Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)

Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)Nghiên cứu một số phương pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng lá cà chua (Đề tài NCKH)

i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP ĐẠI HỌC NGHIÊN CỨU CÁC PHƢƠNG PHÁP NHÂN TẠO ĐỂ LÂY NHIỄM VIRUS GÂY BỆNH XOĂN VÀNG LÁ CÀ CHUA Mã số: ĐH2013-TN06-08 Chủ nhiệm đề tài: TS Nguyễn Thị Hải Yến Thái Nguyên, tháng 2/2017 ii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP ĐẠI HỌC NGHIÊN CỨU CÁC PHƢƠNG PHÁP NHÂN TẠO ĐỂ LÂY NHIỄM VIRUS GÂY BỆNH XOĂN VÀNG LÁ CÀ CHUA Mã số: ĐH2013-TN06-08 Xác nhận tổ chức chủ trì (Ký, họ tên, đóng dấu) Thái Nguyên, tháng 2/2017 Chủ nhiệm đề tài (Ký, họ tên) iii i DANH SÁCH THÀNH VIÊN THAM GIA THỰC HIỆN ĐỀ TÀI VÀ ĐƠN VỊ PHỐI HỢP CHÍNH THÀNH VIÊN THAM GIA THỰC HIỆN ĐỀ TÀI Họ tên TT TS Nguyễn Thị Hải Yến ThS Nguyễn Thị Thu Huyền ThS Đỗ Thị Tuyến Đơn vị công tác Trƣờng Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên Trƣờng Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên Trƣờng Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên ĐƠN VỊ PHỐI HỢP CHÍNH Tên đơn vị nƣớc Nội dung phối hợp nghiên cứu Họ tên ngƣời đại diện Khoa Khoa học Tiến hành thí nghiệm PGS.TS Nguyễn Vũ Sự sống, Trƣờng lây nhiễm thông qua bọ Thanh Thanh Đại học Khoa học phấn ghép vƣờn thí nghiệm Trung tâm Bệnh nhiệt đới, Trƣờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội Cung cấp chủng vi khuẩn mang vector chứa gen TYLCV lây nhiễm TS Hà Viết Cƣờng Agro-inoculation Phòng Công nghệ Cố vấn khoa học tế bào Thực vật, Viện Công nghệ sinh học PGS.TS Chu Hoàng Hà ii MỤC LỤC MỞ ĐẦU Tính cấp thiết vấn đề nghiên cứu Những đóng góp khoa học Ý nghĩa đề tài nghiên cứu Chƣơng MỤC TIÊU, ĐỐI TƢỢNG, PHẠM VI, CÁCH TIẾP CẬN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.1 Mục tiêu nghiên cứu 1.2 Đối tƣợng vật liệu nghiên cứu 1.2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 1.2.2 Vật liệu thực vật 1.2.3 Chủng vi khuẩn 1.2.4 Hóa chất, thiết bị, máy móc 1.3 Phạm vi địa điểm nghiên cứu 1.3.1 Phạm vi nghiên cứu 1.3.2 Địa điểm nghiên cứu 1.4 Cách tiếp cận phƣơng pháp nghiên cứu 1.4.1 Cách tiếp cận nghiên cứu 1.4.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 1.4.2.1 Phƣơng pháp lây nhiễm bọ phấn 1.4.2.2 Phƣơng pháp lây nhiễm ghép áp 1.4.2.3 Phƣơng pháp lây nhiễm bằngAgroinoculation 1.4.2.4 Các tiêu đánh giá mức độ biểu bệnh 1.4.2.5 Phƣơng pháp phân tích có mặt TYLCV Chƣơng NỘI DUNG VÀ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 2.1 Tổng quan tài liệu nghiên cứu 2.1.1 Giới thiệu cà chua số bệnh hại cà chua 2.1.1.1.Nguồn gốc Phân loại 2.1.1.2 Đặc điểm sinh học 2.1.1.3 Một số bệnh hại cà chua 