Câu hỏi Thi Dự định hỏi Thi I Nguyên tắc: - Viết tên hóa chất - Thuốc thử gồm: … - Điều kiện phản ứng II Giá trị: Bình thường III Ý nghĩa - Ứng dụng phản ứng: - Mục đích để xem ta hiểu không IV Lưu ý: - Định lượng đường sau lấy máu lúc đói - Vai trò thuốc thử - Vai trò Methanol phản ứng gì? -… Câu hỏi Viết 10 thông số nước tiểu, cho biết số bình thường Phân biệt: Huyết – Huyết tương Sắc tố mật có nước tiểu trường hợp nào? Làm phân biệt tiểu máu tiểu huyết sắc tố? Vai trò methanol phản ứng Ehrlich ? Tại gọi Bil LH trực tiếp, Bil TD gián tiếp? Cách bảo quản dung dịch Diazo cho bền (dùng để Bil TP) Dùng Serum phải làm XN liền, Huyết tương không cần làm liền được? Tiểu đạm, tiểu lipid ntn? Phân biệt sao? Biện luận: Ceton/ NT, đường/NT ? Lấy máu XN đường: dặn dò gì? Vì sao? Mời bạn tìm thêm câu hỏi giải đáp thêm 1 Tổng phân tích nước tiểu: Ghi nhớ vui 10 thông số Sẽ Tỷ trọng (SG) Phải PH Cầu Đạm Đường Nối Kết Chỉ số bình thường Bệnh lý 1.012 – 1.020 Ghi nhớ vui Út 5.8 - 6.2 Vàng Bạch cầu (WBC) Ketonic (KET) Negative (-) Hồng Protein (PRO) Glucose (GLU) Nitrit (NIT) (-) (-) 10 Số (-) Phải Xem (-) VD 1: 10 thông số NT : Thai 25 tuần GLU : Negative BIL : Negative KET : Negative SG : 1.015 BLO : Small pH : 7.0 PRO : Trace URO 0.2 E.U /dL NIT: Negative LEU : large Liệu em NT tiểu hay NĐ thai nghén Mời bình luận ? 10 thông số Urobilinoge n (URO) Bilirubin (BIL) Hồng cầu (ERY) Hemoglobin (Hb) Chỉ số Bệnh lý bình thường – mg/ 4h (-) (-) (-) VD 2: SG 1.015 pH *LEU 500 NIT neg PRO neg GLU norm KET neg UBG norm BIL neg * ERY 250 Huyết – Huyết tương: Lấy máu, chống đông → vào ống ly tâm → máu phân thành phần rõ rệt: ◘ Phần trong: màu vàng nhạt (55 - 65% tích) Huyết tương ◘ Phần đặc màu đỏ thẫm (40 - 45%): tb máu Tách ly tâm huyết tương tế bào máu phương pháp Lấy máu → cho chất chống đông → máu không đông Quay ly tâm Lấy máu → không chất chống đông → máu không đông Quay ly tâm Nhận xét: - Có chất chống đông Huyết tương - Huyết thanh: Huyết tương loại bỏ chất chống đông Máu gồm hai thành phần: thể hữu hình (huyết cầu) huyết tương - Hữu hình máu: HC, BC, TC (43 - 45% tổng số máu), số gọi hematocrit (HCT) Hồng cầu thành phần chiếm chủ yếu thể hữu hình - Huyết tương chiếm 55 - 57% tổng số máu Chứa: nước, protein, chất điện giải, chất hữu vô cơ, hocmon, vitamin, chất trung gian hoá học, sản phẩm chuyển hoá Huyết tương chứa toàn chất cần thiết cho thể toàn chất cần thải Huyết tương bị lấy fibrinogen gọi huyết Tóm lại : 3 Sắc tố mật có NT trường hợp nào? MẬT: Ngoài chứa Bil chứa (acid mật, sắc tố mật, … ) : nhũ tương hóa chất béo Không xuống ứ lại Ruột (Tại đây: Lipid không hấp thu tốt) NT Uro ↓ Phân có mỡ Sterco ↓ (Phân bạc màu: phân cò) - Về lâu dài: thiếu Vitamin A, D, E, K - Bệnh lý: K đầu tụy, VD gan, VD sau gan, … Sắc tố mật: gọi trình (từ HC → Bil → Gan → ruột → … : gan, sau gan) Có sắc tố mật/ NT = Có Bil LH/ NT Phân biệt: tiểu máu (HC) - Tiểu Huyết sắc tố (Hb) ? Tiểu HC tiểu Hb ? quay ly tâm soi KHV: có HC: tiểu HC Không có: tiểu Hb Bệnh lý: Tiểu máu: bệnh lý đường tiết niệu Tiểu Hb: giống bệnh lý VD trước gan: SR, truyền nhầm nhóm máu, Vai trò Methanol phản ứng? Bil TD: không tan nước tan dung môi Methanol: Hòa tan Bil tự Tại gọi Bil trực tiếp – Bil gián tiếp? Đặt tên: Bil TD = Bil gián