Thuốc thử Eber 10 ml HCl + 10 ml ete + 30 ml cồn
STT TÊN HOÁ CHẤT
THỂ TÍCH PHA
THÔNG
SỐ KỶ THUẬT
CÁCH PHA CHÚ GHI
1
nước cất2
đĩ định mức đến 100ml 5
cất
becher cĩ chứa sắn lượng nước sau đĩ định mức đến
Trang 19HCl 0.5N
1lít
M= 36.46C%= 36- 38
Lấy 43ml HCl cho vào nước cất và định mức tới 1 lít
9
HCl 2%
1lít
M= 36.46C%= 36- 38
Lấy 5.4ml HCl cho vào nước cất và định mức tới 1 lít
100ml nước 15
100ml nước 16
Trang 20Cách pha hố chất mơn Phụ gia thực phẩm
STT TÊN HOÁ CHẤT
THỂ TÍCH PHA
THÔNG
SỐ KỶ THUẬT
CÁCH PHA CHÚ GHI
Cân 1,6290g Anhydrous
cân phân tích Sau đó hòa tan bằng nước cất, rồi định mức đúng 1 lít.
Trang 21có màu hồng nhưng không ảnh hưởng đến kết quả phân tích và có thể dùng trong vài tháng (chú ý: rất độc không được dùng miệng ngậm pipet để hút dung dịch).
5 Dung dịch lưu trữ NO 2-
Hịa tan 1,500g NaNO 2 khan trong nước cất và định mức thành 1lít
EDTA + nước cất
đậm đạc pha lỗng thành 100ml với nước cất
chlorhydrate + 50ml nước cất + 1ml HCl đậm đặc + nước cất
=100ml Pha dùng ngay hoặc giữ
Trang 22Cách pha môi trường trong thí nghiệm vi sinh
Agar 15g Nước cất 1 lít
1 lít
định lượng vi sinh vật bằng phương pháp đếm khuẩn lạc
K2HPO4 1g
NH4H2PO4 1g MgSO4 0,2gBromothymol blue 0,08gAgar 15gNước cất 1 lTrypticase peptone 15gPhytone peptone 5gNaCl 5gNước cất 1 lít
Được sử dụng trong khẳng định sinh hóa
K 2 HPO 4 2,75g
KH 2 PO 4 2,75g NaCl 5g Sodium lauryl sulfate 0,1g Nước cất 1 lít
Được sử dụng để tăng sinh chọn lọc
Trang 23NaCl 5g Nước cất 1 lít
Được sử dụng để khẳng định vi sinh vật
K 2 HPO 4 2,75g
KH 2 PO 4 2,75g NaCl 5g Sodium lauryl sulfate 0,1g
Lactose 5g
KH 2 PO 4 1,5g NaCl 5g Nước cất 1 lít
Được sử dụng để tăng sinh chọn lọc
3 Methyl redThuốc thử
Methyl red 0,1g Ethanol 95% 300mlNước cất 500ml
4 Disodium hydrogen phosphate
Được sử dụng để tăng
sinh chọn lọc Salmonella
Trang 247,Sodium dihydrogen phosphate 9 g Nước cất 1 lít
Xylose 315g Lactose 7,5g Sucrose 7,5g Sodium desoxycholate 1g NaCl 5g
Na2S2O5 6,8g Ammonium ferous (II) citrate 0.8 g0,8g
Phenolred 0,08 Agar 18,0g
Được sử dụng để phân
lập Salmonella
6 Môi trường Kligler Iron
Agar (KIA):
Peptone 20g Lactose 20gDextrose 1g NaCl 5g Ammonium ferric citrate 0.5g
0,5g
Na2S2O5 0,5gPhenolred 0.0125g Agar 15g
Được dùng trong thử nghiệm sinh hóa
7 Môi trường Urea Phenol
Được dùng để thử nghiệm khả năng phân giải urea
8
Môi trường Lysine
Bromocresolpurple 0,015g
Được sử dụng để phát hiện enzym Lysine Decarboxylase của vi sinh vật
9 Môi trường Cao nấm men 3 g Được sử dụng để phát