BÀI THỰC HÀNH Sinh học tế bào HSG Quốc Gia và Quốc Tế

23 3.9K 18
BÀI THỰC HÀNH Sinh học tế bào HSG Quốc Gia và Quốc Tế

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

BÀI THỰC HÀNH SỐ 4: SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO I. Nguyên vật liệu,dụng cụ Tiêu bản cố định nguyên phân ở rễ hành và tiêu bản cố định giảm phân ở hoa hành ta. Củ hành ta , hoa hành , châu chấu đực. Nước cất, cồn 70’ , NaCl 1N, cồn tuyệt đối , dung dịch cố định Carrnoy ( 3 cồn : 1 axit acetic ) , thuốc nhuột Shiff ( 97,5 ml H2O ; 2,5 ml dung dịch HCL đậm đặc ; 0,5g Fuchsin basic ( Fuchsin bazo ) ; 1,5g K2S2O5 Kính hiển vi , lam kính , lamen , đĩa đồng hồ ,kim mũi mác , panh kẹp, hộp diêm, dao lam , giấy thấm , kéo. II. Tiến hành thí nghiệm 2.1 Quan sát nguyên phân ở tế bào rễ hành Bước 1: Lấy rễ ra khỏi cồn 70%, rửa rễ bằng nước cất 3 lần. Bước 2: Thủy phân rễ trong HCL 1N ở 60 độ trong 5> 10p Bước 3: Rửa lại mẫu bằng nước cất. Bước 4: Nhuộm mẫu bằng thuốc nhuộm Shiff trong 15p. Bước 5: Sau khi đã chuẩn bị được mẫu vật đã nhuộm, chúng ta tiến hành làm tiêu bản nén như sau: • Dùng panh gắp rễ hành lên lam kính, dùng dao lam cắt lấy môt khoảng mô phân sinh ( là phần bắt màu đậm dài khoảng 12 mm ở đầu mút rễ ). Nhỏ một giọt thuốc nhuộm lên mẫu vật. • Phủ một lamen sạch lên mẫu vật một cách nhẹ nhàng để tránh xuất hiện bọt khí. • Đặt lên lam kính một tờ giấy thấm , gấp đôi lại.Dùng ngón tay giữa và ngón tay trỏ của bàn tay trái chặt nửa phần giấy thấm trê lamen dể cố định lamen , tay phải dùng đầu que diêm gõ đều , đứt khoát và thẳng góc lên tiêu bản nơi có các mẫu . • Dùng ngón tay cái của bàn tay phải ép thẳng góc lên tiêu bản qua tờ giấy để dàn đều các tế bào. • Tiến hành quan sát trên kính hiển vi ở vật kính 10x, rồi chuyển lên vật kính 40x.

BÀI THỰC HÀNH SỐ 1: TẾ BÀO HỌC I Kính hiển vi cách làm tiêu hiển vi quan sát hình dạng tế bào a Kính hiển vi quang học (Light microscope) loại kính hiển vi sử dụng ánh sáng nhìn thấy để quan sát hình ảnh vạt thể nhỏ phóng đại nhờ hệ thống thấu kính * Cấu tạo Đế kính (chân kính) : thường nặng, phía to phẳng giữ cho kính đứng vững Trên kính có gắn gương đèn điện để lấy ánh sáng Thân kính : Được cấu tạo chắn, gắn đế kính, có vai trò giá đỡ nhiều phận kính hiển vi Ống kính : gồm đoạn khuỷu đoạn ống thẳng mang thị kính Bên đoạn ống khuỷu có lăng kính làm cho hướng chùm tia sáng lệch 45 so với phương thẳng đứng Nhờ vậy, dễ dàng quan sát kính hiển vi Có kính hiển vi có ống kính thường gọi kính hiển vi mắt, có hai ống kính gọi kính hiển vi hai mắt Mâm kính (bàn đặt tiêu bản) : thường hình vuông, có lỗ thủng tròn hình bầu dục để ánh sáng qua lên mẫu vật đặt tiêu (đặt mâm kính) Trên mâm kính có kẹp giữ mẫu bàn xa di mẫu (kẹp + thước) có tác dụng di chuyển giữ mẫu vật đặt bàn phẳng vị trí thích hợp để quan sát Thị kính Trục quay Ốc thứ cấp Vật kính Bàn kính Bộ phận ngưng tụ ánh sáng Ốc vi cấp Bộ phận điều chỉnh ánh sáng Bàn xoay : Dùng để lắp vật kính với độ phóng đại khác Nhờ bàn xoay ta dễ dàng thay đổi vật kính cần thay đổi độ phóng đại hình ảnh cần quan sát Ốc chuyển lớn : gắn hai bên thân kính, dùng để tìm hình ảnh mẫu vật Ốc chuyển nhỏ (ốc vi cấp) : gắn phía ốc chuyển lớn nằm riêng, dùng để vi chỉnh - tìm hình ảnh vật rõ nét Gương : gắn chân kính, để lấy ánh sáng Gương thường có mặt lõm mặt phẳng, quay hướng để lấy ánh sáng Gương thay đèn hiển vi chuyên dụng Bộ tụ quang : thường gắn phía mâm kính Tụ quang thường cấu tạo từ hệ thống thấu kính ghép lại, có nhiệm vụ tập trung ánh sáng phản chiếu từ gương để chiếu lên tiêu đặt mâm kính Trên tụ quang có cần gạt có tác dụng mở rộng hay đóng bớt tụ quang nhằm điều chỉnh lượng ánh sáng Chúng nâng lên hạ xuống nhờ ốc điều chỉnh Thường tụ quang nâng lên mức cao Khi ánh sáng chói hạ tụ quang xuống Vật kính : gắn bàn xoay Độ phóng đại vật kính thường ghi thân vật kính, người ta dùng vạch màu để