2.1.2 Virus gây bệnh xoăn vàng cà chua 2.1.2.1 Triệu chứng biểu bệnh Trang 1 2 3 4 6 7 8 10 12 13 14 14 14 14 15 17 18 18 iii 2.1.2.2 Phân loại virus gây bệnh xoăn vàng cà chua 1.1.2.3 Đặc điểm hình thái cấu tạo 1.1.2.4 Đặc điểm lây lan môi giới truyền bệnh 1.1.2.5 Một số biện pháp phòng bệnh xoăn vàng cho cà chua 2.1.3 Các phƣơng pháp lây nhiễm TYLCV thực nghiệm 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.3 Kết nghiên cứu 2.3.1 Kết tạo nguồn bệnh 2.3.1.1 Kết lây nhiễm virus vƣờn có nguồn bệnh 2.3.1.2 Kết PCR kiểm tra có mặt virus bệnh 2.3.2 Kết lây nhiễm TYLCV cho cà chua bọ phấn 2.3.3 Kết lây nhiễm TYLCV phƣơng pháp ghép lành với bị bệnh 2.3.4 Kết lây nhiễm TYLCV Agro - inoculation 2.3.5 Đánh giá hiệu lây nhiễm TYLCV phƣơng pháp lây nhiễm nhân tạo KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN KIẾN NGHỊ 18 19 20 23 23 24 26 26 26 34 37 39 40 44 47 47 47 iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 1.1 Nồng độ hoá chất dung dịch đệm tách DNA tổng số 24 1.2 Thành phần phản ứng PCR nhân gen từ mẫu DNA tổng số 26 2.1 Kết tạo nguồn bệnh vƣờn có áp lực bệnh cao 27 2.2 Kết theo dõi mức độ biểu bệnh giống cà chua 31 sau lây nhiễm qua bọ phấn 2.3 Kết theo dõi mức độ biểu bệnh giống cà chua 33 sau lây nhiễm ghép áp 2.4 Kết giá trị OD bƣớc sóng 660 nm chủng khuẩn sau 35 nuôi lắc phục vụ thí nghiệm lây nhiễm 2.5 Kết theo dõi biểu bệnh sau lây nhiễm TYLCV 36 Agro- inoculation vào giống cà chua 2.6 Tổng hợp kết theo dõi biểu bệnh trung bình thí nghiệm lây nhiễm TYLCV vào cà chua phƣơng pháp 38 v DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Tên hình Trang 1.1 Sơ đồ quy trình nghiên cứu 21 1.2 Các mức độ biểu bệnh xoăn vàng cà chua 24 2.1 Sơ đồ cấu trúc genome TYLCV 2.2 Chu kỳ sinh trƣởng bọ phấn (Bemisia tabaci) 11 2.3 Hình ảnh cà chua bị bệnh xoăn vàng virus TYLCV trồng 27 vƣờn có nguồn bệnh sau 50 ngày 2.4 Kết điện di sản phẩm tách DNA tổng số số dòng cà 28 chua nhiễm bệnh 2.5 Kết PCR kiểm tra gen CP TYLCV mẫu cà chua 29 nhiễm bệnh 2.6 Kết PCR nhân gen CP TYLCV kiểm tra có mặt 32 virus dòng thí nghiệm sau lây nhiễm bọ phấn 2.7 Kết PCR nhân gen CP TYLCV kiểm tra có mặt 34 virus dòng thí nghiệm sau lây nhiễm phƣơng pháp ghép 2.8 Ảnh điện di sản phẩm PCR kiểm tra TYLCV sau 10 ngày lây 37 nhiễm Agro- inoculation 2.9 Ảnh điện di sản phẩm PCR kiểm tra TYLCV sau 50 ngày lây nhiễm Agro- inoculation 37 vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU Từ viết tắt Nghĩa tiếng Việt Nghĩa tiếng Anh Bp Cặp base base pair CTAB CTAB Cetyltrimethylammonium Bromid CP protein vỏ Coat protein DNA Axit Deoxyribonucleic Deoxyribonucleic Acid dNTP dNTP Deoxynucleoside triphosphate EDTA EDTA Ethylene Acid EtBr EtBr Ethidium Bromide GB GB Gel binding buffe Kb Kb Kilobyte ORF trình tự đọc mở Open reading frame PCR Phản ứng chuỗi trùng hợp Polymerase Chain Reaction Primer F Mồi xuôi Primer Forward Primer R Mồi ngƣợc Primer Reverse Taq Diamine Tetraacetic Thermus aquaticus IR Vùng liên gen Intergenic region Rep Tái Replication SCR vùng vệ tinh Satelite Conserved Region TYLCV Virus gây bệnh xoăn vàng Tomato Yellow Leaf Curl Virus cà chua TB Trung bình RAPD nhân ngẫu nhiên Random Amplified Polymorphic đoạn DNA DNA vii ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN Đơn vị: Trƣờng Đại học Khoa học THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Thông tin chung - Tên đề tài: “Nghiên cứu số phƣơng pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng cà chua” - Mã số: ĐH2013-TN06-08 - Chủ nhiệm: TS Nguyễn Thị Hải Yến - Cơ quan chủ trì: Trƣờng Đại học Khoa học - Thời gian thực hiện: Từ tháng 01/2013-12/2014 Mục tiêu nghiên cứu Tìm đƣợc phƣơng pháp lây nhiễm virus TYLCV phù hợp để lây bệnh cho cà chua nhằm tạo phƣơng pháp chuẩn để đánh giá khả kháng virus cho cà chua điều kiện nhà lƣới vƣờn thí nghiệm Tính sáng tạo: (1) Đánh giá khả lây nhiễm TYLCV thông qua số phƣơng pháp nhƣ ghép áp, thông qua bọ phấn thông qua vi khuẩn Đây công trình thử nghiệm phƣơng pháp lây nhiễm virus nhân tạo để xác định phƣơng thức lây nhiễm hiệu (2) Đề xuất đƣợc quy trình lây nhiễm TYLCV để đánh giá khả kháng virus cho cà chua Kết nghiên cứu (1) Thu thập giống cà chua phục vụ thí nghiệm: + Giống PT 18 viện rau Việt Nam cung cấp Cà chua PT18 có chiều cao trung bình 80 – 100 cm, dạng gọn, màu xanh nhạt, phân cành ít, sinh trƣởng hữu hạn PT18 giống mẫn cảm với bệnh xoăn vàng TYLCV 43 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã tạo đƣợc 63 dòng bị bệnh tổng số 75 trồng vƣờn có áp lực bệnh cao Các dòng bệnh đƣợc kiểm tra có mặt TYLCV phƣơng pháp PCR với cặp mồi pRV 324N/pRC889N Đã tiến hành gieo trồng chuẩn bị nguồn bệnh cho thí nghiệm lây nhiễm Đã tiến hành lây nhiễm TYLCV phƣơng pháp thông qua bọ phấn mang virus, ghép áp với bệnh thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens Đã tiến hành theo dõi phân tích kết quả, đánh giá mức độ biểu bệnh sau lây nhiễm Đƣa 01 quy trình lây nhiễm TYLCV để sử dụng cho lây nhiễm nguồn virus phục vụ đánh giá khả kháng TYLCV cho cà chua ĐỀ NGHỊ Tiếp tục lây nhiễm TYLCV phƣơng pháp để có kết so sánh khác biệt rõ ràng, thuyết phục Nghiên cứu phát triển quy trình lây nhiễm TYLCV cho cà chua ghép áp nhằm tạo quy trình chuẩn áp dụng cho việc đánh giá giống cà chua kháng TYLCV 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Lê Trần Bình (2007), Thu thập phân lập gen virus gây bệnh ba trồng thuộc họ Cà (Solanaceae) thuốc lá, khoai tây cà chua nhằm xây dựng phương pháp chẩn đoán bệnh virus tạo vật liệu di truyền cho tạo giống kháng bệnh virus, Đề tài cấp viện Hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam giai đoạn 2005 - 2006 Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam tập 1, Nxb Y học Hà Nội Đƣờng Hồng Dật (2002), Sổ tay trồng rau, Nxb Nông nghiệp Hà Nội Lê Trần Đức (1997), Cây thuốc Việt Nam, Nxb Nông nghiệp Hoàng Minh (2005), Kỹ thuật trồng chăm sóc dưa hấu, bí ngô, cà chua, ngô, Nxb Lao động Xã hội Vũ Triệu Mân, Lê Hƣơng Tề (2001), Bệnh vi khuẩn virus hại trồng, Nxb Giáo Dục Nguyễn Thị Hải Yến (2012), Nghiên cứu tạo cà chua kháng bệnh xoăn vàng virus kĩ thuật chuyển gen, Luận án tiến sĩ sinh học, Viện công nghệ sinh học – VAST TÀI LIỆU TIẾNG ANH Abhary MK, Anfoka GH, Nakhla MK, Maxwell DP (2006), “Posttranscriptional gene silencing in controlling virruses of the tomato yellow leaf curl virus complex”, Arch Virol 151, pp 2349 – 2363 Ayed M Al Abdallat, Hmoud S Al Debei, Heba Asmar, Samar Misbeh, Ayat Quraan, Anders Kvarnheden (2010), “An efficient in vitro – inoculation method for Tomato yellow leaf curl”, Virology journal 7, pp 84 45 10 Pico B, Ferriol M, DÌez MJ, ViÒals FN (2001), “Agroinoculation methods to screen wild Lycopersicon resistance to Tomato yellow leaf curl virus”, Journal of Plant Pathology 83(3), pp 215-220 11 Byrne D N and Bellows TS (1991), “Whitefly biology”, Ann Rev Entomol 36, pp 431-457 12 Brown JK, Czosneck H (2002), “Whitefly transmitted viruses” Adv Botan Res Academic Press N Y, pp 65 - 100 13 Banuelos-Hernández B, Mauricio-Castillo JA, Cardenas-Conejo Y, Guevara-González RG, Arguello-Astorga GR (2012), “A new strain of tomato severe leaf curl virus and a unique variant of tomato yellow leaf curl virus from Mexico”, Archives of Virology 157(9), pp 1835-1841 14.Bbyrne JK, Bellows TS (1991), “Whitefly biology”, Ann Rev Entomol 36, pp 431 - 457 15 Cohen S, Nitzany FE (1966), “Transmission and host range of the tomato leaf curl virus”, Phytopathology 56, pp 1127-1131 16 Cxosnek H, Ber R, Antignus Y, Cohen S, Navot N, Zamir D (1988), “Isolation of the Tomato yellow leaf curl virus – a geminivirus”, Phytophalogy 78, pp 508-512 17 Changjun Huang, Yan Xie, Liling Zhao, He Ren, and Zhenghe Li* (2013), “A Naturally Occurring Defective DNA Satellite Associated with a Monopartite Begomovirus: Evidence for Recombination between Alphasatellite and Betasatellite”, Viruses 5(9), pp 2116–2128 18 Cohen S, Duffus JE, Liu HY (1989), “Acquisition, interference, and retenton of cucurbit leaf curl virus in whitefly”, Phytopathology 79(1), pp 109 – 113 46 19 Collin & Symons (1992), “Extraction of nuclear DNA from grape vine leaves by a modified procedure”, Plant Mol Biol Rept 10, pp 233-235 20 Cxosnek H, Ber R, Antignus Y, Cohen S, Navot N, Zamir D (1988), “Isolation of the Tomato yellow leaf curl virus – a geminivirus”, Phytopathology 78, pp 508 - 512 21.Elvira Fiallo-Olivé, Yamila Martínez-Zubiaur, Enrique Moriones, Jesús Navas-Castillo (2012), “A novel class of DNA satellites associated with New World begomoviruses”, Virology 425(1), pp 1- 22 Fuentes A, Ramos PL, Piallo E, Callard D, sanchez Y, Peral R, Rodringuez R, Pujol M (2006), “Intron- hairpin RNA derived from replication associated protein C1 gene confers immunity to tomato yellow leaf curl virus infection in transgennic tomato plants”, Transgenic Res 15, pp 291-304 23 Grafni Y (2003), “Tomato yellow leaf curl virus, the intracellular dynemics of a phant DNA virus”, Mol Plant Patho 4(1), pp 9-15 24 Ha Viet Cuong, Le Van Hai, Tran Ngoc Tiep, Ngo Bich Hao (2011), “Molecular characterization of Tomato leaf curl HAINAN virus and Tomato leaf curl virus HANOI virus in VIETNAM”, ISSAAS Journal 17(2), pp 70 – 82 25 Harlan JK (1960), “Agricultural Origins: Centers and Noncentes”, Science 174, pp 468 – 473 26 Ian B Dry, Leslie R Krake, Justin E Rigden†, M Ali Rezaian (1997), “A novel subviral agent associated with a geminivirus: The first report of a DNA satellite”, Plant Biology 94, pp 7088–7093 27 Inoue-Nagata A, Nagata T, de BGordano L (2007), “A reliable egomovirus inoculation method for screening Lycopersicon éculentum line” Hort Bras 25, pp 447 – 450 47 28 Yong Fang, Xiaoguo Jiao, Wen Xie, Shaoli Wang, Qingjun Wu, Xiaobin Shi, Gong Chen, Qi Su, Xin Yang, Huipeng Pan, Youjun Zhang (2013 ), “Tomato yellow leaf curl virus alters the host preferences of its vector Bemisia tabaci”, Scientific 3, pp 2876 29 Yan Xie, Peijun Wu, Pei Liu, Huanran Gong, and Xueping Zhou(2010), “Characterization of alpha satellites associated with monopartite begomovirus/betasatellite complexes in Yunnan, China”, Virol J 7, pp 178 30 Johansen LK and Carrington JC (2001), “Silencing on the spot Induction and suppression of RNA silencing in the Agrobacterium-mediated transient expression system”, Plant Physiol 126, pp 930 - 938 31 Lazarowitz SG, Wu LC, Rogers SG, Elmer JS (1992), “Sequence – specific interraction with the viral AL1 protein identifies a gemminivirus DNA replication origin”, Plant cell 4(7), pp 799 – 809 32 Lapidot M, Friedmann M (2002) “Breeding for resistance to whitefly – transmitted geminiviruses”, Ann Appl Biol 140, pp 109-127 33 Miwa Uchibori, Aiko Hirata, Masashi Suzuki, Masashi Ugaki (2013), “Tomato yellow leaf curl virus accumulates in vesicle-like structures in descending and ascending midgut epithelial cells of the vector whitefly, Bemisia tabaci, but not in those of nonvector whitefly Trialeurodes vaporariorum”, Journal of General Plant Pathology 79(2), pp 115 – 122 34 Murphy FS, Fauquet CM, Bishop DHL, Ghabrial SA, Jarvis AW, Martelli GP, Mayo MA, Summers MD (1994), “Virus Taxonomy, 6th Report of the Internatonal Committee on Taxonomy of virus”, Springer Varlag Wien New York USA, pp 158 – 163 35 Mohammad Reza Hosseinzadeh, Masoud Shams-Bakhsh, Shahrokh Kazempour Osaloo, Judith K Brown (2014), “Phylogenetic relationships, recombination analysis, and genetic variability among diverse variants of 48 tomato yellow leaf curl virus in Iran and the Arabian Peninsula: further support for a TYLCV center of diversity”, Archives of Virology 159(3), pp 485-497 36 Rick CM, Yoder JI (1998), “Classical and molecular genetics of tomato: highlights ang perspectives”, Annu Rev Genet 22, pp 281 – 300 37.http://www.agroatlas.ru/en/content/cultural/Lycopersicon_lycopersicum_K 49 PHỤ LỤC Phụ lục 1: thí nghiệm t thí nghiệm lây nhiễm bọ phấn giống PT18 vườn Lô thí nghiệm Cây TB Mức độ biểu bệnh sau lây nhiễm(Ngày theo dõi) 20 25 30 35 40 45 50 PT1.1 0 1 2 PT1.2 0 1 2 PT1.3 0 0 1 PT1.4 0 1 PT1.5 1 2 PT2.1 1 2 PT2.2 0 0 0 PT2.3 1 2 PT2.4 0 1 2 PT2.5 0 1 2 PT3.1 1 2 PT3.2 0 0 0 PT3.3 1 2 3 PT3.4 0 0 0 PT3.5 0 1 0.33 0.66 0.80 1.20 1.60 1.93 ± 0.12 ± 0.12 ± 0.14 ± 0.20 ± 0.20 ± 0.28 50 Phụ lục 2: Lô thí nghiệ m TB t thí nghiệm lây nhiễm bọ phấn giống GM 2008 Cây Mức độ biểu bệnh sau lây nhiễm(Ngày theo dõi) 10 15 20 25 30 35 40 45 50 GM1.1 GM1.2 GM1.3 GM1.4 GM1.5 GM2.1 GM2.2 GM2.3 GM2.4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 GM2.5 GM3.1 GM3.2 GM3.3 GM3.4 GM3.5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0.5 ± 0.14 1 0 0.5 ± 0.14 1 1 0.9 ±0.1 2 1 1.1 ± 0.22 2 1.4 ± 0.27 51 Phụ lục : Lô thí nghi ệm TB Cây DV1.1 DV1.2 DV1.3 DV1.4 DV1.5 DV2.1 DV2.2 DV2.3 DV2.4 DV2.5 DV3.1 DV3.2 DV3.3 DV3.4 DV3.5 t thí nghiệm lây nhiễm bọ phấn giống DV2962 vườn thí nghiệm Mức độ biểu bệnh sau lây nhiễm (Ngày theo dõi) 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.1 ± 0.0 1 0 0 0 0 1 0.4 ± 0.13 1 0 1 0 0 1 0.5 ± 0.14 1 0 1 1 0 0.7 ± 0.17 2 0 1 1 0 2 0.9 ± 0.2 2 0 2 0 1.2 ± 0.2 52 Phụ lục 4: t thí nghiệm lây nhiễm ghép lành với bệnh giống PT18 Lô thí nghi ệm TB Cây ghép PT1.1 PT1.2 PT1.3 PT1.4 PT1.5 PT2.1 PT2.2 PT2.3 PT2.4 PT2.5 PT3.1 PT3.2 PT3.3 PT3.4 PT3.5 10 0 0 0 0 0 0 0 0 Mức độ biểu bệnh sau ghép(Ngày theo dõi) 15 20 25 30 35 40 45 1 0 1 0 0.33 ± 0.12 1 1 1 1 0 0.73 ± 0.15 1 2 1 1 1 1.13 ± 0.13 2 2 2 2 1 1.60 ± 0.13 2 3 2 2 2 2.13 ± 0.13 3 3 3 3 2 2.60 ± 0.13 3 4 3 3 3 3.00 ± 0.13 50 4 4 4 3 3 3.53 ± 0.13 53 Phụ lục : t thí nghiệm lây nhiễm ghép lành với bệnh giống GM 2008, trung bình (TB) Lô thí nghi ệm TB Cây ghép GM1.1 GM1.2 GM1.3 GM1.4 GM1.5 GM2.1 GM2.2 GM2.3 GM2.4 GM2.5 GM3.1 GM3.2 GM3.3 GM3.4 GM3.5 15 0 0 0 0 0 0 0 0.00 Mức độ biểu bệnh sau ghép(Ngày theo dõi) 20 25 30 35 40 45 0 0 0 0 0 0 0.13 ± 0.09 1 1 0 1 0 0 0.53 ± 0.13 1 2 1 1 1 0 0.87 ± 0.16 2 1 1 0 1.00 ± 0.19 2 2 2 1 1 1.53 ± 0.21 3 2 2 2 1.93 ± 0.20 50 3 3 2 2 2.27 ± 0.24 54 Phụ lục : t thí nghiệm lây nhiễm ghép lành với bệnh giống DV2962 Lô thí nghiệ m Cây ghép TB Mức độ biểu bệnh sau ghép(Ngày theo dõi) 15 20 25 30 35 40 45 50 DV1.1 0 1 2 DV1.2 0 1 DV1.3 1 1 2 DV1.4 0 0 0 0 DV1.5 0 1 3 DV2.1 1 1 2 DV2.2 0 1 1 DV2.3 0 1 1 DV2.4 0 0 0 0 DV2.5 0 0 1 DV3.1 0 1 2 3 DV3.2 1 2 3 DV3.3 0 1 3 DV3.4 0 1 2 DV3.5 0 1 2 0.0 0.20 0.53 0.86 0.93 1.40 1.80 2.13 ±0.10 ± 0.13 ±0.10 ± 0.15 ±0.19 ± 0.26 ±0.27 55 Phụ lục : t thí nghiệm lây nhiễm Agro inoculation giống PT18 Lô thí nghiệm Cây PT1.1 PT1.2 PT1.3 PT1.4 PT1.5 PT2.1 PT2.2 PT2.3 PT2.4 PT2.5 PT3.1 PT3.2 PT3.3 PT3.4 PT3.5 TB Mức độ biểu bệnh sau lây nhiễm(Ngày theo dõi) 20 25 30 35 40 45 50 0 1 1 0 0 0 0 0 1 0 1 0 1 2 0 1 1 0 0 0 0 0 1 1 0 1 0 1 1 0 1 1 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 1 0.00 0.00 0.20 0.60 0.73 0.80 1.07 ± 0.11 ± 0.13 ± 0.12 ± 14 ± 0.21 56 Phụ lục : t thí nghiệm lây nhiễm Agro inoculation giống GM 2008 Lô thí nghiệm Cây GM1.1 GM1.2 GM1.3 GM1.4 GM1.5 GM2.1 GM2.2 GM2.3 GM2.4 GM2.5 GM3.1 GM3.2 GM3.3 GM3.4 GM3.5 TB Mức độ biểu bệnh sau lây nhiễm(Ngày theo dõi) 20 25 30 35 40 45 50 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 1 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 1 0 1 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 1 0.00 0.00 0.07 0.33 0.53 0.60 0.73 ± 0.07 ± 0.13 ± 0.13 ± 0.13 ± 0.18 57 Phụ lục 9: Lô TN Cây DV1.1 DV1.2 DV1.3 DV1.4 DV1.5 DV2.1 DV2.2 DV2.3 DV2.4 DV2.5 DV3.1 DV3.2 DV3.3 DV3.4 DV3.5 TB t thí nghiệm lây nhiễm Agro inoculation giống DV 2962 0 0 0 0 0 0 0 0.0 Mức độ biểu bệnh sau lây nhiễm(Ngày theo dõi) 10 15 20 25 30 35 40 45 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 1 0.00 0.00 0.00 0.00 0.07 0.20 0.40 0.53 ± ± ± ± 0.07 0.11 0.13 0.13 50 0 1 1 1 1 0.67 ± 0.16 ... học Khoa học THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Thông tin chung - Tên đề tài: Nghiên cứu số phƣơng pháp nhân tạo để lây nhiễm virus gây bệnh xoăn vàng cà chua - Mã số: ĐH2013-TN06-08 - Chủ nhiệm:... CỨU 2.1 Tổng quan tài liệu nghiên cứu 2.1.1 Giới thiệu cà chua số bệnh hại cà chua 2.1.1.1.Nguồn gốc Phân loại 2.1.1.2 Đặc điểm sinh học 2.1.1.3 Một số bệnh hại cà chua 2.1.2 Virus gây bệnh xoăn. .. DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP ĐẠI HỌC NGHIÊN CỨU CÁC PHƢƠNG PHÁP NHÂN TẠO ĐỂ LÂY NHIỄM VIRUS GÂY BỆNH XOĂN VÀNG LÁ CÀ CHUA Mã số: ĐH2013-TN06-08