tiếp Bil LH = Bil trực tiếp (có ý nghĩa ntn ? ) Bil TD : không tan nước Bil LT : tan nước Thuốc thử Diazo có pha nước: LH phản ứng Do đó: muốn đo Bil TD: dùng methanol để đo KL: Trực tiếp: tác dụng với H2O Gián tiếp: phải qua dung môi methanol Cách bảo quản dung dịch Diazo cho bền (dùng để Bil TP) Diazo thường bền: thường phải bảo quản dd riêng biệt Khi pha lại bền với thời gian: 30 phút Tại không dùng Huyết tương mà lại dùng Huyết định lượng Ure? - Nếu dùng Huyết tương (có chất chống đông: ion F- ) ức chế trình đường phân xảy để Huyết tương khoảng ½ sau [đường] giảm - Nếu dùng Serum (huyết thanh): ½ sau: [Đường] bình thường Nước tiểu đục: Lipid (tiểu dưỡng trấp) – Protein (tiểu đạm) Muốn phân biệt Nhỏ dm hữu vào Lắc (aceton, ether, ) T rong: Lipid Đục: Protein 10 Lấy máu XN đường: dặn dò gì? Vì sao? - Dặn dò: nhịn đói Vì đường hấp thu nhanh: làm thể chưa kịp điều hòa LIPID Khảo sát tính hòa tan: Nguyên tắc: Lipid gì? - Là HCHC - Không đồng CTCT - Không tan nước, tan dung môi hữu Ứng dụng: Pha chế hóa chất: chất có chất lipid pha dung môi hữu Bảo quản trái cây: muốn để lâu không nên rửa lớp sáp bên (lớp Sáp: chất Lipid) ngăn bốc nước Thuốc: có chất dầu: không nên tiêm Tm bị viêm tắc Chẩn đoán: nước tiểu đục nguyên nhân Lipid (tiểu dưỡng trấp) Protein Nhỏ dm hữu vào Muốn phân biệt T rong: Lipid Lắc (aceton, ether, ) Đục: Protein Định lượng cholesterol TP/ Huyết tương: • Nguyên tắc: Nước tiểu = Cholesterol tự + Cholesterol Este hóa phản ứng: CHE CE + H2O C + AB (1) CHO C + O2 Cholesten – one + H2O2 (2) Chưa thấy tạo màu : phát cách dùng pứ (3) POD H2O2 + (4 amino penazol + Phenol) Quinoneimine + H2O (Đỏ hồng ) Cường độ Đỏ hồng: phụ thuộc [H2O2] - Ghi chú: POD (Peroxidase), CHE (Cholesterol Esterase), CHO (Cholesterol Oxidase) • Ứng dụng: - Đánh giá nguy mắc bệnh xơ vữa đm BN - Cholesterol TP tăng: bệnh tim mạch, đái tháo đường, - Cholesterol TP giảm: rối loạn chuyển hóa lipid, Tìm thể Ceton nước tiểu: • Nguyên tắc: OHCeton + Natri nitroprussiat • Phức màu tím Ý nghĩa: - Đánh giá mức độ nặng hay nhẹ bệnh Tiểu đường PROTID Phản ứng Ninhydrin: nhận biết aa Nguyên tắc: - DD Protein Peptid Acid amin - Ninhdydrin: chất chống oxh + Acid amin, H2O Ninhydrin 0,2% t0 sp cuối dd: màu xanh tím Aldehid NH3 CO2 (Phức hợp màu tím) Ninhydrin bị khử + NH3 + Ninhydrin thứ : tạo sản phẩm ngưng kết màu xanh tím (Chi tiết: tham khảo Sách thực tập Hóa sinh Trang 28 ) Phức hợp tím + NH3 Phức hợp màu xanh Ứng dụng : - Dùng để nhận biết aa : dd sau phản ứng màu xanh tím - Nhận biết Prolin : dd sau phản ứng : màu vàng Định lượng Protein toàn phần huyết PP Biuret Nguyên tắc : -Trong môi trường kiềm, biuret (có nhóm CO – NH, giống lk peptid) kết hợp với Cu2+ phức tím hồng Phức tím hồng (trong môi trường kiềm) Protein - Protein : lk peptid trở lên : cho phức tím hồng Cường độ màu tím hồng phụ thuộc nồng độ Protein (Huyết thanh) Phản ứng tủa Protein nhiệt với môi trường: Môi trường acid nhẹ: Nguyên tắc: - yếu tố giúp hòa tan Protein Lớp áo nước bao xung quanh (Hydrat hóa) Tích điện dấu - Các tiểu phân Protein, (1) chúng ngăn cách (2) chúng đẩy Làm (1) (2) (1), (2) (Tùy theo Protein) Môi trường acid mạnh: Acid vô mạnh: HNO3, H2SO4, HCL Acid Hữu cơ: TCA, CCL3COOH Acid sulfosalicylic (1) (2) dd keo Protein vững bền Giảm tính tan Protein (Protein tủa) Làm biến tính Protein Tủa Protein Kết luận: Protein nước tiểu không giúp chẩn đoán tình trạng bệnh nặng hay nhẹ Ứng dụng: - Định lượng Protein nước tiểu GLUCID Phản ứng Fehling: Nguyên tắc: MS + Base → enediol (chất khử) Cu2+ (trong thuốc thử Fehling, Benedict) Cu2O CuOH Cu+ + đường acid Tủa đỏ (Màu vàng) gạch Ứng dụng phản ứng Fehling: - Dùng để xác định tính khử Đường - Dùng để định tính định lượng đường huyết nước tiểu Phản ứng tìm Glucose nước tiểu: Nguyên tắc: Glucose có nhóm aldehyd: khử Cu2+ thành Cu+ tạo oxid đồng tủa màu đỏ gạch Ứng dụng tìm đường/ NT: - Dùng để theo dõi điều trị - Xem có rối loạn hệ thống điều tiết glucose hay không Định lượng Đường máu: • Nguyên tắc: Khử Glucose máu dd CuSO4 (thuốc thử) (pứ thực môi trường kiềm nóng) Cu+ (Cu2O : đỏ gạch) (dễ bị oxh, không đo trực tiếp) + Arsenmolypdat (bị khử) Đo quang sắc kế Molypden oxid (màu xanh) • Ý nghĩa : - Kiểm tra xem có rối loạn Có rối loạn chuyển hóa Glucid, Rối loạn hệ thống điều hòa đường huyết gan Rối loạn hệ thống nội tiết - Là Xét nghiệm để theo dõi điều trị bệnh Đái tháo đường ĐỊNH LƯỢNG URE – ACID URIC 10 Định lượng ure: • Nguyên tắc: Trong môi trường acid nóng, ure phản ứng với diacetyl monoxim (DAM) cho hợp chất màu hồng Thêm thiosemicarbazid vào thuốc thử DAM làm tăng cường độ màu hợp chất Ure + DAM H+ t0 hợp chất + TSC màu hồng Tăng cường độ màu hồng lên • Ý nghĩa: - Là XN để theo dõi bệnh lý gan thận 11 Định lượng acid uric nước tiểu: Nguyên tắc: Khử: acid phosphotungstic Acid uric màu xanh (độ đậm màu tỉ lệ với nồng độ acid uric) Ứng dụng: - Là XN để theo dõi bệnh thống phong CATALASE – UREASE – AMYLASE 12 Khảo sát hoạt động Catalase: Nguyên tắc: - Hydroperoxid (H2O2): Nồng độ cao → gây độc cho tế bào H2O2 (sp độc) vào thể Catalase H2O + ½ O2 (Không độc) Do đó: Catalase có tác dụng che chở: chống tính độc H2O2 Chúng tạo thành từ trình Oxy hóa – Khử thể Có ở: tất tổ chức động vật, hồng cầu Ý nghĩa - Ứng dụng: - Catalase: enz nội bào có nhiều tế bào - Khi chấn thương, bong tróc, Enz Catalase thoát Bỏng, nhiễm trùng tiểu,… nhiều - Dùng Oxy già (có H2O2): rửa vết thương → làm tb không bị hủy hoại Mặt khác: tiêu diệt VK yếm khí trú ngụ - Biết viêm nhiễm nhiều hay 13 Khảo sát hoạt độ amylase nước tiểu: - Amylase có vai trò thủy phân tinh bột (đường đa thành đường đơn) - Amylase máu : có PTL nhỏ thoát màng lọc cầu thận → Tiểu amylase dễ dàng → Nồng độ amylase / máu , amylase /NT có - Amylase tiết từ tuyến: Tuyến nước bọt, tuyến mang tai, tuyến tụy - Hoạt độ amylase/ NT: bình thường: 16 – 32 đơn vị Wohlgemuth (Có thể dao động: – 64 đv Wohlgemuth): tùy theo người • Ứng dụng: - Giúp chẩn đoán giám sát bệnh viêm tụy cấp mãn tính rối loạn khác có liên quan đến tụy 14 Ảnh hưởng nhiệt độ lên hoạt động urease: Nguyên tắc: Bị thủy phân Ure NH3 : kiềm Urease Phenoltalein CO2 Dd có Hồng đỏ (Phụ thuộc Urease thủy phân nhiều hay ít) KL: - Sự hoàn nguyên xảy nhiệt độ thấp - Protein dễ bị biến tính nhiệt độ cao làm enzym urease hoạt tính Thấy chất Protein ureas 10 ... Ninhydrin bị khử + NH3 + Ninhydrin thứ : tạo sản phẩm ngưng kết màu xanh tím (Chi tiết: tham khảo Sách thực tập Hóa sinh Trang 28 ) Phức hợp tím + NH3 Phức hợp màu xanh Ứng dụng : - Dùng để nhận biết