ta dễ dàng nhận biết Độ phóng đại x4 vật kính thường có vạch màu đỏ, x10 có vạch màu vàng, x40 có vạch màu xanh, vạch màu trắng có vật kính x90 x100 Vật kính x90 x100 gọi vật kính dầu, dùng ta phải nhỏ dầu soi kính để tăng độ chiết quang Các vật kính nhỏ dùng không cần sử dụng dầu soi kính gọi vật kính thô Thị kính : lắp ống kính, bên có hai thấu kính đặt cách khoảng không đổi Trên thân thị kính có ghi độ phóng đại chúng Độ phóng đại phổ biến thị kính: x10, x15, x16 Độ phóng đại hình ảnh quan sát kính hiển vi tính độ phóng đại thị kính nhân với độ phóng đại vật kính VD: sử dụng vật kính x10, thị kính x10 ta thu hình ảnh vật có độ phóng đại 100 lần b Phương pháp sử dụng kính hiển vi Thực theo bước sau : - Đặt kính hiển vi vào nơi phẳng, chắn, cách mép bàn tối thiểu 5cm, thuận lợi để lấy ánh sáng Để kính lệch bên trái, bên phải nơi đặt để vẽ, trước mặt đặt dụng cụ, bút, mẫu vật,… - Nhẹ nhàng xoay bàn xoay đưa vật kính x10 vào vị trí thẳng đứng nghe có tiếng ‘tách’ dựng lại (vật kính vào vị trí quan sát) Nếu kính hiển vi hai mắt dùng mắt nhìn vào thị kính, điều chỉnh để hai thị kính vừa với khoảng cách mắt Nếu kính hiển vi mắt ta dùng mắt trái nhìn vào thị kính, cần tập thói quen không nheo mắt bịt mắt lại, cố gắng mở hai mắt nhìn bình thường Tay đồng thời xoay gương phía nguồn sáng hiển vi trường xuất đĩa sáng đồng điểm Khi ánh sáng đủ ta dùng gương phẳng, ánh sáng yếu dùng gương lõm để lấy ánh sáng Chỉ cầm vào cạnh gương để điều chỉnh Sau chỉnh ánh sáng lưu ý không di chuyển vị trí kính - Đặt tiêu lên mâm kính, điều chỉnh cho mẫu quan sát vào vùng trường quan sát - Mắt nhìn nghiêng tay điều chỉnh ốc chuyển lớn, nâng bàn phẳng mang tiêu dần đến mặt tiêu cách mặt vật kính khoảng 3-5cm dừng lại - Nhìn vào thị kính, tay đồng thời điều chỉnh ốc chuyển lớn hạ dần bàn phẳng xuống nhìn rõ hình ảnh - Quan sát đồng thời vi chỉnh ốc vi cấp phạm vi vòng quanh vị trí, chỉnh tụ quang tìm đến thấy hình ảnh vật đẹp Điều chỉnh tiêu mâm kính để quan sát toàn mẫu vật, tìm vị trí đẹp để quan sát vẽ hình c Nguyên tắc bảo quản kính hiển vi - Luôn đặt kính vị trí chăc chắn, phẳng, tránh vướng đổ - Tuyệt đối không tự ý tháo lắp, lau chùi kính - Khi di chuyển kính: kiểm tra toàn hệ thống ốc xoáy trước di chuyển kính, tay phải cầm thân kính, tay trái đỡ phía chân kính, kính chuyển tư thẳng - Khi dùng xong phải đưa kính tư bảo quản: lấy tiêu khỏi kính, dùng giấy lau lau nước thừa hóa chất mâm kính (nếu có), đặt kính vào vị trí quy định phòng, xoay lệch vật kính khỏi vị trí thẳng đứng Hạ thấp vật kính mâm kính xuống, dựng gương thẳng lên, úp chuông thủy tinh trùm túi nilon lên kính II Tiến hành thí nghiệm Thí nghiệ m 1: Quan sát hình thái số vi khuẩn  Làm vết bôi : nhỏ giọt dịch huyền phù vi khuẩn cho lên lam kính , làm khô không khí hơ nhanh vết bôi lửa đèn cồn 2-3 lần để gắn chặt vi khuẩn vào phiến kính Nhỏ giọt Fusin lên vết bôi 2-3 phút -> đậy lamen lại quan sát kính hiển vi vật kính 10x, 40x 100x ( có dầu kính ) Hình vẽ  Nhận xét: Các tế bào vi khuẩn nhỏ , hình bầu dục, xếp gần xít - - Thí nghiệm 2: Quan sát hình thái số động vật nguyên sinh   Dùng pipet hút giọt nước bình nuôi ĐVNS cho lên lam kính Dàn giọt nước -> đậy lamen lại -> đưa lên kính hiển vi quan sát vật kính 10x, 40x Khi quan sát trùng làm lại tiêu khác có thêm lớp mỏng trước đặt lamen lên để hạn chế di chuyển chúng Hình vẽ Nhật xét: ĐVNS quan sát trùng đế giày có hình dạng giống đế giày , màu vàng ánh,kích thước nhỏ.Di chuyển nhanh môi trường, quan sát thấy có rãnh miệng,2 không bào co bóp, không bào tiêu hóa Thí nghiệm 3: Quan sát tế bào nấm men - Dùng công tơ hút lấy giọt huyền phù nấm men cho lên lam kính sạch, để khô tự nhiên hơ nhẹ vài lượt phía cao lửa đèn cồn Nhỏ giọt Fusin xanh metylen vào đầu lam kính cho trôi qua vết bôi đến nước rửa không màu thuốc nhuộm  Thấm khô tiêu , soi vật kính 10x, 40x Hình vẽ  Nhận xét : có dạng hình cầu tròn, kích thước nhỏ.Trên có chồi ( nhiều chồi)dài ngắn,bắt màu đỏ màu nâu( tùy tiêu ) Thí nghiệm 4: Quan sát tế bào hạt phấn hoa   Nhỏ giọt nước cất lên lam kính -> Gõ nhẹ hạt phấn số hoa lên -> đậy lamen lại Quan sát KHV 10x, 40x Hình vẽ Nhận xét: có dạng hình tròn, màu vàng, gai xung quanh tế bào hạt phấn hoa.Số lượng nhiều ,phân bố xung quanh bao phấn.Bề mặt lõm xuất rãnh Thí nghiệm 5: Quan sát tế bào củ hành tây  Dùng kim mũi mác bóc lớp tế bào biểu bì củ hành Nhỏ giọt xanh metylen lên lam kính.Đặt miếng biểu bì vào giọt xanh metylen để 2-3 phút, đậy lamen quan sát Hình vẽ  Nhận xét : Hình dạng tế bào củ hành tây dài, xếp xít nhau.Nhân phân bố ngoại biên trung tâm, tế bào có thành cầu sinh chất.Không bào lớn, tế bào có kích thước lớn tế bào quan sát Thí nghiệm 6: Quan sát hình thái tế bào niêm mạc má miệng người   Nhỏ giọt xanh metylen lên lam kính Dùng tăm gảy nhẹ lớp tế bào phía xoang miệng phết lên lam kính có giọt thuốc nhuột ->để 2-3 phút, đậy lamen quan sát Hình vẽ Nhận xét: gồm nhiều tế bào dày đặt, bắt màu đỏ.Hình dạng thay đổi ,chủ yếu hình dẹp.Nhân phân bố rìa màng nhiều BÀI THỰC HÀNH SỐ 2: NHẬN BIẾT CÁC THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG TẾ BÀO Nhận biết loại đường Nguyên tắc: - Dựa nguyên tắc khử Cu2+ thành Cu1+ đường khử môi trường kiềm yếu với có mặt Sodium carbonate - Dựa vào tương tác I- với cấu trúc xoắn tinh bột tạo nên màu xanh đen đặc trừng I.2 Nguyên vật liệu dụng cụ thí nghiệm I.2.1 Nguyên vật liệu - Củ khoai tây, khoai lang - Thuốc thử Lugol: 0,5 g KI gam I 5ml nước cất Lắc cho tan hết Thêm nước cất 100 ml - Thuốc thử Benedict: 100g Na 2CO3 173g Na-Citrate 600 ml nước cất, lọc trong, sau thêm nước tới 850ml Hoà tan 17,3g CuSO4.5H2O 100 ml nước, bổ sung nước 150 ml Cuối trộn dung dịch CuSO4 vào dung dịch đầu, vừa đổ vừa khuấy I.2.2 Dụng cụ Kính hiển vi, lam kính, lamen, dao lam, ống nghiệm, đèn cồn, giá kẹp ống nghiệm I TN1: Nhận biết đường đơn đường đôi: Phản ứng Benedict đặc trưng cho tính khử monosaccarit số disaccarit  - O1: 1ml glucozo 1% + 1ml Benedict -> đun sôi 5’ O2: 1ml saccarozo 1% + 1ml Benedict O3: 1ml saccarozo đun sôi + 1ml Benedict Quan sát giải thích O1: Có màu đỏ gạch glucozo có tính khử, phản ứng với Benedict O2: Màu saccarozo saccarozo tính khử nên không phản ứng với Benedict O3: Có màu đỏ gạch nhạt , saccarozo bị thủy phân thành glucozo fuctozo -> chất có tính khử , phản ứng với Benedict Phương trình hóa học C12H22O11 + H2O -> C6H12O6 (glucozo) + C6H12O6 C5H11O5-CHO + 2Cu(OH)2- -> C5H11O5-COOH + Cu2O + 2H2O TN2 Nhận biết tinh bột - Bước 1: Cắt lát mỏng miếng khoai tây, cho vào cối sứ, giã với 10 ml nước lọc - Bước 2: Lấy giọt dung dịch cho lên lam kính, đậy lamen lại quan sát KHV Quan sát hình dạng hạt tinh bột - Bước 3: Lấy 1ml dịch chiết cho vào ống nghiệm 2, 1ml hồ tinh bột cho vào ống nghiệm Nhỏ 1-2 giọt thuốc thử Lugol vào ống nghiệm 3, quan sát thay đổi màu giải thích Nhỏ 1ml thuốc thử Benedict vào ống nghiệm 4, đun nóng, ghi lại màu sắc dung dịch kết luận - Bước 4: Đun sôi cách thủy 5ml tinh bột với 1ml dung dịch HCl 15 phút Để nguội trung hòa NaOH Chia dung dịch làm phần cho vào hai ống nghiệm 6, nhỏ vào ống vài giọt thuốc thử Lugol, ống cho ml thuốc thử Benedict đun nóng  Quan sát giải thích - Ống : có màu xanh tím đặc trưng -> chứng tỏ ống có chứa tinh bột - Ống : thay đổi màu - Ống có màu thuốc thử Lugol - Ống 6: có kết tủa đỏ gạch tinh bột bị phân hủy thành glucozo cho Benedict khử Cu2+thành Cu+ -> đỏ gạch Trả lời câu hỏi: 1.Giải thích chế tạo màu iod tinh bột ? TL: Là amylozo tạo cấu trúc ( cấu dạng ) hình xoắn ốc Iod bị giữ -> tạo phức xanh dương.Khi đun nóng cấu trúc xoắn phá hủy chúng không màu xanh.Nhưng để nguội chúng lại quay trở lại trình ban đầu 2.Giải thích hình dạng phiến gờ hạt tinh bột ? TL: Do cấu trúc tinh bột cấu tạo nhiều lớp đồng tâm xếp chung quanh điểm gọi rốn hạt.Các lớp tạo nên theo nhiều giải thuyết chu kỳ ngày đêm,nhịp sinh học, chế vật lý kéo theo hình thành lớp dần phía ngoài.Phía thường lớp amilopectin có màu sẫm Các hạt tinh bột hình thành gờ hay nhẫn giúp tăng cường khả chống ăn mòn enzym ( Bài báo Hiệp hội nhà Thưc vật Mỹ ) Nhận biết Lipid Nguyên vật liệu dụng cụ thí nghiệm Dầu thực vật, Hạt lạc số mẫu chứa hàm lượng lipid cao cùi dừa, mỡ động vật - Thuốc thử Sudan III: hòa tan 0,2 g sudan III 100ml cồn 70% nóng.Khấy cho tan hết lọc.(Sudan III hợp chất thuộc nhóm azo ,màu vàng cam, sử dụng làm thuốc nhuộm hợp chất triaxylglycerol ) - Cồn 70% - Kính hiển vi , lam kính ,lamen , dao lam , ống nghiệm II.2 Các bước tiến hành thí nghiệm - Lấy ống nghiệm: O1 : 1ml, O2: 1ml dầu thực vật -> nhỏ vào ống nghiệm giọt thuốc thử Sudan III - Nghiền nhỏ vài hạt lạc cối sứ cho thêm 5ml ethanol, lắc mạnh.Lọc dịch nghiền lấy 2ml dịch lọc cho vào ống nghiệm có sẵn 2ml nước  Quan sát giải thích - O1: không tan Lipid có chất gốc triaxylglycerol nên không tan nước - O2: dầu thực vật tan dần vào Sudan III -> Sudan III dung môi hữu phản ứng với Lipid có dầu thực vật - O3 : ống nghiệm có màu trắng đục, sau lắc mạnh thấy tan phần Do hạt lạc có chứa nhiều lipid nên tan alcol ethanol II II.1 - Vì lipid tan cồn mà không tan nước ? TL: lipid có công thức tổng ROOR’ cho tác dụng với nước cồn có điều ta nhận thấy liên kết OH nước rượu khác ( mức phá vỡ lượng liên kết cao nước ) nên lipid ưu tiên phản ứng với alcol trước.Và thực tế hầu hết lipid không tan nước có số loại tan nước chậm Vì ăn thức ăn chứa nhiều lipid tiêu hóa tốt uống thêm thức uống có ga ? TL: Khi uống thức uống có ga mà phần lớn chứa nồng độ CO cao Khi vào thể, CO2 mang nguồn lượng, kích thích phản ứng oxi hóa diễn tra dạy dày -> lipid tiêu hóa.Đồng thời ,CO vào dày lơ lửng đó, làm có cảm giác mau no chướng -> ợ tượng no giả III Nhận biết protein Nguyên tắc: Trong môi trường kiềm mạnh, liên kết peptit phản ứng với CuSO4 tạo thành phức chất màu III.1 Nguyên vật liệu dụng cụ thí nghiệm - Hạt đậu tương , đậu cô ve , dung dịch lòng trắng , sữa - Dung dịch CuSO4 5% - Dung dịch NaOH 10% - Kính hiển vi , lam kính , lamen , dao lam, ống nghiệm III.2 Các bước tiến hành thí nghiệm - Bước 1: Lấy thìa nhỏ bột đậu, thêm vào 1ml NaOH -  cho thêm vài giọt CuSO4 1%, lắc -> ống Bước 2: Cho 1ml sữa 1ml dung dịch lòng trắng trứng 1% vào ống nghiệm, thêm vào 1ml NaOH 10% cho thêm vài giọt CuSO 1%, lắc -.> ống Quan sát giải thích - - Ống 1: có màu tím nhạt so với ống -> bột đầu chứa protein với tỉ lệ thấp phản ứng màu biuret tạo thành dung dịch màu tím Ống 2: có màu tím đậm lòng trắng trứng chứa hàm lượng protein cao phản ứng màu biuret tạo thành dung dịch màu tím BÀI THỰC HÀNH SỐ 3: QUAN SÁT CÁC THÀNH PHẦN CẤU TẠO TẾ BÀO, ĐẾM SỐ LƯỢNG TẾ BÀO, SỰ VẬN CHUYỂN QUA MÀNG I Quan sát nhân bào quan tế bào Thí nghiệm 1: Quan sát lục lạp -  Bước 1: Lấy rong mái chèo tươi lành lặn.Dùng đầu kim mũi mác bóc lấy lớp biểu bì vào đầu ngón tay trỏ dùng lưỡi dao lam tách lấy lớp biểu bì Bước 2: Đặt mẫu lên lam kính , nhỏ giọt nước cất lên trên.Đậy lamen quan sát kính hiển vi vật kính 10x, 40x Nhận xét: lục lạp có dạng hình cầu giống đế giày, số lượng nhiều, phân bố nhiều biểu bì, có di chuyển dần để lục lạp có hội nhận ánh sáng nhau, kích thước tương đối lớn so với kích thước bào quan Thí nghiệm 2: Quan sát sắc lạp ớt chín  Bước 1: Dùng dao lam cắt lớp mỏng biểu bì bên ớt Bước 2: Đặt lên lam kính, nhỏ giọt nước lên , đậy lamen lại quan sát Nhận xét: màu vàng, xuất chấm chấm, có mặt chủ yếu tế bào chín tế bào ngừng sinh sản, sinh trường chuyển sang cho sản phẩm chín ngủ đông Thí nghiệm 3: Quan sát nhân tế bào củ hành tây  Bước 1: Dùng kim mũi mác bóc lớp tế bào biểu bì củ hành Bước 2: Đặt miếng biểu bì lên lam kính, nhỏ giọt xanh metylen lên mẫu vật, đậy lamen quan sát Nhận xét: nhân phân bố chủ yếu vùng ngoại biên, gần với màng tế bào II Đếm số lượng tế bào buồng đếm hồng cầu Vật liệu - - Kính hiển vi, dịch nuôi cấy nấm men tảo đơn bào, nước cất, pipet 1ml, 0,1ml Buồng đếm hồng cầu: Buồng đếm hồng cầu Neubauer kính hiển vi: đếm hồng cầu ô lớn trung tâm, thường đến ô trung bình ® ; đếm bạch cầu ô lớn góc (W) Cho mẫu vào buồng đếm đếm : Buồng đếm làm sấy khô Đậy lamelle lên khu vực có kẻ ô đếm.Đưa buồng đém lên kính hiển vi, dùng thị kính 10 vật kính 10 điều chỉnh để tìm ô đếm.Đặt buồng đếm lên - - mặt phẳng , dùng pipet hút dịch mẫu , nhỏ giọt vào khe buồng đếm chỗ kính dậy lên , dung dịch theo mao dẫn lan khắp ô đếm.Để yên buồng đếm phút để tế bào lắng xuống, sau đưa lên kính hiển vi với vật kính 40x Trên buồng đếm Neubauer: Đếm hồng cầu ô trung bình khu vực đếm hồng cầu ( ô bốn góc ô ) Trong ô trung bình đếm 16 ô nhỏ Trong o nhỏ , đếm tất tế bào nằm gọn ô TB nằm cạnh cạnh trái.Như , biết số tế bào 80 ô nhỏ ( ô nhỏ 1/400mm2) Những tế bào nằm vạch đếm tính 1, hồng cầu nằm vạch vạch tính Mỗi mẫu nên đếm lần để tự kiểm chứng khả Tính kết quả: Ô góc Ô : 14 I: 12 II : 16 III: 13 IV : 14 - Tổng ô : 69 Ta có ô lớn có S= 1mm2 -> Thể tích ô lớn V= 1.0,1.5=0,5mm3 Suy tổng số tế bào 1mm3 dung dịch 69.2=138 tế bào Sự vận chuyển chất qua màng Co phản co nguyên sinh tế bào thực vật Dụng cụ , mẫu vật Mẫu vật : củ hành tím Dụng cụ: Kính hiển vi, lam kính, lamen, giấy thấm, dao lam , kim mũi mác, ống nhỏ giọt Hóa chất: Nước cất , dung dịch NaCl 10% ( saccarozo 1M) Các bước tiến hành Bước 1: Làm mẫu đối chứng III III.1   - Dùng kim mũi mác bóc lớp tế bào biểu bì vỏ tím củ hành tím , đặt lên lam kính nhỏ sẵn giọt nước cất, đậy lamen, thấm bớt nước dư phía Đặt tiêu lên kính hiển vi, quan sát mẫu vật vật kính 10x, chọn vùng có lớp tế bào chất nguyên sinh mầu tím chuyển sang vật kính 40x  Quan sát Hình vẽ  Giải thích: Các tế bào xếp xít nhau, cách thành tế bào.Không bào trung tâm lớn, nhân phân bố chủ yếu rìa màng, bắt màu tím.Do môi trường lúc đạt trạng thái cân - Bước 2: Làm mẫu co nguyên sinh Lấy tiêu bước khỏi kính hiển vi dùng ống nhỏ giọt nhỏ giọt dung dịch NaCl 10% vào mép phía lamen.Dùng giấy thấm hút phía bên lamen nhằm thay hoàn toàn nước cất NaCl 10%.Lặp lại thao tác khoảng 2-3 lần.Đặt tiêu lên kính quan sát.Sau 2-3 phút thấy bắt đầu có tượng co nguyên sinh tiếp tục theo dõi sau 10-15 phút  Quan sát Hình vẽ  Giải thích Ta thấy tượng tế bào chất co lại , tách khỏi thành tế bào -> tượng co nguyên sinh xảy ra.Nguyên nhân nhỏ thêm NaCl môi trường đăng trường ( bước 1) bên tạo áp suất cao, nước thấp dẫn đến chênh lệch áp xuất -> nước từ bên ngoài, trình diễn nhanh.Nếu co nguyên sinh thời gian tạm thời không ảnh hưởng dến hoạt động sinh lý diễn thời gian dài dẫn đến tế bào bị tổn thương - Bước 3: Làm mẫu phản co nguyên sinh Lấy tiêu bước khỏi kính hiển vi nhỏ giọt nước cất vào mép phía lamen.Dùng giấy thấm hút thừa phía bên lamen.Lặp lại thao tác 2-3 lần.Đặt lên kính quan sát  Quan sát Hình vẽ  Giải thích Sau 5-10 phút quan sát thấy tế bào dần trở lại trạng thái ban đầu.Nguyên nhân đưa thêm nước cất vào tế bào, môi trường dần lấy lại áp suất có xu hướng dẫn đến dung dịch đẳng đường -> dịch bên tế bào bắt đầu tạo chênh lệch áp suất nước để hút nước từ bên vào Hiện tượng tan bao teo bao tế bào động vật Cách tiến hành Làm tiêu 1: Lấy lam kính chạm nhẹ vào giọt máu , nhỏ giọt dung dịch NaCl 0,6 %.Đậy lamen , thấm lam kính tiến hành quan sát  Hình vẽ III.2  - - Làm tiêu 2: Lấy lam kính thứ chạm nhẹ vào giọt máu , nhỏ giọt dung dịch NaCl 10%.Đậy lamen , thấm sách lam kính tiến hành quan sát  Hình vẽ - Làm tiêu 3: Lấy lam kính thứ chạm nhẹ vào giọt máu , nhỏ nước cất.Đậy lamen , thấm lam kính tiến hành quan sát kính hiển vi  Hình vẽ  Giải thích: Do tế bào động vật thành nên chênh lệch nồng đồ ảnh hưởng đáng kể đến hoạt động sống tế bào - Ở 1, môi trường đẳng trương ếch ( ếch có dịch nội bào 0,6% ) nên trao đổi diễn bình thường Ở 2, thêm dung dịch NaCl 10% ( ưu trường so với dịch nội bào 0,6% ) làm cho tế bào teo lại ( nước ) Ở 3, thêm nước cất ( nhược trương so với dịch nội bào 0,6%) , tế bào hồng cầu bắt đầu hút nước trình hút nước diễn liên tục dẫn đến vỡ tế bào Câu hỏi kiểm tra Câu Mô tả việc xảy với lượng nước tế bào biểu bì đặt dung dịch muối.Giải thích nguyên nhân xảy ? Câu Tại bón phân cho vào ngày nắng mà không tưới nhiều nước bị héo chết ? TL: Tưới nước cho vào ngày nắng có hai nguyên nhân làm bị héo chết - Khi tưới nước , nước bị mắc kẹt lại phần lá.Những giọt nước trở thành thấu kính hấp thụ ánh sáng ,đặc biệt trời nắng đốt khiến héo khó quang hợp - Khi bón phân, lượng phân bón vào làm tăng nồng độ dịch ngoại bào cao nội bào , khiến cấy khó hút nước.Việc hút nước chất cần thiết đáp ứng hoạt động sinh lý diễn chủ yếu theo đường chủ động.Quá trình chủ động diễn cần có lượng sản phẩm trình hô hấp.Khi trời nắng , phần đất mở rộng khe hở để hô hấp, tưới nước làm nén chặt đất -> không hô hấp -> khó hấp thụ nước Câu Tại bệnh viện, tiêm dịch vào tĩnh mạch cho bệnh nhân dung dịch tiêm dung dịch muối đẳng trương với dịch mô thể người.Vì điều cần thiết ? Nếu dịch tiêm dung dịch muối mà nước cất tiêm vào thể bệnh nhân, điều xảy với tế bào hồng cầu bệnh nhân ? Giải thích? TL: - Vì tế bào người thành nên đưa dịch tiêm vào , phải cần sử dụng dịch tiêm đẳng trương để tránh vỡ teo tế bào Khi tiêm nước cất nước cất môi trường nhược trương nước cất có khả oxi thấp ( không chứa thành phần tạp chất hữu cơ, vô ) nên tiêm vào trình sử dụng diễn chậm khả hòa tan tương đối lâu.Nhưng môi trường nhược trường ,tế bào hồng cầu hút nước làm vỡ tế bào Câu 4+ Nhiều động vật nguyên sinh(ĐVNS) sống nước , ví dụ trùng đế giày có không bào co bóp.Những cấu trúc có chức thu thập bơm nước dư thừa tích tụ tế bào.Tại sinh vật cần có không bào co bóp ? Tại ý nghĩa ĐVNS sống nước mặn ? TL: Ở ĐVNS, cấu trúc tế bào tế bào từ chúng chuyên hóa thực chức định đảm bảo hoạt động sống chúng.Từ ta thấy cấu tạo sơ cấp không bào co bóp - Những sinh vật vùng nước ngọt, chúng di chuyển liên tục đòi hỏi chuyển hóa lượng tăng.Việc chuyển hóa lượng kéo theo nhiều vấn đề sản phẩm tiết, hô hấp đặc biệt nước vào khỏi thể với nồng độ định ngưỡng hoạt động cho phép.Và không bào co bóp đảm nhiệm vai trò - Ở vùng nước mặn, nồng độ muối lớn.Hai không bào co bóp đảm nhận hết nhiệm vụ, mà trình diễn toàn thể -> nên ĐVNS vùng nước mặn Câu Tại động vật không xương sống ( ĐVKXS) thân mềm, ví dụ ốc bị chết ta đổ muối vào chúng? TL: ĐVKXS hệ thống tiết ống Bojanus đầu thông với xoang tim , đầu thông với xoang áo cấu tạo sơ khai.Khi ta đổ muối vào làm cho môi trường ngoại ưu trương tạo chênh lệch nồng độ lớn so với dịch nội bào.Nước từ tế bào , với việc tế bào thành -> vỡ tế bào Nếu không rửa nhanh chống gây chết tế bào thể BÀI THỰC HÀNH SỐ 4: SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO I - - Nguyên vật liệu,dụng cụ Tiêu cố định nguyên phân rễ hành tiêu cố định giảm phân hoa hành ta Củ hành ta , hoa hành , châu chấu đực Nước cất, cồn 70’ , NaCl 1N, cồn tuyệt đối , dung dịch cố định Carrnoy ( cồn : axit acetic ) , thuốc nhuột Shiff ( 97,5 ml H2O ; 2,5 ml dung dịch HCL đậm đặc ; 0,5g Fuchsin basic ( Fuchsin bazo ) ; 1,5g K2S2O5 Kính hiển vi , lam kính , lamen , đĩa đồng hồ ,kim mũi mác , panh kẹp, hộp diêm, dao lam , giấy thấm , kéo II II.1 - Tiến hành thí nghiệm Quan sát nguyên phân tế bào rễ hành Bước 1: Lấy rễ khỏi cồn 70%, rửa rễ nước cất lần Bước 2: Thủy phân rễ HCL 1N 60 độ 5-> 10p Bước 3: Rửa lại mẫu nước cất Bước 4: Nhuộm mẫu thuốc nhuộm Shiff 15p Bước 5: Sau chuẩn bị mẫu vật nhuộm, tiến hành làm tiêu nén sau: • Dùng panh gắp rễ hành lên lam kính, dùng dao lam cắt lấy môt khoảng mô phân sinh ( phần bắt màu đậm dài khoảng 1-2 mm đầu • mút rễ ) Nhỏ giọt thuốc nhuộm lên mẫu vật Phủ lamen lên mẫu vật cách nhẹ nhàng để tránh xuất • bọt khí Đặt lên lam kính tờ giấy thấm , gấp đôi lại.Dùng ngón tay ngón tay trỏ bàn tay trái chặt nửa phần giấy thấm trê lamen dể cố định lamen , tay phải dùng đầu que diêm gõ , đứt khoát thẳng • góc lên tiêu nơi có mẫu Dùng ngón tay bàn tay phải ép thẳng góc lên tiêu qua tờ • giấy để dàn tế bào Tiến hành quan sát kính hiển vi vật kính 10x, chuyển lên vật kính 40x 4.2 Quan sát phân bào giảm nhiễm Làm quan sát tiêu tạm thời trình giảm phân châu chấu - Bước 1: Mỗ châu chấu tách tinh hoàn Chọn châu chấu đực sống , khỏe mạnh Dùng dao kéo cắt bỏ cánh, cắt dọc đường sống lưng theo trục thể từ 2/3 sống lưng tính từ đầu xuống đến ngực.Dùng kim nhọn lấy tinh hoàn châu chấu Đặt tinh hoàn châu chấu vào dung dịch NaCl 0,65% Dùng hai kim nhọn tách hết mỡ bám quanh tinh hoàn Nếu không dùng , cố định dung dịch Carnoy, sau bảo quản tinh hoàn châu chấu cồn 70 độ độ - Bước 2: Nhuộm mẫu vật Gắp tinh hoàn châu chấu vào đĩa đồng hồ Nhỏ thuốc nhuộm Shiff vào đĩa đồng hồ để nhuộm mẫu 10-15 phút - Bước 3: Làm tiêu quan sát Lấy 1-2 ống sinh tinh đặt lên lam kính , nhỏ giọt thuốc nhuộm lên, đậy lamen , dùng đầu que diêm gõ nhẹ lên vị trí có mẫu vật, đậy lamen , dùng đầu que diêm gõ nhẹ lên vị trí mẫu.Sau đó, ép tiêu đầu ngón tay trái , dùng giấy thấm thấm hết thuốc nhuộm thừa quan sát kính hiển vi  Quan sát hình vẽ Câu hỏi kiểm tra Câu Trong kì nguyên phân,kì dễ quan sát nhiễm sắc thể ? sao? TL: Kì dễ quan sát lúc nhiễm sắc thể co ngắn trạng thái cực đại xếp thành hàng mặt phẳng ngang tiêu ( quan sát từ xuống ) nên dễ quan sát Câu Tại lại tiến hành quan sát tế bào nguyên phân phần đỉnh rễ hành? TL: - Bộ nhiễm sắc thể rễ hành , nhiễm sắc thể lại lớn - Ở phần đỉnh rễ nơi chứa mô phân sinh nên trình phân chia diễn liên tục đồng thời nơi chứa tạp chất thuận tiện cho việc quan sát  Nên chọn rễ hành quan sát Câu Mục đích việc xử lí rễ dung dịch HCL 1N 60 độ 10 phút ? TL: Thực vật có thành tế bào nên phải trải qua công đoạn xử lí rễ với dung dịch HCL 1N để làm mềm thành tế bào Câu Điều xảy trình nguyên phân tế bào bị đột biến khả hình thành thoi tơ vô sắc? TL: Quá trình nguyên phân trình tạo tế bào (2n) giống giống hệt cá thể mẹ ban đầu.Việc không hình thành thoi tơ vô sắc tạo tế bào mang NST 4n tế bào không mang NST Câu Tế bào ung thư thường phân chia nhanh Sử dụng hóa trị xạ trị điều trị ưng thư để phá hủy tế bào phát triển nhanh thể, bao gồm tế bào ung thư.Hãy giải thích tượng rụng tóc nôn/tiêu chảy xảy bệnh nhân sử dụng phương pháp điều trị tác dụng phụ ? TL: Nguyên tác trình điều trị ung thư hóa trị xạ trị tiêu diệt tế bào có khả phân chia nhanh để loại bỏ tế bào ung thư ( tế bào ung thư phân chia nhanh) số loại tế bào có tế bào tóc tế bào niêm mạc -> dẫn đến nguyên nhân tóc rụng hay nôn/tiêu chảy xảy - Đồng thời , trình hóa trị xạ trị ảnh hưởng đến hoạt động hoocmon đích -> xảy phản ứng không mông muốn nôn/tiêu chảy [...]... trường ngoại bài ưu trương và tạo sự chênh lệch nồng độ lớn so với dịch nội bào. Nước từ tế bào sẽ đi ra , cùng với việc tế bào không có thành -> vỡ tế bào Nếu không rửa sạch nhanh chống thì sẽ gây chết tế bào và cơ thể BÀI THỰC HÀNH SỐ 4: SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO I - - Nguyên vật liệu,dụng cụ Tiêu bản cố định nguyên phân ở rễ hành và tiêu bản cố định giảm phân ở hoa hành ta Củ hành ta , hoa hành , châu... với dung dịch HCL 1N để làm mềm thành tế bào Câu 4 Điều gì có thể xảy ra trong quá trình nguyên phân khi tế bào bị đột biến mất khả năng hình thành thoi tơ vô sắc? TL: Quá trình nguyên phân là quá trình tạo ra 2 tế bào con (2n) giống nhau và giống hệt cá thể mẹ ban đầu.Việc không hình thành thoi tơ vô sắc sẽ tạo ra tế bào mang bộ NST 4n và tế bào không mang NST Câu 5 Tế bào ung thư thường phân chia rất... biuret tạo thành dung dịch màu tím Ống 2: có màu tím đậm do trong lòng trắng trứng chứa hàm lượng protein rất cao sẽ phản ứng màu biuret tạo thành dung dịch màu tím BÀI THỰC HÀNH SỐ 3: QUAN SÁT CÁC THÀNH PHẦN CẤU TẠO TẾ BÀO, ĐẾM SỐ LƯỢNG TẾ BÀO, SỰ VẬN CHUYỂN QUA MÀNG I Quan sát nhân và các bào quan trong tế bào Thí nghiệm 1: Quan sát lục lạp -  Bước 1: Lấy một lá rong mái chèo còn tươi và lành lặn.Dùng... phút quan sát thấy tế bào dần trở lại trạng thái ban đầu.Nguyên nhân do đưa thêm nước cất vào trong tế bào, môi trường dần lấy lại áp suất và có xu hướng dẫn đến dung dịch đẳng đường -> dịch bên trong tế bào bắt đầu tạo chênh lệch về áp suất và thế nước để hút nước từ bên ngoài vào Hiện tượng tan bao và teo bao ở tế bào động vật Cách tiến hành Làm tiêu bản 1: Lấy lam kính sạch chạm nhẹ vào giọt máu , nhỏ... tế bào phát triển nhanh trong cơ thể, bao gồm cả tế bào ung thư.Hãy giải thích các hiện tượng rụng tóc và nôn/tiêu chảy xảy ra ở các bệnh nhân sử dụng phương pháp điều trị này như tác dụng phụ ? TL: Nguyên tác của quá trình điều trị ung thư bằng hóa trị và xạ trị là tiêu diệt các tế bào có khả năng phân chia nhanh để loại bỏ tế bào ung thư ( do tế bào ung thư phân chia nhanh) và trong số các loại tế. .. mũi mác bóc một lớp tế bào biểu bì vỏ tím của củ hành tím , đặt lên lam kính đã nhỏ sẵn giọt nước cất, đậy lamen, thấm bớt nước dư ở phía ngoài Đặt tiêu bản lên kính hiển vi, quan sát mẫu vật ở vật kính 10x, chọn vùng có lớp tế bào chất nguyên sinh mầu tím rồi chuyển sang vật kính 40x  Quan sát và Hình vẽ  Giải thích: Các tế bào xếp xít nhau, được cách nhau bởi thành tế bào. Không bào trung tâm lớn,... để tránh sự vỡ hoặc teo tế bào Khi tiêm nước cất thì nước cất là môi trường nhược trương và nước cất có khả năng oxi rất thấp ( không chứa thành phần tạp chất hữu cơ, vô cơ ) nên khi tiêm vào thì quá trình sử dụng sẽ diễn ra chậm và khả năng hòa tan tương đối lâu.Nhưng do môi trường nhược trường ,tế bào hồng cầu sẽ hút nước làm vỡ các tế bào này Câu 4+ 5 Nhiều động vật nguyên sinh( ĐVNS) sống ở nước... nguyên sinh( ĐVNS) sống ở nước ngọt , ví dụ trùng đế giày có không bào co bóp.Những cấu trúc này có chức năng thu thập và bơm nước dư thừa tích tụ trong các tế bào. Tại sao các sinh vật này cần có không bào co bóp ? Tại sao không có ý nghĩa đối với ĐVNS sống ở nước mặn ? TL: Ở những ĐVNS, cấu trúc tế bào là 1 tế bào rồi từ đó chúng chuyên hóa thực hiện những chức năng nhất định đảm bảo hoạt động sống của... Quan sát nhân của tế bào củ hành tây  Bước 1: Dùng kim mũi mác bóc một lớp tế bào biểu bì củ hành Bước 2: Đặt miếng biểu bì lên lam kính, nhỏ 1 giọt xanh metylen lên trên mẫu vật, đậy lamen và quan sát Nhận xét: nhân phân bố chủ yếu ở vùng ngoại biên, gần với màng tế bào II Đếm số lượng tế bào bằng buồng đếm hồng cầu Vật liệu - - Kính hiển vi, dịch nuôi cấy nấm men hoặc tảo đơn bào, nước cất, pipet... sẽ thấy bắt đầu có hiện tượng co nguyên sinh và tiếp tục theo dõi sau 10-15 phút  Quan sát và Hình vẽ  Giải thích Ta thấy hiện tượng tế bào chất co lại , tách khỏi thành tế bào -> hiện tượng co nguyên sinh xảy ra.Nguyên nhân do khi nhỏ thêm NaCl và môi trường đăng trường ( bước 1) thì bên ngoài tạo áp suất cao, thế nước thấp dẫn đến sự chênh lệch áp xuất trong và ngoài -> nước từ bên trong sẽ ra ngoài, ... nồng độ lớn so với dịch nội bào. Nước từ tế bào , với việc tế bào thành -> vỡ tế bào Nếu không rửa nhanh chống gây chết tế bào thể BÀI THỰC HÀNH SỐ 4: SỰ SINH SẢN CỦA TẾ BÀO I - - Nguyên vật liệu,dụng... ứng màu biuret tạo thành dung dịch màu tím BÀI THỰC HÀNH SỐ 3: QUAN SÁT CÁC THÀNH PHẦN CẤU TẠO TẾ BÀO, ĐẾM SỐ LƯỢNG TẾ BÀO, SỰ VẬN CHUYỂN QUA MÀNG I Quan sát nhân bào quan tế bào Thí nghiệm 1:... yếu tế bào chín tế bào ngừng sinh sản, sinh trường chuyển sang cho sản phẩm chín ngủ đông Thí nghiệm 3: Quan sát nhân tế bào củ hành tây  Bước 1: Dùng kim mũi mác bóc lớp tế bào biểu bì củ hành

Ngày đăng: 22/12/2016, 20:14

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan