Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ) Phát triển các dòng thuần phục vụ chọn giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời của miền Bắc, Việt Nam (LA tiến sĩ)
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ HÂN PHÁT TRIỂN CÁC DÒNG THUẦN PHỤC VỤ CHỌN TẠO GIỐNG NGÔ LAI CHO ĐIỀU KIỆN CANH TÁC NHỜ NƯỚC TRỜI CỦA MIỀN BẮC, VIỆT NAM CHUYÊN NGÀNH: DI TRUYỀN VÀ CHỌN GIỐNG CÂY TRỒNG MÃ SỐ: 62 62 01 11 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÀ NỘI - 2017 Công trình hoàn thành tại: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Người hướng dẫn: GS TS VŨ VĂN LIẾT PGS.TS NGUYỄN VĂN CƯƠNG Phản biện 1: PGS.TS Vũ Đình Hòa Học viện Nông nghiệp Việt Nam Phản biện 2: TS Khuất Hữu Trung Viện Di truyền nông nghiệp Phản biện 3: TS Đặng Ngọc Hạ Viện Nghiên cứu Ngô Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án cấp Học viện họp tại: Học viện Nông nghiệp Việt Nam Vào hồi giờ, ngày tháng năm 2017 Có thể tìm hiểu luận án thư viện: - Thư viện Quốc gia Việt Nam - Thư viện Học viện Nông nghiệp Việt Nam PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Ngô (Zea mays L.) có nguồn gốc Mexico cách 7000 năm châu Mỹ quê hương chuyển ngô thành nguồn lương thực tốt cho người Hạt ngô chứa xấp xỉ 72% tinh bột, 10% protein 4% chất béo, cung cấp lượng sinh học (365 Kcal/100g) cho hoạt động sống Ngô trồng rộng khắp giới, nước có diện tích sản xuất sản lượng lớn Mỹ, Trung Quốc Brazil, ba nước tạo xấp xỉ 717 triệu tấn/năm Ngô sử dụng làm lương thực, thức ăn chăn nuôi, công nghiệp khác, 10 năm gân ngô sử dụng làm nguyên liệu cho công nghiệp chế biến nhiên liệu sinh học, nhu cầu ngô giới ngày tăng (Peter et al., 2014) Hầu hết 160 triệu diện tích trồng ngô toàn cầu điều kiện canh tác nhờ nước trời Tỷ lệ diện tích trồng ngô có tưới Mỹ khoảng 14%, Trung Quốc khoảng 40% có Ai Cập cao 100% Còn lại, nước khác giới khoảng 10% diện tích trồng ngô có tưới Thống kê toàn cầu, thiệt hại suất ngô hạn trung bình hàng năm 15%, tương đương với 120 triệu ngô hạt, với giá tương đương với 36 tỷ đô la Tuy nhiên, ảnh hưởng tổn thất thực hạn hán tác động đến sống người vùng ngô sử dụng làm lương thực hàng ngày, sa mạc Châu Phi nước nghèo, ước tính khoảng 300 triệu người Chương trình lương thực giới phải mua 410.000 ngô với kinh phí 100 triệu đô la cứu đói cho vùng này, năm 2011 hạn làm thiệt hại nông nghiệp Mỹ 5,2 tỷ đô la (Doug, 2012) Vì thế, chọn giống ngô chống chịu hạn đóng vai trò vô quan trọng với giới mục tiêu phát triển thiên niên kỷ chống nghèo đói (WFP, 2012) Hạn hán xảy nghiêm trọng thập kỷ qua ảnh hưởng nặng nề đến suất sản lượng vùng trồng ngô giới Các phương pháp nhận biết phát triển ngô lai chịu hạn mục tiêu quan trọng nhà nghiên cứu Những cố gắng nhà tạo giống tập trung tạo giống có suất ổn định gặp điều kiện bất thuận hạn, nhận biết để cải tiến khả chịu hạn thông qua tính trạng gián tiếp Các tính trạng gián tiếp nhận biết dòng bố mẹ khả di truyền chúng cho tổ hợp lai bố mẹ chịu hạn (Meghyn, 2010) Mở rộng di truyền tạo nguồn vật liệu di truyền chịu hạn tiềm to lớn để tạo giống ngô chịu hạn, đặc biệt quan trọng với điều kiện môi trường khắc nghiệt nước phát triển (Weiwei et al., 2011) Diện tích trồng ngô Việt Nam chủ yếu đất dốc vùng núi, nơi hệ thống tưới tiêu canh tác ngô chủ yếu canh tác nhờ nước trời Những điều kiện canh tác cần thiết có giống ngô lai suất cao có khả chịu hạn Ngô Hữu Tình (1997) cho ngô Việt Nam trồng chủ yếu miền núi đất dốc canh tác hoàn toàn phụ thuộc vào nước mưa, nên thường xuyên gặp bất thuận thiếu hụt nước giai đoạn đầu cuối ngô, giai đoạn lượng mưa thấp Để giảm ảnh hưởng hạn đến sản xuất ngô Viện Nghiên cứu Ngô nghiên cứu quản lý chọn giống chịu hạn thu kết đáng ghi nhận Tuy nhiên giống chịu hạn hạn chế chưa đáp ứng cho tiểu vùng sinh thái miền núi Tây Bắc, Việt Nam Biến đổi khí hậu tác động đến Việt Nam ngày rõ nét, ảnh hưởng tiêu cực nước biển dâng, nhiệt độ cao, đặc biệt hạn hán ngày khốc liệt ảnh hưởng đến sinh kế người dân tác động tiêu cực đến nông nghiệp (Nguyễn Văn Thắng cs., 2010) Một giải pháp ứng phó với biến đổi khí hậu chọn giống trồng chống chịu thích nghi với điều kiện bất thuận Ở vùng Trung du Miền núi phía Bắc, ngô lương thực đứng sau lúa Năm 2015, diện tích ngô 519,3 nghìn (Tổng cục Thống kê, 2015) Sản xuất ngô chủ yếu đất dốc nhờ nước trời (chiếm khoảng 80% diện tích) Năng suất ngô vùng Trung du Miền núi phía bắc đạt 36,8 tạ/ha, 82,12% so với trung bình nước Năng suất ngô vùng đạt thấp thiếu giống ngô thích hợp với điều kiện vùng Nhu cầu giống ngô lai vùng Trung du Miền núi phía bắc lớn Vì vậy, việc nghiên cứu chọn giống ngô ngắn ngày, chịu hạn, suất cao cho vùng cần thiết cấp bách 1.2 MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI Phát triển tập đoàn dòng đời thấp chọn lọc chọn lọc số dòng có đặc điểm nông sinh học tốt, chị hạn, khả kết hợp cao làm nguồn vật liệu cho công tác tạo giống ngô lai suất cao, chất lượng, thích hợp với điều kiện canh tác nhờ nước trời Miền Bắc, Việt Nam Chọn tạo số tổ hợp lai ngô suất cao thích hợp với điều kiện canh tác nhờ nước trời miền Bắc, Việt Nam Ứng dụng phương pháp kích tạo đơn bội vật liệu ngô điều kiện nhiệt đới sử dụng kích tạo UH400 nhằm phát triển dòng nhanh 1.3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU Phát triển dòng tự phối thụ phấn cưỡng từ 32 dòng tự phối đời S3- S4 ban đầu phát triển từ nguồn gen có nguồn gốc địa phương nhập nội đặc điểm nông sinh học, suất khả chịu hạn Thử khả kết hợp đánh giá khả chịu hạn tổ hợp lai ưu tú điều kiện nhân tạo canh tác nhờ nước trời Nghiên cứu khả thích nghi, khả kích tạo đơn bội dòng kích tạo đơn bội UH400 để phát triển dòng đơn bội kép dòng ngô nhiệt đới 1.4 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA ĐỀ TÀI Xây dựng sở khoa học công tác chọn tạo dòng tự phối chịu hạn để chọn tạo giống ngô lai cho điều kiện canh tác nhờ nước trời miền Bắc, Việt Nam Phát triển 30 dòng tự phối, chọn dòng (D5, D14, D22 D28) chịu hạn có khả kết hợp cao suất Tạo tổ hợp lai (THL1, THL8) ưu tú, suất cao chống chịu tốt, thích ứng với điều kiện canh tác nhờ nước trời phát triển thành giống phục vụ sản xuất Khẳng định UH400 có khả thích nghi kích tạo đơn bội với dòng ngô nhiệt đới tạo 10 dòng đơn bội kép 1.5 Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ Ý NGHĨA THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 1.5.1 Ý nghĩa khoa học Đề tài đánh giá nguồn gen ngô địa phương nhập nội, chất lượng, thích nghi với điều kiện khó khăn nước tưới để phát triển vật liệu di truyền cho chọn giống ngô lai suất cao, thích ứng với điều kiện canh tác nhờ nước trời miền núi phía Bắc, Việt Nam Đề tài khẳng định UH400 có khả thích nghi kích tạo đơn bội với dòng ngô nhiệt đới sử dụng để phát triển dòng nhanh ngô 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn Đã xác định dòng tự phối có khả sử dụng chương trình chọn tạo giống ngô lai cho điều kiện canh tác ngô nhờ nước trời Chọn tạo tổ hợp lai ưu tú suất, khả chịu hạn, thích nghi với điều kiện canh tác khó khăn nước tưới Tạo 10 dòng đơn bội kép sử dụng dòng kích tạo UH400, dòng đơn bội kép sử dụng phát triển giống ngô lai 1.6 BỐ CỤC CỦA LUẬN ÁN Luận án gồm 163 trang, chia thành phần: Phần - Mở đầu trang, Phần 2Tổng quan 37 trang, Phần 3- Phương pháp nghiên cứu 17 trang, Phần 4-Kết thảo luận 94 trang, Phần 5-Kết luận kiến nghị trang Luận án gồm 71 bảng số liệu, hình minh họa, tham khảo 147 tài liệu có 18 tài liệu tiếng việt 129 tài liệu tiếng anh, có phụ lục ghi rõ số liệu thí nghiệm, đặc điểm nông sinh học dòng tổ hợp lai tạo PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 SẢN XUẤT NGÔ TRÊN THẾ GIỚI VÀ VIỆT NAM 2.1.1 Vai trò ngô Ngô lương thực quan trọng nhiều nước, lương thực quyền người Ngô ba lương thực quan trọng đứng thứ sau lúa nước lúa mỳ, nguồn cung cấp calo hàng ngày cho người dân nước phát triển, ngô rẻ hạt ngũ cốc khác Ngô đặc biệt quan trọng với 900 triệu người nghèo nước thuộc châu Phi, châu Á Mỹ La Tinh (CIMMYT and IITA, 2011) 2.1.2 Sản xuất ngô giới Vào năm 1961, suất ngô trung bình giới xấp xỉ 20 tạ/ha, năm 2014 tăng gấp 2,8 lần (đạt 56,63 tạ/ha), sản lượng tăng từ 205,02 triệu lên 1.038,28 triệu (gấp 4,96 lần), diện tích tăng từ 105,55 triệu lên 183,32 triệu hecta (hơn 1,75 lần) (FAO, 2014) Bảng 2.1 Tình hình sản xuất ngô giới giai đoạn 1961- 2014 Diện tích Năng suất Sản lượng Chỉ tiêu Năm (triệu ha) (tạ/ha) (triệu tấn) 1961 105,55 19,42 205,02 1971 118,19 26,53 313,62 1975 121,48 28,13 341,75 1990 131,04 36,89 483,37 2000 137,00 43,25 592,48 2001 137,52 44,76 615,53 2002 137,61 43,96 604,87 2003 144,70 44,59 645,16 2004 147,45 49,43 728,97 2005 148,04 48,21 713,68 2006 146,74 48,17 706,85 2007 158,39 49,88 790,16 2008 162,69 51,06 830,61 2009 158,74 51,67 820,20 2010 164,03 51,89 851,26 2011 171,69 51,70 887,66 2012 179,22 48,99 877,92 2013 185,12 55,00 1.018,11 2014 183,32 56,63 1.038,28 Nguồn: FAOSTAT (2014) 2.1.3 Tình hình sản xuất ngô Việt Nam Sản xuất ngô nước ta tăng nhanh diện tích, suất sản lượng giai đoạn 2000 – 2015 Từ năm 2000, suất sản lượng ngô Việt Nam có bước tiến nhảy vọt Tốc độ tăng trưởng diện tích, suất sản lượng ngô Việt Nam cao nhiều lần giới, lợi nhuận trồng ngô lai cao hẳn loại trồng khác Năm 2015, diện tích ngô tăng đáng kể, đạt khoảng 1.179,3 nghìn ha, tăng xấp xỉ 61,5% so với năm 2000 Về suất, sau 10 năm kể từ năm 2005 tăng từ 36,0 tấn/ha lên 44,8 tấn/ha (tăng 24,4% so với năm 2003) Tổng sản lượng ngô sơ nước năm 2014 đạt 5,2 triệu tấn, tăng 65,6 % so với năm 2004 (Tổng cục Thống kê, 2015) 2.2 ĐA DẠNG NGUỒN GEN VÀ DI TRUYỀN CHỊU HẠN Ở NGÔ 2.2.1 Nghiên cứu đa dạng nguồn gen ngô giới Nguồn gen ngô có tầm quan trọng to lớn đa dạng sinh học, đa dạng di truyền chọn tạo giống nên quan tâm thu thập, bảo tồn sử dụng Bảo tồn thực với hai phương thức bảo tồn in - situ ex - situ Trung tâm phát triển ngô lúa mỳ Quốc tế CIMMYT cố gắng tiếp tục thu thập bảo tồn nguồn gen ngô theo mục tiêu hướng như: thu thập nguồn gen ngô địa đại diện cho châu Mỹ La Tinh điểm tài nguyên di truyền ngô, tiếp tục hợp tác với quốc gia Mỹ La Tinh vùng khác giới để thu thập, nhân bảo tồn đa dạng giống địa Nhận biết bảo tồn đa dạng giống địa Châu Phi, Châu Á chúng nguồn gen có khả thích nghi với khí hậu thổ nhưỡng vùng Nhiệt đới, Á nhiệt đới vùng cao (Taba et al., 2004) 2.2.2 Đa dạng nguồn gen ngô Việt Nam Nguồn gen ngô miền núi phía bắc Việt Nam đa dạng, thu thập phạm vi huyện tỉnh Điện Biên nhà nghiên cứu có 24 mẫu giống ngô Phân loại mẫu giống ngô thu thập theo phân bố địa lý, dân tộc phân loại thực vật kết cho thấy xã vùng sâu, vùng xa Việt Nam có giống ngô đa dạng, phân bố theo tiểu vùng sinh thái dân tộc điểm ý nghiên cứu nguồn gen thực vật nói chung nguồn gen ngô nói riêng (Vũ Văn Liết Đồng Huy Giới, 2006) 2.3 CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁT TRIỂN DÒNG THUẦN CHO TẠO GIỐNG NGÔ ƯU THẾ LAI CHỊU HẠN Một số phương pháp tạo dòng nhà khoa đề xuất sử dụng như: + Phương pháp chuẩn: Do Shull đề xuất sử dụng (1909, 1910) + Phương pháp cận phối (sib fullsib); Phương pháp hoá tích hợp; Chọn tạo dòng tương đồng; Phương pháp lai trở lại Ngoài phương pháp tạo dòng truyền thống trên, số phương pháp tạo dòng phát triển chọn lọc giao tử, tạo dòng đơn bội kép nuôi cấy bao phấn noãn chưa thụ tinh, hay phương pháp tạo dòng đơn bội kép in vivo sử dụng dòng kích tạo đơn bội… 2.4 CÁC NGHIÊN CỨU CHỌN TẠO GIỐNG NGÔ CHỐNG CHỊU HẠN Việt Nam xác định số thị SSR liên kết với gen chịu hạn số thị liên quan đặc tính chịu hạn ngô (Bùi Mạnh Cường, 2013) Nguồn gen ngô địa phương Việt Nam đa dạng cần khai thác sử dụng chọn tạo giống ngô thích ứng với điều kiện sinh thái khác quan tâm nghiên cứu Việt Nam Vũ Văn Liết cs (2013) thực đề tài “Chọn lọc dòng ngô có khả chịu hạn dựa kiểu hình marker phân tử” Hai mươi tám dòng tự phối ngô có nguồn gốc khác đánh giá để chọn dòng bố mẹ có khả chịu hạn phục vụ cho tạo giống ngô ưu lai Thí nghiệm đánh giá khả chịu hạn trồng chậu plastic Sử dụng marker phân tử SSR để dò tìm gen QTL (locus tính trạng số lượng) điều khiển số tính trạng liên quan đến khả chịu hạn với cặp mồi: UMC1862 dò tìm QTL điều khiển suất ngô điều kiện bất thuận nước (YS), UMC2359 dò tìm QTL điều khiển số chống chịu bất thuận nước (STI), NC133 dò tìm QTL điều khiển di truyền khả chống chịu bất thuận nước (TOL) Kết dựa đánh giá kiểu hình marker phân tử chọn dòng TP17, TP12, TP2, TP5 TP24 ưu tú sử dụng để lai thử khả kết hợp chọn tạo giống ngô lại chịu hạn Qua kết nghiên cứu sản xuất ngô Việt Nam thấy nhu cầu sử dụng ngô ngày tăng, đặc biệt nhu cầu cho ngành công nghiệp thức ăn chăn nuôi (theo Bộ NN & PTNT sáu tháng đầu năm 2016, Việt Nam chi tới 650 triệu USD, tương đương 14.650 tỉ đồng để nhập 3,3 triệu ngô) Tuy nhiên nghiên cứu ngô Việt Nam hạn chế, giống ngô lai tạo chưa đủ đáp ứng cho thị trường Mặt khác ngô Việt Nam chủ yếu trồng miền núi nơi khó khăn nước tưới, giống sử dụng miền núi chủ yếu giống địa phương, suất thấp, giống thụ phấn tự cải tiến số giống lai công ty nước sản xuất với giá thành cao Từ thực tế đó, nghiên cứu chọn tạo giống ngô lai chất lượng tốt, suất cao, phù hợp với điều kiện canh tác vùng vấn đề cần thiết nhà chọn tạo giống Việt Nam PHẦN PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU Nghiên cứu tiến hành Viện Nghiên cứu Phát triển trồng, Khoa Công nghệ Sinh học, Phòng thí nghiệm Dự án JICA– Học Viện Nông nghiệp Việt Nam Thời gian nghiên cứu từ năm 2012 đến năm 2016 3.2 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU Vật liệu 32 dòng ngô tự phối đời S3 – S4 phát triển từ giống ngô có nguồn gốc địa phương nhập nội Viện Nghiên cứu Phát triển trồng, Học Viện Nông nghiệp Việt Nam cung cấp, giống đối chứng LCH9, VN8960 DK 9901 3.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Nội dung 1: Đánh giá dòng tự phối ngô đời thấp đặc điểm nông sinh học, khả chống chịu, suất chịu hạn qua thí nghiệm đồng ruộng, nhà lưới, chậu vại, thị phân tử đánh giá khả kết hợp chung sớm Gia Lâm, Hà Nội Nội dung 2: Phát triển dòng thuần, đánh giá dòng tự phối đời cao Gia Lâm, Hà Nội Lai thử khả kết hợp riêng dòng tuyển chọn lai diallel theo mô hình Griffing Nội dung 3: Đánh giá dòng bố mẹ tổ hợp lai Gia Lâm, Hà Nội Khảo nghiệm tổ hợp lai ưu tú môi trường canh tác nhờ nước trời Mai Sơn, Sơn La Nội dung 4: Tạo phát triển dòng đơn bội kép kích tạo đơn bội, sử dụng dòng UH400 Gia Lâm, Hà Nội 3.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.4.1 Phương pháp thí nghiệm đồng ruộng, đánh giá dòng tự phối hệ S3-S4 thí nghiệm so sánh Phương pháp bố trí thí nghiệm đánh giá 32 dòng tự phối hệ S3-S4 + Thí nghiệm bố trí mạng lưới (Lattice) sử dụng đánh giá 32 dòng tự phối hệ S3-S4 theo IPGRI năm 2001, diện tích ô thí nghiệm 14m2, lần lặp lại, đố i chứng là VN8960, LCH9 Sơ đồ thí nghiệm tóm tắt sau: (Ghi chú: A, B, C : Vật liệu nghiên cứu) Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm: Thí nghiệm thực năm 2012 Viện Nghiên cứu Phát triển trồng + Thí nghiệm so sánh tổ hợp lai Thí nghiệm bố trị khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh (RCBD) theo phương pháp (Gomez, 1984); lần nhắc lại, diện tích ô thí nghiệm 14m2, đối chứng LCH9, VN8960 Thí nghiệm đánh giá THL ưu tú môi trường mục tiêu canh tác nhờ nước trời (Mai Sơn, Sơn La) vụ Xuân Hè 2016 Thí nghiệm bố trí bố trí khối ngẫu nhiên hoàn chỉnh (RCBD) theo quy chuẩn Việt Nam (QCVN 01 - 56: 2011/ BNNPTNT), lần nhắc lại, diện tích ô thí nghiệm 14m2, đối chứng LCH9 DK9901 3.4.2 Phương pháp thí nghiệm đánh giá khả chịu hạn dòng tự phối tổ hợp lai + Đánh giá chịu hạn giai đoạn ngô trồng chậu vại theo phương pháp (Camacho et al., 1994) Bố trí thí nghiệm chậu plastic nhà có mái che, ba lần nhắc lại mẫu trồng chậu plastic lớn rút nước (chậu cao 35 cm, đường kính 20 cm), mẫu trồng chậu, chậu Các chậu đặt nhà có mái che, tưới nước ẩm Ngừng tưới nước, gây hạn 10 ngày thu mẫu Thu mẫu sau gieo tuần cách nhổ rễ để đánh giá tiêu: Diện tích lá/cây; thể tích rễ = V (tổng) - V (nước); Chiều dài rễ dài nhất; Chiều cao cây; Khối lượng rễ tươi; Khối lượng rễ khô; Khối lượng thân khô; Tỷ lệ RDW/SDW (khối lượng rễ khô/khối lượng thân tươi) + Đánh giá chịu hạn giai đoạn sinh trưởng, phát triển khác nhà có mái che theo phương pháp của (Pervez et al., 2002) Bố trí thí nghiệm theo thời điểm (thời vụ) gieo khác nhà có mái che Viện Nghiên cứu Phát triển trồng Vật liệu nghiên cứu gồm 32 dòng ngô đời S3 - S4, đố i chứng là VN8960 LCH9 Các dòng trồng thời vụ, thời vụ gieo ngày 2/3 sau 10 ngày gieo thời vụ Mỗi thời vụ trồng hàng chiều dài 5m Gây hạn thời vụ vào chắc, thời vụ vào giai đoạn trỗ cờ- phun râu thời vụ giai đoạn xoắn nõn thời vụ giai đoạn – lá, sau gây hạn tưới trở lại theo dõi đánh giá khả chịu hạn dựa tiêu gồm độ lá, độ tàn lá, chênh lệc trỗ cờ phun râu, suất yếu tố tạo thành suất Các chı̉ số đánh giá chiụ ̣n Chỉ số mẫn cảm hạn (Stress Susceptibility Index) Fischer and Maurer (1978) Ys / SI Y p SSI = 1 − Trong SI =1 (Ys / Yp ) Chỉ số chịu bất thuận hạn (Stress Tolerance Index) Fernandez (1992) STI = (Y p −Y s ) (Y ) p Chỉ số chịu hạn : Theo CIMMYT (Fischer et al., 1983; Zadi, 2000) Có thể đánh giả khả chịu hạn (DI) theo công thức Ys / Yp Ys / Yp DI = Trong đó SSI = chı̉ số mẫm cảm với ̣n STT= Chı̉ số chiụ bấ t thuâ ̣n Yp = Năng suấ t điề u kiê ̣n có tưới Ys = Năng suấ t điề u kiê ̣n bất thuâ ̣n Y p = Năng suấ t trung bı̀nh điề u kiê ̣n có tưới Ys = Năng suấ t trung bı̀nh điề u kiê ̣n bấ t thuâ ̣n + Dò tìm QTL kiểm soát số tính trạng chịu hạn thị phân tử SSR theo Mohammadreza (2011) Bảng 3.1 Tên trình tự mồi Tên mồi Trình tự mồi umc1719 Forward: CCTGGAAGCACCACTGATACTAGC Reverse: AGCTCCAGCCTGCCTACCAG nc133 Forward: AATCAAACACACACCTTGCG Reverse: GCAAGGGAATAAGGTGACGA umc1432 Forward: GGCCATGATACAGCAAGAAATGAT Reverse: TACTAGATGATGACTGACCCAGCG umc1447 Forward: TAATACTCCTACTAACGGCGCTGC Reverse: TCTGTCTCCCATGCCTGAAATAAT umc2359 Forward: CTGGATCAGATGAAAAAGAAGGGA Reverse: GCCTGACATGAATGTTACATGAGC umc1862 Forward: ATGGGCACATGAAAAAGAGACATT Reverse: CCCATGAGAAGAGTGAAGACAACA Dò tìm QTL Chỉ số chịu hạn Khả chịu hạn Năng suất điều kiện hạn Chỉ số chịu bất thuận hạn Năng suấ t trung bı̀nh điều kiện hạn, số chịu bất thuận Năng suất điều kiện hạn Chỉ tiêu sinh trưởng, tiêu hình thái, tiêu chống chịu, tiêu suất yếu tố cấu thành suất - Đánh giá đặc điểm chịu hạn đồng ruộng: + Độ lá: Xác định độ thang điểm từ 1- (Điểm 1: Không cuốn, Điểm 2: Bắt đầu cuốn, Điểm 3: Cuốn hình chữ V, Điểm 4: Lá tròn lại, Điểm 5: Lá cuộn tròn hành) + Độ tàn lá: Quan sát chung triệu chứng ô sở tổng diện tích bị khô điểm Một hệ thống thang điểm thông dụng từ - 10 điểm: